全 文 ：半边旗二萜类化合物 5F对高转移卵巢癌
HO-8910PM细胞中癌相关基因表达的影响
何太平 1 ,覃燕梅 1 ,莫丽儿2 ,吴科锋 2 ,梁念慈 1, 2
(1.广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江　524023;2.广东天然药物研究与开发重点实验室 ,广东 湛江　524023)
中国 图 书 分 类 号:R 282.71; R 394-33;R 394.2;
R737.310.53;R977.6
文献标识码:A　文章编号:1001-1978(2008)01-0117-06
摘要:目的　深入探讨半边旗(PterissemipinnataL, PsL)二
萜化合物 5F(PsL5F)抗癌作用的分子机制 ,全面了解其对卵
巢癌中癌相关基因表达的影响。方法　应用人癌相关基因
芯片观察 PsL5F对多种癌相关基因表达的影响 ,并用实时定
量 PCR和 Westernblot对部分基因和蛋白进行验证。结果
　在芯片所含 440种基因中 , PsL5F明显上调 52个基因的
表达 , 明显下调 25个基因的表达。差异表达明显的基因可
粗略分为 3类:①影响 p53及相关基因;②影响TGF-β 通路
相关基因;③抑制细胞外基质和粘附分子的表达。结论　
芯片结果明显深化了对 PsL5F抗癌分子机制的认识 ,其作用
机制与 p53、TGF-β 相关基因及细胞外基质和粘附分子表达
有关。
关键词:半边旗;卵巢癌;表达
收稿日期:2007-08-14,修回日期:2007-10-14
基金项目:广东省中医药局建设中医药强省科研课题(No1060044,
1050047);广东省医学科研基金资助项目(NoB2005104)
作者简介:何太平(1970-),男 , 硕士 ,副研究员 , 研究方向:生化药
理学 , Tel:0759-2388634, E-mail:taipinghe@163.com;
梁念慈(1940-),男 , 教授 ,博士生导师 , 研究方向:生化
药理学 ,通讯作者 , Tel:0759-2388501, Fax:0759-2284104,
E-mail:ncliang@gdmc.edu.cn
　　中草药半边旗(PterissemipinnataL, PsL)具有
明显的抗癌作用 ,本课题组分离和鉴定了几种有效
成分 ,其化学结构皆为二萜类化合物 ,其中之一 5F
(PsL5F)含量最高 ,其结构为 Ent-11α-hydroxy-15-
oxo-kaur-16-en-19-oicacid。近 10年的研究表明 ,
PsL5F抑制多种癌细胞的生长 ,并初步探讨其作用
机制 ,包括下调 NF-κB的活性 、下调 Bcl-2及 Bcl-xL
的表达 、上调 Bax的表达和刺激 p38 MAPK的活性
等 [ 1-3] 。但这些 “零敲碎打 ”的研究难以了解其作
用的全貌。为了深入探讨 PsL5F抗癌作用的分子机
制 ,全面了解其对癌相关基因表达的影响 ,我们应用
人癌相关基因芯片获得了许多新的信息。现报道如
下 。
1　材料与方法
1.1　实验材料　人肿瘤基因芯片(OHS-802)购自
SuperAray公司 ,芯片上含有 440个癌相关基因 、3
个空白点和一系列看家基因 , 基因的详细情况见
SuperAray公 司 网 页 (htp://www.superaray.
