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(2007-06-15收稿)
岗松水提物药理作用的实验研究
李燕婧 ,陈学芬 ,钟正贤 ,刘布鸣 ,卢文杰
(广西中医药研究所 ,广西南宁 530022)
　　摘要　目的:观察岗松枝叶和根茎水提物的药理作用。方法:采用巴豆油致小鼠耳廓肿胀法 、毛细血管通透性
实验 、试管二倍稀释法 、小鼠醋酸扭体法 、迟发型超敏反应实验 、小鼠炭末廓清法 、四氯化碳及异硫氰酸萘酯致小鼠
肝损伤模型等实验方法 , 并对其进行急性毒性实验。结果:岗松枝叶和根茎水提取物均能抑制巴豆油引起小鼠耳
廓肿胀和小鼠腹腔毛细血管通透性的增加 ,对乙型副伤寒沙门氏菌 、福氏志贺氏菌 、金黄色葡萄球菌等有明显抑菌
作用 , 减少醋酸致小鼠扭体次数 , 对 2, 4-二硝基氯苯致小鼠超敏反应有抑制作用 , 可促进单核巨噬细胞的吞噬功
能 , 明显降低肝损伤小鼠血清 ALT、AST活性 ,并且提高 TP、ALB值 , 能降低黄疸小鼠血清的 T-BIL含量和 ALT活
性。岗松枝叶水提物的最大给药量为 340.79 g生药 /kg体重;根茎水提物的最大给药量为 752.35 g生药 /kg体重。
结论:岗松枝叶和根茎水提取物具有抗炎 、抑菌 、镇痛 、抗过敏 、免疫增强 、保肝退黄等药理作用 , 岗松水提取物的毒
性很小。
关键词　岗松水提物;药理实验;急性毒性实验
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2007)11-1429-04
基金项目:广西自然科学基金资助项目(桂科自 0542021)
　　岗松(BaeckeafrutescensL.)为桃金娘科岗松属
草本植物 ,在我国广西 、广东 、江西 、福建等地均有野
生 ,全草入药 。岗松枝叶味苦 、辛 ,性凉 ,具有化瘀止
痛 、清热解毒 、利尿通淋 、杀虫止痒之功效 ,用于跌打
瘀肿 、肝硬化 、热泻 、热淋 、小便不利 、阴痒 、脚气 、皮
肤搔痒 、疥癣 、水火烫伤 、虫蛇咬伤等 〔1〕 ,民间常用 。
近年来对岗松的研究多集中在岗松挥发油的化学成
分分离鉴定〔2、3〕和质量分析〔4〕等方面 ,除曾有文献
报道岗松根有抗生育作用 〔5〕之外 ,对岗松的其他药
理研究极少 。因此 ,本文对岗松枝叶和根茎水提物
进行了药理作用研究 ,探讨其在抗炎镇痛保肝和免
疫增强方面的药理作用 ,为将来开发应用岗松提供
实验依据。现将实验结果报告如下。
1 　实验材料
1.1　药物　岗松枝叶水提物(6.39 g生药 /g膏)、
岗松根茎水提物(6.27g生药 /g膏),由广西中医药
研究所化学室提供;阿司匹林为武汉远大制药集团
股份有限公司产品 ,批号:041209;联苯双酯为北京
协和药厂产品 ,批号:05030205;地塞米松为天津药
业集团有限公司产品 ,批号:011030。
1.2　试剂　ALT、AST、TP、ALB、T-BIL试剂盒均为
长春汇力生物技术有限公司产品 , 批号分别是:
2005042、2005031、 2005032、2005041、2005032;2, 4-
二硝基氯苯由军事医学科学院药材供应站提供 ,批
号:991223;伊文思兰为上海化学试剂采购供应站分
装厂产品 ,批号:910516;印度墨汁为北京西中化工
厂产品 ,批号:010326;异硫氰酸萘酯 , Sigma公司产
品。
1429中 药 材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 11期 2007年 11月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2007.11.029
