全 文 ：岗松醇提物药理作用的实验研究＊
李燕婧　陈学芬　钟正贤　刘布鸣　卢文杰
(广西中医药研究院·南宁 530022)
摘　要　目的:观察岗松枝叶和根茎醇提物的药理作用。方法:采用巴豆油致小鼠耳廓肿胀法 、毛细血管
通透性实验 、试管二倍稀释法 、小鼠醋酸扭体法 、2 、4-硝基氯苯致敏法 、小鼠炭末廓清法 、四氯化碳及异
硫氰酸萘酯致小鼠肝损伤模型等方法观察岗松醇提物的药理作用 , 并对其进行急性毒性试验。结果:枝
叶和根茎醇提物能抑制巴豆油引起小鼠耳廓舯胀和小鼠腹腔毛细血管通透性的增加 ,对乙型副伤寒沙门
氏菌 、福氏志贺氏菌 、金黄色葡萄球菌有明显抑菌作用;对2 、4-二硝基氯苯致小鼠超敏反应有抑制作用 ,
可促进单核巨噬细胞的吞噬功能 ,明显降低急性肝损伤小鼠血清 ALT、AST活性 ,降低黄疸小鼠血清 T-
Bil值;枝叶醇提物能减少醋酸致小鼠扭体次数。岗松枝叶醇提物的最大给药量为 103.62g/kg , 根茎醇提
物的最大给药量为 606.06g/kg。结论:岗松枝叶和根茎醇提物具有抗炎 、抑菌 、镇痛 、抗过敏 、增强免疫 、
保肝 、退黄等药理作用 ,岗松醇提物毒性很小。
主题词　炎症 中医药疗法　疼痛 中医药疗法　肝损伤 中医药疗法　岗松醇提物 治疗应用　岗松醇提
物 毒性　小鼠
＊广西自然科学基金资助项目 No.桂科 0542021
　　岗松(baeckea fruiescentsL)为桃金娘科岗松属草本植物 ,
在我国广西 、广东 、江西 、福建等地均有野生 ,全草入药。岗
松枝叶味苦 、辛 , 性凉 ,具有化瘀止痛 、清热解毒 、利尿通淋 、
杀虫止痒之功效 ,用于跌打瘀肿 、肝硬化 、热泻 、热淋 、小便不
利 、阴痒 、脚气 、皮肤瘙痒 、疥癣 、水火烫伤 、虫蛇咬伤等 , 民间
常用。近年来对岗松的研究多集中在岗松挥发油的化学成
分分离鉴定 、质量分析等方面 , 药理作用仅见对岗松根抗生
育作用的报道[ 1] , 对岗松的其他药理作用的报道尚少。因
此 ,本文对岗松枝叶和根茎醇提物的药理作用进行了研究。
1　实验材料
1.1　药物　岗松枝叶醇提物(3.74g 生药/g)、岗松根茎醇提
物(10.10g生药/g):由广西中医药研究院化学室提供。阿司
匹林:武汉远大制药集团股份有限公司产品 , 批号:041209。
联苯双酯:北京协和药厂产品 , 批号:05030205。 地塞米松:
天津药业集团有限公司产品 ,批号:041030。
1.2　试剂　ALT、AST 、TP、ALB 、T-Bil试剂盒:长春汇力生
物技术有限公司产品。2 , 4-二硝基氯苯:军事医学科学院
药材供应站。伊文思蓝:上海化学试剂采购供应站分装厂产
品。印度墨汁:北京西中化工厂产品。异硫氰酸萘酯:Sigma
公司产品。
1.3　动物　KM 种小鼠 , 18～ 22g ,雌雄兼用 , 清洁级 ,由广西
医科大学实验动物中心提供 , 许可证号;SCXK 桂 2003 -
0003。
1.4　菌种　大肠埃希杆菌 、乙型副伤寒沙门氏菌 、福氏志贺
氏菌 、铜绿假单胞菌 、金黄色葡萄球菌 、肺炎克雷白氏杆菌:
均为国家标准菌株 ,由广西药物检验所提供。
1.5　仪器　722 型光栅分光光度计:上海分析仪器三厂产
品。
2　实验方法与结果
2.1　抗炎作用
2.1.1　对小鼠巴豆油致耳廓肿胀的影响[2]
动物分组及给药剂量见表 1。均每天灌胃给药 1 次 , 模
型组给予等体积蒸馏水 , 连续 7 天。于末次给药后 1 小时 ,
用微量注射器取 0.05ml 2%巴豆油涂于小鼠右耳 , 待 4 小时
后通过拉颈椎处死小鼠。立即用口径为 6mm 的打孔器 , 沿
小鼠左右耳廓相同部位打孔取材 , 然后分别称重 , 以两耳片
重量(mg)的差值作为肿胀程度指标 , 计算抑制率。统计学处
理采用 t 检验 ,结果见表 1。
表 1 　各组小鼠巴豆油耳廓肿胀度的比较(x±s , n=10)
