全 文 ：China Pharmaceuticals
2013年 9月 5日 第 22卷第 17期
Vol． 22，No． 17，September 5，2013
＊科技部科技基础性工作专项项目，项目编号:2009FY220100;2011 年自然科学基金面上项目，项目编号:81173594;中央高校基
本科研业务费专项资金项目，项目编号:SWJTU11ZT26。
藏药木橘为芸香科植物木橘 Aegle marmelos ( L． ) Correa 的
干燥未成熟果实，11 ～ 12 月采集，整个或横剖，晒干 [ 1 ]。木橘产于
云南西双版纳，生于海拔 600 ～ 1 000 m 略干燥的坡地林中，印
度、缅甸、老挝、越南、柬埔寨、泰国、马来西亚、印度尼西亚也有分
布 [2 ]。木橘具有重要的药用价值，可治疗消化不良、腹泻和痢疾 [3 ]，但
目前相关研究甚少。因此，笔者利用气相色谱 －质谱(GC － MS)联
ppmppm
或成盐对溶解度影响很大，如不准确会导致产率减少; 得到的延
胡索乙素需要多重结晶几次，才能得到高纯度的产品。
致谢:本研究中核磁共振结果由中国药科大学陈东军老师测定，
特此致谢。
作者简介:刘亚萍(1970 －)，女，大学本科，副主任药师，主要
从事中医院药剂科工作，(电子信箱)liuyaping1970@ 163． com。
参考文献:
[ 1 ] Cao FL，Shang GW，Wang Y，et al． Antinociceptive effects of intragastric
DL － tetrahydropalmatine on visceral and somatic persistent nociception
and pain hypersensitivity in rats [ J ] ． Pharmacol Biochem Behav，2011，100
(1 ) : 199 － 204．
[ 2 ] 闵 清，白育庭，舒思洁，等 ． 延胡索乙素对四氯化碳致小鼠肝损伤
的保护作用 [ J ]，中国中药杂志，2006，31(6):483 － 485．
[ 3 ] 刘玉梅，周宇宏，单宏丽，等 ． 延胡索乙素对豚鼠单个心室肌细胞钾
离子通道的影响 [ J ]，中国药理学通报，2005，21 (5 ):599 － 601．
[ 4 ] Oh YC，Choi JG，Lee YS，et al． Tetrahydropalmatine inhibits pro － inflam-
matory mediators in lipopolysaccharide － stimulated THP － 1 cells [ J ] ．
J Med Food，2010，13 (5 ) : 1 125 － 1 132．
[ 5 ] 原永芳，李修禄，柳正良，等 ． 超临界流体萃取法及高效液相色谱法分
析延胡索中延胡索乙素的含量 [ J ] ． 药学学报，1996，31 (4 ) : 282 － 286．
[ 6 ] 杨振寰，赵 亮，王旭生，等 ． 反相高效液相色谱法制备延胡索乙
素 [ J ] ． 中成药，2006，28(8):1 185 － 1 186．
[ 7 ] 王奇志，梁敬钰，原 悦 ． 岩黄连化学成分研究 [ J ]，中国天然药物，
2007，5(1):31 － 34．
(收稿日期:2012 － 08 － 28 )
ppmppm
A． 延胡索乙素 1H － NMR谱 B． 巴马汀 1H － NMR谱
C． 延胡索乙系 13C － NMR D． 巴马汀 13C － NMR谱
图 4 延胡索乙素和巴马汀的核磁共振氢谱和碳谱
檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨
藏药木橘挥发油化学成分气相色谱 －质谱联用分析＊
武尉杰，谭 睿，卢 琼，谢 彬
(西南交通大学生命科学与工程学院，四川 成都 610031)
摘要:目的 促进藏药木橘的开发利用。方法 采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，峰面积归一化法测定相对含量，气相色谱 －质谱联用技术
(GC － MS)辅助人工检索鉴定其化学成分。结果 共分离和鉴定了 33 个化合物，占挥发油总量的 91． 82%，其中脂肪酸类相对百分含量
为 51． 97%。藏药木橘挥发油的主要成分为棕榈酸(40． 04%)，β －石竹烯(10． 04%)，油酸(7． 83%)，香叶烯 B(5． 33%)，α －葎草烯
(3． 53%)，γ －姜黄烯(2． 61%)和 α －桉叶烯(2． 30%)等。结论 藏药木橘具有较好的药物开发潜质，值得深入研究。
关键词:木橘;挥发油;气相色谱－质谱联用
中图分类号:R284． 1;R282． 71 文献标识码:A 文章编号:1006 － 4931 (2013 )17 － 0011 － 03
