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贵州野生与栽培头花蓼的主要药效质量评价研究



全 文 :收稿日期:2008-07-17; 修订日期:2008-12-30
基金项目:国家中医药管理局西部重点学科资助项目(No.200414)
作者简介:钱海兵(1977-),男(汉族),河南卫辉人 ,现任贵阳中医学院副
教授 ,博士学位 ,主要从事中药及民族药药效学研究工作.
*通讯作者简介:王祥培(1975-), 男(侗族),贵州天柱人 , 现任贵阳中医
学院副教授 ,博士学位 , 主要从事中药及民族药的品种品质与资源开发
工作.
贵州野生与栽培头花蓼的主要药效质量评价研究
钱海兵 1 , 王祥培1* , 孙宜春 1 , 黄国钧2 , 万德光 2
(1.贵阳中医学院 ,贵州 贵阳 550002; 2.成都中医药大学 ,四川 成都 610075)
摘要:目的 通过野生与栽培头花蓼主要药效学的研究 , 对贵州野生与栽培头花蓼进行药效质量评价。 方法 采用醋酸
致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进 、二甲苯致小鼠耳肿胀实验 、角叉菜胶致小鼠足肿胀和小鼠棉球肉芽肿等实验进行抗炎
实验 , 采用醋酸扭体法进行镇痛实验。结果 野生与栽培头花蓼对小鼠腹腔毛细血管通透性 、小鼠足肿胀 、小鼠耳肿胀和
棉球肉肿等炎症具有明显的抑制作用;对醋酸引起的扭体反应有明显的镇痛作用;相同剂量的野生与栽培头花蓼之间没
有明显差异。结论 贵州产野生与栽培头花蓼在主要药效质量方面没有明显差异。
关键词:头花蓼; 野生; 栽培; 药效质量评价
中图分类号:R285.5;R288  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2009)07-1597-02
QualityEvaluationofWildandCultivatedPolygonuncapitatuminGuizhou
QIANHai-bing1 , WANGXiang-pei1* , SUNYi-chun1 , HUANGGuo-jun2 , WANDe-guang2
(1.GuiyangColegeofTraditionalChineseMedicine, Guiyang550002, China;2.ChengduUniversityofTradi-
tionalChineseMedicine, Chengdu610075, China)
Abstract:ObjectiveToestimatethequalityofwildandcultivatedPolygonuncapitatumHambythestudyofprimarypharmaco-
dynamics.MethodsAnti-inflammationefectofwildandcultivatedPolygonuncapitatumwereobservedbymouseabdominal
cavitycapillarypermeabilityincreasetestinducedbyaceticacid, mouseauricleswellingtestinducedbyxylene, mousepedal
swelingtestinducedbycarrageeninandcottongranulomatestinmouse.AnalgesicactionofwildandcultivatedPolygonuncapita-
tumwasobservedbyaceticacid-inducedtwistingtest.ResultsBothwildandcultivatedPolygonuncapitatumcouldinhibitcotton
-inducedgranulomaofmice, andinhibittwistingresponseofmiceobviously.Inthesamedose, therehadnosignificantdifer-
encebetweenwildandcultivatedPolygonuncapitatum.ConclusionThereisnosignificantqualitydifferencebetweentheprimary
pharmacodynamicsqualityevaluationofwildandcultivatedPolygonuncapitatuminGuizhou.
Keywords:Polygonuncapitatum; Wild; Cultivated; Qualityevaluation
  头花蓼为蓼科植物头花蓼 PolygonumcapitatumHamexD.
