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三种迎春花提取物体外抗菌活性的研究



全 文 :非常严重,导致耐药性产生的速度很快。
4 讨论与小结
由大肠杆菌引起的鸡大肠杆菌病是一种细菌性
传染病,临床主要表现为大肠杆菌性的腹膜炎、心包
炎、肝周炎、输卵管炎、脐炎、滑膜炎、气囊炎等多种病
变[1]。该病易诱发其他疾病的并发病和继发病,应
激、饲养管理差、环境卫生不良也会加剧其病情。不
同大肠杆菌的血清类型给药物治疗带来极大困难,而
养鸡场有病乱投药,盲目、小剂量、重复选用抗生素类
药物防治,诱发了大肠杆菌耐药因子的产生,从而导
致出现大量耐药菌株,使药物控制的难度越来越大,
医疗成本大幅度提高[4],呈现出鸡大肠杆菌病治疗
效果反复,难治愈,好药难求的恶性循环。
药敏试验结果与临床给药效果可能不同。一是
养鸡户为了防治鸡大肠杆菌病,在饲养过程中盲目用
药,使大肠杆菌产生耐药性;二是药品在鸡体内、体外
因环境不同,对抗大肠杆菌的作用效果可能不同。因
此,药敏试验结果不能完全应用于临床治疗,只能提
供参考比较,临床对大肠杆菌病的准确治疗效果还需
要大量试验来验证[5]。
5 建议
1)为了更好地防治鸡大肠杆菌病,减缓耐药菌
株的产生速度,建议通过药敏试验和临床应用试验,
从适合于兽用许可的强敏感性的药物中筛选组成复
方制剂,进行科学合理的药物诊治。
2)加强饲养管理,做好卫生防疫工作,防止鸡大
肠杆菌的交叉、垂直感染,减少鸡大肠杆菌病的传播。
3)选用自家养殖场分离的大肠杆菌菌株制作的
灭活油苗进行免疫,可大大增强鸡体免疫力,降低发
病率。
参考文献:
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(011)
收稿日期:2014 - 08 - 07;修回日期:2014 - 09 - 11
基金项目:江苏农牧科技职业学院院级课题项目(QN1204)
作者简介:洪伟鸣(1981 -),男,讲师,硕士,主要从事生物制
药的教学与研究工作,jsahvc@ 163. com.
通信作者:范 斌(1974 -),男,实验师,本科,主要从事药物
分析实训教学工作,
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843018594@ qq. com.
三种迎春花提取物体外抗菌活性的研究
洪伟鸣1,徐 懿2,宋 亮1,崔潇婷1,陈海峰1,傅求平1,范 斌1
(1.江苏农牧科技职业学院 动物药学院,江苏 泰州 225300;2.泰州市海陵区兽医站,
江苏 泰州 225300)
中图分类号:R284 文献标识码:B 文章编号:1004 - 7034(2015)04 - 0110 - 02
关键词:迎春花;抗菌活性;体外;管碟法;水提取物;醇提取物;石油醚提取物
摘 要:为了观察三种不同提取方法得到的迎春花提取物的体外抗菌活性,试验采用管碟法对其进行
了研究。结果表明:迎春花的水提取物和醇提取物具有良好的抗菌活性,而迎春花的石油醚提取物未
见明显的抗菌活性。说明采用水提和醇提的方法可以获得迎春花中的抗菌活性成分。
迎春花(Jasminum nudi - florum Lindl.)为木犀科
茉莉花属植物,有黄梅、清明花等之称,分布于我国陕
西、山东、河南、江苏、浙江、贵州等地,有野生和栽培
两种,其叶、花、茎均可入药,每年 5—7 月份采集。
《本草纲目》中有迎春花“气味苦涩、平、无毒;主治肿
毒恶疮,阴干研末,酒服三钱,出汗便瘥”的记载[1]。
《贵州民间药物》、《陕西中草药》、《中草药手册》、
《全国中草药汇编》中均记载了该物种的药用功
效[2]。据相关文献报道,迎春花提取物具有耐缺氧、
抗心律失常、镇痛镇静、抗菌消炎等作用[3 - 6]。为了
更有效地开发利用这一丰富的资源植物,本试验研究
采用三种不同提取方法得到的迎春花提取物的体外
抗菌活性,现将结果报道如下。
1 材料
1. 1 供试菌株
大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均由中国兽药监察
