全 文 ：基金项目:浙江丽水市重点课题(编号:201004);丽水市科技局项目(编号:2012CXTD09-05);丽水市重点科技创新团队项目(编号:
2012CXTD09)
通讯作者:李水福 Tel:(0578)2155989 E-mail:
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lsf6789@ 126． com
2 Li H，Wang S，Xie Y，et al． Simultaneous determination of danshen-
su，salvianolic acid B，and paeonol in ShuangDan oral liquid by
HPLC［J］． JAOAC Int，2013，96(1):20-23
3 Li H，Wang SW，Zhang BL，et al． Simultaneous quantitative determi-
nation of 9 active components in traditional Chinese medicinal prepa-
ration ShuangDan oral liquid by ＲP-HPLC coupled with photodiode
array detection［J］． Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analy-
sis，2011，56:820-824
4 王彦英，王红． 丹参舒心胶囊薄层鉴别方法研究［J］． 齐鲁药事，
2009，28(11):661-662
5 王智森，韩桂茹，高飞，等． 归丹沙棘胶囊的快速薄层鉴别与二苯
乙烯苷和丹酚酸 B 同时测定［J］． 中国现代应用药学，2013，30
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6 黄文远． HPLC法测定桂枝茯苓软胶囊中丹皮酚的含量［J］． 中
国药师，2010，13(11):1608-1609
7 冯华琴． HPLC法测定女宝胶囊中丹皮酚的含量［J］． 中国药师，
2009，12(6):831-832
(2014-01-21 收稿 2014-03-19 修回)
HPLC法同时测定畲药檵木叶中没食子酸和槲皮素
余乐 刘敏 李水福 (丽水市食品药品检验所 浙江丽水 323000)
摘 要 目的:建立畲药檵木叶中没食子酸和槲皮素的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法测定，色谱柱为 Agilent-
SBC18(250 mm ×4． 6 mm，5 μm);流动相为甲醇-0． 4%磷酸溶液，梯度洗脱;流速1． 0 ml·min
－1，柱温 30℃;检测波长 254 nm。
结果:没食子酸和槲皮素的线性范围分别为0． 094 ～ 0． 282 μg(r = 0． 999 9)，0． 015 ～ 0． 136 μg(r = 1． 000 0);平均加样回收率
分别为98． 97%(ＲSD = 1． 74%)，99． 05%(ＲSD = 1． 84%)。结论:该方法简便易行、准确、重复性好，可用于畲药檵木叶的质量
控制。
关键词 檵木叶;没食子酸;槲皮素;高效液相色谱法
中图分类号:Ｒ927． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2014)07-1239-03
Simultaneous Determination of Gallic Acid and Quercetin in Traditional She Medicine Folium Loropetali by
HPLC
Yu Le，Liu Min，Liu Shuifu (Lishui Institute for Food and Drug Control，Zhejiang Lishui 323000，China)
ABSTＲACT Objective:To establish an HPLC method for the determination of gallic acid and quercetin in traditional She medicine
Folium Loropetali． Methods:HPLC was applied with the chromatographic conditions as follows:the chromatographic column was an
Agilent-SB C18(250 mm ×4． 6 mm，5 μm)at 30℃，methanol-0． 4% phosphoric acid as the mobile phrase with gradient elution，the
flow rate was 1． 0 ml·min －1 and the detection wavelength was 254nm． Ｒesults:The linear range was 0． 094-0． 282 μg(r = 0． 999 9)
and 0． 015-0． 136 μg(r = 1． 000 0)，the average recovery was 98． 97%(ＲSD = 1． 74%)and 99． 05%(ＲSD = 1． 84%)，respectively．