GC －MS Analysis of Chemical Constituents in Volatile Oils from Tibetan
Medicine Aegle marmelos (L． ) Correa
Wu Weijie， Tan Rui， Lu Qiong，Xie Bin
( College of Life Science and Engineering， Southwest Jiaotong University， Chengdu， Sichuan， China 610031 )
Abstract: Objective To promote the development and utilization of Tibetan medicine Aegle marmelos (L． ) Correa． Methods The water
steam distillation method was adopted to extract the volatile oils from Aegle marmelos ( L． ) Correa． The relative amount of each
constituent was determined by the peak area normalization method． The chemical constituents were separated and identified by GC － MS
assisted the manual retrieval． Results Thirty － three chemical compounds were separated and identified，accounting for 91． 82% of the
total volatile oils，in which the relative percentage composition of fatty acids was 51． 97% ． The main components of Tibetan medicine
Aegle marmelos ( L． ) volatile oil are hexadecanoic acid ( 40． 04% ) ，beta － caryophyllene ( 10． 04% ) ，9 － octadecenoic acid ( 7． 83% ) ，
germacrene B ( 5． 33% ) ， alpha － humulene (3． 53% )， gamma － curcumene (2． 61% ) and alpha － selinene (2． 30% ) ． Conclusion Tibetan
medicine Aegle marmelos ( L． ) has better medicinal development potential and deserves to be deeply researched
Key words:Aegie marmelos (L． ) Correa; volatile oil ; GC － MS
·药物研究·
Drug Research
1．
02
9
7
3．
03
5
4
2．
89
5
4
1．
00
0
0
3．
06
4
5
3．
02
5
0
3．
02
6
6
1．
97
6
5
4． 5 4． 0 3． 5 3． 0 2． 5
3．
03
7
0
6．
55
4
0
4． 5 4． 0 3． 5 3． 0 2． 5
5．
76
8
3
1．
97
0
0
2．
98
2
1
1．
96
0
7
A B
60 50 40 30 60 50 40 30
C D
11
China Pharmaceuticals
2013年 9月 5日 第 22卷第 17期
Vol． 22，No． 17，September 5，2013
表 1 木橘挥发油成分组成
序号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
保留时
间(min)
3． 19
5． 07
5． 85
6． 14
6． 93
7． 06
7． 29
7． 72
8． 01
8． 31
8． 48
8． 90
9． 11
9． 53
9． 73
9． 96
10． 63
化合物名称
柠檬烯 limonene
反式氧化芳樟醇 trans － linalool oxide
α －古巴烯 alpha － copaene
芳樟醇 linalool
α －紫穗槐烯 alpha － amorphene
β －榄香烯 beta － elemene
β －石竹烯 beta － caryophyllene
γ －榄香烯 gamma － elemene
反式 － β －金合欢烯 trans － beta － farnesene
α －葎草烯 alpha － humulene
γ －姜黄烯 gamma － curcumene
香叶烯 germacrene － D
