全 文 ：HPLC测定不同产地猴耳环中没食子酸和槲皮苷的含量
赵径华，黄海波* ，陈明权
(广州中医药大学中药学院，广东 广州 510006)
摘要 目的:建立以高效液相色谱法同时测定不同产地的猴耳环药材中没食子酸和槲皮苷含量的方法。方
法:色谱柱 Thermo Hypersil C18(250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ，流动相为甲醇-0. 4%磷酸-乙腈(30∶ 65∶ 5) ，流速为 1. 0
mL /min;柱温为室温;检测波长 270 nm。结果:没食子酸和槲皮苷的进样量分别在 0. 1505 ～ 2. 2575 μg(r =
0. 9992)、0. 0560 ～ 0. 8400 μg(r = 0. 9994)范围内与各自峰面积呈良好线性关系;二者平均加样回收率分别为
102. 48%、103. 19%，RSD分别为 1. 87%、2. 22%。结论:本方法简便、可靠，能用于猴耳环药材的质量控制。
关键词 猴耳环;没食子酸;槲皮苷;产地
中图分类号:R282. 6 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2012)12-1920-02
收稿日期:2012-05-15
基金项目:基于多学科的南药开发利用关键技术集成示范研究(2012BAI29B09)
作者简介:赵径华(1987-) ，男，硕士研究生，主要从事生药品种与质量研究;Tel:15913144488，E-mail:ivanzhao159@ 139. com。
* 通讯作者:黄海波，E-mail:bobhwang65@ gmail. com。
猴耳环为豆科猴耳环属植物猴耳环 Archiden-
dron clypearia(Jack)Nielsen 的干燥叶，分布于浙江、
福建、广东、广西、四川、云南等省区〔1〕。猴耳环主
要含没食子酸、槲皮苷和连苯三酚〔2〕，其中没食子
酸是猴耳环中消炎、止咳的主要有效成分〔3〕，槲皮
苷具有抗菌、抗病毒之功效，对胃肠道有消炎、镇痛
的作用，同时还有抗癌、抗心血管疾病的作用。猴耳
环消炎片、猴耳环消炎胶囊可用于治疗上呼吸道感
染、急性胃肠炎、急性咽喉炎、急性扁桃体炎，亦可试
用于细菌性痢疾，可以说明没食子酸和槲皮苷与猴
耳环制剂药理作用相同，是其中的有效成分。不同
产地的猴耳环中没食子酸和槲皮苷含量的是否存在
差异尚未见报道，为了进一步研究猴耳环的质量，本
实验建立了猴耳环中没食子酸和槲皮苷的 HPLC 含
量测定方法，为猴耳环的质量控制提供了方法和依
据。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 Waters 515 高效液相仪，Waters 2487
双波长检测器，Waters N3000 色谱工作站，色谱柱
Thermo Hypersil C18 (250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ;
BP211D Sartoriu 电子分析天平;SG8200HE 超声波
清洗仪(上海冠特超声仪器有限公司) ;DXF-10A 粉
碎机(广州市大祥电子机械设备有限公司)。
1. 2 试药 实验样品为取自 7 个产地的野生品，
分别采自广东省从化、信宜、新兴、惠东、罗定，海南
省霸王岭、尖峰岭，见表 1。经广州中医药大学中药
鉴定教研室黄海波副教授鉴定，为豆科植物猴耳环
Archidendron clypearia (Jack)Neilsen 的干燥叶。没
食子酸(批号:110831-201202)、槲皮苷(批号:
111538-201202)对照品由中国药品生物制品检定所
提供。甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂
均为分析纯。
2 方法与结果
表 1 猴耳环样品药材的来源
编号 产地 采收日期
1 广东省从化 2011. 07
2 广东省惠东 2011. 07
3 广东省新兴 2011. 08
4 广东省信宜 2011. 08
5 广东省罗定 2011. 08
6 海南省霸王岭 2011. 08
7 海南省尖峰岭 2011. 08
2. 1 对照品溶液制备 精密称取没食子酸对照品
和槲皮苷对照品适量，加甲醇制成混合对照品溶液
(含没食子酸 150. 50 μg /mL，槲皮苷 56. 00 μg /
mL)。
2. 2 供试品溶液制备 分别取 7 份猴耳环粉末
(过 60 目筛)约 0. 5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，
精密加入 50 mL 甲醇，称定重量，超声处理 40 min，
取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇
匀，用 0. 45 μm 微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试
品溶液。
2. 3 色谱条件与系统适应性试验 色谱柱:Ther-
mo Hypersil C18(250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ;流动相:
甲醇-0. 4%磷酸-乙腈(30 ∶ 65 ∶ 5) ;流速:1. 0 mL /
min;柱温:室温;检测波长:270 nm;进样量:10 μL。
