全 文 :收稿日期:2009-01-20; 修订日期:2009-04-19
修订日期:国家自然科学基金(No.3082833)
作者简介:林晓亮(1983-),男(汉族),广东广州人 ,现任南方医科大学中
医药学院助教 ,硕士学位 ,主要从事中药药理学教研工作.
*通讯作者简介:莫志贤(1958-), 女(汉族),广西南宁人 , 现任南方医科
大学中医药学院教授 ,博士生导师 ,博士学位 ,主要从事中药及复方有效
成分的药理学研究工作.
毛钩藤叶对中枢抑制作用的初步研究
林晓亮 ,罗超华 ,莫志贤*
(南方医科大学中医药学院 ,广东 广州 510515)
摘要:目的 研究毛钩藤叶对中枢神经系统的药理作用。方法 采用小动物自主活动测定仪测定小鼠的自主活动。采用
戊巴比妥钠阈下催眠实验及戊巴比妥钠阈剂量诱导小鼠睡眠时间实验 , 观察毛钩藤叶的镇静催眠作用。结果 钩藤组
(12g/kg)与毛钩藤叶低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3个剂量组均能使小鼠自发活动减少 , 使戊巴比妥钠阈下睡
眠剂量致小鼠入睡个数增多 ,并延长戊巴比妥钠阈剂量睡眠时间 , 且以毛钩藤叶高剂量组效果最为明显。结论 毛钩藤
叶具有显著的中枢抑制作用。
关键词:钩藤; 毛钩藤叶; 自主活动; 催眠作用
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2009)09-2132-02
InhibitoryEffectoftheLeavesofUncariahirsutaHavil.onCNSinMice
LINXiao-liang, LUOChao-hua,MOZhi-xian*
(ColegeofTraditionalChineseMedicine, SouthernMedicalUniversity, Guangzhou510515 , China)
Abstract:ObjectiveToinvestigatethepharmacologicalactionoftheleavesofUncariahirsutaHavil.onCNS.MethodsThe
sedativeeffectandhyponicactionoftheleavesofUncariahirsutaHavil.couldbeexaminedthroughthemouselocomotoractivity
experiment, underpentobarbitolsodiumthresholddosage-inducedsleepexperimentandpentobarbitolsodiumthresholddosage-
inducedsleeptimeexperiment.ResultsAftertreatedwithUncariarhyuchophyla.(12g/kg)andthelowdose(6g/kg), middle
dose(9g/kg)andhighdose(12g/kg)oftheleavesofUncariahirsutaHavil., mouselocomotoractivitywasreduced, thesleep
numberofmicewhichwereinducedbythesodiumpentobabitalthresholdsleepdosagewasincresed, andthesodiumpentobarbital
-inducedsleeptimeofmicewasextended, andtheeffectinhigh-doseoftheleavesofUncariahirsutaHavil.wasthemostsig-
nificant.ConclusionTheleavesofUncariahirsutaHavil.hassignificantinhibitoryeffectonCNS.
Keywords:Uncariarhyuchophyla.; LeavesofncariahirsutaHavil; Locomotoractivity; Hyponicaction
钩藤具有清热平肝 、息风定惊之功效 , 是中医临床治疗肝风
内动 , 惊痫抽搐的常用中药。 2005年版 《中国药典》规定中药钩
