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二叉鹿角蕨商品化育苗技术研究



全 文 :二叉鹿角蕨商品化育苗技术研究
林证明 陈 晔 韦丽娜 钟 音
(杭州花圃花卉科技开发中心 , 310007)
提要 珍贵观赏植物二叉鹿角蕨 (Platycerium bif urcatum C.Chr.)的批量生产 , 有两种途径:
孢子繁殖法和组织培养法。孢子播种基质的种类对二叉鹿角蕨孢子萌发有一定影响 , 但影响孢子
萌发的主要因素是温度和湿度。用组织培养方法 , 进行孢子无菌播种 , 孢子萌发对培养基要求并
不专一 , 但培养基中激素种类和浓度以及糖的含量对孢子萌发后原叶体生产及发育成幼孢子体均
有一定影响。用二叉鹿角蕨幼孢子体的茎尖和叶片进行组织培养 , 同样能获得二叉鹿角蕨小苗。
关键词 二叉鹿角蕨;孢子繁殖;组织培养
中图分类号 Q949.36
  收稿日期:1998-06-30
  二叉鹿角蕨又称蝙蝠蕨 、 “山国王子” ,
是鹿角蕨科鹿角蕨属的多年生附生植物 , 具
独特的体型高雅姿态 , 深受人们喜爱。它不
仅是美化现代居室的理想植物 , 也是插花配
叶和室内立体绿化的优良材料 。传统的繁殖
是用分株法 , 其繁殖数量少 , 不能在短期内
获得大量小苗。在自然环境中孢子成苗率很
低。通过长期试验 , 已探索出一套二叉鹿角
蕨孢子及组织培养繁殖方法 , 并已进行商品
化生产。
1 材料和方法
1.1 材料
二叉鹿角蕨孢子 、幼孢子体茎尖和叶片
1.2 方法
(1)基质准备:对红瓦片 、滤纸 、 脱脂
棉花 、 泥炭土 、水藓等进行高温灭菌消毒 ,
消毒后 , 将虑纸 、脱脂棉花 、 泥炭土 、 水藓
分别放在干净的塑料框或盆子里 , 放滤纸的
塑框上先垫一层棉花 , 以利于吸水和保持水
分;红瓦片放在盛凉开水的瓷盆里 。
(2)在红瓦片 、 滤纸 、脱脂棉花 、 泥炭
土 、 水藓上分别播上二叉鹿角蕨孢子。用凉
开水进行细喷雾或让水慢慢从底部渗入 , 并
盖上普通薄玻璃 , 保持湿度 , 以后将上几种
基质全部移入玻璃温室里 , 7d 以后观察记
录孢子萌发情况。
(3)孢子无菌播种法培养基用 MS 和减
量MS 以及 White 培养基;在 1/2MS 培养
基中分别加入 0.5mg/L , BA , KT , 2.4-D
等激素及不同浓度的糖含量 , pH 调整为
5.4 ~ 5.8琼脂 0.65%。
(4)二叉鹿角蕨孢子消毒:剪取带有成
熟孢子二叉鹿角蕨叶片 , 用 75%酒精浸
15S , 再在 0.1%HgC12 深液中浸 8min , 用
无菌水冲洗 4次 , 在无菌条件下把孢子播种
在培养基上。
(5)培养条件:培养室温度 25℃, 光
照强度 1 000-3 000lx , 光照时间每天 11h。
2 结果与分析
2.1 二叉鹿角蕨孢子播种试验
2.1.1 二叉鹿角蕨孢子在不同基质中萌发
情况 见表 1。
从表 1可见 , 在相同环境条件中 , 孢子
萌发在滤纸和脱脂棉花上最快 , 比在红瓦片
第 25卷 增刊
1998 年 9 月
江 苏 林 业 科 技
     Journal of Jiangsu Forestry Science &Techno logy      
Vol.25 Supple.