Don的干燥全草或地上部分 , 具有清热利湿 、解毒 、止痛的功效 ,
主产于贵州 , 为贵州道地药材 , 苗族将其广泛用于泌尿系统疾病
的治疗。作为市售治疗泌尿系统感染的成药制剂热淋清的原料
药 , 头花蓼现已有 GAP的种植基地 , 为进一步进行质量评价 , 本
研究以贵州施秉头花蓼 GAP种植基地当地野生品为对照 , 进行
了头花蓼野生与栽培的主要药效质量研究。
1  材料与仪器
1.1 药材与试剂 栽培头花蓼 , 采自贵州施秉头花蓼 GAP种植
基地;野生头花蓼 ,采自贵州施秉 , 经成都中医药大学万德光教授
鉴定为蓼科植物头花蓼。
1.2  动物 昆明种小鼠 , 6 ~ 8周龄 , 体重 18 ~ 22 g, 雌雄兼有 ,
由贵阳医学院实验动物中心提供。
1.3  仪器与设备 LDZ5-2型自动平衡离心机 , 北京医用离心
机厂产品;千分尺 ,上海量具刃具厂产品;752型紫外光栅分管光
度计 , 上海第三分析仪器厂产品。
2 方法
2.1 对醋酸致小鼠毛细血管通透性增加的影响 取昆明种小鼠
60只 , 随机分为 6组 ,分别为正常对照组 、野生高剂量组 、野生低
剂量组 、栽培高剂量组 、栽培低剂量组和阿司匹林对照组 , 每组
10只。灌胃给药 , 连续 5d, 给药体积 0.2 ml/10 g, 末次给药后 1
h,尾静脉注射 0.5%伊文思蓝生理盐水溶液 0.1 ml/10 g,随即腹
腔注射 0.6%醋酸溶液 0.1 ml/10 g, 20 min后脱颈处死小鼠 , 腹
腔注射生理盐水 4 ml, 充分冲洗后 , 抽取腹腔冲洗液 3 ml, 2 500
r/min离心 5 min, 取上清液 ,紫外分光光度计 590nm处测定吸收
度(OD值), 进行组间比较。
2.2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 取昆明种小鼠 60只 , 分组
同 “ 1.4.1”项。灌胃给药 , 连续 5 d,给药体积 0.2 ml/10 g, 末次
给药后 1 h, 于小鼠右耳双面均匀涂抹二甲苯 0.03 ml/只 , 左耳不
涂作为对照 , 40 min后脱颈处死小鼠 , 用 8 mm打孔器分别在双
耳相同位置打下耳片 ,于分析天平上称取耳片重量 ,以重量差值
为肿胀度 ,并计算肿胀抑制率。
肿胀抑制率(%)=[(空白对照组耳片重差 -给药组耳片重差)/空
白对照组耳片重差 ] ×100%
2.3 对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响 取昆明种小鼠 60
只 , 分组同 “ 1.4.1”项。 灌胃给药 , 连续 5 d, 给药体积 0.2
ml/10 g。 末次给药前 , 千分尺测量小鼠正常足掌厚度 , 给药
后 40 min, 分别在小鼠右后肢足爪皮下注射 0.1%角叉菜胶
0.05 ml/只致炎。 随后第 1, 2, 4, 6 h各测量 1次 , 记录结果 ,
计算肿胀度 。
肿胀度(mm)=致炎后足掌厚度 -致炎前足掌厚度
2.4 对小鼠棉球肉芽肿的影响 取昆明种小鼠 60只 , 分组同
“ 1.4.1”项。将 20 mg灭菌棉球种植于小鼠皮下 , 自手术后第 1
天开始灌胃给药 , 连续 7 d。末次给药后 24 h取出棉球 , 置于
80℃烘箱 6 h烘干 ,称重 , 计算肉芽重量。
肉芽重量 =肉芽肿干重 -棉球重量
2.5 对醋酸引起的扭体反应的影响 取昆明种小鼠 60只 ,分组
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.7 时珍国医国药 2009年第 20卷第 7期
同 “ 1.4.1”项。灌胃给药 ,连续 5 d,给药体积 0.2 ml/10 g。末次
给药后 1 h,腹腔注射 0.6%冰醋酸溶液 0.2 ml/只 , 观察 20 min
内扭体次数 , 并计算镇痛率。
镇痛率(%)=(空白对照组扭体次数 -给药组扭体次数)/空白对照
组扭体次数 ×100%
2.6 统计学处理 数据均采用 SPSS10.0forWindows统计分析软
件分析处理 , 数据用 x±s表示 , 两组之间的比较用 Dunnett
检验。
3 结果
3.1 对醋酸致小鼠毛细血管通透性增加的影响 结果如表 1所
示 , 野生与栽培头花蓼对醋酸引起的腹腔毛细血管通透性增高具
有明显的抑制作用 , 二者相应剂量之间没有明显差异。
3.2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 结果见表 2,野生与栽培头
花蓼对二甲苯所致小鼠耳肿胀具有明显的抑制作用 ,野生与栽培
之间没有明显差异。
3.3 对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响 结果如表 3所示 , 野
生与栽培头花蓼对角叉菜胶所致小鼠足肿胀均有一定的抑制作
用 , 野生与栽培同种剂量之间没有明显的作用差异。
表 1 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响( x±s)
组别 剂量 C/g· (kg生药)-1 渗出液(OD)
正常对照 - 0.700±0.062
阿司匹林对照 12 0.522±0.133*
野生高剂量 60 0.510±0.062*
野生低剂量 30 0.698±0.159
栽培高剂量 60 0.589±0.110*■
栽培低剂量 30 0.682±0.119■
  与对照组比较 , *P<0.05;与相应剂量野生组比较 , ■P>0.05;n
