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不同方法提取客家药膳草药溪黄草的研究



全 文 :第 24卷 第 6期
2006年 12月
嘉应学院学报(自然科学)
JOURNAL OF JIAY ING UN IVERSITY(NATURAL SC IENCE)
Vo.l 24 No. 6
Dec. 2006
不同方法提取客家药膳草药溪黄草的研究*
刘志伟 ,王宏辉 ,张 晨
[收稿日期 ] 2006 -09 - 18
[基金项目 ]梅州市科技计划项目(2006B21)
[作者简介 ]刘志伟(1969— ),男 ,广东大埔人 ,嘉应学院生物系副教授 ,博士。
(嘉应学院 生物系 , 广东 梅州 514015)
[关键词 ]煎煮法;浸渍法;提取;客家药膳草药;溪黄草
[摘 要 ]研究了煎煮法和乙醇浸渍法提取客家药膳草药溪黄草的条件 , 通过感官评价及薄层色谱比较
两种提取方法得到的提取物的成分 , 证明水煎煮法和乙醇热浸渍法提取溪黄草的得率 、成分和口味均有
明显不同。通过实验确定煎煮法为提取溪黄草制作药膳汤料的方法 , 其最优的提取条件为:加水量 10
倍 , 煎煮时间 0. 5 h,提取次数 4次 , 此时得率为 13. 5%。
[中图分类号 ] R 284. 1 [文献标识码 ] A   [文章编号 ] 1006 - 642X(2006)06 - 0055 -04
  客家饮食文化颇具特色 ,客家药膳汤是其重要组成部分 。客都梅州孕育着丰富的药用植物 ,大多
分布于偏远的丘陵地带 ,是纯天然 、无污染的资源。常作为药膳汤料的有溪黄草 、铁甲草 、艾 、淮山 、土
茯苓 、鸡矢藤等。[ 1]用这些中草药炖成的汤品不仅味道独特 ,而且有各种预防 、治疗 、保健的功能 ,很
多已成为地方特色菜肴。
客家特色的药膳汤料目前主要还是以原料形式通过浅加工 (如干燥 、切片等)后出售 ,一般质量
轻 、体积大 ,携带不便 。将这些药膳中草药中有效成分提取加工成携带方便的汤料粉末形式 ,可为客
家药膳的产业化开发打下基础 。
本文研究了客家草药溪黄草成分的提取。溪黄草主要成分有萜类 、黄酮类 、甾醇类 、熊果酸类 、氨
基酸 、多糖类 、多肽类;味苦甘微涩 ,性平 ,无毒;内服清热利尿退黄去积止痛;外用消肿 ,入肝肺经 。实
验比较了不同提取方法对提取物得率 、主要成分及口味的影响 ,为溪黄草药膳方便汤料制备提供依
据 。
1材料与方法
1. 1 实验材料与仪器
溪黄草 ,市售干品 ,梅州地区产。化学试剂均为分析纯 。远红外辐射干燥箱 (766型),南通科学
仪器厂 。电子天平(FA1604A型 ),上海精天电子仪器厂 。
1. 2 实验方法
1. 2. 1煎煮法提取[ 2]
  称取 10 g溪黄草 ,放入 250mL的接收瓶中 ,加入所需的水量 ,接上回流装置 ,放在 1 kw控温电炉
上 ,用文火沸腾至设计的时间。将提取物过滤 ,再将滤液用文火蒸发至呈现浸膏状 , 80℃干燥至恒重 ,
以提取物重量为考察指标 。
—55—
表 1 煎煮法正交实验的因素和水平
次 加水量 A
/倍
提取时间 B
/h
提取次数 C
/次
1 10 1. 5 1
2 15 1 2
3 20 0. 5 3
表 2 热浸渍法正交实验的因素和水平
次 加液量 A
/倍
提取浓度 B
/%
提取次数 C
/次
1 10 40 1
2 15 50 2
3 20 60 3
  正交试验取溪黄草 10 g,进行三水平三因素 [ 3] (表 1)的实验 。做 3次平行样 。
1. 2. 2热浸渍法提取 [ 2]
选取不同浓度的乙醇溶液作为溶剂 ,称取 10 g的溪黄草 ,分别加入 20倍不同浓度乙醇溶液 ,
60℃分别浸渍 1 d、3 d、5 d。浸渍结束 ,将提取液过滤 , 60℃干燥至恒重 ,以提取物重量为考察指标确
定热浸渍的浓度和时间。
  正交实验称取 10 g溪黄草 ,进行三因素三水平实验(表 2)。做三次平行样 。
1. 2. 3薄层色谱鉴别实验
硅胶 G湿法制板 ,晾干 ,层析前将板放入烘箱中 110℃烘 0. 5 h至 1 h ,置于干燥器中备用 。
采取两种点样方式 ,一种是从各提取物干样品的复溶液中直接取样后点样 ,另一种是对提取物重
新 “醇溶 ”,然后点样。
展开剂为甲苯:乙酸乙酯:甲酸:甲醇:水 =20:10:5::5:2;显色剂为 5%的磷钼酸 -乙醇溶液和
10%的硫酸 -乙醇溶液 ,两者以 1:2的体积比临用时混合 。
2 结果与讨论
2. 1 煎煮法提取溪黄草
  试验结果如表 3所示。 R显示对各因素对提取物得率的影响顺序为 C >B >A。直观分析表明 ,