组别 剂量(g kg) 两耳重量差(mg) 抑制率(%)
模型组 — 23.40±3.89 —
阿司匹林组 0.20 12.60±6.99＊＊ 46.15
枝叶组(小) 5.18 16.90±3.14＊＊ 27.78
枝叶组(大) 10.36 14.30±3.23＊＊ 38.89
根茎组(小) 30.30 19.40±2.37＊ 17.09
根茎组(大) 60.60 14.10±4.41＊＊ 39.74
　　与模型组比较＊P<0.05 , ＊＊P<0.01(下同)
2.1.2　对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响[ 3] 　动物分组及
给药见表 2。每天灌胃给药 1次 , 模型组给予等体积蒸馏水 ,
连续 7天 。于末次给药 1小时后 , 尾静脉注射 1%伊文思蓝
0.1ml ,并同时腹腔注射 0.6%醋酸 0.2ml , 20 分钟后 , 拉颈椎
处死动物 , 剪开腹腔 ,用 5ml蒸馏水冲洗腹腔数次 , 用吸管吸
取腹腔洗出液约 5 ～ 6ml , 离心 5 分钟 , 在 722 分光光度计
590nm 处测定吸收值(OD)。统计学处理采用 t 检验 , 结果见
表 2。
2.2　抑菌作用　采用液体试管二倍稀释法。用营养肉汤培
养基将醇提取物原液作系列稀释 , 使药膏浓度为 1:2 、1:4、1:
·192· 中国中医药科技 2009 年 5月第 16卷第 3 期 May 2009 Vol.16 No.3
8 、1:16 、1:32、1:64、1:128 、1:256 、1:512 、1:1024 , 第 11 管不加
药膏作为阳性对照 ,然后每管分别接种大肠埃希杆菌 、乙型
副伤寒沙门氏菌 、福氏志贺氏菌 、铜绿假单胞菌 、金黄色葡萄
球菌 、肺炎克雷白氏杆菌 105CFU0.1ml , 第 12 管不加药膏和
菌液作为阴性对照。置 35 ～ 37℃培养 24 小时 , 划线接种于
营养琼脂平板培养基上 ,置 35 ～ 37℃培养 24 小时 ,以生长菌
落不超过 5 个的最高稀释度为该药的最小抑制浓度(MIC)。
结果见表 3。
表 2 各组小鼠腹腔毛细血管通透性的测定(x±s)
组别 剂量(g kg) 动物数(只) 　　OD值
模型组 — 10 0.451±0.141
地塞米松组 0.0045 10 0.342±0.060＊
枝叶组(小) 5.18 10 0.347±0.109
枝叶组(大) 10.36 10 0.337±0.070＊
根茎组(小) 30.30 10 0.341±0.167
根茎组(大) 60.60 10 0.339±0.061＊
表 3 岗松醇提物体外抑菌试验结果
　　菌种 菌号 MIC(mg ml)枝叶醇提物 根茎醇提物
大肠埃希杆菌 44102 186.82 1010.00
乙型副伤寒沙门氏菌 50094 46.71 68.81
福氏志贺氏菌 51572 11.68 68.81
铜绿假单胞菌 10104 186.82 1010.00
金黄色葡萄球菌 26003 39.94 68.81
肺炎克雷白氏杆菌 46117 46.71 1010.00
　　2.3　镇痛作用[2] 　动物分组及给药剂量见表 4。每天灌胃
给药1 次 , 对照组给予等体积蒸馏水 , 连续 7 天。 于末次给
药后 1 小时 ,每只小鼠腹腔注射 0.6%醋酸溶液 0.2ml , 立即
观察并记录 20分钟内小鼠的扭体次数。统计处理采用 t 检
验 ,结果见表 4。
表 4 　各组小鼠扭体反应次数的比较(x±s)
组别 剂量(g kg) n 20min内扭体次数
模型组 — 10 24.40±4.65
阿司匹林组 0.20 10 7.20±9.40＊＊
枝叶组(小) 5.18 10 14.00±6.92＊＊
枝叶组(大) 10.36 10 11.40±5.46＊＊
根茎组(小) 30.30 10 21.80±9.84
