全 文 ：中 国 药 科 大 学
J o ur n al of Ch in aP h ar m a e e ut j e al Un iv e了
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学 报
2 0 0 2
,
3 3 ( 5 )
: 4 0 1一通0 3 4 0 1
半边旗抗肿瘤有效成分含量变化的研究
梁 统` , 苟占平’ , 梁念慈2
〔’ 广东医学院厂一东天然药物研究开发实验室 , 湛江 5 2 4 023 ; 2广东医学院生化教研室 )
摘 要 目的 探讨半边旗不 同部位 、 不 同采集季节其扰肿瘤 有效 成分含量 的 变化 。方法 用 甲醇加 热 回流
提取 , 反 相 高效液 相 色谱法定量分析 。结果 一 年中 8 、 9 、 1 0 、 1 1四个 月份 采集有效成分 l l a 一经基一 1 5 一氧一 16 烯一对映
贝壳衫烷一 1 9 一酸 ( S )F 含 量较 高 , 不 同部位 有效成分的含量差异很大 , 叶片含 量最 高 , 是根茎的二十倍以 上 。 结论
采集季节最好选在 8一 1 1月份 ;根茎有效 成分含量低 ,应采收 到: _上邵分 , 保留根茎 , 以利于 资源保护 。
关键词 半边旗 ; H P L c ; 杭肿瘤
中图分类号 : R o 2 7 2 . 2 文献标识码 : A 文章编号 : 。 0 0 0 一 5 0 4 8 ( 2 0 0 2 ) 0 5 一 0 4 0 1一 0 3
中药的质量是影响临床疗效的关键 ,是人们最
为关注的问题 , 其质量受到产地 、 生长环境 、 采集季
节 等因素的影响 。 半边旗 ( 2飞亡护洁 ~ 恻咖 L , 以下
简称 sP )L 为凤尾蔗 科凤尾属植物 , 民间用于治疗
菌痢 、 肝 炎 、 肠 炎 、 蛇伤 、 外伤 出血等 ,具有化湿 消
肿 、 清热解毒的功能 仁`〕 。 我们课题组在筛选抗肿瘤
化合物时发现半边旗的提取物具有显著的抗肿瘤
活性〔 2习, 以半边旗为主要原料制成的白雪平胶囊对
人原发性肝癌的瘤体有明显的缩小作用仁,」。从半边
旗中分离出二菇类化合物 S F ( 1 1一 a 一轻基 一 15一氧 一 16
烯汉寸映贝 壳 杉 烷 一 19 一 酸 ) 具 有 很 强 的 抗 癌 活
性 仁树了。 为配合半边旗资源 的开发 , 以 SF 含量为质
量指标 , 研究不同采集季节 、 不同部位半边旗 S F 含
量的变化 , 对充分利用半边旗资源具有重要意义 。
1 2 样品预处理
称半边旗全草 、 叶柄 、 根径 、 叶片 (过 4 0目筛 )粉
末 ,约 2 9 (准确称量 ) , 加甲醇 25 m l 用索 氏提取器
加热回流 Z h , 重复提取一次 , 合并两次提取液 , 冷
却后过滤 ,定容至 50 m l 。
七 3 色谱条件川
流动相由乙睛一 甲醇 一 50 m m ol / L 磷酸盐缓冲
液 ( 3 0 : 5 , 6 5 , v / v , p H 4 . 1 )组成 ; 流速 1 . 0 m l / m in ,
检测波长 24 2 n m , 室温 ,进样体积 10 川 。
结 果
2
.
1 分析图谱
半边旗提取物液相色谱 图见图 1
材料与方法
1
.
1 仅器与试剂
法 国 吉 尔 森公 司 高 效 液 相 色 谱仪 , 反 相
s p h e r is o r b e ,: 色谱柱 , 2 5 0 x 4 . 6 m m , 5 林m (大连依
利 特公 司 ,前加保 护柱 ) ; S F 参 照品 ,本实验室制
备 ;半边旗分别采自湛江 、 广西 、 广州郊区 (经本实
验室教师鉴定 ) 。 乙睛 、 甲醇为 H P L C 级 , 其余为分
析纯试剂 。
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12 5
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收稿 日期 2 0 0 2 0 1一 17 · 通讯作者 T e l : 0 7 5 9 2 3 8 8 58 l l E一 m a i l l a , l g t@ g dm c ` e d u · c n
基金项目 : 国家自然科学基金资助项目 ( 3 9 8 7 09。。 ) ;广东省重点学 科资助项 目 (9 30 5 ) 。
4 0 2中 国 药 科 大 学 学 报 3 3卷
2
.
2标准 曲线 的制备
精密称取 SF 参照品用 甲醇溶解 , 配成 l m g / m l
的储备液 , 吸取储备液用 甲醇稀释成 5 , 1 0 , 3 0 , 60 ,
1 0
,
1 5 0m g / L 的标准系列浓度 , 按色谱条件进行 。
以 峰高为纵坐标 (Y ) , 对应的浓度为横坐标 ( x ) 作
工作曲线 ,线性方程为 Y 一 0 . 0 95 1 7 X + .0 0 7 9 0 , :
一 0 . 9 9 9 7 。 该方法在 5一 1 50 m g / L 范围内呈 良好线
性 。
2
.