最佳提取条件为 A3B1C 3 ,此时提取和浓缩总耗用时间 7. 5 h。但经方差分析可知 , A、B两个因素是不
显著的 , C是极显著(F =15. 91>F0. 01)的 ,从缩短生产周期 、降低生产成本等方面考虑 ,尝试其他的
组合 ,考虑煎煮和浓缩的消耗最少化与提取物得率最大化之间的平衡。由于 A、B两个因素是不显著
的 ,尝试 A1B2C3 ,得率 12. 1%,耗时 4. 5 h, A2B3C 3得率 12. 8%,耗时 3. 75 h,均不理想 。由于 C是极
度显著的 ,因此尝试一个本正交设计所没有的组合 ,即 10倍水 - 0. 5 h - 4次 ,得率 13. 5%,耗时 4 h,与
A3B1C 3的得率相差只有 8%,却节约了 3. 5 h。因此确定煎煮法的最佳条件为加水量为药材量的 10
倍 ,提取 0. 5 h,提取 4次。
为了减少热对提取物的破坏和损失 ,采用 80℃将浓缩至膏状的提取物干燥至恒重 ,其除水率为
105℃的 98%。
2. 2热浸渍法提取溪黄草
表 4 不同浸渍时间和乙醇浓度下的提取得率
        1 d               3 d               5 d       
乙醇浓度
/%
提取得率
/%
乙醇浓度
/%
提取得率
/%
乙醇浓度
/%
提取得率
/%
0 8. 0 0 8. 6 0 10. 2
20 7. 4 20 9. 0 20 9. 4
40 7. 0 40 8. 6 40 8. 6
60 5. 8 60 7. 8 60 8. 0
80 3. 4 80 5. 4 80 5. 7
100 1. 3 100 2. 6 100 3. 0
—56—
表 3 煎煮法正交实验结果
实验号 A
1
B
2
C
3
提取物得率
/%
1 1 1 1 8. 6
2 1 2 2 11. 2
3 1 3 3 11. 5
4 2 1 2 12. 9
5 2 2 3 13. 3
6 2 3 1 7. 9
7 3 1 3 14. 8
8 3 2 1 8. 3
9 3 3 2 11. 5
Ⅰ 31. 3 36. 3 24. 8
Ⅱ 34. 1 32. 8 35. 6
Ⅲ 34. 6 30. 9 39. 6
T=Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ
=100
K1 10. 4 12. 1 8. 3
K2 11. 4 10. 9 11. 7
K3 11. 5 10. 3 13. 2
R 1. 1 1. 7 4. 9
表 5 热浸渍法正交实验结果
实验号 A
1
B
2
C
3
提取物得率
/%
1 1 1 1 5. 0
2 1 2 2 7. 6
3 1 3 3 8. 6
4 2 1 2 10. 4
5 2 2 3 11. 6
6 2 3 1 6. 8
7 3 1 3 11. 2
8 3 2 1 7. 8
9 3 3 2 10. 0
Ⅰ 21. 2 26. 6 19. 6
Ⅱ 28. 8 27. 0 28. 0
Ⅲ 29. 0 25. 4 31. 4
T=Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ
=79
K1 7. 1 8. 9 6. 5
K2 9. 6 9. 0 9. 3
K3 9. 7 8. 5 10. 5
R 2. 6 0. 5 4
  从表 4实验结果可知 ,提取得率随着乙醇浓度的增加而下降 ,高浓度乙醇得率很低 ,说明水溶性
物质比醇溶性物质多 ,比较不同浸渍时间的得率和能耗等 ,从经济和方便出发 ,确定 3 d为热浸渍的
最佳时间。
如表 5所示 , R 显示各因素对得率的影响顺序为 C >B >A。直观分析表明 ,最佳提取条件为
A3B2C3 ,经实验后其提取物得率为 12. 1%。但经方差分析可知 , A、B两个因素不显著 ,C是显著(F =5. 30>
F0. 05)的 ,且 B的影响几乎可以忽略(F =0. 04)。根据药物炮制学[ 13]经验 ,确定乙醇浓度为 50%;而由
于浓缩过程的能耗相对于提取能耗的影响很小 ,因此 20倍加液量可行 。因此确认 A3 B2C3为热浸渍
的最佳提取条件 。
2. 3提取物的感官比较
  1 -水提取物复溶物;
2 - 50%的乙醇提取物复溶物;
3 - 100%的乙醇提取物复溶物;
4 - 50%的乙醇提取物的纯乙醇溶解物;
5 -水提取物的纯乙醇溶解物
图 1 提取物的薄层色谱图
水煎煮法提取物 15 g、50%乙醇热浸渍法提取物 15 g、
原药材 150 g,分别加入 250 g的猪骨头和 2 000mL的水 ,同