1.3 　动物 　昆明种小鼠 , 18 ～ 22 g,雌雄兼用 ,清
洁级动物 ,由广西医科大学实验动物中心提供 ,许可
证号:SCXK桂 2003-0003。
1.4 　菌种　大肠埃希杆菌 、乙型副伤寒沙门氏菌 、
福氏志贺氏菌 、铜绿假单胞菌 、金黄色葡萄球菌 、肺
炎克雷伯氏杆菌 ,均为国家标准菌株 ,由广西药物检
验所提供。
1.5 　仪器 　722型光栅分光光度计 ,上海分析仪
器三厂产品 。
2 　方法
2.1 　抗炎实验 〔6〕　取昆明种小鼠 60只 ,雌雄各
半 ,随机分为空白对照组 ,阿司匹林(0.2 g/kg)组 ,
岗松枝叶水提物大 、小剂量 (34.08 g生药 /kg和
17.04 g生药 /kg)组 ,岗松根茎水提物大 、小剂量
(75.24 g生药 /kg和 37.62g生药 /kg)组 ,每天灌胃
给药 1次 ,空白对照组给予等体积蒸馏水 ,连续 7d。
于末次给药后 1 h,用微量注射器取 0.05 ml2%巴
豆油涂于小鼠右耳 ,待 4 h后通过拉颈椎处死小鼠 。
立即用口径为 6 mm的打孔器 ,沿小鼠左右耳廓相
同部位打孔取材 , 然后分别称重 , 以两耳片重量
(mg)的差值作为肿胀程度指标 ,求出每只小鼠的平
均值 ,采用 T检验统计学处理 ,并求出百分抑制率
(%)。结果见表 1。结果表明 ,岗松枝叶和根茎水
提物大剂量和小剂量组均能显著抑制巴豆油引起的
小鼠耳廓肿长 ,提示岗松水提物具有较强的抗炎作
用 。
　表 1　　　　岗松水提物对巴豆油引起小鼠耳
廓肿胀的影响( x±SD, n=10)
组别 剂量(g/kg) 两耳重量差(mg) 抑制率(%)
空白对照组 - 23.40±3.89 -
阿司匹林组 0.20 12.60±7.00＊＊ 46.15
枝叶水提物大剂量组 34.08 10.00±7.41＊＊ 57.26
枝叶水提物小剂量组 17.04 13.30±6.43＊＊ 43.16
根茎水提物大剂量组 75.24 14.10±4.42＊＊ 39.74
根茎水提物小剂量组 37.62 19.70±1.89＊ 15.81
　　注:与对照组比较:＊＊P<0.01, ＊P<0.05;与模型组比较:■P
<0.05, ■■P<0.01。下表皆同
2.2 　对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 〔7〕　取昆
明种小鼠 60只 ,雌雄各半 ,随机分为空白对照组 ,地
塞米松(0.0045 g/kg)组 ,岗松枝叶水提物大 、小剂
量(34.08g生药 /kg和 17.04g生药 /kg)组 ,岗松根
茎水提物大 、小剂量(75.24 g生药 /kg和 37.62g生
药 /kg)组 ,每天灌胃给药 1次 ,空白对照组给予等体
积蒸馏水 ,连续 7 d。于末次给药 1 h后 ,尾静脉注
射 1%伊文思蓝 0.1 ml/只 ,并同时腹腔注射 0.6%
醋酸 0.2 ml/只 , 20min后 ,拉颈椎处死小鼠 ,剪开腹
腔 ,用 5ml蒸馏水冲洗腹腔数次 ,用吸管吸取腹腔
洗出液约 5 ～ 6 ml,离心 5 min,在 722分光光度计
590 nm处测定吸收值(OD)。结果见表 2。结果表
明 ,岗松枝叶水提物小剂量组和根茎水提取物大剂
量组能抑制小鼠腹腔毛细血管通透性的增加 ,使伊
文思兰渗出量减少 ,提示岗松枝叶和根茎水提物对
中期炎症有较好的抗炎作用 。
　表 2　　　　岗松水提物对小鼠腹腔毛血细管
通透性的影响( x±SD, n=10)
组别 剂量(g/kg) OD值
空白对照组 　- 0.421±0.081
地塞米松组 0.0045 0.323±0.046＊＊
枝叶水提物大剂量组 34.08 0.304±0.131＊