3 日内 、 日间精密度
日内精密度是 1d 内测定 3个浓度 ,每个浓度连
续测定 5次 。 日间精密度是 3个浓度每天测定 1次 ,连
续 d5 。结果见表 1 。
T a b 1
.
P r e e i s i o n o f SF w 让h i n 一 d a y a n d b e tw e e n 一 d a y ( n = 5 )
量的 20 倍以上 。见表 4 。
T a b 3
.
SF e o n t e n t f r o m t h
e l吸 , is
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乞严 n 敌` le e o l l e e t e d i n d i f f e r e n t
m o n t h s i n Z h a n j i a n g a r
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.
J u l y
.
A u g
.
S e P
.
1
.
0 0 6 士 0 . 0 4 0
1
.
38 2 士 0 . 0 5 4
1
.
5 7 1 士 0 . 0 3 2
2
.
3 3 7 士 0 . 0 8 7
2
.
04 9 士 0 . 0 4 5
2
.
12 9 士 0 . 0 5 6
2
.
8 9 7 士 0 . 1 3 1
1
.
7 8 0 士 0 . 0 9 9
T a b 4
.
S F e
o n t e n t j n d i f f e r e n t p a r t s o f p et 争猪
~
葱刀抓介晚 . ( 兀一 4 )
C o fl t e fl t W i t h i n
一 d a y B e t w e e n 一 d a y
( R D S % )
c o n t e n t s ( m g / g )
( m g / L ) ( R D s 肠 ) R S D %
8531851乐已歇.710又.42 0 2
.
7 3
.
8
6 0 2 2 2
.
1
1 0 0 1
.
8 2
.
3
Z h a n ji a n g
2
.
4 回 收率试验
称半边旗全草粉末各 5份 , 每份约 1 g( 准确称
量 ) , 按样 品处理法进行 , 测定 5F 含量 , 求其平均
值 。再精密称量 已知含量的样品各 6份 ,精密加入一
定量的 S F 对照品溶液 , 按上法处理样品 、 测定 , 结
果见表 2 。平均回收率为 96 . 9% 。
T a b 2
.
R e e o v e r y o f S F
S F a v e r a g e e o n t e n t A d d e d SF F o u n d S F M
e a n r e e o v e r y
G u a n g z h o u
G u a n g x j
L e a v e s
S t e m S
R 0 0 t S
L e a v e s
S t e m S
R o o t s
L e a v e s
S t e m s
3
.
0 11 士 0 . 16 4
0
.
3 2 2 士 0 . 0 2 0
0
.
1 3 5 士 0 . 0 11
2
.
7 5 2 士 0 . 19 6
0
.
5 7 0 士 0 . 0 6 2
0
.
1 2 9 士 0 . 0 1 0
1
.
3 2 9 士 0 . 1 0 7
0
.
4 6 9 士 0 . 0 2 1
3 讨 论
(
,乙一 5 ) ( m g ) ( m g )
0
.
2 5 0
( m g )
0
.
9 8 4
( % )
0
.
7 5 0
0
.
2 5 0 0
.
9 5 9
0
.
2 5 0 0
.
9 7 8
0
.
6 0 0 1
.
3 0 7
0
.
60 0 1
.
2 4 5
0
.
6 0 0 1
.
3 5 6
2
.
5 不 同月份采集的半边旗 S F 含量的变化
半边旗采 自湛江市区 , 采收时间从 2 0 0 0年 5月
至同年月 12 月 , 每月中旬采样一次 , 按样 品处理方
法进行 , 不同采收季节半边旗 SF 含量有较大 的差
异 , 以 8一 1 月含量最高 。见表 3 。
2
.
6 半边旗不 同部位 S F 的含量
分别测定了湛江市区 、 广州郊区及广西产的半
边旗叶片 、 叶柄 、 根茎不同部位有效成分的含量 , 以
叶片含量最高 , 根茎含量最低 , 叶片含量是根茎含
经紫外扫描 , S F 的最大吸收波长为 2 42 n m ,故
选用 2 42 n m 波长测定 。 中草药中的成分复杂 ,干扰
物质多 ,样品不经纯化处理 ,对色谱柱会产生污染 ,
本文采用在分析柱前加保护柱的方法 ,定期置换保
护柱 ,并经常冲洗分析柱 , 亦可使分析柱的寿命得
到较大的延长 。本方法简便 ,定量准确 ,可作为半边
旗抗肿瘤有效成分 S F 的质量监控方法 。
半边旗是 多年生草本植物 , 抗癌有效成分 S F
主要分布在叶片中 ,根茎的含量极低 , 叶片的 SF 含
量是根径的 20 倍以上 , 因此 ,可采用地上部分的叶
片 、 叶柄作为利用资源 , 保留根径 ,让其继续生长 ,
使资源得到保护 。半边旗是全年可采植物 , 但其抗
肿瘤有效成分 S F 的含量在不同的季节有较大的变
化 , 8一 n 月份含量最高 , 于该期 间采收可得到较
高产率的有效成分 。
参 考 文 献
[ l 〕 丁恒山 ( jD gn H s) . 中国药用 袍子植物仁M」, 第一版 , 上海 : 上
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S t u d ie s o n t h e D if f e r e n e e in C o n t e n t o f a n A n t it u m o r
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.
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.
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10
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(源载于 2 0 0 2年 出版 《中国科技期刊 引证报告 )