藤为茜草科植物钩藤 Uncariarhyuchophylla(Miq.)Jacks.,华钩
藤 U.siueusis(Oliv.)Havil.,大叶钩藤U.macrophylaWall.,毛
钩藤 U.hirsuteHavil., 无柄果钩藤 U.sessilfructusRoxb.的干燥
带钩茎枝 [ 1] 。钩藤中含有多种吲哚类生物碱 , 主要有钩藤碱 ,异
钩藤碱 [ 2~ 4] 。最近的研究发现钩藤叶中也含有钩藤碱和异钩藤
碱 [ 5~ 6] 。目前对钩藤的研究多集中于该植物带钩的茎枝 , 而对于
该植物的其他部位研究报道较少。为开发和利用钩藤叶资源 ,本
文对毛钩藤叶的中枢神经系统作用进行初步的药理学研究。
1 材料与仪器
1.1 药材 毛钩藤嫩枝采自本校中药圃 , 经本校中药鉴定教研
室张宏伟副教授鉴定为茜草科植物毛钩藤UncariahirsuteHavil.。
将毛钩藤叶与带钩茎枝分别剪下 ,在 60℃以下烘干 ,将两种药材
分别用 75%乙醇回流提取两次 , 回收乙醇后 , 减压浓缩制成 1∶1
(1g/ml)醇提取液。放入 4℃冰箱中保存备用 , 使用前用蒸馏水
配置成所需浓度。
戊巴比妥钠由中国医药集团上海化学试剂公司生产 , 批号
F20050405。 95%乙醇 、无水乙醇等试剂由广东汕头西陇化工厂
生产。
1.2 动物 SPF级昆明种小鼠 , 雌雄各半 , 体重 20 ~ 25 g, 由
南方医科大学实验动物中心提供 , 动物合格证号:SCXK粤 2006
-0015。
1.3 仪器 YLS-1A多功能小动物自主活动记录仪 ,山东省医
学科学院设备站提供。
2 方法
2.1 小鼠自发活动实验 [ 7] 昆明种小鼠 50只 , 雌雄各半 , 禁食
12 h,饮水不限。将小鼠随机分为 5组 , 即空白对照组(等容量生
理盐水组),钩藤(即毛钩藤带钩茎枝 ,下同)组(12 g/kg)和毛钩
藤叶低(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3剂量组。每组 10只
动物。将各组小鼠放入 YLS-1A多功能小动物自主活动记录仪
中 , 适应 5 min后 , 测定小鼠给药前的自主活动次数 , 记录时间
为 5 min。记录时室内保持安静 。然后按剂量给各组小鼠灌胃给
药(ig)。分别于给药后 30, 60 min各测定 1次自发活动数 ,记录
5min内各组小鼠的活动数。
2.2 戊巴比妥钠阈下睡眠剂量诱导小鼠入睡实验 [ 8] 取昆明种
小鼠 50只 ,雌雄各半。将小鼠随机分为 5组 , 即空白对照组(等
容量生理盐水组),钩藤组(12 g/kg)和毛钩藤叶低(6 g/kg)、中
(9 g/kg)、高(12 g/kg)3剂量组。按各组剂量给小鼠 ig给药 , 药
后 60min后给每只小鼠腹腔注射戊巴比妥钠 30 mg/kg, 以小鼠
翻正反射消失 1 min以上为入睡标准 ,记录 15 min内各组小鼠的
入睡个数。
2.3 戊巴比妥钠阈剂量诱导小鼠睡眠时间实验 [ 8] 取昆明种小
鼠 50只 ,雌雄各半 , 随机分为 5组。将小鼠随机分为 5组 , 即空
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 9期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.9
白对照组(等容量生理盐水组), 钩藤组(12 g/kg)和毛钩藤叶低
(6 g/kg)、中(9 g/kg)、高(12 g/kg)3剂量组。按各组剂量给小
鼠 ig给药 , 药后 60 min后给每只小鼠腹腔注射戊巴比妥钠 50
mg/kg,然后记录各组小鼠的睡眠时间(以给药后小鼠翻正反射
消失为入睡时间 , 翻正反射消失至恢复为睡眠时间)。
2.4 统计学处理 实验数据以 x±s表示 , 应用 SPSS13.0统计
软件进行完全随机设计资料的单因素方差分析或两独立样本 t
检验 , 组间多重比较方差齐时用 LSD方法 , 不齐时用 Games-
Howel方法。 P<0.05表示差异有统计学意义。计数资料采用
χ2检验。
3 结果
3.1 药物对小鼠自发活动的影响 由表 1可见 , 空白对照组给药
前后小鼠自发活动次数未见明显变化(P>0.05)。钩藤组和毛
钩藤叶低 、中 、高 3个剂量组给药后小鼠的自发活动明显减少 ,与