com/)。人高转移卵巢癌 HO-8910PM细胞购自上
海细胞生物所 ,是由浙江省肿瘤研究所许沈华等[ 4]
建立 。细胞在含 10%小牛血清 , 100 U· ml-1青霉
素和 100mg· L-1链霉素的 RPMI1640完全培养基
中 , 37℃、5% CO2饱和湿度孵箱培养。细胞经消化
传代 ,取对数生长期的细胞进行培养。
1.2　药品与试剂　超级小牛血清购自杭州四季青
公司;RPMI1640培养基购自 Invitrogen公司;4×上
样缓冲液(125 mmol· L-1 Tris-HCl, pH6.8, 4%
SDS, 10% β-巯基乙醇 , 20%甘油 , 0.04%溴酚蓝);
GDF15兔多克隆抗体购自 Abgent公司;NR1D1兔
多克隆抗体购自 CelSignaling公司;BRCA1兔多克
隆抗体 、β -actin兔多克隆抗体购自 SantaCruz公司;
辣根过氧化物酶标记抗兔 IgG购自北京中山公司。
PsL5F由广东天然药物研究与开发重点实验室提
供 ,实验前用 DMSO溶解 ,培养基稀释 , DMSO终浓
度为 0.1%(实验证明该浓度对细胞无影响)。
1.3　实验方法
1.3.1　总 RNA提取 　按常规方法培养 HO-
8910PM细胞 , 用 0.1% DMSO和 100 μmol· L-1
(实验浓度参照文献 2)PsL5F分别作用 HO-
8910PM细胞 24 h,用 TRIzol试剂 (Invitrogenlife
technologies)抽提总 RNA,变性琼脂糖凝胶电泳检
测 RNA纯度及完整性 。
1.3.2　cRNA标记与合成　反转录酶合成 cDNA,
TrueLabeling-AMPTM线性 RNA扩增试剂盒扩增 、并
用 Biotin-16-dUTP标记 cRNA, 再用 SuperArrayAr-
rayGradecRNA纯化试剂盒纯化 cRNA。
1.3.3　芯片杂交与洗涤　将 OligoGEAray®芯片
装于杂交管中 ,用 GEAhyb杂交液预杂交 2 h,弃去
预杂交液 ,加入含有标记的 cRNA的样品杂交液杂
交过夜 。 5ml洗液 1(2×SSC, 1%SDS)洗膜 15 min,
·117·中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBulletin　2008 Jan;24(1):117 ～ 22
5 ml洗液 2(0.1×SSC, 0.5% SDS)再洗膜 15 min。
1.3.4　化学发光检测　最后 1次洗膜后 ,弃去洗
液 ,立刻加入 1.5mlGEAb封闭液 Q,在杂交仪中孵
育 40 min,弃去封闭液 ,加入 2 ml结合缓冲液 ,在杂
交仪中轻轻摇动孵育 10 min,洗膜后 ,加入 1.0 ml
CDP-Star化学发光底物至杂交管中 , 室温孵育 2
min。取出膜 , 放在滤纸上以去除多余的 CDP-Star
溶液 ,然后用干净的塑料膜包住 ,驱除气泡 ,用 X胶
片曝光 。
1.3.5　图像采集和数据分析　用台式扫描仪扫描
X胶片 ,图片保存为灰度的 、TIFF格式的电子版文
档 。用 GEAray表达分析配套软件 (GEArayEx-
pressionAnalysisSuite)进行完整的芯片数据分析 。
每个点的灰度值跟芯片所有看家基因的平均灰度值
进行标准化处理 ,得出每个点的标准值 ,再与对照组
相应点的标准值进行比较 ,以差异为 2倍 (即比值
≥2.0或≤0.5)的标准来确定差异表达基因。
1.3.6　实时定量 RT-PCR验证分析　对芯片结果
中部分差异表达基因进行 SybergreenⅠ实时定量
RT-PCR验证。设计引物 , β -actin:5′-CCTGTACGC-
CAACACAGTGC-3′(Forward), 5′-ATACTCCTGCTT-
GCTGATCC-3′(Reverse);BRCA1:5′-AGGTCCAA-
AGCGAGCAAGAG-3′(Forward), 5′-TGCCAAGGGT-
GAATGATGAA-3′(Reverse);FBN2:5′-ATCCAGTA-
GTCGCAATCTCGT-3′(Forward);5′-TTGGCATTAC-
CTTACATTCATC-3′(Reverse);GDF15:5′-TGACTT-
GTTAGCCAAAGACTGCC-3′(Forward), 5′-GAACCT-
TGAGCCCATTCCACA-3′(Reverse);NR1D1: 5′-
GGGCTTCTCCCAGTTTCCA-3′(Forward), 5′-AGAC-