α －桉叶烯 alpha － selinene
δ －杜松烯 delta － cadinene
α －姜黄烯 alpha － curcumene
瓦伦烯 valencene
反式茴香脑 trans － anethole
相对分
子质量
136
170
204
154
204
204
204
204
204
204
204
204
204
204
202
204
148
分子式
C10H16
C10H18O2
C15H24
C10H18O
C15H24
C15H24
C15H24
C15H24
C15H24
C15H24
C15H24
C15H24
C15H24
C15H24
C15H22
C15H24
C10H12O
相对含
量 (% )
0． 76
0． 30
0． 46
0． 18
0． 32
1． 67
10． 04
1． 17
0． 81
3． 53
2． 61
1． 23
2． 30
1． 31
0． 74
0． 67
1． 35
匹配
度 (% )
98
91
98
97
86
99
99
98
96
99
95
98
99
99
93
95
98
序号
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
保留时
间(min)
10． 78
13． 25
14． 60
15． 30
15． 98
16． 92
17． 27
17． 90
19． 00
21． 96
24． 02
25． 14
25． 49
26． 30
28． 04
29． 58
化合物名称
香叶烯 B germacrene B
氧化石竹烯 caryophyllene oxide
榄香醇 elemol
匙叶桉油烯醇 spatulenol
γ －桉叶醇 gamma － eudesmol
β －桉叶油醇 beta － eudesmol
蛇床 － 6 －烯 － 4 －醇 selina － 6 － en － 4 － ol
别香橙烯 alloaromadendrene
反式松香芹烯 longipinocarveol，trans －
月桂酸 dodecanoic acid
十四酸 tetradecanoic acid
十五酸 pentadecanoic acid
14 －顺式十五烯酸 14 － pentadecenoic acid
棕榈酸 hexadecanoic acid
十七烷酸 heptadecanoic acid
油酸 9 － octadecenoic acid ( Z ) －
相对分
子质量
204
220
222
220
222
222
222
204
220
200
228
242
240
256
270
282
分子式
C15H24
C15H24O
C15H26O
C15H24O
C15H26O
C15H26O
C15H26O
C15H24
C15H24O
C12H24O2
C14H28O2
C15H30O2
C15H28O2
C16H32O2
C17H34O2
C18H34O2
相对含
量(%)
5． 33
0． 83
0． 91
0． 35
0． 65
1． 77
0． 95
1． 24
0． 98
0． 57
1． 19
1． 30
0． 66
40． 04
0． 38
7． 83
匹配
度(%)
99
99
91
96
98
92
78
93
62
97
99
97
93
99
95
97
3 讨论
采用水蒸气蒸馏法对木橘药材总挥发油进行提取，收油率较
低。藏药木橘外皮质地坚硬，因此药材的粉碎度及浸泡时间均对
挥发油的提取有很大影响。
研究结果显示，木橘挥发油中主要含脂肪酸类、萜类(主要为倍
半萜)和醇类化合物，其中脂肪酸类为主要成分，占 51． 97%;在分
离鉴定出的 33个化合物中，相对含量最高的是棕榈酸(40． 04%)，
其次是 β －石竹烯(10． 04%)、油酸(7． 83%)、香叶烯 B(5． 33%)、
γ －姜黄烯(2． 61%)、α －葎草烯(3． 53%)和 α －桉叶烯(2． 30%)。
现代药理研究发现，棕榈酸对血小板聚集具有抑制作用，对
治疗血栓有较大帮助 [ 5 ]。油酸则能降低低密度脂蛋白胆固醇水
平，预防动脉硬化 [ 6 ]。挥发油中种类众多的倍半萜及单萜类化合
物也具有重要的药用价值。其中含量最高的 β －石竹烯不仅具有
局部麻醉、治疗结肠炎、镇咳等药理作用，在环保、空气净化各方
面也有比较广的用途，可很好地除去空气中的臭氧并净化空气 [7 ]。
其他萜类如柠檬烯、金合欢烯、香叶烯等均具有杀菌消毒、抵抗炎
症和镇痛的作用 [ 8 ]。因此，藏药木橘具有较好的药物开发潜质。为
更好地评价这一藏药资源的药用价值并合理开发利用，有必要对
其进行广泛深入的研究。
作者简介:武尉杰 ( 1989 － )，男，河南开封人，硕士研究生，
(电子信箱)819196892@ qq． com;谭睿(1969 －)，女，四川成都人，
教 授，硕 士 研 究 生 导 师 ，本 文 通 讯 作 者 ，(电 话 )028 －
