全 文 ：基金项目:武警医学院院级课题资助项目(编号 2005-5)
作者简介:王佐妤 ,女 , 1977年出生。讲师。主要从事心血管生
理研究 ,现在上海交通大学医学院攻读博士学位。
通讯作者:韩晨光 , E-mail:sunlight7573@163.com
鬼箭羽钩藤复方液对心肌肥大大鼠 L型钙电流的影响
王佐妤1　李海英1　韩晨光2　赵　娟1　佟长青1　(武警医学院:1 生理学与病理生理学教研室;2 附属医院
医教部 ,天津 300162)
　　【摘　要】　目的　探讨鬼箭羽钩藤复方液对高血压性心肌肥大的影响。方法　利用腹主动脉缩窄法建立高血压性心肌
肥大模型 ,利用灌胃法给予中药治疗 , 采用离体大鼠心脏 Langendorff 灌注法急性分离心肌细胞 , 利用膜片钳全细胞技术记录 L
型钙电流 ,比较正常对照组 、高血压模型组及中药治疗组之间的区别。结果　高血压模型组的 L型钙电流密度显著高于正常
对照组(P <0.05);中药治疗组的 L型钙电流密度显著小于高血压模型组(P <0.05), 与正常对照组相比无显著性差异(P
>0.05)。结论　鬼箭羽钩藤复方液具有逆转高血压性心肌肥大的作用。
【关键词】　鬼箭羽钩藤复方液　高血压病　心肌肥大　L型钙电流　　　　　【中国图书分类号】　R541.3
　　Effect of compound Evonymus alata and Uncaria rhynchophylla decoction on L-type calcium
channels in rats with cardiac hypertrophy
WANG Zuoyu , LI Haiying ,HAN Chenguang , ZHAO Juan , and TONG Changqing.Department of Physiology ,Medical College of Chinese
People s Armed Police Forces , Tianjin 300162 , China
【Abstract】　Objective　To study the effect of comypound Evonymus alata and Uncaria rhynchophylla decoction on cardiac hypertro-
phy induced by hypertension in rats.Methods　Cardiac hypertrophyrat model was developed by partial ligation of abdominal aorta.The decoc-
tion was given intragastrically.Langendorff system was used to separate myocardiac cells.Whole-cell patch clamp recording technique was
used to record the current of L-type calcium channels in control group , hypertension group and herbal medicine group.Results　The current
density of L-type calcium channels in control group was higher than that in hypertension group(P <0.05), whereas that in herbal medicine
group was lower than that in hypertension group (P <0.05).There was no significant difference between control group and herbal medicine
group(P >0.05).Conclusions　Compound Evonymus alata and Uncaria rhynchophylla decoction can reverse cardiac hypertrophy induced
by hypertension.
【Key words】　 Evonymus alata Uncaria rhynchophylla 　Hypertension　Cardiac hypertrophy　L-type calcium currents
　　心肌肥大是高血压病心脏代偿的结果 ,也是病
情进一步发展的危险因素 ,故逆转心肌肥大成为中
西医治疗高血压病的重要指标 。钙离子通道是调节
细胞内钙离子浓度的主要途径 ,与心肌自律性 、兴奋
性及收缩能力等密切相关 。钙离子通道包括许多种
类 ,其中电压门控 L型钙离子通道与降血压机制密
切相关。有报道证明 ,钩藤 、丹参等中药复方具有逆
转心肌肥大动物的心脏指数及胶原含量作用[ 1 , 2] 。
本实验以腹主动脉缩窄大鼠模型为研究对象 ,通过