CATTTAGGGCCTCGTTAT-3′(Reverse)。取 2.5 μg
总 RNA反转录形成 cDNA(MMLV反转录酶 , Pro-
mega公司),使用 Rotor-Gene3000 RealtimePCR仪
进行实时定量 RT-PCR扩增 。扩增条件为 β -actin:
95 ℃, 5min;35 cycles(95℃, 10 s;57℃, 15 s;72℃,
20 s;85.5℃, 5 s)。 BRCA1:95℃, 5 min;35 cycles
(95℃, 10 s;59℃, 15 s;72℃, 20 s;82.7℃, 5 s)。
FBN2:95℃, 5min;35 cycles(95℃, 10 s;60℃, 15s;
72℃, 20 s;84℃, 5 s)。 GDF15:95℃, 5 min;35 cy-
cles(95℃, 10 s;60℃, 15 s;72℃, 20 s;85℃, 5 s)。
NR1D1:95℃, 5 min;35 cycles(95℃, 10 s;60℃, 15
s;72℃, 20 s;85℃, 5 s)。 72℃ ～ 99℃绘制溶解曲
线 ,然后采用比较阈值法对实时定量 RT-PCR结果
进行定量分析。
1.3.7　Westernblot验证　取对数生长期的 HO-
8910PM细胞 ,稀释成 1 ×109· L-1 ,接种于 50 mm
的培养皿中培养 ,每皿 5ml。待细胞贴壁后 ,分别用
0.1% DMSO和 100 μmol· L-1的 PsL5F处理 HO-
8910PM细胞 24h,收集细胞 , PBS洗涤 2次 ,加入预
冷的细胞裂解液 100 μl,用细胞刮将细胞刮下 ,并转
移至预冷的 1.5 ml离心管中 ,置于碎冰上冰育 20
min后 ,于 4 ℃, 12 000×g离心 15 min。 BCA法测
定上清液蛋白质含量。蛋白样品和 4×上样缓冲液
按 3 ∶1的比例混合 , 100℃水中煮沸 5 min使蛋白
质变性。 SDS-PAGE电泳后电转移至 PVDF膜上 ,
5%脱脂牛奶封闭后加入第 1抗体于室温孵育 2 h,
用 TBS缓冲液洗涤 3次 ,每次 10min,加入第 2抗体
于室温孵育 2h,再用 TBS缓冲液洗涤 3次 ,每次 10
min,加入发光试剂(ECL)显色 ,用 X胶片曝光。以
β-actin作内参 ,用图像分析软件 ScionImage进行光
密度积分值分析。
1.4　统计学方法 　采用 SPSS11.0统计软件包
One-WayAnova与 Bon-feroni(方差齐)或Tamhane′s
T2(方差不齐)检验进行统计学处理 。
2　结果
2.1　PsL5F影响 HO-8910PM细胞基因表达　100
μmol· L-1的 PsL5F处理 HO-8910PM细胞 24 h
后 ,芯片检测图片见 Fig1,芯片数据分析结果显示
PsL5F对 77个基因的表达有差异 ,其中表达下调≥
2倍基因有 25个 (Tab1),表达上调 ≥2倍基因有
52个(Tab2),并将差异表达基因按照生物学功能
进行分类(Tab3)。
Fig1　Scanningresultoftestchip
2.2　实时定量 RT-PCR验证分析　从 Tab1、2中
选出 4个基因(BRCA1、FBN2、GDF15和 NR1D1)进
行实时定量 RT-PCR验证 ,结果与芯片的分析数据
基本吻合(Fig2、3)。
·118· 中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2008 Jan;24(1)
Fig2　VerificationofefectofPsL5Fontheexpression
ofBRCA1, FBN2mRNAbyReal-timePCR( x±s, n=3)
　　＊＊P<0.01vscontrolgroup
Fig3　VerificationofefectofPsL5Fontheexpression
ofGDF15andNR1D1mRNAbyReal-timePCR( x±s, n=3)
　　＊＊P<0.01vscontrolgroup
2.3　Westernblot验证 　再选出 BRCA1、GDF15
和 NR1D1 3个基因用 Westernblot分析其蛋白表达
变化 ,结果证实 PsL5F能升高 GDF15和 NR1D1蛋
白表达 ,降低 BRCA1的表达(Fig4)。
Fig4　VerificationofefectofPsL5Fontheexpression
ofBRCA1, GDF15andNR1D1proteinsbyWesternblot
Tab1　Down-regulatedgenesinPsL5F-treated
