免费文献传递   相关文献

地胆草全草提取物抗菌抗炎作用的实验研究



全 文 :地胆草全草提取物抗菌抗炎作用的实验研究
何昌国 董玲婉 阮肖平 指导 戴明宽1
(浙江省临海市中医院·临海 317000 1 浙江省台州市医药科学研究所·台州 31800)
摘 要 目的:观察地胆草全草提取物的抗菌抗炎作用。方法:采用药物最低抑菌浓度和对常见致病菌
抑菌强度观察其抑菌作用;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀 、1%角叉菜胶大鼠足跖肿胀及棉球肉芽肿试验观
察其抗炎作用。结果:地胆草全草提取物具有明显的体外抗菌作用 , 能显著地抑制实验小鼠和大鼠的各
期炎症反应 ,与对照组相比 ,有显著差异(P<0.05)。结论:地胆草全草提取物具有明显的抗菌抗炎作用。
主题词 炎症/中医药疗法 地胆草全草提取物/治疗应用 大鼠 小鼠
  地胆草(Elephanltopus Scaber.L.)为菊科多年生草本植
物 ,主要分布于浙江 、福建 ,江西 、两广及云南等地 ,以全草入
药。民间广泛应用于咽炎 、扁桃体炎 、皮肤及尿路感染等多
种感染性疾病的治疗[1] ,其野生资源较为丰富 , 为充分利用
地胆草这一野生资源 ,对地胆草进行了抗菌抗炎作用的实验
研究 ,现将结果报告如下。
1 实验材料
1.1 药品与试剂 地胆草全草提取物:地胆草全草采自浙
江省临海市城南花鼓岩 ,经台州市医药科学研究所戴明宽主
任中药师鉴定。取阴干的地胆草全草 200g , 用醇水法常
规[ 2~ 4]制成提取液 200ml , 分装于 5ml安瓿中 , 熔封 , 100℃流
通蒸汽灭菌 30分钟备用 , 提取液中干物质含量为 4.85%(g
ml)。阿斯匹林:南京第二制药厂。角叉菜胶(caraseenin):英
国 BHD公司生产。试剂:均为市售产品(分析纯)。
1.2 仪器 TG328B 电光分析天平:北京天平仪器厂。 电热
恒温干燥箱:浙江嘉兴新塍电器厂。电热恒温多用箱;浙江
诸暨电热仪器厂。
1.3 菌种 金黄色葡萄球菌 、藤黄八叠球菌 、绿脓杆菌与大
肠杆菌:购自中国药品生物制品检定所;溶血性乙型链球菌
及肺炎双球菌:由台州市疾病预防控制中心提供。
1.4 动物 昆明种小鼠 、Wistar大鼠均由台州市医药科学研
究所提供。
2 实验方法与结果
2.1 抗菌试验[5 ,6]
2.1.1 最低抑菌浓度(MIC)观察 按抑菌试验双倍试管稀
释法。结果见表 1。
表 1 地胆草全草提取物的MIC测定
 菌 种 药物稀释度(g ml)
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 对照管
MIC
(g ml)
金黄色葡萄球菌 - - - - + + + + + + 0.0313
藤黄八叠球菌 - - - - - + + + + + 0.0156
溶血性链球菌 - - - - + + + + + + 0.0313
肺炎双球菌 - - + + + + + + + + 0.1250
绿脓杆菌 - - + + + + + + + + 0.1250
大肠杆菌 - - - + + + + + + + 0.0625
2.1.2 固体培养基抑菌实验 采用纸片扩散法。将地胆草
提取物用注射用水稀释成 0.5g(以生药计) ml的溶液;将受
试菌种于 37℃培养约 6小时 , 使浓度达到约 3亿 ml个左右 ,
用无菌棉拭浸菌液均匀划线接种于固体肉汤琼脂平板上 ,上
压每片含药液 0.01ml的滤纸片 , 37℃培养 24 小时后 ,测量抑
菌圈直径(mm),以生理盐水作对照。结果地胆草全草提取
物的抑菌直径金黄色葡萄球菌为(16.58±1.32)mm , 藤黄八
叠球菌为(15.21±0.79)mm , 乙型溶血性链球菌为(14.37±
1.23)mm , 肺炎双球菌为(13.28 ±1.35)mm , 绿脓杆菌为
(11.27±2.18)mm , 大肠杆菌为(12.47±1.65)mm , 与生理盐
水组比较 , P 均<0.01。
2.2 抗炎试验[ 5 , 6]
2.2.1 对二甲苯所致小鼠耳廓炎性肿胀的影响 取体重
(20±2)g的雄性昆明种小鼠 50 只 , 分组及给药剂量见表 2 ,
每天 2次 ,连续 3 天 ,末次给药后 1 小时 , 在小鼠右耳前后两