给药前相比 , 均有显著性差异(P<0.05或 P<0.01)。钩藤组和
毛钩藤叶中 、高剂量组给药后小鼠的自发活动次数与空白对照组
相比 , 均有非常显著差异(P<0.01)。毛钩藤叶对小鼠自发活动
的抑制随剂量加大而加强 ,毛钩藤叶高剂量组与钩藤组比较差异
非常显著(P<0.01)。
表 1 各组小鼠自发活动次数( x±s)
组别 给药前 给药后 30min 给药后 60min
空白对照 117.40±19.23 108.70±20.54 114.00±32.37
钩藤 112.50±19.56 89.50±8.62*■■ 84.30±14.60*■■
毛钩藤叶低剂量 117.30±22.41 98.70±12.24■ 95.40±18.03■
毛钩藤叶中剂量 112.60±19.26 80.20±17.10*■■ 77.10±15.62*■■
毛钩藤叶高剂量 108.70±19.54 50.40±17.85*■■△ 57.20±21.84*■■△
与空白组比较 , *P<0.01;与给药前比较 , ■P<0.05, ■■P<0.01;与钩藤组比
较 , △P<0.01;n=10
3.2 药物对戊巴比妥钠阈下睡眠剂量致小鼠入睡的影响 结果
表明 , 空白组腹腔注射戊巴比妥钠 30 mg/kg后小鼠无一睡眠。
钩藤组和毛钩藤叶低 、中 、高 3个剂量组均有小鼠入睡 , 各组小鼠
入睡个数经 χ2检验表明 , χ2 =16.586, ν=4, P=0.002(双侧),差
异有显著性意义 , 可认为 5个实验组之间的差异有显著性意义 ,
其中毛钩藤叶高剂量组小鼠的入睡个数最多。见表 2 ~ 3。
表 2 戊巴比妥钠阈下剂量诱导睡眠的结果( x±s)
组别 翻正反射消失小鼠数
空白对照 0
钩藤 4
毛钩藤叶低剂量 5
毛钩藤叶中剂量 5
毛钩藤叶高剂量 9
n=10
表 3 戊巴比妥钠阈下剂量诱导睡眠的统计结果( x±s)
检验项目 χ2 变异度 P值
非核正 χ2 检验 16.586a 4 0.002
似然比 χ2 检验 21.307 4 0.000
线性相关性检验 14.242 1 0.000
有效分析例数 50
a.5个格(50%)的理论频数小于 5,最小理论频数为 4.6
3.3 毛钩藤叶对戊巴比妥钠睡眠时间的影响 由表 4可见 , 钩
藤及毛钩藤叶给药后可使戊巴比妥钠阈剂量所致小鼠睡眠时间
延长 , 钩藤组及毛钩藤叶低剂量组可使睡眠时间延长 , 但与空白
组比较无显著性差异(P>0.05)。 毛钩藤叶中 、高剂量组与空白
组比较均有显著差异(P<0.05或 P<0.01)。毛钩藤叶 3个剂
量组的小鼠睡眠时间随剂量加大而延长。毛钩藤叶高剂量组与
钩藤组比较差异非常显著(P<0.01)。
表 4 药物对戊巴比妥钠阈剂量睡眠时间的影响( x±s)
组别 小鼠睡眠时间 t/min
空白对照 19.50±15.46
钩藤 28.20±11.01
毛钩藤叶低剂量 28.88±14.14
毛钩藤叶中剂量 52.78±38.08*
毛钩藤叶高剂量 74.38±34.53**△
与空白组比较 , * P<0.05, ** P<0.01;与钩藤组比较 , △P<0.01;n=10
4 讨论
本研究主要考察毛钩藤叶对中枢神经系统的抑制作用。 采
用了小鼠自发活动实验 、戊巴比妥钠阈下睡眠剂量诱导小鼠入睡
实验及戊巴比妥钠阈剂量诱导小鼠睡眠时间实验来评价毛钩藤
叶的镇静催眠作用 ,并与毛钩藤带钩茎枝进行对比。从实验结果
可知 , 毛钩藤叶低 、中 、高 3个剂量组给药后小鼠的自发活动明显
减少 , 钩藤组和毛钩藤叶中 、高剂量组与空白组相比 ,差异非常显
著。毛钩藤叶对小鼠自发活动的抑制随剂量加大而加强 ,毛钩藤
叶高剂量组与钩藤组比较有差异 ,表明毛钩藤叶的镇静作用比钩
藤茎枝明显。毛钩藤叶高剂量组还能明显增加戊巴比妥钠阈下
睡眠剂量诱导入睡的小鼠个数 ,并能明显延长戊巴比妥钠阈剂量
的小鼠睡眠时间 ,与钩藤组相比较有差异。提示高剂量的毛钩藤
叶对中枢的抑制作用较为显著。
实验结果表明毛钩藤叶具有明显的镇静催眠作用 ,其作用强
度与剂量有一定关系。但毛钩藤叶抑制中枢神经系统的物质基
础及作用机理仍有待深入研究。
参考文献:
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