全 文 ：泸州医学院学报 2008 年 第 31 卷 第 5 期
Journal of Luzhou Medical College Vol.31 No.5 2008
HPLC法测定复方岗松洗液中盐酸小檗碱含量
傅秀娟
（泸州医学院药学院药学教研室， 四川泸州 646000）
摘 要 目的：对复方岗松洗液的主药黄柏的主要有效成分盐酸小檗碱进行含量测定，以便更好地控制产品质量。 方法：用
高效液相色谱法对盐酸小檗碱进行含量测定，色谱条件为 KromasilC18柱(4.6 mm×200mm,5μm)；乙腈-磷酸盐缓冲液（0.7%三乙
胺溶液，用磷酸调 pH 值至 3.0）(27:73)为流动相；流速 1ml·min-1；检测波长为 349nm。 结果：样品中盐酸小檗碱含量在 0.076μg～
0.76μg 内，进样量与峰面积积分值线性关系良好，r = 0.9998，平均回收率 99.6%，RSD=1.35%。结论：所建立的方法简便、快速，结
果准确、重复性好，可用于产品的质量控制。
关键词 复方岗松洗液； HPLC； 黄柏； 盐酸小檗碱； 含量测定
中图分类号 R927.2 文献标识码 A 文章编号 1000-2669（2008）5-0512-02
DETERMINATION OF BERBERINE HYDROCHLORIDE IN
COMPOUND GANGSONG LOTION BY HPLC
Fu Xiujuan
Department of Dharmacy,Luzhou Medical College
Abstract Objective：To establish a method for the determination of berberine hydrochloride in Cortex Phel-
lodendri in Compound Gangsong Lotion, for a better controlment of the product quality. Methods: The berberine
hydrochloride was determined by HPLC on Kromasil C18 (4.6 mm×200mm,5μm). The mobile phase consisted of
acetonitrile-phosphate buffer (0.7% triethylamine solution, pH adjusted to 3.0 with phosphoric acid) (27:73) at a
flow rate of 1ml·min-1. A UV-detector at 349nm was used. Results: The range of berberine hydrochloride was
0.076μg～0.76μg where the sample sizes in good linear relationship with peak areas with r=0.9998. The average
recovery reached 99.6%, RSD at 1.35%. Conclusion: The established method is simple, rapid, accurate, of good
reproducibility, thus can be applied to the controlment of the product.
Key words Compound Gangsong Lotion; HPLC; Cortex Phellodendri; Berberine hydrochloride; Content de-
termination
作者简介：傅秀娟（1982-），女，助教，研究生
复方岗松洗液是由苦豆草、岗松、黄柏、冰片等
六味中药制成的复方制剂， 具有清热解毒， 泻火燥
湿，杀虫止痒的功效。 用于湿热下注所致的阴痒、带
下。 症见：外阴、阴道灼热瘙痒，阴道分泌物增多，黄
稠而臭等症，以及滴虫性、霉菌性、非特异性阴道炎
见上述证候者。为控制产品质量，保证临床疗效的稳
定，特进行了该制剂的含量测定研究，规定了该洗液
中主药黄柏的主要有效成分盐酸小檗碱的含量限
度，并制订了其含量测定方法。
1 仪 器
岛津LC-10Avp 高效液相色谱仪 （SPD-10Avp
紫外检测器，CTO-10Asvp 柱温箱，Lc-10Atvp 双泵，
N2000 色谱数据工作站）；Auto Science AS5150A 超
声波清洗器；德国 Sartorius公司 BP211D电子天平。
2 试 药
复方岗松洗液及阴性对照样品 （自制， 批号
070201、070202、070203）；盐酸小檗碱对照品（中国
药品生物制品检定所提供）；乙腈为色谱纯，水为重
蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