根茎组(大) 60.60 10 23.20±12.34
2.4　抗过敏作用[4] 　动物分组见表 5。用 5%的 2 、4-二硝
基氯苯乙醇液涂布于小鼠腹部皮肤(去毛)致敏。致敏前一
天 ig给药 , 剂量见表 5 ,每天 1次 , 连续 9 天。致敏后第 7 天
用 1%的 2、4-二硝基氯苯涂右耳 , 24 小时后处死小鼠 , 剪取
耳片称重 , 以左右两耳片重量差值作为迟发型超敏反应值 ,
并摘取胸腺 、脾脏称重。结果见表 5。
2.5　免疫增强作用[3] 　动物分组及给药见表 6。 每天灌胃
给药1 次 , 空白组给予等体积蒸馏水 , 连续 7 天。 于末次给
药30 分钟后 , 小鼠尾静脉注射 20%印度墨汁 0.1ml 10g , 于
注入后2 、7分钟分别从眼眶静脉丛取血20μl ,溶于 2ml 0.1%
Na2CO3 溶液中摇匀 ,于 722型分光光度计 650nm 处测定吸光
度(OD),按公式计算吞噬指数 K 值 ,采用 t 检验进行组间比
较。结果见表 6。
表 5 岗松醇提物对 2 、4-二硝基氯苯所致
小鼠超敏反应的影响(x±s , n=10)
组别 剂量(g kg)
两耳重量差
　(mg)
　　胸腺
　(mg 10g)
　　脾脏
　(mg 10g)
模型组 — 17.01±5.62 46.93±10.80 59.16±16.20
地塞米松组 0.0045 4.98±2.20＊＊ 38.76±10.78 49.62±l11.02
枝叶组(小) 5.18 8.20±3.69＊＊ 45.14±12.22 53.20±14.78
枝叶组(大) 10.36 9.65±6.03＊＊ 44.63± 9.47 56.12±12.56
根茎组(小) 30.30 12.33±3.37＊ 49.05±14.15 54.54±15.59
根茎组(大) 60.60 9.74±4.94＊＊ 42.98± 9.38 53.42±12.41
表 6 各组小鼠单核巨噬细吞噬功能测定(x±s , n=10)
组别 剂量(g kg)
OD值
2min　　 7min 吞噬指数 K
空白组 — 0.809±0.072 0.636±0.091 　0.021±0.013
地塞米松组 0.0045 0.775±0.115 0.526±0.089 　0.034±0.011＊
枝叶组(小) 5.18 0.868±0.194 0.626±0.147 　0.029±0.015
枝叶组(大) 10.36 0.841±0.107 0.556±0.078 　0.036±0.017＊
根茎组(小) 30.30 0.781±0.162 0.603±0.199 　0.024±0.014
根茎组(大) 60.60 0.741±0.111 0.464±0.090 　0.041±0.018＊
　　与空白组比较＊P<0.05
2.6　保肝作用[ 5] 　动物分组及给药见表 7。每天灌胃给药
1次 , 连续 7天。末次给药 1 小时后 , 除正常对照组外 , 其他
各组小鼠腹腔注射 0.1% CCl4 液体花生油溶液 10ml kg , 同
时禁食 、自由饮水 , 20 小时后 , 摘除眼球取血 , 分离血清 , 按
试剂盒方法测定小鼠血清 ALT、AST 活性及 TP、ALB 含量。 t
检验处理分析 , 结果见表 7。
表 7 各组小鼠 ALT、AST 、TP 和ALB含量测定(x±s , n=10)
组别
剂量
(g kg)
　ALT
　(u L)
　AST
　(u L)
　 TP
　(g L)
　ALB
　(g L)
正常组 — 131.9±19.0＊＊ 233.0±27.3＊＊ 94.1±26.5＊＊ 66.2±14.9＊＊
模型组 — 500.0±77.2 356.2±24.5 46.1±20.0 33.9±8.1
联苯双酯组 0.2 336.5±108.3＊＊ 318.2±41.3＊ 61.8±17.9 41.2±9.9