喂养鬼箭羽钩藤复方液观察大鼠心肌L 型钙电流变
化 ,探讨鬼箭羽钩藤复方液对大鼠高血压性心肌肥
大的药理作用。
1　材料和方法　
1.1　动物分组　Wistar 雄性大鼠(由中国医学科学
院实验动物研究所提供)随机分为正常对照组 、高血
压模型组及中药治疗组 ,每组 20只 。
1.2　方法　
1.2.1　动物模型建立与血压测定　高血压模型组
及中药治疗组参照 Anderson法[ 3] ,3%戊巴比妥钠腹
腔注射(35 mg/kg)后右侧卧位 ,左侧肋缘下腰大肌
外缘术野剪毛 ,2%碘酒 ,75%乙醇消毒 ,左肋缘沿腰
大肌外缘做一切口 ,分离腹主动脉 ,用 4号手术线连
同 8号针头共同结扎 ,然后抽去针头并将切口缝合 ,
术后单笼饲养 ,两组大鼠均饲以 1%氯化钠 4周;正
常对照组在游离腹主动脉后不结扎 ,正常饮水 。4
周后采用MPA5软件经多道生物信号分析系统分别
测三组大鼠的右颈总动脉收缩压和舒张压 。
1.2.2　中药配方及给药方式　鬼箭羽钩藤复方液
成分包括鬼箭羽 、钩藤和丹参(江阴天江药业有限公
司提供)。中药治疗组大鼠于饲以1%氯化钠盐水 4
周后行鬼箭羽钩藤复方液灌胃 , 2 g/d每只 ,给药 12
周;高血压模型组和正常对照组均给予等量生理盐
水灌胃 ,给药 12周。
611武警医学 (Medical Journal of the Chinese People s Armed Police Forces)Vol.19 No.07 2008-07 出版
DOI :10.14010/j.cnki.wjyx.2008.07.001
1.2.3　心肌细胞急性分离与心肌肥大测定　三组
大鼠给药 12周后 ,采用 Langendorff灌流系统逆向灌
流冠状动脉 ,酶解法制备大鼠心室肌单细胞。大鼠
击头致昏 ,迅速开胸取下心脏 ,在 4℃无钙 Tyrode 液
中去除脂肪和结缔组织 ,挂于 Langendorff 装置经主
动脉逆行灌流 ,流速 2 ml/min。37℃下无钙 Tyrode
液灌流约 5 min ,含 0.15 g/LⅡ型胶原酶的有钙 Ty-
rode 液灌流 10 min ,至心脏变得柔软 、松弛时取下心
脏 ,将左心室肌剪成碎块再置于 37℃含胶原酶的有
钙Tyrode 液中孵育 5 ～ 10 min ,分 3次取出 ,分别在
KB液中轻柔吹打 ,用 200 目筛网过滤 ,获得细胞在
4℃冰箱中静置 2 h后备用;以心系数作为判定心肌
肥大的指标 ,用电子天平称心脏质量(HW)和左心室
质量(LVW),以 LVW/BW为心系数(mg/g)。
1.2.4　全细胞膜片钳记录 　ICa-L记录:吸取适量
细胞悬液滴加于灌流槽中 ,放置 15 ～ 20 min使细胞
牢固贴壁 ,使用记录 L 型钙电流的细胞外液以 5 ml/
min匀速灌流 ,使细胞逐渐复钙 , 10 ～ 20 min后 ,于倒
置显微镜下选择贴壁牢固 、无跳动 、横纹清晰 、折光
性好 、立体感强的细胞进行实验。玻璃微电极由
P-97水平微电极拉制仪(Sutter Instrument Company ,
Novato , CA , USA)制备 ,充灌电极内液后的电极电阻
为 2 ～ 5 MΨ。用微电极操纵器(Sutter Instrument
Company , USA)将电极推向细胞 ,负压吸引形成高阻
封接 ,电击破细胞膜 ,补偿电容电流和串联电阻 ,形
成全细胞记录模式记录 ICa-L。细胞破膜后 5 min开
始记录 ICa-L ,电流值以电流密度(pA/pF)表示 。以
上记录均在室温下进行 。信号经 Ag -AgCl电极引
导 ,由 Axon 700 A 膜片钳放大器(Axon Instrument ,
USA)放大 ,计算机通过软件(pClamp 8.1 , Clampfit
8.1)经模/数转换系统(Digidata 1320 A)采集数据 ,
并进行数据分析 。
1.2.5　溶液成分 　HEPES-台式液(HEPES -Ty-
rode s液)成分(mmol/L):NaCl 137 ,KCl 5.4 ,MgCl2 1 ,
NaH2PO4(2H2O)0.33 ,CaCl2 1.8 ,HEPES 5 ,D-glucose
10(NaOH 调至 pH7.3 ～ 7.4);Kraft -Brǜhe 液(KB
液):L-谷氨酸钾 50 , KCl 25 ,牛磺酸 10 ,MgCl2 3 ,
KH2PO4 10 , EGTA 0.5 , K2HPO4 10 , D -glucose 10 ,
HEPES 10(KOH 调至 pH7.3 ～ 7.4);记录 L型钙离子
通道(ICa-L)的电极内液:CsCl 100 ,TEA-Cl 20 ,HEP-
ES 5 ,MgATP 3 ,EGTA 10 ,MgCl2 3(CsOH调至 pH7.2
～ 7.3);细胞外液:NaCl 137 ,CsCl 5.4 ,MgCl2 0.5 ,Ca-
Cl2 1.8 ,HEPES10 , D-glucose 5(NaOH 调至 pH7.3 ～