时炖 2 h。然后在同等条件下进行多人次 、多次数的感官检
验 。结果表明 ,用水提取物炖制的骨头汤与原药炖制的相
比较 ,无论是色泽 、气味 、味道都非常的接近 ,效果令人满
意 。而用水 —乙醇的提取物炖制的骨头汤有与原药有较明
显差异 ,主要是气味多了一种腥味 ,味道中多了一种特殊的
苦味 ,此外 ,汤液与原药材煎煮的相比 ,颜色偏黄。可以认
为水煎煮法和乙醇浸渍法提取物成分有差异。
2. 4薄层色谱的结果
从层析的结果(图 1)可以看出 ,由于水提取物基本为极
性物质 ,含有多糖与多肽 ,这些可以被高浓度的乙醇沉淀 ,
在展开剂中扩散很慢 ,层析分离效果差 ,但通过醇沉后的醇
浓缩液可以展开;乙醇水溶液提取的物质最复杂 ,其混合溶
液直接点样可以有较清晰的斑点 ,其醇沉后的乙醇浓缩液
—57—
体可以看出既有水溶液醇沉的斑点 ,又有纯乙醇提取物的特征性斑点;纯乙醇提取物的点样在本展开
系统中效果最为明显 ,其浓缩液的在层析板上有 7 ~ 10个斑点 ,但是有三个不明显 ,而且褪色快 ,对热
不稳定 ,无法重复显色 。
从色谱结果看 ,水和醇的提取物成分有很大差别 ,乙醇能溶出多种水不能溶的物质 ,但水溶液中
的强极性物质成分种类不能在本实验分离鉴别 。
3 结论
实验证明水煎煮法和乙醇热浸渍法提取溪黄草的得率 、成分和口味均有明显不同 。但作为保健
性的溪黄草药膳汤来说 ,其最重要的指标就是感官指标 ,即提取物制得的汤料做成的汤品的色 、香 、味
都必须与原药的相同 ,同时考虑到传统的制汤方式 ,确定煎煮法为提取溪黄草的方法 ,其最优的提取条
件为:加水量 10倍 ,煎煮时间 0. 5 h,提取次数 4次 ,此时得率为 13. 5%。
[参考文献 ]
[ 1]赖万年 ,许良政.客家民间药膳中草药资源调查和开发利用 [ J] .嘉应学院学报:自然科学 , 2004, 22(6):52 - 54.
[ 2]崔福德.药剂学 [M ] .北京:人民工业出版社 , 2003.
[ 3]马振山 ,李先端 ,王琳王 ,等.复方川芎颗粒提取浓缩干燥方法的研究 [ J] .中国实验方剂学杂志 , 2003, 7(23):2 - 3.
Study ofD ifferentM ethods for Extraction ofHakka
D ietH erbalM edicineRabdosia serra (M axmi . )Hara
LIU Zhi -we i,WANG Hong - hui, ZHANG Chen
(B iology departmen t of J iaying University, M eizhou 514015, China)
[ Key words] decoc tion;alcoho l soak method;ex traction;Hakka diet herba l medicine;Rabdosia serra
(Max im. )H ara
[ Abstrac t] The condition of ex traction of H akka die t he rb Rabdosia serra(M ax im. )Hara w ith decoction
and alcoho l soak method w as studied. The component in the ex tract w as a lso de tected by sense evalua tion
and TLC. The resu lts show ed that the ex traction e fficiency, component and taste in the extrac t are different
betw een the tw o methods. The expe riment indicated tha t decoction was the prope rme thod fo r extracting
Rabdosia serra(Maxim. )Hara to prepare soup material, and the op timal condition of decoc tion w as as fo l-
low s:the w eight ofw a te rw as 10 times ofRabdosia serra(M axim. )Hara, the time o f ex traction w as 0. 5h ,
and the number o f ex traction w as 4.
—58—