全 文 ：Central South Pharmacy. February 2016, Vol. 14 No.2　中南药学 2016 年 2 月 第 14 卷 第 2 期
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（收稿日期：2015-09-23；修回日期：2015-10-19）
榄绿粗叶木茎甲醇提取物对 CCl4致
小鼠肝损伤的保护作用
程晶，温扬敏，谢永华（泉州医学高等专科学校，福建　泉州　362011）
摘要：目的　研究榄绿粗叶木茎甲醇提取物（简称MESLL）对 CCl4引起肝损伤小鼠的保护作用。方法
　小鼠称重后随机分为 6组。Ⅰ组为 正常对照组，Ⅱ组为肝损伤模型组，均按 20 mL·kg－１剂量每日
一次性灌胃生理盐水；Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组分别按 50、100、150 mg·kg－１剂量每日一次性灌 胃MESLL溶液；
Ⅵ组为按100 mg·kg－１剂量每日一次性灌胃水飞蓟素水溶液，连续7 d。末次给药2 h后，除正常对照组外，
其他各组分别按 10 mL·kg－１的剂量给小鼠一次性腹腔注射浓度为 0.2%的 CCl4溶液。禁食不禁水 18
h后，称重，摘眼球取血，测定血清 AST和 ALT活性。断颈处死小鼠，取其肝脏，称重。取肝脏右叶
同一部位经 10%甲醛固定，切片，HE 染色，观察肝组织病理学变化。剩余肝脏组织匀浆，测定其T- AOC、
SOD、MDA活性。结果　各剂量的MESLL均能降低肝损伤小鼠血清ALT 和AST 水平，提高肝脏T-AOC、
SOD活性和能降低MDA含量，减轻肝组织损伤程度。结论　MESLL对 CCl4致小鼠急性肝损伤具有明
显的保护作用。
关键词：榄绿粗叶木；急性肝损伤；保肝；小鼠
中图分类号：R285　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2016)02-0122-04
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2016.02.003
Protection of methanol extract from the stem of Lasianthus lancilimbus
against carbon tetrachloride-induced hepatic damage in mice
CHENG Jing, WEN Yang-min, XIE Yong-hua (Quanzhou Medical College, Quanzhou Fujian 362011)
Abstract: Objective　To evaluate the protective effect of methanol extract from the stem of Lasianthus lan-
cilimbus (MESLL) on carbon tetrachloride (CCl4)-induced hepatic damage mice. Methods The mice were
randomly divided into 6 groups: Group Ⅰ and Ⅱ were the normal control group and the model group, and
they were both given 20 mL·kg－１ normal saline. Group Ⅲ , Ⅳ and Ⅴ were given MESLL at 50, 100 and
150 mg·kg－１. GroupⅥ were given 100 mg·kg－１ silymarin. All groups were given medicines or normal
saline via intragastric administra tion once daily for 7 days. Two hours after the last intragastric administra-
tion, all the mice were given 0.2% CCl4 at 10 mL ·kg－１ except for the normal control group . After 18 h fast-
ing, all the mice were weighed and blood samples were collected by eye bleeding method. The activities of