枝叶组(小) 5.18 430.9±78.3 332.6±67.9 58.7±17.2 39.8±7.5
枝叶组(大) 10.36 386.2±61.8＊＊ 306.8±55.9＊ 61.2±18.4 39.8±6.1
根茎组(小) 30.30 438.8±66.0 294.1±64.8＊ 58.9±15.0 41.5±10.9
根茎组(大) 60.60 395.6±74.5＊＊ 311.9±47.8＊ 47.2±3.2 41.9±10.7
2.7　退黄作用[ 6] 　动物分组及给药见表 8。每日灌胃给药
1次 , 连续 7天。 第 7 天除正常对照组外 , 其余各组 ig 给予
0.6%异硫氰酸萘酯(ANIT , 90mg kg)中毒 , 中毒后继续给药 2
天 ,模型组则给以同体积生理盐水。各组于中毒 48 小时后
摘眼球取血 ,用试剂盒测定血清总胆红素(T-Bil)含量和丙
氨酸氨基转移酶(ALT)活性。结果见表 8。
2.8　急性毒性试验　取小鼠预试验后 ,另选取 18～ 22g小鼠
40只 , 分为 2组 , 雌雄各半。 以岗松枝叶醇提物和根茎醇提
物的最大给药浓度和最大给药体积给小鼠灌胃给药 , 24 小
时给药 3 次 ,连续观察 7 天 ,记录小鼠活动行为 ,大小便和饮
食情况。结果:未见动物有行为异常 、死亡等情况 , 体重增长
正常。计算枝叶醇提物最大给药量为 103.62g生药/ kg ,体重
增长为 36.29%:根茎醇提物最大给药量为606.06g生药/ kg ,
体重增长为 30.73%。
·193·中国中医药科技 2009年 5 月第 16卷第 3 期 May 2009 Vol.16 No.3
表 8 各组小鼠血清 T-Bil和 ALT 的测定(x±s , n=10)
组别 剂量(g kg) T-BIL(g L) 　ALT(u L)
正常组 — 42.76±5.76＊＊ 　2.17±1.55＊＊
模型组 — 194.63±48.91 196.68±50.17
联苯双酯组 0.20 125.68±30.74＊＊ 175.03±26.94＊
枝叶组(小) 5.18 160.54±26.16 154.69±49.45
枝叶组(大) 10.36 151.13±24.76＊ 119.54±38.82＊＊
根茎组(小) 30.30 162.18±19.77 155.94±45.52
根茎组(大) 60.60 146.34±21.13＊ 195.54±58.92
　　与模型组比较＊P<0.05 , ＊＊P<0.01
3　讨论
为了探讨岗松醇提物药用价值 ,本文采用多种动物模型
及实验方法 ,对其进行抗菌 、抗炎 、镇痛 、保肝等药理作用的
实验研究。结果表明 ,岗松枝叶和根茎醇提物能抑制巴豆油
引起的小鼠耳廓肿胀 , 降低小鼠腹腔毛细血管通透性;对乙
型副伤寒沙门氏菌 、福氏志贺氏菌 、金黄色葡萄球菌有明显
抑菌作用;减少醋酸致小鼠扭体次数;对 2 、4-二硝基氯苯
致小鼠超敏反应有抑制作用;可促进单核巨噬细胞的吞噬功
能;明显降低急性肝损伤小鼠血清 ALT、AST活性 ,降低黄疸
小鼠血清 T-Bil 值和 ALT活性。因此 , 提示岗松枝叶和根
茎醇提物具有明显的抗菌 、消炎 、保肝和免疫增强等作用。
岗松在我区药用资源非常丰富 , 是一个很有开发前景的药用
植物。
　　参考文献
1　朱红梅 ,钟鸣.岗松根抗生育作用的实验观察.医学理论与实践 ,
1995 , 4(8):145.
2　朱小宁.舒胆抗炎胶囊抗炎 、抑菌 、利胆 、镇痛作用的实验研究.
中国中医药科技 , 2007, 14(5):335.
3　陈奇.中药药理研究方法学 ,北京:人民卫牛出版社 ,1993:303.
4　黄俊 ,谢金鲜.鼻炎膏抗炎抗过敏的实验研究.广西中医药 , 2001,
24(1):51.
5　郭建生 ,吴勇军 ,王小娟 ,等.摄生肝泰胶囊对肝损伤动物治疗作
用的实验研究.中药新药与临床药理 ,1999 , 10(2):87.
