全 文 ：虎 斑 游 蛇 抗 炎 作 用 的 实 验 研 究
赵文静　马冬平1　宫玉晶1
(黑龙江中医药大学·哈尔滨 150040　1哈药集团三精制药有限公司·哈尔滨 150010)
摘　要　目的:探讨虎斑游蛇的抗炎作用。方法:采用二甲苯耳肿胀 、蛋清足跖肿 、棉球肉芽肿及腹腔毛细
血管通透性等方法观察其抗炎作用 ,并观察对切除肾上腺后的大鼠的抗炎作用 。结果:虎斑游蛇对急性炎
症 、渗出性炎症均有显著的抑制作用 , 对慢性增生性炎症亦有抑制作用 , 对切除肾上腺大鼠仍保有同样抗
炎效应。结论:虎斑游蛇有显著的抗炎作用 , 以醇制剂作用更明显。
主题词　炎症/中医药疗法　@虎斑游蛇/治疗应用　小鼠　大鼠
　　虎斑游蛇[ Natrix tigribna(berthold)] , 为《中国动物药》所
载药蛇之一 ,其蛇资源极其丰富 , 具有祛风除湿 、蠲痹止痛 、
解毒疗疮的作用 ,尤以治疗风湿痹痛而见长 , 疗效确切 ,故民
间广为应用。但有关抗风湿作用的药效学研究尚未见报道 ,
为此我们对虎斑游蛇进行了抗炎作用的实验研究 , 以期科学
地验证其药用价值。
1　实验材料
1.1　虎斑游蛇　捕于黑龙江省虎林县境内 , 活体经分类鉴
定为游蛇科动物虎斑游蛇[ Natrix tigribna(berthold)] 。药材干
燥磨粗粉后 ,制成 100%水提液和 100%醇提液(含生药量 1g/
ml), 由黑龙江中医药大学药理实验室制备 , 用时根据所需浓
度用生理盐水稀释。
1.2　药品与试剂　氢化可的松注射液(天津市氨基酸公司
人民制药厂), 二甲苯(哈尔滨市化工厂);伊文思蓝(上海化
学试剂采购供应站);2 , 4 二硝基苯肼(北京市化学试剂厂);
乙醚(上海马陆制药厂);三氯醋酸(上海化学试剂采购供应
站);活性炭(天津春辰化工制药厂)。
1.3　实验动物　昆明种小白鼠 、Wistar大白鼠 , 均由黑龙江
中医药大学实验中心提供。
2　实验方法与结果
2.1　对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响　取体重 25 ～ 30g 雄性
小鼠 60 只 , 随机分成 6组 , 然后分别灌胃不同剂量的虎斑游
蛇制剂和对照药物(详见表 1)。给药后 1h ,于小鼠右耳两侧
均匀涂布二甲苯 0.05ml/只 , 左耳作对照 , 致炎 30min 后剪下
左右两耳廓 , 用 9mm 打孔器取双耳片称重 ,以左右耳片重量
差为肿胀程度 ,结果见表 1。
表 1 对二甲苯致鼠耳肿胀的影响( x±s)
组别　　　 动物数(只)
剂量
(g/ kg)
肿胀程度
(mg)
抑制率
(%)
生理盐水 10 20ml 5.97±0.74 -
100%醇提液 10 20 4.50±0.76＊＊ 24.62
50%醇提液 10 10 4.92±0.88＊＊ 17.59
100%水提液 10 20 4.81±0.59＊＊ 19.43
50%水提液 10 10 5.02±0.84＊＊ 15.91
0.075%氢化可的松 10 15mg 3.97±0.73＊＊ 33.50
注:各用药组与生理盐水组比较＊P<0.05 , ＊＊P<0.01(下同)
2.2　对大鼠蛋清性足跖肿胀的影响
取体重 140 ～ 170g 雄性大鼠 60 只 , 均分 6 组 , 用毛细血
管放大测量足跖容积法测量各鼠右后足跖容积。然后分别
灌胃给不同剂量的虎斑游蛇提取液及对照药物。药后 1h ,将
10%新鲜鸡蛋清 0.1ml , 注入大鼠右足跖皮下致炎 ,再用容积
法测量注射蛋清后不同时间的足跖容积 , 以观察足跖肿胀程
度。结果见表 2。
表 2 对大鼠蛋清性足跖肿胀的影响( x±s)
组别　　 动物数(只)
剂量
(g/ kg)
不同时间足跖肿胀程度(ml)
0.5h　　　 1.5h　　　 3h　　　 4h　　　 5h　　　 7h　　　
生理盐水 10 20ml 0.765±0.063 0.779±0.073 0.669±0.07 0.551±0.058 0.388±0.044 0.252±0.052
100%
醇提液 10 20
0.463±0.103＊＊
　(39.48)
0.483±0.106
　(38)
0.357±0.094＊＊
　(47.37)
0.295±0.054＊＊
　(37.89)
0.241±0.046＊＊
　(61.11) 0.098±0.037
＊＊
50%
醇提液 10 10
0.533±0.091＊＊
　(30.33)
0.655±0.082＊＊
　(15.92)
0.530±0.068
　(22.87)
0.425±0.072＊＊
　(29.38)
0.274±0.064＊＊
　(43.25) 0.143±0.045
＊＊
10%