group(comparedwithcontrolgroup)
Symbol Description Signalratioa
ADSL Adenylosuccinatelyase 0.49
BLMH Bleomycinhydrolase 0.45
BRAF V-rafmurinesarcomaviraloncogenehomologB1 0.47
BRCA1 Breastcancer1, earlyonset 0.44
CCNE1 CyclinE1 0.42
CD24 CD24antigen(smalcellungcarcinomacluster4antigen)0.37
CD59 CD59antigenp18-20 0.46
CDK10 Cyclin-dependentkinase(CDC2-like)10 0.47
CKMT1 Creatinekinase, mitochondrial1(ubiquitous) 0.44
COL1A1 Colagen, typeI, alpha1 0.43
CTPS CTPsynthase 0.43
DCN Decorin 0.35
E2F3 E2Ftranscriptionfactor3 0.30
FASTK FASTkinase 0.48
FBN1 Fibrillin1 0.38
FBN2 Fibrillin2 0.18
FES Felinesarcomaoncogene 0.34
FZD9 Frizzledhomolog9 0.44
MMP1 Matrixmetaloproteinase1 0.18
MYL9 Myosin, lightpolypeptide9, regulatory 0.48
PPARG Peroxisomeproliferativeactivatedreceptor, gamma 0.47
SFPQ Splicingfactorproline/glutaminerich 0.34
SPRY2 Sproutyhomolog2(Drosophila) 0.38
TFDP1 TranscriptionfactorDp-1 0.48
ZNF9 Zincfingerprotein9 0.35
　　a:ratioofgeneexpressioninPsL5F-treatedgroupvscontrolgroup
3　讨论
半边旗又名半边莲 、半边菊 ,属凤尾蕨科植物 ,
广泛分布于南方各省 ,具有清热解毒 、利水消肿和抗
炎等功效 。我们在过去数年的研究表明 PsL5F在体
外可致人的多种癌细胞死亡 ,其作用机制主要是通
过线粒体途径诱导癌细胞的凋亡 , 同时还发现
PsL5F的作用是部分依赖 p53,而 p53通过刺激 Bax
的活性和抑制 Bcl-2的活性来促进线粒体介导的凋
亡[ 5, 6] ,另外我们的实验还证明 PsL5F能抑制人高
转移卵巢癌细胞的侵袭转移能力 [ 7] ,但 PsL5F抗肿
瘤作用的机制还不完全明确 ,因此我们应用癌相关
基因芯片观察 PsL5F对人高转移卵巢癌细胞中癌相
关基因表达的影响 。结果发现在芯片所含 440种基
因中 , PsL5F明显上调 52个基因的表达 ,明显下调
25个基因的表达 ,并对部分基因和蛋白用实时定量
PCR和 Westernblot进行了验证 ,证明芯片结果完全
可靠 。本实验结果表明 PsL5F下调高转移卵巢癌
HO-8910PM细胞中遗传性乳腺癌 、卵巢癌易感基因
BRCA1的表达 ,但这似乎与 BRCA1作为经典的抑
癌基因对细胞生长增殖起负调控作用不相符合 [ 8] 。
但大量研究表明 BRCA1基因在卵巢癌人群中高度
·119·中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2008 Jan;24(1)
突变 ,突变的 BRCA1明显增加罹患卵巢癌风险 [ 9] ,
同时我们的前期研究也表明 BRCA1与卵巢癌的恶
性表型也相关 ,高转移卵巢癌 HO- 8910PM细胞中
BRCA1表达明显高于低转移卵巢癌 HO-8910细胞
Tab2　Up-regulatedgenesinPsL5F-treatedgroup(comparedwithcontrolgroup)
Symbol Description Signalratioa
RHOC Rashomologgenefamily, memberC 2.16
CEBPG CCAAT/enhancerbindingprotein(C/EBP), gamma 2.70
CYR61 Cysteine-rich, angiogenicinducer, 61 2.77