面均匀涂布二甲苯 0.05ml , 1 小时后颈椎脱臼处死小鼠 , 剪
下两耳 , 用 8mm 打孔器在两耳对称处取下耳片 ,立即用分析
天平称重 ,以左右两耳重量差求出各组致炎耳片的增量和肿
胀抑制率 , 数据统计分析采用 t检验。结果见表 2。
表 2 地胆草全草提取物对二甲苯致小鼠耳廓
急性炎症的抑制作用(x±s , n=10)
 组别 剂量(g kg)
致炎耳片增重
(mg)
肿胀抑制率
(%)
生理盐水组 - 12.39±0.51 -
阿斯匹林组 0.06 9.38±0.21** 24.29
地胆草组(小) 0.1 10.98±0.60** 16.86
地胆草组(中) 0.2 9.06±0.52** 26.89
地胆草组(大) 0.4 7.54±0.70**■ 39.15
  与生理盐水组相比*P<0.05 , **P<0.01;与阿斯匹林组相比
■P<0.05 , ■■P<0.01(下同)
2.2.2 对角叉菜胶诱发大鼠足肿胀的影响 取大鼠 40 只 ,
体重(180±20)g , 雌雄兼用 ,随机分成 5 组 ,每组 8 只 ,大鼠给
药剂量见表 3。灌胃给药 30 分钟后 ,在每只大鼠右后肢足跖
皮下注射 1%角叉菜胶混悬液 0.1ml。分别用千分尺测量并
记录致炎后 1、2、4 、6 小时的足厚度 , 与致炎前鼠足厚度比
较 ,以鼠足厚度之差为鼠足肿胀度 ,计算足肿胀率 , 数据统计
分析采用 t 检验 ,结果见表 3。
·191·中国中医药科技 2008年 5 月第 15卷第 3 期 May 2008 Vol.15 No.3
表 3 地胆草全草提取物对大鼠足肿胀的影响(x±s , n=8)
组别    剂量
(g kg)
足肿胀率(%)
1h   2h   4h   6h   12h  
生理盐水组 - 27.6±5.7 54.3±3.8 62.7±4.1 60.2±2.7 33.2±4.7
阿斯匹林组 0.06 25.2±4.3 50.7±3.4 58.5±4.3 52.3±3.6 33.4±2.7
地胆草组(小) 0.1 23.2±4.0 51.4±3.2 60.3±3.9 56.8±2.8 34.6±3.0
地胆草组(中) 0.2 24.5±3.7 48.5±3.0** 58.1±3.7* 54.2±4.1** 32.1±2.4
地胆草组(大) 0.4 21.2±4.1* 46.2±4.2**■■ 53.6±4.7*■■ 50.2±2.9** 31.7±2.6
2.2.3 对大鼠棉球肉芽肿的影响 取大鼠 40 只 , 分组及给
药见表 4 ,连续给药 7 天 , 实验方法参照文献[7] , 数据分析采
用 t检验 , 实验结果见表 4。
表 4 地胆草全草提取物对大鼠棉球肉芽肿的影响(x±s , n=8)
组别   剂量(g kg)
肉芽净重  
(mg 100g)  
抑制率
(%)
生理盐水组 - 20.8±3.07 -
阿斯匹林组 0.06 18.70±2.71 10.44
地胆草组(小) 0.1 20.31±2.83 2.73
地胆草组(中) 0.2 17.29±1.46** 17.19
地胆草组(大) 0.4 15.65±1.34**■ 25.05
3 讨论
地胆草在我国南方地区分布较广泛 ,资源丰富 ,具有较高
的开发利用价值,目前仅局限于民间使用。我们根据民间经验 ,
选用呼吸道 、泌尿系统和皮肤感染较常见的致病菌作为研究对
象进行实验 ,结果表明 ,地胆草具有较强的抗菌作用。
本文采用多种炎症模型观察地胆草的抗炎作用及强度 ,
结果表明 ,地胆草全草提取物的中 、大剂量组对各期炎症均
有明显的抑制作用 , 抗炎强度优于阿斯匹林组(P<0.05)。
综上所述 , 地胆草具有较强的抗菌抗炎作用 , 为临床使
用地胆草治疗多种感染性疾病提供了实验依据。
  参考文献
1 江苏新医学院编.中药大辞典(上册).上海:上海科技出版社 ,
1985:1291 , 1301.
2 张兆旺主编.中药药剂学.北京:中国中医药出版社 ,2003:252.
3 国家药典委员会编.中国药典 、(一部).北京:化学工业出版社 ,
2005:附录 11.
4 何昌国 ,李美英.复方槟榔灌肠液的制备与临床应用 , 中国中医
药科技 , 1999 ,8(4):封 4.
5 陈奇主编.中药药理研究方法学.第 2版:北京:人民卫生出版
社 , 2006:262, 272.