3 方法与结果
3.1 色谱条件
KromasilC18 柱 (4.6 mm×200mm,5μm)；乙腈-磷
论著
512
酸盐缓冲液 （0.7%三乙胺溶液， 用磷酸调 pH 值至
3.0）(27:73)为流动相；流速 1ml·min-1；检测波长为
349nm； 对照品盐酸小檗碱与杂峰分离度大于 1.5；
理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于 3000。
3.2 线性关系考察
精密量取盐酸小檗碱对照品溶液 （0.0384mg/
ml）2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、20.0μl 进样，记录色谱图，
测定其峰面积，并以峰面积值（A）对进样量（C）进行
回归， 得标准曲线方程为: A = 3E+06C + 10495 r =
0.9998。结果表明进样量在 0.076μg～0.76μg间，进样
量和积分面积间线性关系良好。
附图 标准曲线
3.3 供试品溶液和对照品溶液的制备
供试品溶液的制备:精密量取本品 1ml，置于 10ml
量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，微孔滤膜滤过，即得。
对照品溶液的制备: 精密称取盐酸小檗碱对照
品，加甲醇制成每 1ml含 38μg的溶液，摇匀，即得。
3.4 精密度试验
精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液（0.038mg/ml）
5μl，重复进样 6 次，盐酸小檗碱峰面积的相对标准
差(RSD)<2%。
3.5 重复性试验
分别精密称取同一批样品，依法测定计算含量，
结果 RSD=0.74%（n=6）。
3.6 空白试验
按处方中药味的比例自配不含黄柏的样品，按
照样品处理方法制成空白溶液，依法测定，结果空白
溶液在与盐酸小檗碱对照品相同保留时间处未显示
明显的色谱峰，故认为无干扰。
3.7 回收率试验
采用加样回收法， 精密称取已知含量的同一批
号的样品， 分别精密加入定量的盐酸小檗碱对照品
溶液，按样品方法测定，结果见附表。
3.8 样品测定结果
三批样品（060701、060702、060703）测定。 结果
每毫升含黄柏以盐酸小檗碱计分别为 0.482mg、
0.500mg、0.522mg。
4 讨 论
(1)对方中药物进行含量控制时，原拟对方中君药
苦豆草中的槐定碱进行含量测定，并考察了多种色谱
条件及样品处理方法，均无法使槐定碱与杂质峰有效
分离。 推断原因是由于苦豆草所含生物碱种类众多，
且极性相近所至。故选择方中另一主药黄柏的主要有
效成分盐酸小檗碱进行含量控制，效果较好。
(2)由于本品为液体剂型，所测成份盐酸小檗碱
在甲醇溶解性好，故可以直接用甲醇溶解，测定。
(3) 在对盐酸小檗碱测定的色谱条件的考察中，
先后使用了： ①乙腈-0.1%磷酸溶液 （50∶50） （每
100 ml 加十二烷基磺酸钠 0.1g） 为流动相， 检测波
长 265nm[1]；②乙腈-0.2％磷酸水溶液(36∶64)为流动相，
检测波长 350 nm[2]；③水-乙腈-磷酸二氢钾-十二烷
基硫酸钠 (50∶50∶0.3∶0.2)， 为流动相，检测波长为 345
nm[3]；乙腈．磷酸二氢钾（0.05 mol·L-1）(28∶72)为流动相，
检测波长 349nm[4]，均不能得到较好的峰形， 并使分
离度达到要求， 故最后选择了本文中的色谱条件，
所得峰形的拖尾因子及分离度均达到要求。
参 考 文 献
1. 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 2005 版（一部）
[S].北京:化学工业出版社,2005;214
2. 黄 莺，朱华旭. RP -HPLC 法测定黄柏中小檗碱的含
量[J].现代医药卫生,2006;22 (4): 601
3. 付小六.反相高效液相色谱法测定复方黄柏酊中小檗碱
含量[J].中国药业,2006;15(6):23
4. 迟芳振，刘 群，李伟妮.黄柏胶囊中盐酸小檗碱的含量
测定[J].医药导报,2005;24(9):821
（2008-12-03 收稿）
附表 盐酸小檗碱回收率试验结果
测定
次数
1
2
3
4
5
取样量
（ml）
1
1
1
1
1
盐酸小檗
碱含量（mg）
0.483
0.483
0.483
0.483
0.483
加入盐酸小檗
碱量（mg）
0.762
0.762
0.762
0.762
0.762
测得量
（mg）
1.242
1.240
1.254
1.227
1.248
回收率
（%）
99.6
99.3
101.2
97.6
100.4
平均值
（%）
99.6
RSD
（%）
1.35
第 5 期 傅秀娟 HPLC 法测定复方岗松洗液中盐酸小檗碱含量 513