87600993(电子信箱)tanrui@ swjtu． edu． cn。
参考文献:
[ 1 ] 中华人民共和国卫生部药典委员会 ． 中华人民共和国卫生部药品标
准·藏药(第一册)[M ] ． 北京:人民卫生出版社，1995: 31．
用技术对藏药木橘挥发油的化学成分进行了分析，试图寻找其药
效物质以及为进一步开发利用提供基础资料。
1 仪器与材料
HP － 6890 / 5973 型 GC － MS 联用仪(美国惠普公司); 挥发
油提取器;恒温水浴锅;电热套。木橘药材于 2011 年 12 月购自成
都荷花池中药材市场，经西南交通大学生命科学与工程学院宋良
科副教授鉴定为芸香科木橘属植物木橘 Aegle marmelos (L． ) Correa
的干燥果实。
2 方法与结果
2．1 GC－MS分析条件
色谱柱:HP － Innowax毛细管柱(50 m × 0． 25 mm × 0． 25 μm);
汽室化温度:260 ℃;载气:高纯氦气;流速:0． 8 mL /min;进样量:
1 μL;分流比:50 ∶ 1;程序升温:100 ℃保持 1 min，以 6 ℃ /min升
温至 270 ℃，保持 10 min;离子源:EI;电离能量:70 eV;离子源温
度:230 ℃;四级杆温度:150 ℃;扫描范围:20 ～ 450 amu。
2．2 挥发油制备
按 2010 年版《中国药典(一部)》附录ⅩD 挥发油测定法 [ 4 ]，
将木橘药材粉碎成粗粉，称取 240 g，精密称定，置烧瓶中，加 10倍
量水浸泡过夜，加热至沸腾并保持微沸 5 h，至测定器中油量不再
增加时停止加热，静置 1 h，读取挥发油含量，并计算供试品中挥
发油的含量(%)。
2. 3 组分分析与鉴定
采用水蒸气蒸馏法对木橘药材总挥发油进行提取，每 100 mg
木橘的总挥发油平均含量为 0． 83 mL。对总离子流图 (见图 1 )中
各峰经质谱扫描后得到质谱图，经谱库检索，将各峰的质谱裂片
图与文献资料核对，结合人工图谱解析，利用峰面积归一化法确
定各组分在挥发油中的相对百分含量。按上述 GC /MS条件对木
橘中的挥发油进行分析，共分离鉴定出 33 个组分，占挥发油总量
的 91． 82%。
图 1 木橘挥发油总离子流图
·药物研究·
Drug Research
4． 00 14． 00 24． 00 34． 00
200 000
140 000
80 000
20 000
t / min
丰度
12
China Pharmaceuticals
2013年 9月 5日 第 22卷第 17期
Vol． 22，No． 17，September 5，2013
＊广东医学院青年基金项目，项目编号:XQ1103。
[ 2 ] 林 镕，石 铸 ． 中国植物志 ． 第 43 卷 (第 2 分册)[M ] ． 北京:科学
出版社，1987: 210．
[ 3 ] N·N·Barthakurt，林 野，等 ． 木桔果实的有机成分和无机成分 [ J] ．
世界热带农业信息，1989，6: 32 － 34．
[ 4 ] 国家药典委员会 ． 中华人民共和国药典(一部)[M ] ． 北京:中国医药
科技出版社，2010:附录ⅩD．
[ 5 ] 张 坚，王春荣，杨淑华，等 ． 棕榈油对成人血脂和血小板功能的影
响 [ J ] ． 营养学报，1997，19 (2 ) : 186．
[ 6 ] 田永全 ． 脂肪酸的营养功能 [ J ] ． 中国食物与营养，2007(8): 51 － 52．
[ 7 ] 陈旭冰，仝 诚，陈光勇 ． β －石竹烯的研究进展 [ J ] ． 山东化工，
2011，40 (7 ) : 34 － 36．
[ 8 ] 金紫霖，张启翔，潘会堂，等 ． 芳香植物的特性及对人体健康的作
用 [ J ] ． 湖北农业科学，2009，48(5): 1 245 － 1 247．
(收稿日期:2013 － 04 － 27 )
通过现代仪器技术研究蛙的血液成分，发现蛙血液中含有
糖、脂类、蛋白质、核酸及其核酸代谢产物、胆固醇和低密度脂蛋
白、免疫球蛋白及补体、酶类、多种酯类、乳酸脱氢残根和无机
盐 [ 1 ]。目前，国内外对蛙血液的研究仅限于其血液成分的分析测
定，有关药理药效学方面尚无研究报道。故本研究探讨蛙血清去
蛋白提取物对小鼠的抗缺氧作用，为其进一步深入研究和开发利
用提供依据。
1 材料与方法
1．1 仪器、试药与动物
250 mL广口瓶;秒表;离心机(上海安亭科学仪器厂);pH计
(美国 Thermo Electron公司);RE － 52AAB型旋转蒸发仪(上海亚
荣生化仪器厂)。无水乙醇、亚硝酸钠(AR，天津市晨福化学试剂
厂); 碱石灰(AR，上海化学试剂公司);盐酸普萘洛尔片(山西云
鹏制药有限公司);胃蛋白酶(BR，沃凯公司);木瓜蛋白酶(BR，国
药集团化学试剂有限公司)。清洁级昆明种小鼠，雌雄各半，体重
(20 ± 2)g，由广东医学院实验动物中心提供，生产许可证号 SCXK