Conclusion:The method is simple，accurate and repeatable，and suitable for the determination of gallic acid and quercetin in tradi-
tional She medicine Folium Loropetali．
KEY WOＲDS Folium Loropetali;Gallic acid;Quercetin;HPLC
檵木叶是常用的畲族药，为金缕梅科檵木属植物檵木
［Loropetalum chinensis (Ｒ． Br．)Oliv．］的干燥叶。分布我国
中部、南部及西南。多生于向阳山坡灌木丛、路边、郊野溪沟
边。具有清热解毒、收敛、止血的功效，用于治疗烧、烫伤，外
伤出血，吐血，崩漏，腹泻。主要用于止血，为特效外敷止血
的药材。现有研究表明，檵木叶含槲皮素和鞣质，尚含没食
子酸和黄酮类。槲皮素能增强毛细血管抵抗力、减少毛细血
管的脆性等作用，没食子酸具有抗菌、抗病毒等作用［1，2］。
为了开发檵木叶这一民间药用资源，有效控制檵木叶的质
量，本文建立高效液相色谱法同时测定檵木叶中有效成分没
食子酸和槲皮素的含量。
1 仪器与试药
Agilent 1200 高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);电子
天平(XS104，上海恒刚衡器天平有限公司)。檵木叶(2013
年 7 月分别采自丽水龙泉市市区、龙泉市住龙镇、龙泉市锦
旗镇、龙泉市安仁镇、龙泉市八都镇、龙泉市上垟镇，共 6 个
区、镇，经我所李水福主任中药师鉴定为金缕梅科檵木属植
物檵木［Loropetalum chinensis(Ｒ． Br．)Oliv．］的叶);没食子
酸对照品(批号:110831-201204，含量为89． 9%)、槲皮素对
照品(批号:100081-200907，含量为96． 5%)，两者均购自中
国食品药品检定研究院。甲醇为色谱纯，磷酸为色谱纯，水
为哇哈哈纯净水。
2 方法与结果［3 ～ 6］
2． 1 色谱条件
色谱柱为 Agilent-SBC18(250 mm ×4． 6 mm，5 μm)，流动
相为甲醇(A)-0． 4%磷酸溶液(B)，梯度洗脱，0 ～ 7 min，5%
A;7 ～ 9 min，5% ～35%A;9 ～ 11 min，35% ～55%A;流速为
1． 0 ml·min －1，柱温 30℃，检测波长为 254 nm。
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中国药师 2014 年第 17 卷第 7 期 China Pharmacist 2014，Vol． 17 No． 7
2． 2 对照品溶液的制备
精密称取没食子酸和槲皮素对照品适量，加 80%甲醇
制成每 1 ml含没食子酸234． 8 μg、槲皮素151． 1 μg的溶液，
即得。
2． 3 供试品溶液的制备
精密称取经粉碎，过 3 号筛的檵木叶(2013 年 7 月采自
浙江省龙泉市区)粉末4． 0 g(同时另取本品测定水分)置锥
形瓶中，精密加入 50 ml甲醇-15%盐酸(4∶ 1)，密塞，称定重
量，加热回流提取 3 小时，放冷至室温，再称定重量，用提取
溶剂补足减失的重量，摇匀，过滤，精密量取 5 ml 滤液置 20
ml量瓶中，用提取溶剂稀释至刻度，摇匀，用0． 45 μm的微孔
滤膜过滤，滤液即为供试品溶液。
2． 4 系统适应性试验
分别精密吸取“2． 2”、“2． 3”项下溶液，按“2． 1”项下色
谱条件进样，记录色谱图，见图 1。
A．对照品 B．供试品 1．没食子酸 2．槲皮素
图 1 HPLC色谱图
由图 1 可见，在该色谱条件下，没食子酸、槲皮素与其
他成分可达到基线分离，分离度均大于1． 5。对照品色谱峰
与供试品色谱峰中相对应色谱峰的紫外光谱吸收均一致。
结果表明在上述色谱条件下没食子酸和槲皮素具有良好的
分离效果。
2． 5 线性关系考察
取没食子酸和槲皮素对照品适量，精密称定，分别置一
50 ml量瓶中，加 80%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成含
没食子酸234． 8 μg·ml －1、槲皮素151． 1 μg·ml －1的对照品
溶液。分别精密吸取两对照品溶液适量于同一 25 ml 量瓶
中，制成没食子酸浓度为18． 786，28． 178，37． 571，46． 964，
56． 357 μg· ml －1，槲皮素浓度为 3． 022，9． 067，15． 110，
21． 157，27． 201 μg·ml －1的对照品溶液，准确吸取 5 μl，按上
述确定的色谱条件进行测定，分别以对照品的含量(X，μg)
为横坐标，峰面积积分值(Y)为纵坐标，得没食子酸回归方
程为 Y = 1 724． 7X + 2． 574 5，r = 0． 999 9，槲皮素回归方程为
Y = 4 256． 7X － 2． 054 8，r = 1． 000 0。结果表明:没食子酸和
槲皮素分别在0． 094 ～ 0． 282 μg、0． 015 ～ 0． 136 μg范围内与