ALT and AST of the blood samples were evaluated. Following the sacrifice of all the mice, the livers were
dissected. The ac tivities of SOD, MDA and T-AOC of the liver supernatant were tested. For histological
analysis, the livers were fixed in 10% formaldehyde at room temperature. Then 5 μm thick serial sections
were cut with microtome, and stained with haematoxylin-eosin. Results　MESLL significantly reduced the
level of ALT, AST and MDA, increased the level of T-AOC and SOD, and alleviated the liver injury in sinu-
作者简介：程晶，女，主要从事实验动物学研究，E-mail：83186698@qq.com
中南药学 2016 年 2 月 第 14 卷 第 2 期　Central South Pharmacy. February 2016, Vol. 14 No.2
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　　肝脏是人体总重要的器官之一，对药物、毒物以
及体内代谢产物等具有代谢转化作用。随着环境污染
日益严重和人们不良生活习惯增加，使得各种肝脏疾
病如肝炎、药源性肝损伤、肝硬化、脂肪肝等的发病
率不断上升。肝病的预防与治疗对改善人们的健康和
生活水平具有重要意义 [1]。
　　传统中医药实践，为天然药物的开发积累宝贵经
验。粗叶木属是茜草科中的一个大属，约有 180个
种，间断分布于热带亚洲、非洲至中、南美洲。热带
亚洲为分布中心 [2]，传统医学认为其具有祛风胜湿、
活血止痛等功效，主风寒湿痹、筋骨疼痛等功效 [3]。
近年来，对粗叶木植物活性成分提取及药理机制研究
越来越受到关注。李斌等 [4-5]对长尾粗叶木化学成分
进行分离纯化，分离出蒽酮、倍半萜内酯等新化合物。
从罗浮粗叶木 [6]、污毛粗叶木 [7]等植物中也分离出
多种具有生理活性的物质。榄绿粗叶木（Lasianthus
lancilimbus Merr.）为茜草科粗叶木属下的一个变
种，分布于我国浙江、江西、福建等地，生长在海拔
300～ 1500 m处的林下 [8]。福建民间一直有将榄绿
粗叶木用于治疗乙肝的传统，但其确切的有效成分不
明确，活性成分和药理作用研究也很少。预实验分别
采用水提取、乙醇提取和甲醇提取，发现醇提取物的
抗氧化活性较强，且甲醇提取率较高。本文对榄绿粗
叶木茎甲醇提取物对 CCl4致小鼠肝损伤的保护作用
进行研究。
1　材料与方法
1.1　材料
　　榄绿粗叶木采自福建省三明市宁化县治平乡泥
坑村，由泉州市林业局野生动植物保护管理站原站长
林彦云先生鉴定；水飞蓟素（德国马博士大药厂，
H20090217）；谷丙转氨酶（ALT）活性、谷草转氨酶
（AST）活性、超氧化物岐化酶（SOD）活性、总抗
氧化（T-AOC）活性和丙二醛（MDA）含量测定试剂
盒（南京建成生物公司）；100%CCl4（CCl4济宁华凯
树脂有限公司），甲醇（AR级，杭州永星五交化有限
公司）。
1.2　榄绿粗叶木茎甲醇提取物制备
　　取榄绿粗叶木茎，水洗干净后晒干，切成长 2～ 3
cm、宽 0.5～ 1 cm小块。称取 1 kg榄绿粗叶木茎小块，
放入 10 L玻璃瓶，加入固液比为 1 ：10（kg·L－１）
的甲醇溶液。浸泡 15 d后过滤，取上清液，旋转蒸发
仪蒸发，得到甲醇提取物浸膏（简称MESLL），提取
率为 1.28%。
1.3　动物分组与造模方法
　　小鼠称重后随机分为 6组。Ⅰ组为正常对照组，
Ⅱ组为 CCl4肝损伤模型组，均按 20 mL·kg －１剂量
每日一次性灌胃生理盐水。Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组分别为榄
绿粗叶木茎甲醇提取物低、中、高剂量组，分别按
50、100、150 mg·kg －１剂量每日一次性灌胃榄绿
粗叶木茎甲醇提取物，榄绿粗叶木茎甲醇提取物均
用蒸馏水溶解。Ⅵ组为水飞蓟素药物阳性对照组，
按 100 mg·kg －１剂量每日一次性灌胃水飞蓟素水
溶液。连续给药 7 d。末次给药 2 h后，Ⅱ～Ⅵ组分
别按 10 mL·kg －１的剂量给小鼠一次性腹腔注射浓
度为 0.2%的 CCl4溶液，0.2%CCl4用橄榄油配制。