7.4)。电极内液配制后置于 EP管中分装冷冻保存。
MgATP 为 Sigma公司生产 , Ⅱ型胶原酶为 Introgen公
司生产 ,余为国产分析纯。
1.3　统计学处理　原始数据经 Clampfit处理 ,数值
均以 x ±s表示。两组之间比较采用异体对照 t 检
验 , P <0.05为差异显著。
2　结　　果　
2.1　血压比较　正常对照组收缩压为 12.66±0.40
kPa ,显著小于高血压模型组和中药治疗组 ,后两组
的收缩压均为 16.02±0.74 kPa (P <0.01 , n =
4);正常对照组的舒张压为 8.34±0.22 kPa ,显著小
于高血压模型组和中药治疗组 ,后两组的舒张压均
为 11.09±0.45 kPa(P <0.01 , n =4)。高血压模
型制作符合实验要求。
2.2　心系数比较　给药 12周后 ,正常对照组的心
系数为 1.81±0.04 mg/g ,显著小于高血压模型组
2.66±0.27 mg/g(P <0.05 , n =8);中药治疗组的
心系数为1.80±0.03 mg/g ,显著小于高血压模型组
(P <0.05 , n =8),但与正常对照组相比无统计学
意义(P >0.05 , n =8 ,图 1)。
图 1　三组大鼠心系数对比
①与正常对照组和中药治疗组比较 , P <0.05
2.3　L 型钙电流密度比较 　刺激模式为钳制电
位-40 mV ,起始于-30mV 、终止于 60mV 、10mV步
进 、时长为 200 ms的电压刺激细胞 ,刺激频率 0.2
Hz。将电流值除以细胞电容获得该细胞电流密度
(单位 pA/pF),即单位面积内通道电流的大小。以
刺激电压为自变量 、以该电压下的电流密度为因变
量作图即可得到细胞钙离子通道的 I -V 曲线(图
2)。从电流的 I-V 曲线可以观察到 , 三组曲线均
于-30 mV开始激活 ,在20 mV时达到峰值 。通过以
612 武警医学 (Medical Journal of the Chinese People s Armed Police Forces)Vol.19 No.07 2008-07 出版
上特征 ,可以确定此电流为 L 型钙电流。当去极化
至20 mV时 L型钙电流达到峰值 ,正常对照组的钙
电流密度为-3.65±0.06 pA/pF (n =8),与高血
压模型组-4.90±0.14 pA/pF(n =8)相比 ,具有显
著性差异(P <0.05)。中药治疗组的钙电流密度
为-3.60±0.17 pA/pF(n =8),显著小于高血压模
型组(P <0.05),但与正常对照组相比无统计学意
义(P >0.05)(图 2 、3)。
图 2　三组大鼠 L型钙电流密度与膜电位曲线的对比
图 3　三组大鼠去极化至 20 mV时 L型钙电流密度的对比
①与正常对照组和中药治疗组比较 P <0.05
3　讨　　论
心肌肥大是高血压病进展的独立危险因素[ 4] 。
近年来 ,积极防治和逆转心肌肥大是高血压病治疗
学研究的焦点。中药复方或单方制剂的有效成分已
在临床广泛用于高血压病的治疗[ 5] 。中药可降低血
压 ,改善高血压病症状 ,减少不良反应 ,同时能够减
低心 、肾等高血压病靶器官的损害 。现代药理研究
表明 ,鬼箭羽具有降低末梢血管阻力 、降低血压及增
加冠脉血流量 、改善心肌缺血状态的作用 ,还具有抗
缺氧 、降血脂 、降血糖等功能[ 6] ;钩藤具有明显的降
压 、镇静 、加速血流 、降低血管阻力和逆转心肌肥大等
作用 ,以钩藤为主药的中药复方制剂可用于治疗原发
性及继发性高血压[ 7] ;丹参具有抗心肌缺血缺氧 、抑
制心肌肥大及改善微循环 、抗血栓形成等作用[8 ,9 ,10] 。
多数中药可作为钙离子通道拮抗药用于高血压的治
疗[ 11] 。钙拮抗药的药理作用主要包括两个方面 ,一
是通过阻止钙离子内流减弱心肌兴奋-收缩偶联功
能 ,从而降低心肌收缩力;二是通过降低窦房结的兴
奋性 ,减弱房室交界传导功能 ,减少心律失常的发生。
此外 ,钙拮抗药具有强大的扩张小动脉作用 ,从而减
少外周阻力 、降低血压。研究表明 ,丹参的脂溶性成
分丹参酮ⅡA能够阻断心室肌细胞的 L 型钙电流 ,从
而发挥其抗心肌缺血缺氧作用[ 12] 。同时 ,丹参通过
阻止心肌细胞 Ca2+内流 ,降低了钙调神经磷酸酶活
性及其蛋白表达 ,从而降低 c-fos mRNA的表达 ,心
肌肥大的发生与进展受到抑制[13] 。钩藤的主要成分
钩藤碱能够阻止细胞外钙内流和细胞内钙释放 ,通过
降低心肌兴奋性 、延长心肌不应期等机制 ,发挥降低
血压与抗心律失常作用[ 14] 。
本实验中 ,三组大鼠腹主动脉缩窄术后 4周测
定血压变化 ,高血压模型组及中药治疗组血压均明
显高于正常对照组 。进一步研究发现 ,高血压模型
组的心系数显著大于正常对照组 ,说明高血压模型
组的心肌明显肥厚于正常对照组 。经鬼箭羽钩藤复
方液治疗12周后 ,中药治疗组的心系数与正常对照
组之间无统计学意义(P >0.05),而与高血压模型
组相比差异显著(P <0.05),说明鬼箭羽钩藤复方