理论塔板数按没食子酸计算应不低于 1 500，按槲皮
苷计算应不低于 3 000。结果表明，在上述色谱条件
下，没食子酸和槲皮苷对照品溶液的色谱峰分离度
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DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2012.12.017
良好，R ＞ 1. 5。
2. 4 线性关系考察 精密吸取对照品溶液 1、2、5、
10、15 μL 注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测
定，以测得峰面积为纵坐标 Y 轴，对照品进样量为
横坐标 X 轴，绘制标准曲线，得回归方程:没食子
酸:Y = 3255312X + 143752，r = 0. 9992，表明没食子
酸对照品进样量在 0. 1505 ～ 2. 2575 μg 之间有良好
的线性关系;槲皮苷:Y = 1842104X + 23096，r =
0. 9994，表明槲皮苷对照品进样量在 0. 0560 ～
0. 8400 μg之间有良好的线性关系。
2. 5 精密度试验 取编号 1 供试品溶液，按照
“2. 3”项下条件重复测定 6 次，没食子酸的平均峰
面积 3572072，RSD为 1. 36%;槲皮苷的平均峰面积
1523841，RSD为 1. 18%。表明仪器精密度良好。
2. 6 稳定性试验 取编号 1 供试品溶液，按照
“2. 3”项下条件，分别于 0、2、4、6、12 h内测定，记录
峰面积，结果没食子酸的平均峰面积 3659791，RSD
为 0. 91%，槲皮苷的平均峰面积 1467861，RSD 为
1. 61%，表明供试品溶液在 12 h内稳定。
2. 7 重复性试验 取编号 1 药材粉末，制备 6 份
供试品溶液进行试验，按照“2. 3”项下条件测定，结
果没食子酸平均含量为 10. 460 mg /g，RSD 为
0. 69%;槲皮苷平均含量 7. 730 mg /g，RSD 为
1. 64%，表明本方法重复性良好。
2. 8 加样回收率试验 取已知含量编号 1 的药材
粉末 0. 5 g，共 6 份，精密称定。分别精密加入一定
量的齐墩果酸对照品和熊果酸对照品，按上述样品
制备方法制备样品和色谱条件测定其含量，计算回
收率，没食子酸平均回收率为 102. 48%，RSD 为
1. 87%;槲皮苷平均回收率为 103. 19%，RSD 为
2. 22%。
表 2 样品含量测定结果(n =2)
编号 产地 没食子酸 /% 槲皮苷 /%
1 广东省从化 1. 05 0. 77
2 广东省惠东 0. 79 0. 88
3 广东省新兴 0. 87 0. 57
4 广东省信宜 0. 52 0. 18
5 广东省罗定 0. 62 0. 33
6 海南省霸王岭 1. 22 0. 94
7 海南省尖峰岭 1. 25 1. 12
2. 9 样品含量测定 照上述方法，每个产地药材
制备供试品溶液 2 份，分别吸取供试品溶液各 10
μL，依法测定。结果见表 2。
3 讨论
3. 1 由表 2 可知，不同产地猴耳环含量差异较大，
猴耳环没食子酸含量由高到低是:尖峰岭 ＞霸王岭
＞从化 ＞新兴 ＞惠东 ＞罗定 ＞信宜，槲皮苷含量由
高到低:尖峰岭 ＞霸王岭 ＞惠东 ＞从化 ＞新兴 ＞罗
定 ＞信宜。海南省的 2 个产地含量均较高，初步分
析，这与海南省独特的地理位置、气候条件等原因有
关，具体原因有待进一步的探究。
3. 2 笔者曾用甲醇-0. 4% 磷酸(50 ∶ 50)、甲醇-
0. 4%磷酸-乙腈(40 ∶ 60 ∶ 2)为流动相，检测波长为
270 nm和 350 nm，同时测定猴耳环中没食子酸含量
和槲皮苷含量，但由于没食子酸分离度均不能达到
R ＞ 1. 5，槲皮苷出峰时间大于 40 min，且在 350 nm
处下槲皮苷峰面积较小。因此，经过笔者摸索，确定
在甲醇-0. 4%磷酸-乙腈(30∶ 65∶ 5) ，270 nm 波长下
条件最优，能同时测定两者含量。
3. 3 2010 年版中国药典及《广东省中药材标准》
均暂未有关于猴耳环中指标性成分的相关记载及含
量测定方法，根据前人研究〔4-6〕，没食子酸和槲皮苷
是猴耳环制剂中的主要有效成分，故选择这 2 个成
分作为定量指标有较强的说服力，可为猴耳环的质
量控制提供参考。
参 考 文 献
［1］广东省食品药品监督管理局 . 广东省中药材标准(第
一册) ［S］. 广州:广东科学技术出版社，2004:197-199.
［2］ 王永刚，淡墨，李咏华，等 . 猴耳环化学成分的研究
［J］.中药材，2005，28(9) :774-775.
［3］柯铭清 . 中草药有效成分理化与药理特性［M］. 长沙:
湖南科学技术出版社，1982:105-233.
［4］刘永刚 . 猴耳环质量标准研究［J］. 中国药师，2008，11
(1) :29-31.
［5］聂少平，王远兴，谢明勇，等 . 高效液相色谱法测定猴耳
环消炎胶囊中没食子酸的含量［J］. 实用中西结合临
床，2003，4(3) :3-4.
［6］李雪玲，刘莉，钟棱，等 . HPLC 测定猴耳环不同部位中
没食子酸和槲皮素的含量［J］. 中国实验方剂学杂志，
2010，12(16) :95-97.
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