禁食不禁水 18 h，称重，摘眼球取血，按南京建成
生物公司试剂盒测定血清 AST 和 ALT 活性。断颈
处死小鼠，取其肝脏，称重。再取肝脏右叶同一部
位经 10%甲醛固定，石蜡包埋后制成 5 μm切片，
HE 染色，光镜下观察肝组织病理学变化。剩余肝脏
组织，用冷生理盐水制成 10%的肝匀浆，4 ℃ 4000
r·min－１离心 10 min，取上清液，测定 SOD、T-AOC
活性和 MDA含量。
1.4　统计学方法
　　采用 SPSS 11.5统计软件，结果比较采用单因素
方差分析。
2　结果
2.1　MESLL对小鼠肝脏系数的影响
　　实验结束后，各组小鼠与正常对照组之间肝脏系
数（小鼠肝脏湿重占处死前体重的百分比）差异均无
统计学意义（见表 1）。注射 CCl4 后，小鼠肝脏系
数值比正常对照组增大，且差异均有统计学意义（ P
＜ 0.01）。各组小鼠肝脏系数均小于模型组，且存在
剂量相关性。
2.2　MESLL对肝损伤小鼠血清 ALT和 AST的影响
　　从表 2可以看出，CCl4肝损伤模型组小鼠血清
ALT和 AST明显高于对照组。与模型组比较，不同浓
度MESLL实验组均能显著降低小鼠 ALT和 AST活性
（P＜ 0.01），表明各 MESLL剂量对因肝损伤引起
的 ALT，AST升高具有显著的抑制作用。
2.3　MESLL对肝损伤小鼠肝匀浆组织 SOD、MDA、
T-AOC的影响
　　CCl4肝损伤造模后，小鼠肝组织匀浆 T-AOC、
SOD活性显著降低，而MDA水平升高。与模型组比较，
MESLL各剂量组与水飞蓟素阳性均能显著提高肝脏
T-AOC活性（P＜ 0.01），而显著降低MDA水平（P
＜ 0.01）。除 MESLL低剂量组外，其他实验组与模
型组之间 SOD活性差异均有统计学意义（P＜ 0.01）。
soidal spaces in CCl4-induced hepatic mice. Conclusion　MESLL can protect against hepatic injury in CCl4-
induced mice.
Key words: Lasianthus lancilimbus; acute liver injury; hepatoprotective; mice
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表 2　MESLL对小鼠血清 ALT和 AST的影响 (x±s，n＝ 6)
Tab 2　Effect of MESLLL on the serum ALT and AST in mice with liver injury (x±s，n＝ 6)
组别（group） 剂量（dose）/mg·kg－１ ALT/U·L－１ AST
Ⅰ组（正常对照组） — 16.27±1.51 37.81±4.08
Ⅱ组（模型组） — 70.73±5.43☆☆ 88.49±5.60☆☆
Ⅲ组（MESLL低剂量组） 50 58.44±1.67△△ ## 63.4±7.89△△ ##
Ⅳ组（MESLL中剂量组） 100 54.33±3.05△△ ## 57.7±4.36△△ ##
Ⅴ组（MESLL高剂量组） 150 49.20±2.12△△ 51.9±1.95△△
Ⅵ组（阳性对照组） 100 42.57±2.06△△ 49.8±6.58△△
注：与正常对照组比较，☆☆P＜ 0.01；与模型组比较，△△P＜ 0.01；与阳性对照组比较，##P＜ 0.01。
Note：Compared with the normal group，☆☆P＜ 0.01；compared with the model group，△△P＜ 0.01；compared with the positive control
group，##P＜ 0.01.
2.4　MESLL对急性肝损伤小鼠肝脏 HE染色切片的
影响
　　从图 1可以看出，正常对照组小鼠肝组织无损伤，
表现正常，细胞核分布均匀。而 CCl4急性肝损伤小鼠
肝脏组织细胞体积增大，细胞质颜色变淡。细胞边沿
不完整，结构不清晰，有大量的脂肪变性，出现水肿
和气球样变。MESLL各剂量组与水飞蓟素阳性对照组
肝细胞损伤、坏死等病理均有不同程度的缓解。
3　讨论
　 药物性肝病是指由药物或其代谢产物引起的肝损
害。大多数药物都需通过肝脏进行生物转化被清除。
在生物转化过程中，药物本身和（或）其代谢产物可
直接或间接通过免疫机制引起肝损伤，严重时可发生
肝衰竭 [9]。近年来，药物性肝病发病率呈逐年上升趋势，
我国由药物导致肝损伤患者占肝病患者的 l%～ 5%；
占急性肝炎患者的 10%，占暴发性肝衰竭患者的
13%～ 30%[10]。保护肝细胞，加速肝功能恢复，促使