液能够逆转高血压性肥大心肌的心系数 。观察 3组
大鼠腹主动脉缩窄术后 16周(用药 12周)心肌细胞
的 L型钙电流密度变化 ,中药治疗组与正常对照组之
间无显著性差异 ,但中药治疗组显著小于高血压模型
组 ,说明鬼箭羽钩藤复方液在降低心系数的同时具有
逆转 L 型钙电流的作用。其机制存在两种可能 ,一是
鬼箭羽钩藤复方液能够逆转高血压性心肌肥厚 ,使肥
大的心肌细胞形态学上趋于正常化 ,从而使其 L型钙
电流亦恢复正常;二是鬼箭羽钩藤复方液在体内经过
药物代谢后 ,其有效成分发挥了钙离子通道拮抗作
用 ,使异常增大的 L型钙电流恢复至正常。以哪一种
机制为主 ,是下一步研究的重点。本实验为鬼箭羽钩
藤复方液治疗高血压病提供了实验依据。
参　考　文　献
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(2007 -12 -21 收稿 ,责任编辑　郭　青)
作者简介:李　卉 , 女 , 1965年出生。 本科学历 , 副主任医师。 主要
从事心血管内科疾病的临床工作。
伊贝沙坦对轻中度原发性高血压左室肥厚的逆转作用
李　卉1　刘　莉2　李　静1　罗　敏1　韩　盈1 　(1 武警总医院南楼一科 ,北京 100039;2 武警云南总队医
院医务处 ,昆明 650111)
　　【摘　要】　目的　观察伊贝沙坦对轻中度原发性高血压左室肥厚的逆转作用。方法　采用自身对照试验 ,对 83例轻中
度原发性高血压左室肥厚的患者 ,服用伊贝沙坦 150 mg/ d 治疗 ,如 4 周无效加至 300 mg/d , 共 12 周 ,随访患者血压 、超声心动
图变化以及服药耐受性。结果　12 周后 , 所有患者血压均较入院时明显下降(P <0.05), 室间隔厚度(IVST)、心室后壁厚度
(PWT)、左室重指数(LVMI)均有明显减少(均为 P <0.01), 说明左室肥厚减轻 , 左室舒张功能得到改善 , 且无明显不良反应。
结论　伊贝沙坦是一个安全 、有效的降压药物 ,同时能逆转左室肥厚。
【关键词】　伊贝沙坦　高血压　左心室肥厚　　　　　【中国图书分类号】　R544.1
　　Reversal effect of Irbesartan on left ventricular hypertrophy in patients with mild-moderate
essential hypertension
LI Hui , LIU Li , LI Jing , LUO Min , and HAN Ying.First Department for Invalid Cadres , General Hospital of Chinese People s Armed Po-
lice Forces , Beijing 100039 , China
【Abstract】　Objective　To study the reversal effect of irbesartan on left ventricular hypertrophy in patients with mild-moderate essen-
tial hypertension.Methods　A before-after study in the same patients was conducted.83 patients with mild-moderate essential hypertension
were treated with irbesartan 150 mg/ d , and were given 300 mg/ d if their blood pressure was not decreased effectively after 4 weeks for subse-
quent 8 weeks.The blood pressure , echocardiogram , and drug safety were monitored.Results　After 12 weeks treatment the blood pressure was
decreased(P <0.05), IVST , LVPWT , and LVMI were decreased(P <0.01).Conclusions　Irbesartan is an effective and safe drug in the
treatment of essential hypertension and reversal of left ventricular hypertrophy.
【Key words】　Irbesartan　Hypertension　Left ventricular hypertrophy
　　高血压引起左室肥厚(LVH)是独立的心血管危
614 武警医学 (Medical Journal of the Chinese People s Armed Police Forces)Vol.19 No.07 2008-07 出版