全 文 ：收稿 1999-08-12 修定 1999-11-08
雪柳的组织培养与植株再生
邹翠霞 肖荣俊(辽宁师范大学生物系 , 大连 116029)
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Fontanesia fortunei
ZOU Cui-Xia , XIAO Rong-Jun(Department of Biology , Liaoning Normal University , Dalian 116029)
1 植物名称 雪柳(Fontanesia fortunei)。
2 材料类别 嫩叶(采自大连郊区石头山崖
上野生植株)。
3 培养条件 诱导愈伤组织培养基:(1)
MS+6-BA 1.5 mg·L-1(单位下同)+2 , 4-D
2+NAA 1;(2)MS+6-BA 1.5+2 , 4-D 1.5+
NAA 0.5;(3)MS+6-BA 1.5+2 ,4-D 1+NAA
0.5;(4)MS+6-BA 1.5+2 ,4-D 1.5;(5)MS+
6-BA 1.5+NAA 1。芽分化培养基:(6)MS +
6-BA 1+NAA 1;(7)MS+6-BA 1+NAA 0.5;
(8)MS +6-BA 1 +NAA 0.3;(9)MS +6-BA
0.5+NAA 1;(10)MS+6-BA 0.5+NAA 0.5;
(11)MS+6-BA 0.5+NAA 0.1。生根培养基:
(12)1/2MS+NAA 0.5+IAA 1;(13)1/2MS +
IAA 1.5;(14)1/2MS+NAA 1。以上培养基中
蔗糖含量:诱导愈伤组织培养基为 45 g·L-1 ,
芽分化培养基为 30 g·L-1 ,生根培养基为 15
g·L-1 。琼脂 0.6%,培养温度20 ～ 28℃,光照
12 h·d-1 ,光照度 2 000 lx左右。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织诱导 5月份采回较嫩的叶片
后 ,先用流水冲洗 30 min , 浸入 70%酒精中
10 ～ 30 s ,再转入 0.02%的 HgCl3 溶液中灭菌
7 min ,用无菌水振荡洗涤 5次 ,放到盛有吸水
纸的无菌培养皿中 ,切成约 0.3 cm 的小块 ,
接种到愈伤组织诱导培养基中培养 。8 d 后
在(1)～ (5)号培养基上叶片切口处均形成愈
伤组织。再继续培养 15 d ,(1)号培养基上形
成约0.5 cm 的愈伤组织块;(2)、(3)、(4)号培
养基上形成 0.3 ～ 0.4 cm的愈伤组织块;(5)
号培养基上形成约 0.05 ～ 0.1 cm 的愈伤块 。
愈伤组织初期为淡黄色 ,随着培养时间的延
长 ,颜色逐渐加深 ,形成少量的绿色 ,并出现
少许颗粒状 。
4.2 芽的分化诱导 将(1)～ (5)培养基中
的愈伤组织分别接种到(6)～ (11)芽分化培
养基进行分化培养 ,接种后 10 d内变化不大;
10 d后(6)～ (8)培养基上的愈伤组织生长速
度加快 ,但其它变化不大 。在(9)～ (11)号培
养基上的颗粒愈伤组织随着生长不断地变
绿 ,逐渐形成芽点或丛生芽 。经过50 d培养 ,
有的丛生芽可长成高达 1.5 cm 的无根苗 。
其中(10)号培养基丛生苗或无根苗长得粗
壮 ,生长速度较快 。
4.3 生根 、移栽或扦插 将在(9)～ (11)号
培养基上生长的高为 1 ～ 1.5 cm的无根苗从
基部剪下 , 分别接种到(12)～ (14)号培养基
上进行生根培养。在(14)号培养基上 , 无根
苗下部的切口在 7 ～ 10 d时开始形成愈伤组
织 , 培养20 d时 , 愈伤组织块可以长到 0.3
cm左右 , 47%的无根苗从愈伤组织块周围长
出1 ～ 4条根。在(12)、(13)号培养基中 , 经过
20 d培养 , 97.5%的无根苗可长出 2 ～ 9条
0.5 ～ 1.5 cm长的根 , 平均根数为 5.6条。将
上述生根苗炼苗后 , 移栽到下铺肥沃园土 ,