EGR1 Earlygrowthresponse1 4.35
EIF5 Eukaryotictranslationinitiationfactor5 3.04
EPHA2 EphA2 2.67
ERBB2 V-erb-b2erythroblasticleukemiaviraloncogenehomolog2 3.70
FGFR1 Fibroblastgrowthfactorreceptor1 4.14
FKBP8 FK506bindingprotein8, 38ku 3.38
FOSL1 FOS-likeantigen1 6.02
FOXO1A ForkheadboxO1A(rhabdomyosarcoma) 2.38
GDF15 Growthdiferentiationfactor15 7.14
HMMR Hyaluronan-mediatedmotilityreceptor(RHAMM) 3.08
ICAM1 Intercelularadhesionmolecule1(CD54), humanrhinovirusreceptor 2.04
IER3 Immediateearlyresponse3 7.37
IRF3 Interferonregulatoryfactor3 3.25
ITGA3 Integrin, alpha3 2.30
LEP Leptin 3.90
MAP2K2 Mitogen-activatedproteinkinasekinase2 2.67
MICB MHCclassIpolypeptide-relatedsequenceB 2.01
NINJ1 Ninjurin1 3.54
NR1D1 Nuclearreceptorsubfamily1, groupD, member1 26.17
PDGFA Platelet-derivedgrowthfactoralphapolypeptide 3.17
PEA15 Phosphoproteinenrichedinastrocytes15 2.20
PRKAR1A Proteinkinase, cAMP-dependent, regulatory, typeI, alpha 2.24
PTEN Phosphataseandtensinhomolog 2.26
RAB5A RAB5A, memberRASoncogenefamily 3.99
RAC1 smalGTPbindingproteinRac1 3.84
REL V-relreticuloendotheliosisviraloncogenehomolog 2.35
RELA nuclearfactorofkappalightpolypeptidegeneenhancerinB-cels3 4.64
RELB V-relreticuloendotheliosisviraloncogenehomologB 4.59
STAT2 Signaltransducerandactivatoroftranscription2, 113ku 4.43
STAT3 Signaltransducerandactivatoroftranscription3 6.46
TBRG4 Transforminggrowthfactorbetaregulator4 5.93
TGFBR3 Transforminggrowthfactor, betareceptorⅢ(betaglycan, 300ku) 4.12
THBS1 Thrombospondin1 2.41
TIMP1 Tissueinhibitorofmetalloproteinase1 2.10
TK1 Thymidinekinase1, soluble 2.08
TLE1 Transducin-likeenhancerofsplit1 2.95
TNFRSF1A Tumornecrosisfactorreceptorsuperfamily, member1A 2.31
TNFRSF1B Tumornecrosisfactorreceptorsuperfamily, member1B 3.96
TNK1 Tyrosinekinase, non-receptor, 1 5.04
TP53 Tumorproteinp53 3.52
TP53BP2 Tumorproteinp53bindingprotein, 2 4.74
TP53I3 Tumorproteinp53inducibleprotein3 2.55
TPBG Trophoblastglycoprotein 4.13
TYRO3 TYRO3proteintyrosinekinase3 2.58