枝叶水提物小剂量组 17.04 0.326±0.092＊
根茎水提物大剂量组 75.24 0.280±0.100＊＊
根茎水提物小剂量组 37.62 0.329±0.109＊
2.3　抗菌实验　将岗松枝叶水提物和根茎水提物
浸膏用蒸馏水制成 1∶5的溶液作为原液 , 116℃高压
灭菌 20 min,备用。采用液体试管二倍稀释法 ,用营
养肉汤培养基将水提物原液作系列稀释 ,使药膏浓
度为 1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1
∶512、1∶1024,第 11管不加药膏作为阳性对照 ,然后
每管分别接种大肠埃希杆菌 、乙型副伤寒沙门氏菌 、
福氏志贺氏菌 、铜绿假单胞菌 、金黄色葡萄球菌 、肺
炎克雷伯氏杆菌 105CFU0.1 ml,第 12管不加药膏
和菌液作为阴性对照。置 35 ～ 37℃培养 24 h,划线
接种于营养琼脂平板培养基上 ,置 35 ～ 37℃培养 24
h,以生长菌落不超过 5个的最高稀释度为该浸膏最
小抑制浓度(MIC)。结果见表 3。结果表明 ,枝叶
和根茎水提物均有一定的抑菌作用 ,其中对乙型副
伤寒沙门氏菌 、福氏志贺氏菌 、金黄色葡萄球菌的抑
菌作用较强。
　表 3 　岗松水提物体外抑菌实验结果
试验菌种 菌号 MIC(mg生物 /ml)枝叶水提物 根茎水提物
大肠埃希杆菌 44102 638.98 626.96
乙型副伤寒沙门氏菌 50094 9.98 156.74
福氏志贺氏菌 51572 19.97 39.18
铜绿假单胞菌 10104 319.49 626.96
金黄色葡萄球菌 26003 39.94 78.73
肺炎克雷伯氏杆菌 46117 638.98 626.96
2.4　镇痛实验 〔6〕　动物分组及给药同 2.1项方
法。于末次给药后 1 h,每只小鼠腹腔注射 0.6%醋
1430 中 药 材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 11期 2007年 11月
酸溶液 0.2 ml/只 ,立即观察并记录 20 min内各小
鼠的扭体次数。结果见表 4。结果表明 ,岗松枝叶
和根茎水提物大 、小剂量组均能明显减少醋酸所致
小鼠扭体次数 ,提示岗松枝叶 、根茎水提物具有明显
的镇痛作用 。
　表 4　　　　岗松水提物对醋酸所致小鼠扭体
反应的影响( x±SD, n=10)
组别 剂量(g/kg) 20min内扭体次数
空白对照组 - 28.30±9.18
阿司匹林组 0.20 7.30±9.40＊＊
枝叶水提物大剂量 34.08 13.10±5.97＊＊
枝叶水提物小剂量 17.04 10.20±10.98＊＊
根茎水提物组 75.24 14.60±7.53＊＊
根茎水提物大剂量 37.62 13.10±5.97＊＊
2.5 　2, 4-二硝基氯苯所致小鼠迟发型超敏反应 〔8〕
　动物分组同 2.2项方法。分组后用 5%的 2, 4-二
硝基氯苯乙醇液涂布于小鼠腹部皮肤(去毛)致敏 。
致 敏前 1d灌胃给药 , 连续 9d, 每天 1次 。致敏后
第 7 d用 1%的 2, 4-二硝基氯苯涂右耳 , 24h后处小
鼠 ,剪取耳片称重 ,以左右两耳片重量差值作为迟发
型超敏反应值 ,并摘取胸腺 、脾脏称重 。结果见表
5。结果表明 ,岗松枝叶水提取物大剂量组和根茎水
提取物大 、小剂量组都对 2 , 4-二硝基氯苯所致小鼠
过敏反应有抑制作用 ,但对免疫器官的重量无明显
影响 ,提示岗松枝叶和根茎水提物都具有免疫增强
抗过敏作用。
2.5　对单核巨嗜细胞吞噬功能的影响 〔7〕　动物分
组及给药同 2.2项方法。于末次给药 30 min后 ,小
鼠尾静脉注射 20%印度墨汁 0.1ml/10g,于注射后