水提液 10 20
0.503±0.069＊＊
　(34.25)
0.620±0.068
　(20.413)
0.539±0.087＊＊
　(19.06)
0.446±0.682＊＊
　(22.68)
0.300±0.075＊＊
　(40.48) 0.150±0.06
＊＊
50%水提液 10 10 0.64±0.038
＊＊
　(16.34)
0.706±0.07＊＊
　(9.37)
0.61±0.83
　(8.53)
0.504±0.076＊＊
　(7.22)
0.36±0.066＊＊
　(20.63) 0.2±0.067
＊＊
0.75%
氢化可的松 10 15mg
0.485±0.037＊＊
　(36.6)
0.385±0.036
　(50.58)
0.36±0.036＊＊
　(46.19)
0.287±0.032＊＊
　(46.39)
0.208±0.036
　(66.67) 0.084±0.039
＊＊
　　注:(　)为肿胀抑制率(%)
2.3　对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响　取雄性小鼠 60 只 , 体重为 20±2g 随机分成 6组 , 然后按鼠耳肿胀法给药 ,药
·27·2003年第 10 卷第 1 期 中国中医药科技　　　　　　　　
后 1 h , 各鼠尾静脉注射 0.5%伊文思蓝生理盐水溶液 0.1ml/
10g 体重 , 尔后马上腹腔注射 0.6%HAc0.2ml/只致炎 , 20min
后脱颈椎处死 ,剪开腹腔 , 用 5ml蒸馏水分 3 次冲洗腹腔 ,用
吸管吸出洗涤液 , 加至 5ml , 3000rpm 离心 15min , 取上清液用
722 光珊分光光度计于 590nm 处测定洗出液的吸收度。结果
见表 3。
表 3 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响( x±s)
组别　　 动物数(只)
剂量
(g/ kg) 洗出液吸光度　
抑制率
(%)
生理盐水 10 20ml 0.314±0.081 -
100%醇提液 10 20 0.184±0.049＊＊ 41.4
50%醇提液 10 20 0.226±0.079＊＊ 28.03
100%水提液 10 20 0.225±0.073＊＊ 28.34
50%水提液 10 10 0.246±0.053＊＊ 21.66
0.075%氢化考的松 10 15mg 0.155±0.031＊＊ 50.64
2.4　对大鼠棉球肉芽肿的影响　取大鼠 60只 , 雄性 ,体重为
140～ 160g ,随机分成 6 组。用乙醚浅麻醉后 , 仰卧固定于鼠
台上 ,在无菌操作下 , 作一纵切口 ,将已称重灭菌的棉球植入
大鼠左侧腋窝皮下 , 随即缝合皮肤 , 于术后次日开始灌胃给
药 , 剂量同上 ,连续用药 7d , 第 8d做大鼠剪头处死 , 剥离并取
出棉球肉芽组织(剔除脂肪组织)。置于80℃烘干箱内1h ,烘
干 , 取出分析天秤称重 , 减去原棉球重量(10mg)即为肉芽肿
重量 。结果见表4。
表 4 对大鼠棉球肉芽肿的影响( x±s)
组别 动物数(只)
剂量
(g/ kg)
肉芽肿重量　　
(mg)　　
抑制率
(%)
生理盐水 10 20ml 80.70±6.21 -
100%醇提液 10 20 59.29±5.56＊＊ 26.53
50%醇提液 10 10 63.91±5.96＊ 20.80
100%水提液 10 20 62.39±5.19＊＊ 22.69
50%水提液 10 10 66.37±5.82 17.76
0.075%氢化考的松 10 15mg 56.13±6.04＊＊ 30.45
2.5　对切除肾上腺大鼠蛋清性足跖肿胀的影响　取雄性大
鼠 60 只 ,体重为 140～ 170g , 于无菌手术下将大鼠双侧肾上腺
切除 , 术后喂予葡萄糖氯化钠溶液代替饮水 , 术后 3d 按体重
随机分成 6 组 ,并开始灌胃给药 , 剂量同上 , 连续用药 7d , 于
末次给药 1h后 , 按前述蛋清足跖肿胀法进行实验 ,以观察给
药组与对照组足跖肿胀程度的差异。结果见表 5。
表 5 对切除肾上腺大鼠蛋清性足跖肿胀的影响( x±s)
组别　 动物数(只)
剂量
(g/kg)
不同时间足跖肿胀程度(ml)
0.5h　　 1.5h　　 3h　　 4h　　 5h　　 7h　　 11h　　 24h　　
生理盐水 10 20ml 0.752±0.087 0.851±0.079 0.871±0.085 0.829±0.095 0.764±0.101 0.684±0.094 0.53±0.07 0.26±0.085
100%
醇提液 10 20
0.494±0.093＊＊