UBE2L6 Ubiquitin-conjugatingenzymeE2L6 2.04
USP7 Ubiquitinspecificprotease7(herpesvirus-associated) 4.32
WEE1 WEE1homolog(S.pombe) 3.04
WNT1 Wingless-typeMMTVintegrationsitefamily, member1 2.48
YWHAZ Tyrosine3-monooxygenase/tryptophan5-monooxygenaseactivationprotein, zetapolypeptide 2.89
　　a:ratioofgeneexpressioninPsL5F-treatedgroupvscontrolgroup
·120· 中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2008 Jan;24(1)
Tab3　DifferentialmolecularfunctionprofileinHO-8910PMcelstreatedbyPsL5F
Functions Up-regulatedgenes Down-regulatedgenes
Apoptosis FOXO1A, IER3, PEA15, RELA, TNFRSF1A, TNFRSF1B, TP53, TP53BP2,
TP53I3
BRAF, BRCA1, FASTK
Celcycle PCTK2, PDGFA, PPGFB, PTEN, TBRG4, TP53, TP53BP2, TP53I3, WEE1 BRCA1, CCNE1, TFDP1
Celgrowthanddifferenti-
ation
RHOC, CYR61, FGFR1, FOSL1, FOXO1A, GDF15, IER3, JUN, PDGFA, PDG-
FB, REL, TBRG4, TIMP1, WNT1
BRAF, BRCA11, CDK10, FES
Celmotility HMMR, ICAM1, ITGA3, RAC1, STAT3, THBS1, TIMP1, TPBG COL1A1, DCN, FBN2, FBN1, MMP1
Signaltransduction CSNK1G2, FKBP8, PDGFA, PPKAR1A, RAB5A, RAC1, SIAH2, WNT1, BRAF, CD59, FZD9
Transcription CEBPG, EGR1, FOSL1, FOXO1A, IRF3, PRKAR1A, REL, RELA, RELB, STA2,
STA3, TLE1, TP53, TP53BP2, TP53I3,
BRCA1, E2F3, PPARG, TFDP1,
ZNF9
Metabolism LEP, TK1 CTPS, PPARG
Others EIF5, EPHA2, ERBB2, MAP2K2, MICB, NINJ1, TBL3, TGFBR3, TNK1, TYRO3,
UBE2L6, USP7, YWHAZ
ADSL, BLMH, CD24, CKMT1,
DDX10, MYL9, SFPQ, SPRY2
(另文待发表),推测 BRCA1在高转移卵巢癌细胞
中已发生突变 ,从而可解释 PsL5F下调 BRCA1表达
的实验结果 ,但这还需进一步验证。另外我们还发
现 PsL5F能明显上调孤儿核受体超家族成员
NR1D1的表达 ,文献表明 NR1D1主要与脂肪细胞
分化[ 10] 、炎症和昼夜节律有关[ 11] , Filipski等 [ 12]的
研究表明昼夜节律紊乱可引起肿瘤恶变 ,另外 Chin
等 [ 13]发现 NR1D1与乳腺癌的病理生理紧密相关 ,
PsL5F影响卵巢癌细胞中 NR1D1表达也与半边旗
在民间具有抗炎功效相符合 ,但其作用机制有待深
入研究 。
对表达差异基因按照生物学功能进行分类 ,
PsL5F抗高转移卵巢癌细胞作用涉及细胞凋亡 、细
胞周期 、细胞生长与分化 、细胞运动 、信号转导 、基因
转录和细胞代谢等 7大类相关基因的共同作用 。尽
管这些基因相互关系复杂 ,我们发现 PsL5F抗肿瘤
细胞作用主要与以下 3类基因密切相关:①影响
p53相关基因。 PsL5F能上调 TP53、 TP53BP2和
TP53I3的表达 ,这几个基因都影响肿瘤细胞的细胞
周期演变与转录活性 ,并与癌细胞的凋亡密切相
关 [ 14, 15] ;②影响 TGF-β通路相关基因。PsL5F强烈
刺激 TGF-β家族一个成员 GDF15 (又称 NAG-1)的
表达 ,过去的研究表明此基因能抑制多种癌的生长