2、7 min时分别从小鼠眼眶静脉丛取血 20μl,溶于
2ml0.1% Na2CO3溶液中 ,摇匀 ,于 722型分光光
度计 650nm处测定吸光度(OD),按公式计算吞噬
指数 K值 ,进行组间比较 。结果见表 6。结果表明 ,
岗松枝叶水提物大 、小剂量组和根茎水提取物大剂
量组均能明显提高吞噬指数 。提示枝叶和根茎水提
取物可促进单核巨噬细胞的吞噬功能 ,具有一定的
免疫增强作用 。
　　表 5 岗松水提物对 2, 4-二硝基氯苯所致小鼠超敏反应的影响( x±SD, n=10)
组别 剂量(g/kg) 两耳重量差(mg) 胸腺重量(mg/10g) 脾脏重量(mg/10g)
空白对照组 　- 17.01±5.62 46.93±10.80 59.16±16.20
地塞米松组 0.0045 4.98±2.20＊＊ 38.76±10.77 49.63±11.02
枝叶水提物大剂量组 34.08 9.31±4.42＊＊ 48.96±13.90 51.68±11.34
枝叶水提物小剂量组 17.04 12.82±5.22 47.48±12.71 52.13±12.07
根茎水提物大剂量组 75.24 11.05±4.75＊ 45.59±8.37 53.01±8.15
根茎水提物小剂量组 37.62 12.30±2.47＊ 49.79±11.53 54.16±11.24
　　表 6 岗松水提物对单核巨噬细胞吞噬功能的影响( x±SD, n=10)
组别 剂量(g/kg)
OD值
2min 7min 吞噬指数 K
空白对照组 　- 0.810±0.07 0.626±0.098 0.023±0.012
地塞米松组 0.0045 0.845±0.103 0.536±0.090 0.040±0.020＊
枝叶水提物大剂量组 34.08 0.741±0.111 0.464±0.090 0.041±0.018＊
枝叶水提物小剂量组 17.04 0.767±0.134 0.494±0.133 0.040±0.021＊
根茎水提物大剂量组 75.24 0.764±0.119 0.491±0.130 0.040±0.021＊
根茎水提物小剂量组 37.62 0.790±0.100 0.520±0.143 0.038±0.022
2.6 　保肝作用 〔9〕　取昆明种小鼠 70只 ,雌雄各
半 ,随机分为空白对照组 ,模型组 ,联苯双酯(0.2 g/
kg)组 ,岗松枝叶水提物大 、小剂量(34.08 g生药 /
kg和 17.04g生药 /kg)组 ,岗松根茎水提物大 、小剂
量(75.24 g生药 /kg和 37.62 g生药 /kg)组 。每天
分别灌胃给药 1次 ,连续 7 d。末次给药 1 h后 ,除
空白对照组外 ,其他各组小鼠腹腔注射 0.1%CCl4
液体花生油溶液 10 ml/kg,同时禁食 、自由饮水 , 20
h后 ,摘除眼球取血 ,分离血清 ,按试剂盒方法测定
小鼠血清 ALT、AST、TP、ALB含量 。结果见表 7。结
果表明 ,岗松枝叶水提物大小剂量组和根茎水提物
大剂量组能明显降低急性肝损伤小鼠血清的 ALT、
AST活性 ,且能提高 TP、ALB含量 ,提示岗松枝叶和
根茎水提物对小鼠急性肝损伤有一定保护作用。
1431中 药 材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 11期 2007年 11月
　　表 7 　岗松水提物对 CCl4致急性肝损伤小鼠的保护作用( x±SD, n=10)
组别 剂量(g/kg) ALT(U/L) AST(U/L) TP(g/L) ALB(g/L)
对照组 - 131.9±19.0 233.0±27.3 94.1±26.5 66.2±14.9