肝细胞再生，防止肝纤维化的产生等是治疗早期肝病
的重要治疗方法 [11]。中医药在肝病的治疗中越来越受
重视，已证实很多中药具有减轻肝细胞和组织损伤、
促使受损肝细胞修复与再生、恢复肝脏功能的作用 [12]。
　　传统医学认为粗叶木属植物具有重要的药理价
值，具有祛风胜湿、活血止痛等功效，主风寒湿痹、
筋骨疼痛 [13]。现代生化技术研究表明，粗叶木植物
含豆甾醇，β-谷甾醇及虎刺醛，白桦脂醇等化学成分
等 [14-15]。而榄绿粗叶木的药理作用及机制研究较少，
表 1　MESLL对小鼠生长和肝系数的影响 (x±s，n＝ 6)
Tab 1　Effect of MESLLL on the growth and liver coefficient in mice (x±s，n＝ 6)
组别（group） 剂量（dose）mg·kg－１ 小鼠体重（weight of mice）/g 肝重（weight of liver）/g 肝脏系数（liver coefficient）/%
Ⅰ组（正常对照组） — 28.30±2.11 1.08±0.04 3.67±0.14
Ⅱ组（模型组） — 29.58±1.86 1.36±0.11☆☆ 4.72±0.29☆☆
Ⅲ组（MESLL低剂量组） 50 28.88±1.84 1.27±0.10☆ 4.40±0.47☆☆
Ⅳ组（MESLL中剂量组） 100 28.50±0.95 1.22±0.07☆△ 4.30±0.34☆
Ⅴ组（MESLL高剂量组） 150 29.08±1.45 1.24±0.11☆ 4.27±0.33☆
Ⅵ组（阳性对照组） 100 29.48±1.32 1.24±0.68☆ 4.21±0.22☆△
注：与正常对照组比较，☆P＜ 0.05，☆☆P＜ 0.01；与模型组比较，△P＜ 0.05。
Note：Compared with the normal group，☆P＜ 0.05，☆☆P＜ 0.01；compared with the model group，△P＜ 0.05.
表 3　MESLL对肝损伤小鼠肝匀浆组织 SOD、MDA、T-AOC的影响 (x±s，n＝ 6)
Tab 3　Effect of MESLL on the level of SOD，MDA and T-AOC in mice with liver injury (x±s，n＝ 6)
组别（group） 剂量（dose）/mg·kg－１ T-AOC/U·mg－１ pro SOD/U·mg－１ pro MDA/U·mg－１ pro
Ⅰ组（正常对照组） — 14.81±1.33 17.69±3.31 9.33±0.69
Ⅱ组（模型组） — 8.94±1.78☆☆ 8.18±1.24☆☆ 24.95±0.62☆☆
Ⅲ组（MESLL低剂量组） 50 11.41±0.83△△ 10.11±0.91# 19.52±1.37△△ #
Ⅳ组（MESLL中剂量组） 100 12.53±0.81△△ 12.36±2.43△△ 17.21±1.55△△
Ⅴ组（MESLL高剂量组） 150 12.90±1.20△△ 12.75±0.67△△ 15.24±1.23△△
Ⅵ组（阳性对照组） 100 13.07±1.96△△ 12.98±0.87△△ 16.74±1.28△△
注：与正常对照组比较，☆☆P＜ 0.01；与模型组比较，△△P＜ 0.01；与阳性对照组比较，##P＜ 0.01。
Note：Compared with the normal group，☆☆P＜ 0.01；compared with the model group，△△P＜ 0.01；compared with the positive control
group，##P＜ 0.01.
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正常 阳性对照 模型组

MESLL低剂量 MESLL中剂量 MESLL高剂量
图 1　MESLL对 CCl4小鼠急性肝损伤小鼠肝脏组织病理学影响（HE×40）
Fig 1　Effect of MESLL on histopathology of mice with acute hepatic injury induced by CCl4（HE×40）
民间常将其用于治湿热黄疸等。本研究表明，榄绿粗
叶木茎甲醇提取物能降低 CCl4引起的小鼠血清高浓度
的 ALT和 AST水平，减轻肝细胞的损伤、坏死，表
明MESLL具有强肝脏保护作用。显示榄绿粗叶木是
重要的药用植物，具有较高的药用开发利用价值。进
一步深入研究MESLL的抗肝损伤作用，可望将其开
发为新的治疗肝病药物。
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