6　施顺清 ,任建伟 ,李健.虎杖 、小田基黄煎剂的动物实验.中成药研
究 , 1983 ,6(7):36. (收稿:2008-04-02)
大黄 虫丸对静脉损伤大鼠 t-PA 、PAI-1 、D-Dimer的影响
郭伟光　(黑龙江中医药大学附属第二医院·哈尔滨 150001)
1　材料　Wistar 大鼠 42只 , 12周龄 ,雌雄各半 ,体重 200～ 250g ,清洁
级 ,购自哈尔滨医科大学实验动物中心。大黄 虫丸 、通塞脉片:江
苏南星药业有限公司。组织型纤溶酶原活化剂(t-PA)、组织型纤溶
酶原活化剂抑制物 1(PAI-1)、D 聚体(D-Dimer)活性测定试剂盒:
美国 RD公司原装进口分装。 722型可见分光光度计:上海光谱仪器
有限公司制造。
2　实验方法　将 42只大鼠随机分为 6组 ,每组 7只 ,分组及给药剂
量见表 1。每日灌胃 1次 ,连续 10天 ,各组大鼠最后一次给药后 2小
时 ,除正常组外 ,均行下腔静脉造模术。用 10%的水合氯醛 0.036ml
100g 体重行腹腔麻醉 ,后肢内侧去毛 ,常规消毒 、铺巾 ,沿后肢内侧
剪开皮肤 ,拨离出股静脉 ,将一根粗糙的铜丝插入股静脉中 ,反复拉
动铜丝 ,在抽出铜丝的同时用吸收性明胶海绵止血。 用 1#丝线缝
合皮肤 ,建立大鼠深静脉血管内皮破坏 、损伤模型后 6小时 ,心脏取
血 , 3000r/min离心 10分钟 , 取血清检测t-PA , PAI-1 , D-Dimer , 操
作严格按试剂盒说明进行。正常组不造模 ,其余处理方法相同。
3　结果　见表 1。
表 1 各组大鼠血清 t-PA、PAI-1 、D-Dimer
水平测定(x±s , n=7)
组别 剂量(g 100g)
t-PA
(pg ml)　　
PAI-1
(ng ml)
D-Dimer
(μg ml)
正常组 — 　456.63±183.74 　1.46±0.60 　0.661±0.006
模型组 — 246.12±110.69＊ 4.48±2.24＊ 0.770±0.047＊
阳性组 0.057 592.536±324.23■ 1.57±0.64■ 0.686±0.07■
低剂量组 0.054 558.82±340.86■ 2.14±1.04■ 0.701±0.068■
中剂量组 0.108 593.98±294.55■ 1.73±0.72■ 0.685±0.061■
高剂量组 0.216 537.72±212.40■■ 2.21±1.04■ 0.693±0.081■
　　与正常组比较＊P<0.05;与模型组比较■P<0.05
4　讨论　大黄 虫丸为汉代张仲景《金匮要略》方 , 主要由大黄 、黄
芩 、干地黄 、干漆 、芍药 、桃仁 、杏仁 、 虫 、虻虫 、蛴虫曹、水蛭 、甘草等
12味中药组成 ,具有祛瘀生新 、缓中补虚 ,主治内有干血 、肌肤甲错 、
两目黯黑的瘀血内阻症。实验证明其具有抗血小板聚集 、杭血栓形
成 、降低血黏度及提高纤溶酶活性等作用[1] 。纤溶活性下降是血栓
形成的重要因素之一 ,而血浆组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和纤溶
酶原激活剂抑制因子 -1(PAI-1)是代表纤溶性的重要指标 ,
Ulfhammer[ 2] 等应用人动脉内皮细胞经反复抻拉破坏内皮细胞后发
现 t-PA mRNA 和蛋白的表达减少 , PAI-1的表达增加。它们之间
的平衡失调在血栓发生发展中具有关键的作用 , 对两者水平的监测
对深静脉血栓形成有一定预测作用[ 3] 。D-二聚体是交联纤维蛋白
的降解产物 ,其生成或增高可作为体内高凝状态和纤溶功能亢进的
分子标志物[ 4] ,也是血栓的特异指标。本实验结果显示大鼠内皮细
胞破坏后其 t-PA 水平明显降低 ,而 PAI-1的产生明显增多 , D-二
聚体也有明显表达 , 大黄 虫丸可明显改善这一病理变化 , 表明大
黄 虫丸对血管内皮具有保护作用 , 可抑制血栓形成 ,为大黄 虫
丸临床应用于静脉血栓疾病提供实验依据。
　　参考文献
1　巩海涛.大黄 虫丸抗栓作用及机理的研究.山东医药工业 ,
2002 , 21(4):38.
2　Ulfhammer E , Ridderst rale W , Andersson M , et al.Prolonged cyclic strain
impairs the fibrinolytic system in cultured vascular endothelial cel ls.J
Hypertens ,2005 , 23(8):1551.
3　Thogersen AM , Jansson JH , Boman K.High plasminogen activator
inhibitor and tissue plasminogen activator levels in plasma precedea first
acute myocardial infarction in both men andwomen:evidence for the fib-
rinolytic system as an independent primary risk factor.Circulat ion , 1998,
98:2241.
4　郝振海 , 周东生 ,张进禄.严重四肢骨折血浆中 D-二聚体的变
化及临床意义.骨关节损伤杂志 , 2004 ,19(9):608.
(修回:2009-01-30)
·194· 中国中医药科技 2009 年 5月第 16卷第 3 期 May 2009 Vol.16 No.3