所提供,均系常见致病菌,经斜面培养传至第 3 代,用
无菌生理盐水稀释成浓度为 1 × 105个 /mL 的菌悬
011
Heilongjiang Animal Science
and Veterinary Medicine № 04 2015
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2015.0619
2015 年 04 月(下)
液,现用现配。
1. 2 迎春花水提取物
迎春花采自江苏省泰州市 4 月中旬的地上部分,
切成寸长,以水浸泡 60 min,煎煮 2 次,30 min /次,合
并 2 次煎液,双层纱布过滤,将水煎液浓缩至 1 mL药
液,相当于 1 g药材,经高压灭菌后备用。
1. 3 迎春花醇提取物
将采摘的迎春花阴干后粉碎,称取迎春花粗粉
100 g置圆底烧瓶中,加入 95%乙醇 500 mL,加热回
流 1. 5 h后放冷,过滤;将滤液浓缩至 100 mL,向浓缩
液中加入活性炭 2 g,吸附数小时后过滤,收集滤液
备用。
1. 4 迎春花石油醚提取物
称取迎春花粗粉 100 g置圆底烧瓶中,加入石油
醚 500 mL,加热回流 1. 5 h后放冷,过滤;将滤液浓缩
至 100 mL,向浓缩液中加入活性炭 2 g,吸附数小时
后过滤,收集滤液备用。
1. 5 对照药品
注射用青霉素钠(批号为 09102302) ,山东瑞阳
制药有限公司生产,稀释至浓度为 800 U /mL;注射用
硫酸链霉素(批号为 20091106) ,大连美罗药厂生产,
稀释至浓度为 1 000 U /mL。
2 方法
2. 1 抗菌试验
采用管碟法进行抗菌试验[7],取灭过菌的营养
琼脂培养基加热至 50 ~ 53 ℃,吸取 20 mL 营养琼脂
培养基至培养皿中,冷却 30 min 后盖上灭菌的陶瓷
瓦盖,置 35 ~ 37 ℃培养箱中保温。另取在恒温水浴
箱中的培养基,放冷至 48 ~ 50 ℃,吸取适量菌悬液加
入其中,轻轻摇匀(以不出现气泡为宜) ,吸取 5 mL
注入营养琼脂培养基上,迅速摇匀使其展开。将双碟
置水平台上,盖好陶瓷瓦盖,放置 20 ~ 30 min 冷凝备
用。将灭菌的小钢管(牛津杯)放在双碟上,分别加
入三种提取物和对照药品,置 37 ℃恒温箱中培养
16 ~ 18 h后测量抑菌圈直径。重复 3 次,取平均值。
2. 2 判定标准
抑菌圈直径 > 20 mm为极度敏感,≤20 mm ~ >
15 mm为高度敏感,≤15 mm ~ > 10 mm 为敏感,≤
10 mm为低度敏感。
3 结果(见表 1)与分析
表 1 三种提取物的抑菌圈直径 mm
受试菌 迎春花水提取物 迎春花醇提取物 迎春花石油醚提取物 青霉素钠 硫酸链霉素
大肠杆菌 18. 44 17. 76 - 19. 03 21. 26
金黄色葡萄球菌 17. 32 16. 40 - 20. 66 20. 78
注:-表示无明显的抑菌圈。
由表 1 可知:迎春花水提取物和醇提取物对大肠
杆菌和金黄色葡萄球菌均具有良好的抗菌效果,为高
度敏感;而迎春花的石油醚提取物未见明显的抑
菌圈。
4 讨论
本试验结果表明,迎春花水提取物和醇提取物具
有良好的抗菌活性,而迎春花的石油醚提取物未见明
显的抗菌活性。虽然抑菌效果不如常见的一些抗生
素明显,但还是显现了良好的抗菌活性。通过石油醚
提取得到的大多是一些憎水性的物质,目前已有的文
献报道未见该类物质有抗菌活性,这与本试验结果
一致。
迎春花含有多种裂环烯醚萜类、黄酮类化合物,
现代药理研究结果表明,迎春花提取物具有良好的抗
菌消炎作用,同时还兼有提高动物机体的免疫作
用[8],可用于治疗动物细菌性及炎症等疾病。目前,
对迎春花的研究还处于初级阶段,若要弄清其有效成
分及结构,还有待进一步深入研究。本试验讨论了三
种不同提取物的体外抗菌活性,并考虑到醇提取物中
残留的提取溶剂本身对细菌有一定的抑制作用,最后
认为水提取物中存在有效抗菌成分的可能性更大,还
需对迎春花水提取物进行深入研究与开发。
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111《黑龙江畜牧兽医》综合版