6 李仪奎主编.中药药理实验方法学.上海:上海科技出版社 ,
1991:286 , 300.
7 徐淑云 ,卞如廉 ,陈修.药理实验方法学.第 3版 ,北京:人民出
版社 , 2002:918. (修回:2007-12-12)
硇砂提取液复方制剂抑瘤作用的实验研究
梁秀艳 刘进先 吴玉波1 王 泽2
(哈尔滨医科大学附属肿瘤医院·哈尔滨 150081 1 哈尔滨医科大学附属四院·哈尔滨 150001 2 鑫蟾中医药研究所·哈尔滨 150000)
1 实验材料 动物:昆明种小鼠 40只 , 5~ 6周龄 ,体重 18~ 22g ,雌
雄各半 ,由黑龙江省肿瘤研究所提供 ,合格证号:050621。瘤株:S180
肉瘤瘤株及H22肝癌瘤株 , 由黑龙江省肿瘤研究所提供。药品及试
剂:硇砂提取液复方制剂(由硇砂 、瑞香狼毒、甘草等组成)由鑫蟾中
医药研究所提供 ,含生药 12g ml ,4℃冰箱保存。 5-Fu由上海旭东海
普药业有限公司生产 ,按 25mg kg给药。
2 实验方法 选择接种后 7天生长良好的荷瘤小鼠颈椎脱臼处死 ,
固定板上 ,消毒皮肤 ,行无菌条件下剥取瘤块 ,选取生长良好无坏死
及液化的肿瘤组织 ,剔除纤维包膜及坏死组织 ,在无菌平皿中剪碎 ,
置组织研磨器中加入少量 4℃生理盐水轻轻研磨成匀浆, 过滤制成
瘤细胞悬液 ,用生理盐水调细胞浓度至 1×107 ,台盼蓝染色 ,光镜下
瘤细胞计数 ,活瘤细胞>90%。取小鼠 80只 ,常规消毒后 ,接种肿瘤
稀释液 , 0.2ml 只于小鼠右腋下 ,并于瘤生长 24小时后随机分为 8
组 , 每组 10 只:①模型组(S180肉瘤及 H22 各 1 组), 灌胃生理盐水
0.2ml 10g·d-1 ;②5-Fu组(S180肉瘤及 H22各 1组),腹腔注射 0.1ml
10g·d-1 ,并灌胃生理盐水 0.2ml 10g·d-1 ;③每种瘤株各分硇砂抑瘤
提取液复方高剂量组(900mg kg)、低剂量组(400mg kg), 各灌胃给药
0.2ml 10g·d-1 ,1次 d ,连续 10天。 停药 24小时后 ,脱臼处死 , 取瘤
称重 ,计算抑瘤率。摘取胸腺 、脾脏 ,计算胸腺指数 、脾脏指数 , 统计
学处理采用 t 检验。实验期间各组均采取自由进食水。
3 结果
3.1 各组小鼠一般情况 治疗后摄食 、饮水均无明显变化 ,各组小
鼠均未出现意外死亡。
3.2 各组抑瘤率及平均瘤重的比较 见表 1。
表 1 各组平均瘤重及抑瘤率的比较(x±s , n=10)
组别 瘤  重 抑瘤率
S180 H22 S180 H22
模型组 2.13±0.58 1.32±0.23 — —
5-Fu组 0.85±0.38■■ 0.79±0.30■■ 60.09 40.1
硇砂高剂量组 1.12±0.54■ 0.64±0.29■ 47.41 35.6
硇砂低剂量组 1.58±0.58■* 1.04±0.36■* 25.82* 21.2*
  与模型组比较■P<0.05 , ■■P<0.01;与 5-Fu组比较*P<
0.05(下同)
3.3 对小鼠免疫器官重量的影响 见表 2。
表 2 各组小鼠胸腺 、脾脏指数比较(x±s , n=10 ,mg 10g体重)
组别 胸腺指数  脾脏指数 
模型组 36.1±5.9   62.2±8.7  
5-Fu组 14.2±3.4■■ 39.0±5.6■■
硇砂高剂量组 36.6±6.5   60.4±8.5  
硇砂低剂量组 35.8±5.7   61.7±7.7  
4 结论 实验结果显示该药有较显著的抑瘤作用 ,对小鼠的免疫器
官未出现有显著意义的影响 ,抑瘤作用随剂量的增加抑瘤作用呈增
强趋势。但由于人肿瘤与动物肿瘤株之间的差异 ,使单一的小鼠体
内实验难以确切阐明药物的抗癌效果与机理 ,其抗肿瘤作用还需进
一步验证。 (修回:2008-03-28)
·192· 中国中医药科技 2008年 5 月第 15卷第 3 期 May 2008 Vol.15 No.3