　(34.31)
0.57±0.076
　(33.02)
0.573±0.108＊＊
　(34.21)
0.553±0.093＊＊
　(33.29)
0.51±0.069＊＊
　(33.25)
0.393±0.068＊＊
(42.54)
0.264±0.101＊＊
　(50.19)
0.015±0.038＊＊
(94.23)
50%
醇提液 10 10
0.640±0.065＊＊
　(14.89)
0.717±0.051＊＊
　(15.75)
0.734±0.053
　(15.73)
0.683±0.07＊＊
　(17.61)
0.628±0.09＊＊
　(17.80)
0.493±0.085＊＊
　(27.92)
0.356±0.075＊＊
(32.83)
0.064±0.061＊＊
　(72.38)
10%
水提液 10 20
0.543±0.083＊＊
　(27.79)
0.635±0.067
　(25.38)
0.621±0.07＊＊
　(28.70)
0.546±0.084＊＊
　(34.14)
0.484±0.077＊＊
　(36.64)
0.39±0.064＊＊
　42.98
0.263±0.078＊＊
　(50.38)
0.055±0.052＊＊
　(78.85)
50%水提液 10 10 0.655±0.084
＊＊
　(12.90)
0.722±0.067＊＊
　(15.16)
0.718±0.08
　(17.57)
0.666±0.092＊＊
　(19.66)
0.595±0.078＊＊
　(22.12)
0.508±0.09＊＊
　(25.73)
0.351±0.096＊＊
　(33.77)
06093±0.049＊＊
　(64.23)
0.75%
氢化可的松 10 15mg
0.469±0.045＊＊
　(37.63)
0.483±0.088
　(43.24)
0.432±0.085＊＊
　(50.40)
0.414±0.087＊＊
　(50.06)
0.305±0.065
　(60.08)
0.19±0.083＊＊
　(72.22)
0.144±0.085＊＊
　(78.49)
0.014±0.0023＊＊
　(94.62)
　　注:(　)为肿胀抑制率(%)
2.6　对大鼠肾上腺中维生素 C 含量的影响　选取雄性大鼠
60 只 ,体重为 150 ～ 170g , 随机分成 6 组 , 灌胃给药 , 剂量同
上 ,连续用药 7d ,于末次给药 1h 后处死动物 , 取出两侧肾上
腺迅速剥离附着的脂肪 , 然后于分析天平上称重 ,按每 20mg
肾上腺加 10ml4%三氯醋酸 , 用匀浆器匀浆再用抗坏血酸标
准液 2.0ml加 4%三氯醋酸 8.0ml。以上匀浆液和标准液各
100ml分别加入活性炭 0.3g 振荡 5min , 再用滤纸过滤 , 取滤
液按 2 , 4-二硝基苯肼法测定并求出肾上腺内维生素 C 含
量 ,以观察肾上腺对其抗炎作用的影响。结果见表 6。
表 6 对大鼠肾上腺中维生素 C含量的影响
组别　　 动物数(只)
剂量
(g/kg)
肾上腺中维生素C含量(μg/100mg组织)
( x±s)
生理盐水 10 20ml 331.97±37.89
100%醇提液 10 20 281.08±28.38
50%醇提液 10 10 308.34±45.34
100%水提液 10 20 295.02±27.76
50%水提液 10 10 322.79±30.19
0.075%氢化可的松 10 15mg 283.07±28.25
　　经统计学处理 ,虎斑游蛇水醇两种提取液的高低剂量组
及氢化可的松组与空白对照组比较无显著性意义。表明虎
斑游蛇提取物无降低肾上腺内维生素 C含量的作用 , 只能显
现其似有降低趋势(氢化可的松降低肾上腺 Vc 含量作用不
明显 ,可能与连日给药 ,使皮质激素反馈性抑制脑垂体前叶
对 ACTH 的分泌引起肾上腺皮质萎缩和机能不全有关)。
3　讨论
上述药理实验结果表明 , 虎斑游蛇有显著的抗炎作用 ,
其水 、醇各提取物对急性炎症 、渗出性炎症均有显著的抑制
作用;对慢性增生性炎症亦有抑制作用。其中醇制剂作用更
明显 , 另外足跖肿胀法的实验 , 可以发现 , 虎斑游蛇的抗炎药
效较为持久 , 另外 , 其提取物对切除双肾上腺的大鼠仍保存
同样的抗炎效应 ,对幼年大鼠免疫器官无明显影响 , 在进行
肾上腺抗坏血酸含量测定时 ,发现对腺体内维生素 C 含量无
降低作用 ,这些结果均提示 , 虎斑游蛇无促肾上腺皮质激素
样作用 ,其明显的抗炎作用并非一定通过肾上腺皮质释放皮
质激素所致。
(本研究为黑龙江省自然科学基金资助项目)
(收稿:2002-03-09)
·28· 　　　　　　　　中国中医药科技 2003 年第 10卷第 1 期