Sept.1998
表 1 二叉鹿角蕨在不同基质中的萌发时间
基质种类 红瓦片滤纸脱脂棉花泥炭土水藓
孢子现绿时间 (d) 28 21 21 28 26
和泥炭土上提前 7d , 比水藓基质上提前 5d。
但在红瓦片 、滤纸 、 棉花基质上孢子萌发后
需及时移植 , 否则对原叶体和幼孢子体生长
不利 。基质成分对二叉鹿角蕨孢子萌发有一
定影响。因此 , 在孢子播种前 , 必须选择保
水性良好 , 易管理的材料作基质。
2.1.2 不同营养条件对二叉鹿角蕨孢子萌
发影响 表 2以滤纸为基质 , 不加任何营养
表 2 不同营养成分对二叉鹿角蕨孢子萌发影响
营养条件 不加任何营养物质 添加 MS无机盐溶液
孢子现绿时间 (d) 21 18
物质组织只浇凉开水 , 结果添加营养元素组
的孢子提前 3d萌发 , 只浇凉开水组 21d时
也萌发 , 因此 , 可以认为孢子萌发是不需要
任何营养元素。但孢子萌发后从原叶体到幼
孢子体生产过程中需喷施低浓度的营养物质
如复合肥料等。
2.1.3 温度对二叉鹿角蕨孢子萌发的影响
 二叉鹿蕨孢子在 9 ~ 15℃的环境中 60d仍
未萌发 , 把这些未萌发孢子放入温度为 20
~ 26℃环境中 15d 后即萌发 , 从表 3可见 ,
二叉鹿角蕨了解子萌发适宜温度为 20 ~
26℃, 因此温度和湿度是孢子萌发主要因
素。在常规情况下 , 孢子播种在基质表面 ,
盆上再盖一块玻璃 , 保证小环境有足够湿
度 , 并可减少空气中微生物的侵入 。但孢子
萌发最适温度与真菌等孢子萌发条件相近 ,
菌类的繁殖速度快 , 因此真菌的衍生 , 可以
使蕨类植物的孢子播种归于失败。另外 , 高
温高湿气候 , 对孢子萌发后原叶体生长也很
不利 , 如温度在 36℃以上时在叶体生长不
良乃至死亡。因此在常规情况下 , 二叉鹿角
蕨孢子播种管理上需特别细致 。
表 3 不同温度情况下 , 二叉鹿子蕨孢子萌发时间
培养温度   9~ 15℃ 14~ 21℃ 20-26℃
孢子萌发时间 60d还未萌发 22d 12d
2.2 二叉鹿角蕨孢子的无菌播种
为了克服低温及高温高湿对二叉鹿角蕨
孢子萌发不利因素 , 用组织培养方法进行了
二叉鹿角蕨孢子无菌播种 , 在培养室良好环
境条件下培养 , 其试验结果如下:
2.2.1 矿质元素对鹿角蕨孢子萌发的影响
 用全量的 MS , 1/2MS , 1/1MS 以及
White培养基的大量元素 4种培养基 , 均匀
稳步稀疏地播上二叉鹿角蕨的孢子 , 在培养
基的表面均在 7 ~ 10d内出现绿色 , 说明这
4种培养基的浓度 , 均在其萌发的适度范围
以内 , 也未见有专一的要求 , 其适应范围较
广。
2.2.2 几种植物激素对二叉鹿蕨孢子萌发
的影响 在 1/2M S 培养基中 , 分别添加浓
度为 0.5mg/ L 的 BA , KT , 2.4 -D 和
GA3 , 分别均匀稀疏地播上孢子。7d天后 ,
添加 GA3 , KT 组首先现绿 , 经继续培养 ,
原叶体上不定根也以添加 GA3 , KT 组出现
早7d , 而 BA , 2.4-D 组迟 7d。但是 , 孢
子体的出现则反而以添加 2.4 -D 组为最
早 , 而且数量也最多 , 此外 , 把添加 BA的
浓度增至 1 ~ 2mg/L 时 , 则见孢子萌发以后
产生绿色的球状体 , 谓之 GGB。GGB有继
续增殖的能力 , 可以用来扩大繁殖系数 。把
GGB转入 1/2MS添加 0.2mg/ L的 K T 培养
基中分化为小芽。
2.2.3 糖对二叉鹿角蕨孢子萌发的影响 
在 1/2M S培养基中不加糖 、 添加 1%和 5%
庶糖的 3种培养基中 , 分别均匀稀疏地播上
孢子 , 则见 5%庶糖的 1/2MS 培养基上的
孢子现绿时间延迟 5d , 在没有添加庶糖的
培养基上 , 原叶体的色泽较浅 , 体形较小 ,
不定根出现的时间也较迟 , 180d 后 , 也未
见孢子体幼苗出现 。把仅为 1/2MS 培养基
上的原叶体 , 一部分转移到添加 3%糖的 1/
2MS培养基上 , 则 30d 后就出现幼小的孢
子体;未作转移的另一部分原叶体 , 则在
300d后才产生少量的孢子体幼苗。
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2.2.4 二叉鹿角蕨孢子成熟程度对萌发的
影响 。 杭州地区的孢子 , 约在 7月以后成
熟。5 月底 , 6 月初的二叉鹿角蕨孢子囊 ,
虽呈黄色 , 从颜色上看 , 比 7 月以后的略
浅。这种孢子囊的色泽差异虽然不很明显 ,