上铺 5 cm厚干净河沙的木箱中 , (12)、(13)
号培养基培养的生根苗移栽成活率为 84%,
而(14)号培养基培养的生根苗移栽成活率仅
为 12.8%。研究中同时发现 , 这些由愈伤组
织形成根移栽成活的试管苗 , 原来的根几乎
都烂掉了 , 而由愈伤组织上部基又发出的新
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DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2000.02.017
根才成活。据此 , 我们将高 1 ～ 1.5 cm 的无
根苗下部切口在 150 mg·L-1的 IAA溶液浸醮
一下 , 再扦插到上述移栽基质中 , 扦插成活
率为 68%, 40 d后成活苗的单株平均生根数
为7.4条 。移栽或扦插成活的试管苗初期生
长较慢 , 60 d后生长速度较快 , 移栽 80 d后
平均株高为36 cm。
5 意义与进展 雪柳为木犀科雪柳属落叶
灌木或小乔木。近年来辽南地区在对石质山
野生树种进行调查时发现 , 它非常耐瘠薄 ,
在岩石缝中仍可正常生长 , 是北方石质山绿
化的优良树种。用种子繁殖植株变异较大 ,
扦插苗成活率低 , 繁殖速度慢 , 难以满足生
产上的需要 。用组织培养方法进行繁殖可以
补其不足。同时 , 北方人还喜欢用它的干嫩
叶代茶饮用 , 因此 , 在用它进行石质山绿化
时 , 又可以为人们提供无污染的饮品。雪柳
的组织培养国内外未见报道 。
收稿 1999-07-01 修定 1999-10-28
1 云南省中青年学术和技术带头人培养项目(97C025G)。
2 联系人。
刺果番荔枝的组织培养1
赵沛基 彭丽萍 甘烦远2 胡益明(中国科学院昆明植物研究所 ,昆明 650204)
Tissue Culture of Annona muricata
ZHAO Pei-Ji , PENG Li-Ping , GAN Fan-Yuan , HU Yi-Ming(Kunming Institute of Botany , Chinese Academy of Sciences ,
Kunming 650204)
1 植物名称 刺果番荔枝(Annona murica-
ta)。
2 材料类别 种子 。
3 培养条件 种子萌发培养基:(1)MS +
GA3 5 ～ 10 mg·L-1(单位下同);增殖培养基:
(2)MS +6-BA 2.0+NAA 0.1;壮苗培养基:
(3)MS +NAA 2.0+6-BA 0.2;生根培养基:
(4)1/2MS +NAA 0.2。所有培养基均加 0.
7%琼脂和 3%的蔗糖 ,在高温灭菌前 pH 均
为5.8 。培养温度为 25℃,每天光照 10 h ,光
照度为1 500 ～ 2 000 lx 。
4 生长与分化情况
4.1 种子的萌发 将种子剥皮后 ,经常规表
面灭菌 ,接种在培养基(1)上 。培养 2周后 ,
种子开始膨大 , 4周后 ,长出芽 ,并生根 。
4.2 增殖及壮苗 在芽长到 3 cm 时 ,移至
培养基(2)上 ,2周后膨胀 ,4周后在膨胀的部
分长出丛芽 。将丛芽接种到同样的培养基
上 ,3 周后产生大量的丛芽 。将丛芽接种到
培养基(3)上 ,芽逐渐长粗 ,产生强壮的幼苗 。
4.3 生根 将幼苗接种在培养基(4)上 ,4周
后 ,幼苗的基部长出许多不定根 ,生根率为
90%。生根的幼苗移至温室花盆中栽培 ,成
活率为 70%。
5 意义与进展 刺果番荔枝为番荔枝科番
荔枝属的常绿乔木 ,药用植物。其种子萌发
困难 ,植株生长缓慢。在植株中含有抗肿瘤
活性的番荔素 ,体内抗肿瘤活性是紫杉醇的
40 ～ 300倍。并被证明还具有杀虫活性 、细胞
毒性 、抗疟活性和 T 细胞抑制活性 。刺果番
荔枝的组织培养国内外尚未见报道。本文建
立的组织培养系统 ,为解决其快速繁殖 ,以及
为下一步开展次生代谢产物生物合成的研
究 ,提供了基础性资料 。
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