模型组 - 500.0±77.2＊＊ 356.2±24.5＊ 46.10±20.0＊＊ 33.9±8.1＊＊
联苯双酯 0.2 336.5±108.3■ 299.9±35.9■■ 61.8±17.9 41.2±9.9
枝叶水提物 34.08 402.3±71.3■ 322.2±46.5 59.8±15.8 42.7±10.5
17.04 421.4±78.8■ 298.2±61.6■■ 60.6±19.7 35.5±8.8
根茎水提物 75.24 413.7±102.5■ 311.1±38.0■■ 63.7±19.7 37.5±7.0
37.62 447.8±92.9 323.5±75.7 52.3±6.0 40.3±8.1
2.7 　退黄实验 〔10〕 　动物分组及给药同 2.6项方
法 。第 7 d除正常对照组外 , 其余各组灌胃给予
0.6%异硫氰酸萘酯(90 mg/kg),中毒后继续给药 2
d,模型组则给予同体积生理盐水。各组于中毒 48h
后摘眼球取血 , 用试剂盒测定血清 T-BIL、ALT含
量 。结果见表 8。结果表明 ,岗松枝叶和根茎水提
物大 、小剂量组能降低黄疸小鼠模型血清总胆红素
含量和丙氨酸氨基转移酶活性 ,提示岗松水提取物
具有较好的退黄保肝作用 。
　表 8　　　　岗松水提物对黄疸小鼠血清 T-BIL
和 ALT的影响( x±SD, n=10)
组别 剂量(g/kg) T-BIL(g/L) ALT(U/L)
对照组 - 2.17±1.55 42.76±5.76
模型组 - 196.68±50.17＊＊ 194.63±48.90＊＊
联苯双酯 0.2 175.03±26.94 125.68±30.74■
枝叶水提物 34.08 153.37±32.28■ 136.19±18.02■■
17.04 115.44±20.65■■ 146.46±21.17■■
根茎水提物 75.24 143.60±33.11■ 160.50±14.53■
37.62 154.46±32.02■ 176.65±25.39
2.8 　急性毒性实验　取小鼠预试后 ,另选取 18 ～
22 g小鼠 40只 ,分为 2组 ,雌雄各半 。以岗松叶水
提物和根茎水提物的最大给药浓度和最大给药体积
给小鼠灌胃给药 , 24h给药 3次 ,连续观察 7d,记录
小鼠活动行为 ,大小便和饮食情况。结果观察 7 d,
未见动物有行为异常 、死亡等情况 ,体重增长正常 。
计算枝叶水提取物最大给药量为 340.79 g生药 /
kg,体重增长为 40.21%;根茎水提物最大给药量为
752.35 g生药 /kg,体重增长为 40.36%。
3 　讨论
为了探讨和开发岗松水提物药用价值 ,本文采
用多种动物模型及实验方法 ,对其进行了抗菌抗炎
镇痛保肝等药理作用的实验研究 。结果表明 ,岗松
枝叶水提取物 、根茎水提取物均能抑制巴豆油引起
小鼠耳廓肿胀和小鼠腹腔毛细血管通透性的增加;
对乙型副伤寒沙门氏菌 、福氏志贺氏菌 、金黄色葡萄
球菌有明显抑菌作用;减少醋酸致小鼠扭体次数;对
2, 4-二硝基氯苯致小鼠超敏反应有抑制作用;可促
进单核巨噬细胞的吞噬功能 ,并能明显降低急性肝
损伤小鼠血清的 ALT、AST活性 ,提高 TP、ALB含
量;降低黄疸小鼠血清的 T-BIL含量和 ALT活性 ,
具有明显的抗菌消炎保肝和免疫增强作用。岗松在
我区药用资源非常丰富 ,是一个很有开发前景的药
用植物。本文仅对岗松枝叶和根茎的水提物进行了
初步的药理作用研究 ,我们将对其有效部位作进一
步分离提取 ,其药理活性有待作深入研究 ,可望获得
活性更强的有效成分。
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