(粤 ) 2008 － 0008，使用许可证号 SYXK(粤 ) 2008 － 0007。动物饲
养条件，自由取食，饮用自来水，环境温度 18 ～ 22 ℃，相对湿度
40% ～ 70%，自然照明。
1. 2 方法
蛙血清去蛋白提取物制备:取新鲜蛙血，分离得到血清，加乙
醇除去蛋白，粗滤，加入适量胃蛋白酶和木瓜蛋白酶，在特定的
pH下酶解 12 ～ 24 h，超滤，得蛙血清去蛋白提取物，每 1 mL约含
固形物 50 mg。
动物分组及给药:取健康昆明种小鼠100 只，随机分成 5 组，
每组 20 只，雌雄各半。蛙血清去蛋白提取物分为高、中、低 3 个剂
量组(C1，C2，C3 组)，腹腔注射，剂量分别为 90，30，10 mL / kg。空
白对照组(A组)按 90 mL /kg腹腔注射生理盐水。阳性对照组(B组)
按 30 mg /kg腹腔注射盐酸普萘洛尔。
常压耐缺氧试验:给药1 h后，将各组小鼠分别放入 250 mL带
塞玻璃广口瓶内(瓶内放有 10 g碱石灰吸收 CO2和 H2O，垫滤纸用
于吸收尿液)，每瓶只放 1只小鼠，用凡士林涂抹瓶塞以密闭瓶口，
立即用秒表盲法计时，直至小鼠停止呼吸。以小鼠在密闭广口瓶内
存活时间为指标，比较各组小鼠耐缺氧存活时间。
急性脑缺血性缺氧试验:给药1 h后，用大剪刀在小鼠双耳后
部迅速断头，立即用秒表盲法记录小鼠断头后至张口喘气停止的时
间，比较各组小鼠急性脑缺血性缺氧的存活时间。
亚硝酸钠中毒缺氧试验: 给药1 h 后，各组小鼠均腹腔注射
蛙血清去蛋白提取物抗缺氧作用的初步研究＊
陈 博
(广东医学院东莞校区生理科学实验室，广东 东莞 523808)
摘要:目的 研究蛙血清去蛋白提取物对小鼠的抗缺氧作用。方法 通过建立小鼠常压缺氧模型、急性脑缺血性缺氧模型及亚硝酸钠
中毒缺氧模型，以生理盐水为空白对照，盐酸普萘洛尔为阳性对照，观察蛙血清去蛋白提取物 3 个剂量组(10，30，90 mg / kg)对小鼠的
抗缺氧作用。结果 蛙血清去蛋白提取物能显著延长模型小鼠在常压缺氧、急性脑缺血性缺氧及亚硝酸钠中毒缺氧时的存活时间。
结论 蛙血清去蛋白提取物具有抗缺氧作用。
关键词:蛙血清去蛋白提取物;抗缺氧;小鼠
中图分类号:R285． 5;R282． 74 文献标识码:A 文章编号:1006 － 4931 (2013 )17 － 0013 － 02
Primary Study on Anti － Hypoxia Activity of Deproteinized Frog Serum Extract
Chen Bo
( Laboratory of Physiological Science， Dongguan Campus， Guangdong Medical College， Dongguan， Guangdong， China 523808 )
Abstract: Objective To investigate the anti － hypoxia activity of deproteinized frog serum extract on mice． Methods With normal saline
as the blank control group，and propranolol hydrochloride as the positive control group，the anti － hypoxia effect of the 3 doses (10，30，
90 mg / kg ) of deproteinized frog serum extract on the mice was observed by extablish the normobaric hypoxia mice model，acute cere-
bral ischermic hypoxia mice model and sodium nitrite poisoning hypoxia mice mode． Results The deproteinized frog serum extract could
significantly prolong the survival time of mice in hypoxia under ordinary pressures，acute cerebral ischemic hypoxia and sodium nitrite
poisoning caused hypoxia． Conclusion Deproteinized frog serum extract has the anti － hypoxic effect on mice．
Key words: deproteinized frog serum extract;anti － hypoxia;mouse
檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨
·药物研究·
Drug Research
13