峰面积呈良好的线性关系。
2． 6 精密度试验
精密吸取对照品溶液 5 μl，连续进样 5 次，测得其峰面
积，计算没食子酸峰面积的 ＲSD为0． 10%(n = 5)，槲皮素峰
面积的 ＲSD为0． 14%(n = 5)，结果显示精密度良好。
2． 7 稳定性试验
精密吸取“2． 3”项下制备的供试品溶液各 3 μl，分别在
0，4，8，12，24 h依次进样，测得其峰面积，计算没食子酸峰面
积的 ＲSD为1． 22%(n = 5)，槲皮素峰面积的 ＲSD 为1． 33%
(n = 5)，结果表明供试品溶液 24 h内稳定性良好。
2． 8 重复性试验
精密称取同一檵木叶(采自龙泉市区)粉末 3 份，照
“2． 3”项下制备，进样 3 μl测定含量，按干燥品计算，没食子
酸和槲皮素的含量分别为2． 17、0． 82 mg·g －1，ＲSD 分别为
0． 86%、1． 42%。
2． 9 加样回收率试验
取已知含量的檵木叶(采自龙泉市区)6 份，各约2． 0 g，
精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入适量没食子酸、槲
皮素对照品，按“2． 3”项下方法，制备供试品液，进样 3 μl，测
定没食子酸和槲皮素含量，计算回收率。结果没食子酸、槲
皮素的平均加样回收率分别为98． 97% (ＲSD = 1． 74%)，
99． 05%(ＲSD = 1． 84%)。
2． 10 样品测定
取不同采集地的样品粉末(过 3 号筛)约4． 0 g，各 3 份，
精密称定，按“2． 3”项下方法制备供试品溶液，分别测定并
计算含量。结果见表 1。
表 1 檵木叶中没食子酸和槲皮素的测定结果
(mg·g －1，n =3)
组分 地区 测得值
没食子酸 龙泉市市区 2． 17
龙泉市住龙镇 2． 14
龙泉市锦旗镇 2． 21
龙泉市安仁镇 2． 19
龙泉市八都镇 2． 16
龙泉市上垟镇 2． 17
槲皮素 龙泉市市区 0． 82
龙泉市住龙镇 0． 84
龙泉市锦旗镇 0． 80
龙泉市安仁镇 0． 81
龙泉市八都镇 0． 76
龙泉市上垟镇 0． 79
3 讨论
3． 1 对提取溶媒进行了考察，盐酸酸度对提取影响较大，通
过比较发现以甲醇-15%盐酸(4∶ 1)作为提取溶剂能将药材
中的两种成分提取完全;采用酸性流动相，可有效提高柱效，
减少两成分的色谱峰拖尾，而其中以0． 4%磷酸溶液的分离
效果最佳。比较了乙腈-0． 4%磷酸溶液、甲醇-0． 4%磷酸溶
液作为流动相进行梯度洗脱效果的差别，结果发现以甲醇-
0． 4%磷酸溶液效果优于乙腈-0． 4%磷酸溶液，所有方法条
件摸索的结果与刘敏［3］等测定畲药地稔中没食子酸和槲皮
素的条件一致。再次验证了该方法的通用性、准确性、可信
性。
3． 2 同一月份，同一县市不同乡镇，同一干燥方法(晒干)，
檵木叶中两种成分含量变化不大。本法仅测定了檵木叶中
的有效成分没食子酸和槲皮素两个成分，要更全面控制檵木
叶的质量，还有待进一步研究。
0421
www． zgys． org 研究简报
通讯作者:高新富 Tel:(0543)3256750 E-mail:
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bzbyfygxf@ 163． com
参 考 文 献
1 雷后兴，李水福．中国畲族医药学［M］．北京:中国中医药出版社，
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与开发，2011，23:267-269
3 刘敏，李水福，程科军． HPLC法测定畲药地稔药材中没食子酸和
槲皮素［J］．中草药，2012，43(4):721-723
4 李雪晶，高叶，周小江． 檵木叶中槲皮素的含量测定［J］． 湖南中
医药大学学报，2008，28(2):46-50
5 吴震纬，郭腾，胡小玲，等．不同生长期的浙产檵木叶中槲皮素和
山奈酚的含量动态［J］．光谱实验室，2012，29(2):894-898
6 刘英慧，陈晓玲，黄琪，等．高效液相色谱法测定檵木叶中没食子
酸的含量［J］．中南药学，2012，10(1):33-35
(2014-02-13 收稿 2014-04-04 修回)
高效液相色谱法同时测定白斑乳膏中 4 种组分的含量
高新富 边瑞民 张循格 王滨 刘明华 (滨州医学院附属医院药学部 山东滨州 256603)
摘 要 目的:建立同时测定白斑乳膏中氟尿嘧啶、氢化可的松、黄芩苷、维生素 E含量的高效液相色谱法。方法:采用 Ai-
chrom Bond-AQ C18色谱柱(250 mm ×4． 6 mm，5 μm)，流动相为甲醇-［0． 5%醋酸(含 6 mmol·L
－1庚烷磺酸钠)］(70∶ 30)，检
测波长为 267 nm，流速为1． 0 ml·min －1，柱温为室温。结果:氟尿嘧啶、氢化可的松、黄芩苷、维生素 E 分别在1． 61 ～ 14． 49，
8． 032 ～ 40． 16，21． 92 ～ 284． 48，48． 13 ～ 433． 17 mg·L －1浓度范围内线性关系良好(r≥0． 999 9)，平均加样回收率分别为
99． 91%(ＲSD = 0． 96%)、99． 79%(ＲSD = 0． 70%)、100． 10%(ＲSD = 0． 44%)、99． 50%(ＲSD = 0． 74%)。结论:该方法准确可