但是 , 在生产应用时 , 孢子萌发时间的差异
却很大 。取 5 月底或 6月初的孢子进行播
种 , 经过长约 150d时间的培养 , 才萌发现
绿 , 萌发率也低;采用 8至 9月底的孢子进
行同样的播种 , 则在 7 ~ 10d 就萌发现绿 ,
并且发芽率高 。
2.2.5 二叉鹿角蕨孢子寿命的试验 1991
年 8月 , 收集了一批二叉鹿角蕨的孢子叶 ,
在常温下贮藏 。到 1992年 8月和 1993年 9
月分别取这些贮藏的孢子播种 , 并以当年 8
~ 9月间所采孢子作播种的对照 , 结果如表
4:
表 4 二叉鹿角蕨孢子寿命的试验
播种时间 (年.月) 孢子收集时间 (年.月) 萌发记录时间 (d) 萌发率 贮藏时间
1992.8 1991.8 20~ 30 1 常规贮藏 1年
1992.8 7~ 10 1 随采随播
1993.9
1991.8 40~ 50 0.3~ 0.4 常规贮藏 2年
1992.8 20~ 30 1 常规贮藏 1年
1993.9 10~ 12 1 随采随播
  种子学认为:“当一个种子群体的发芽
率降低到 50%左右时 , 那末 , 从收获后到
半数种子存活率所经历的时间就作为该种子
群体的寿命。” 依照这一概念 , 认为二叉鹿
角蕨的孢子寿命 , 在常温条件下贮藏的寿命
不到 2年 。
2.3 二叉鹿角蕨的无性繁殖
二叉鹿角蕨是外来种 , 新中国建立初
期 , 杭州引种过几株 , 一直以传统的分株方
法繁殖 , 几十年来未见增加几株 , 更谈不上
批量生产 。为此 , 应用组织培养无性繁殖技
术能获得较多数量鹿角蕨小苗 。
把试管中无菌孢子体幼苗叶片或茎尖剪
下 , 切成 0.5cm2 的小块 , 置于添加 6-BA
0.1 ~ 1mg/L 和 NAA 0.1 ~ 0.5mg/ L的改良
MS培养基上 , 进行培养 , 20d 左右 , 在叶
片切口处长出绿白色愈伤组织 , 120d左右 ,
在叶片的切块上长出肉眼可见的丛生芽 , 把
这些芽分割 , 进行继代培养以增加芽的数
量。
把幼孢子体茎尖培养在 6-BA 0.05 ~
0.5mg/L 和 NAA 0.1 ~ 0.5mg/L 的 1/2MS
培养基中 , 30d后产生绿色球状物 , 称之谓
GGB , GGB也可不断增殖 , 把 GGB转放 1/
2MS添加 KT0.1 ~ 0.5mg/ L 的培养基上 ,
则分为小芽 , 小芽长大后转入 1/2M S+0.1
~ 0.5mg/L NAA 的培养基中 , 20d左右生
根 , 成为可以移植的二叉鹿角蕨小苗。
3 讨论
(1)二叉鹿角蕨的孢子很小 , 在显微镜
下才能清楚地看到孢子的形状 。因此在孢子
繁殖过程中基质的选择很重要 , 选择保水性
好 , 通透性强 , 消毒容易的材料作为二叉鹿
角蕨孢子播种基质 , 孢子萌发快 , 在管理上
还能省时省力 。
(2)孢子萌发的关键因子主要是温度和
湿度。二叉鹿角蕨孢子萌发较理想温度为
20 ~ 26℃, 温度过低 (9 ~ 15℃), 孢子不易
萌芽 , 但温度 (36℃以上)、 湿度过高时孢
子萌发后原叶体生长不良 , 乃至死亡。蕨类
植物孢子萌发的适温范围 , 与菌类孢子萌发
相吻合 , 菌类的蔓延 , 速度更快 , 它们间生
存竞争 , 可以导致观赏蕨孢子育苗的失败 。
控制菌类孢子衍生 , 是保证二叉鹿角蕨稳产
的关键。
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(3)用组培方法进行孢子无菌播种的优
点是
孢子萌发速度快 (7 ~ 10d), 萌发率高 ,
有利于观察和研究 , 但其技术条件要求严 ,
成本也较常规播种高 , 在进行批量生产时二
者有机结合起来进行 , 互作补充 , 可扬长避
短。
(4)用孢子播种进行批量生产二叉鹿角
蕨苗所需时间为孢子萌发需 7 ~ 26d , 长成
原叶体需 30 ~ 60d , 到幼孢子体形成需 180
~ 300d , 成为商品苗出售需进行 1 ~ 2年的
栽培 , 用组织培养方法进行无性繁殖 , 同样
也需这些时间 。如果要缩短生长周期 , 还需
进一步研究。
·文摘·
发 展 中 国 牡 丹 的 探 讨
滕长江
(盐城市园林管理处 , 224001)
摘要 根据中国牡丹的优势 , 提出了发展中国牡丹的途径 , 以及在发展中国牡丹过程中需解决的
问题 , 针对具体问题就如何发展中国牡丹提出建议。
关键词 中国牡丹;发展;探讨
中图分类号 S685.11
180                江 苏 林 业 科 技                第 25 卷