=10
表 2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响( x±s)
组别 剂量 C/g· (kg生药)-1 耳廓肿胀度 m/mg抑制率(%)
正常对照 - 17.04±1.68 -
阿司匹林对照 12 11.25±2.69* 33.98
野生高剂量 60 10.35±2.71* 39.26
野生低剂量 30 14.5±1.29* 14.91
栽培高剂量 60 11.95±2.93*■ 29.87
栽培低剂量 30 14.81±2.2■ 13.15
  与对照组比较 , *P<0.05;与相应剂量野生组比较 , ■P>0.05;n=10
表 3 对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响( x±s)
组别 剂量C/g· (kg生药)-1
不同时间足掌肿胀度l/mm
1h 2h 4h 6h
正常对照 - 1.73±0.18 1.99±0.26 1.83±0.24 1.60±0.10
阿司匹林对照 12 1.62±0.39 1.44±0.39 1.34±0.41* 1.33±0.47*
野生高剂量 60 1.61±0.54 1.43±0.17* 1.18±0.28* 0.89±0.13*
野生低剂量 30 1.82±0.17 1.61±0.23 1.47±0.23* 1.24±0.25*
栽培高剂量 60 1.61±0.54 1.74±0.38*■ 1.33±0.25*■ 1.06±0.20*■
栽培低剂量 30 1.78±0.22 1.75±0.29■ 1.46±0.15*■ 1.16±0.29*■
  与对照组比较 , *P<0.05;与相应剂量野生组比较 , ■P>0.05;n=10
3.4 对小鼠棉球肉芽肿的影响 结果如表 4所示 , 野生与栽培
头花蓼对小鼠棉球肉芽肿有明显的抑制作用 ,且相同剂量的野生
与栽培作用之间没有明显的差异。
表 4 对小鼠棉球肉芽肿的影响( x±s)
组别 剂量C/g· (kg生药)-1 肉芽肿重量 /mg
正常对照 - 6.2±1.39
阿司匹林对照 12 4.4±1.62*
野生高剂量 60 4.5±1.58*
野生低剂量 30 5.0±0.81*
栽培高剂量 60 4.3±1.49*■
栽培低剂量 30 4.6±0.96*■
  与对照组比较 , *P<0.05;与相应剂量野生组比较 , ■P>0.05;n
=10
3.5 对醋酸引起的扭体反应的影响 结果如表 5所示 , 野生与
栽培头花蓼对角叉菜胶所致小鼠足肿胀均有一定的抑制作用 , 野
生与栽培同种剂量之间没有明显的作用差异。
表 5 对醋酸引起的扭体反应的影响 ( x±s)
组别 剂量C/g· (kg生药)-1
每 20 min扭体
次数
镇痛率
(%)
正常对照 - 30.14±2.34 -
阿司匹林对照 12 14.35±2.62* 52.38
野生高剂量 60 20.00±2.70* 33.64
野生低剂量 30 27.14±5.10 9.95
栽培高剂量 60 19.43±4.96*■ 37.19
栽培低剂量 30 28.14±3.63 6.64
  与对照组比较 , *P<0.05;与相应剂量野生组比较 , ■P>0.05;n=10
4 讨论
苗药头花蓼是贵州苗族民间常用药物 , 为贵州六大苗药之
一 ,其单方制剂也得到了广泛的临床应用 [ 1] 。 但由于野生资源
有限 ,为了进行资源的有效保护和充分利用 , 进行规范的 GAP种
植是有效的途径之一。有学者对头花蓼的化学成分进行研究 , 同
时在野生与栽培以及不同产地的品种质量控制方面也进行了相
关的研究。研究发现不同产地的野生与栽培之间在挥发油成分 ,
没食子酸含量以及总黄酮的含量均有明显的差异。即使是作为
道地产区的贵州 , 在不同的区域范围内其化学成分也具有明显的
差异 [ 2 ~ 5] 。在主要药效方面 ,也有人进行了头花蓼抗炎与镇痛研
究 [ 6] ,但在野生与栽培药效质量评价的对比研究方面 , 相关的报
道还比较少。本研究通过对 GAP种植基地地区的野生与栽培进
行药效质量的对比评价 , 发现在主要药效方面 ,野生与栽培没有
明显的差异 , 对炎症和疼痛具有明显的抑制作用 , 为头花蓼的
GAP种植提供了进一步的药效学评价资料。
参考文献:
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总黄酮的动态变化研究 [ J] .中国中药杂志 , 2003, 28(9):889.
[ 2 ]  王祥培 ,万德光 ,王祥森 ,等.不同产地野生与栽培头花蓼中总黄酮
的含量分析 [ J] .时珍国医国药, 2006, 17(9):1713.
[ 3 ]  王祥培 ,万德光 ,吴红梅.川产野生与栽培头花蓼挥发油的 GC-MS
分析 [ J].贵阳中医学院学报 , 2007, 29(5):61.
[ 4 ]  李勇军 ,骆宏丰 , 王永林, 等.头花蓼黄酮类化学成分的研究 [ J] .
中国药学杂志, 2000, 35(5)300.
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[ 6 ]  刘 明 ,罗春丽 ,张永萍 ,等.头花蓼 、飞龙掌血的镇痛抗炎及利尿
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 7期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.7