靠，重复性好，可用于白斑乳膏 4 组分的含量测定。
关键词 黄芩苷;氢化可的松;氟尿嘧啶;维生素 E;高效液相色谱法;含量测定
中图分类号:Ｒ927． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2014)07-1241-03
Simultaneous Determination of Four Components in Leukoplakia Creams by HPLC
Gao Xinfu，Bian Ｒuimin，Zhang Xunge，Wang Bin，Liu Minghua(Department of Pharmacy，Affiliated Hospital of Binzhou Medical
College，Shandong Binzhou 256603，China)
ABSTＲACT Objective:To develop an HPLC method for the simultaneous determination of fluorouracil，hydrocortisone，baicalin
and vitamin E in leukoplakia creams． Methods:The HPLC system consisted of an Aichrom Bond-AQ C18(250 mm ×4． 6 mm，5 μm)
column，methanol-0． 5% phosphoric acid solution (containing 6． 0 mmol·L －1 sodium heptanesulfonate)(70 ∶ 30)as the mobile
phase，the UV detection wavelength at 267nm，the flow rate of 1． 0 ml·min －1 and the column temperature of room degree． Ｒesults:
The linear range of fluorouracil ，hydrocortisone，baicalin and vitamin E was 1． 61-14． 49，8． 032-40． 16，21． 92-84． 48 and 48． 13-
433． 17 mg·L －1(r≥0． 999 9)，respectively． The average recovery of the four compounds was 99． 91%(ＲSD = 0． 96%)，99． 79%
(ＲSD = 0． 70%)，100． 10%(ＲSD = 0． 44%)and 99． 50%(ＲSD = 0． 74%)，respectively． Conclusion:The method is accurate，re-
liable and reproducible，and can be used in the determination of the four components in leukoplakia creams．
KEY WOＲDS Baicalin;Hydrocortisone;Fluorouracil;Vitamin E;HPLC;Determination
外阴营养不良是妇科难治性疾病。目前对于此病发病
机制有多种观点，但均未获得证实和普遍认可［1］。治疗多采
用激素疗法、物理疗法、中药及针灸疗法等［2］。复方氟尿嘧
啶乳膏治疗外阴营养不良疗效确切［3］，白斑乳膏是在复方氟
尿嘧啶乳膏处方的基础上加入黄芩苷及亚硫酸氢钠开发的
新制剂(在研)。为建立白斑乳膏的质量标准，本试验建立
了 HPLC法同时测定处方中氟尿嘧啶、氢化可的松、黄芩苷、
维生素 E含量的方法，现报道如下。
1 仪器与试药
1． 1 仪器
PC2000 高效液相色谱仪(美国科学系统公司);Model-
500可变波长紫外 /可见光检测器(美国科学系统公司);色
谱工作站(美国科学系统公司);762 紫外分光光度计(上海
分析仪器厂);超声清洗器(上海致金仪器设备有限公司);
FA2204B电子天平(上海精密科学仪器制造有限公司)。
1． 2 试药
氢化可的松对照品(中国食品药品检定研究院，批号:
100152-200206);氟尿嘧啶对照品(含量:99． 87%，批号:
100221，齐鲁药厂提供);黄芩苷对照品(中国食品药品检定
研究院，批号:110715-200514);维生素 E 对照品(中国食品
药品检定研究院，批号:100062-200608);庚烷磺酸钠(天津
傲然精细化工研究所，批号:20080213);其余试剂为药用，甲
醇为色谱纯，水为超纯水。白斑乳膏(医院自制，批号:
20110314，20110316，20110318)。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件
色谱柱:Aichrom Bond-AQ C18 (250 mm × 4． 6 mm，5
μm);流动相:甲醇-［0． 5%醋酸(含 6 mmol·L －1庚烷磺酸
1421
中国药师 2014 年第 17 卷第 7 期 China Pharmacist 2014，Vol． 17 No． 7