和粘附能力 ,并促进癌细胞凋亡 [ 16 ～ 18] ;同时 PsL5F
上调 TGF-β调节蛋白 4(TBRG4)和 TGF-β受体 3
(TGFBR3)的表达 ,此二基因具有明显的抑癌作
用 [ 19, 20] ;PsL5F还明显下调 TGFBI(TGF-β诱导的
68 ku蛋白)的表达 ,也与其抑癌作用吻合 [ 21] 。 ③
抑制细胞外基质和粘附分子的表达 。PsL5F强烈抑
制细胞外基质 COL1A1、 Fibrilin1、 Fibrilin2和
MMP1的表达 ,刺激 TIMP1的表达 ,还影响粘附分子
ICAM1 、ITGA3和 DCN的表达 ,这几种蛋白均与癌
细胞的侵袭运动和转移密切相关 [ 22-24] 。本次芯片
结果也很好地符合 PsL5F抑制 HO-8910PM侵袭转
移能力和促进癌细胞凋亡的以往实验结果。
总之 ,应用癌相关基因芯片的研究明显深化我
们对半边旗有效成分抗癌分子机制的认识 ,新发现
PsL5F作用机制与影响 p53、TGF-β相关基因及细胞
外基质和粘附分子表达有关 。由此可以较好地解释
PsL5F促癌细胞凋亡 、抑制癌细胞侵袭转移能力的
分子机制 , 为进一步确定 PsL5F的分子靶点及
PsL5F的开发应用提供了依据 。
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Effectof5FfromPterissemipinnataLoncancer-associated
geneexpressioninHO-8910PMcels
HETai-ping1 , QINYan-mei1 , MOLi-er2 , WUKe-feng2 , LIANGNian-ci1, 2
(1.InstituteofBiochemistryandMolecularBiology, GuangdongMedicalColege, ZhanjiangGuangdong　524023, China;
2.GuangdongKeyLaboratoryforResearchandDevelopmentofNaturalDrugs, ZhanjiangGuangdong　524023, China)
Abstract:Aim　Toinvestigatetheefectof5Ffrom
PterissemipinnataL(PsL5F)oncancer-associated
geneexpressioninhighlymetastaticovariancarcinoma
HO-8910PMcels, andexploreitsmolecularmecha-
nismofantitumorefect.Methods　Thecancer-associ-
atedgeneexpressionprofilesofHO-8910PMcelswith
andwithoutPsL5F-treatmentwereanalyzedbyusing
genechiptechnology.Tovalidatethegenechipdata,
somediferentialexpressiongenes, includingBRCA1,
GDF15 andNR1D1 wereanalyzedwithfluorescent
quantitativereal-timePCRandWesternblotasay.Re-
sults　77 diferentlyexpressedgeneswerescreened
out, ofwhichup-regulatedanddown-regulatedgenes
were52and25, respectively.Thesegeneswererelat-
edtoapoptosis, celcycle, celgrowthanddiferentia-
tion, celmotility, signaltransduction, transcription
andmetabolism.Conclusions　Theresultsindicated
thatantitumorefectofPsL5FinHO-8910PMcelswas
associatedwithp53, TGF-betasignalingpathway, ex-
tracelularmatrixandadhesionmoleculeexpression.
Keywords:emodin;ovariancarcinoma;expression
·122· 中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2008 Jan;24(1)