全 文 :中国药业 !#$% &%’(%)*+,#)%-.·!·
!!年第 ## 卷第 #!期药物研究
狼毒大戟水浸液对 !#$白血病的抑制作用
胡克忠 #,崔 $,巩国明 !,周 瑛 %,姚 苹 $
(#& 烟台市莱阳中心医院,山东 莱阳 $’($; $& 山东医科大学卫生化学室,山东 济南 $(#$;
!& 烟台护校,山东 烟台 $’%; %& 山东莱阳中医医院,山东 莱阳 $’($)
中图分类号:!#$ 文献标识码:% 文章编号:$& ’ ()$ *+&&+ ,$+ ’ &&)& ’ &$
表 # 狼毒水浸出液对 )’#( 白血病小鼠存活时间的影响
组别
!
#
$
癌细胞攻击数(个 *
+
#%
#%
#%
药物
生理盐水
生理盐水
), + #
), + $
剂量(- . /)
+
+
& !’
& ’
动物数
#
#
#
#
生存时间(/)
+
’& 0 1 & 2
0& 3 1 #&
0& 0 1 #& (
生命延长率(4)
%
%!
$& $ 接种 )’#( 细胞的小鼠与对照组相比脾脏显著增大,脾脏重量
增加 ! 倍以上(! 5 & #),给 ), + #,), + $ 后,脾脏重量显著下降
(! 5 & $),两给药组间无显著差别。与对照组相比,,#,$
组小鼠体重下降,),对体重无恢复作用,如表 $ 所示。
$& ! 与!组相比,组白细胞有极显著增加(! 5 & #),给药后
#,$组小鼠血中白细胞数明显下降(! 5 & $),显示狼毒浸出液
对白血病细胞的增殖有一定抑制作用,且该作用随给药剂量增加
而增强 6图 #)。
表 $ 狼毒水浸出液对 )’#( 病鼠脾脏肿大的作用
#:与!相比;$:与相比。
组别 药物 动物数
体重(-)
始 后
!
#
$
生理盐水
生理盐水
), + #
), + $
#
#
#
#
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5 & $$
5 & $$
脾重(-) !
!& 阴性对照组 & 阳性对照组 #& ), + # 组 $& ), + $ 组
图 # 狼毒水浸出液对 )’#( 病鼠体内白细胞增殖的作用
摘要 目的:探讨狼毒大戟水浸液(),)抗小鼠 7 淋巴细胞白血病
()’#()的作用。方法:2 只纯系小鼠随机分为阴性对照( 8 $)、阳
性对照( 8 $)、), + #( 8 $)和 ), + $( 8 $)。除阴性对照组
外,每只鼠腋下接种 )’#( 细胞 #% 个,), + #,), + $ 组每只分别给
予 ), & !’ - . / 和 & ’ - . /,共 3 /,第 2 日将各组动物处死一半
取血,剩余的用作观察生命延长率。结果:给药组和对照组的平均
存活时间分别为 0& 3 9 0& 0 / 与 ’& 0 /,生命延长率为 %4 9 %!4,
),对由 )’#( 白血病细胞攻击引起的白细胞显著增高和脾脏肿大有
显著的降低和缓解作用(! 5 & $,! 5 & $)。结论:), 对 )’#( 细
胞有较强的抑制作用,可在一定程度上抑制白血病的发展。
关键词 狼毒大戟;中草药;白血病;动物模型
大戟科狼毒,成分主要是二萜内酯,多数具有抗癌活性 : # ;。我国
民间用狼毒治疗恶性肿瘤已有较久的历史,但用于治疗白血病的
报道较少 : $ ;。为探讨大戟狼毒对白血病的作用,笔者进行了狼毒大
戟水浸液(),)抗 ’#(7淋巴细胞性白血病的实验研究。
$ 材料与方法
#& # ’#( 近交系小鼠由中国医学科学院药物所动物中心提供,体
重 #0 9 $# -,$ 月龄,雌雄各半。
#& $ )’#(白血病瘤株由中国医学科学院血液病研究所引入,常规传
代,保种后接种。)’#(是 ’#(近交系小鼠的一株 7淋巴细胞性白血病,
是由津 ’!2病毒在新生的 ’#(系小鼠身上诱发的,再用源鼠的脾细
胞同系移植传代建株而成。同系接种 #4发病,无自发性缓解。
#& ! 药品及试剂
#& !& # 大戟科狼毒大戟 6 #$%&’()*+ ,*-.&/(*++ <=>?/& *购自济南市
医药公司。
#& !& $ 分别取狼毒生药 #$ -和 $ -,各加蒸馏水 # @),煮沸后
文火煎 #( @AB,滤去药渣后加蒸馏水至 # @),制成 ), + #,), + $
水剂,置冰箱备用。
#& !& ! CDEF + #’% 培养基内含 #(4 9 $4 磷酸盐缓冲液,
$ @@GH . ) 的苏木素贴红,$ @@GH . ) 谷氨酰胺,( I #( J $ +巯基
乙醇,#& $ - . )碳酸氢钠,青霉素、链霉素各 # J . )。
#& % 实验方法
#& %& # 取 ’#( 小鼠一只,接种后第 ’ 日用颈椎脱位法处死,在
无菌条件下取出脾脏,在 K?BL< 液中研磨,用尼龙网(#$ 目 *滤
过,# ( M . @AB 离心 ( @AB,弃上清液,用低渗休克法破碎红细
胞,尼龙网过滤,用 K?BL< 液洗涤,用盼兰排除法计算活细胞,用
CDEF + #’%培养基配成 # I #( 个 .毫升 ’#(细胞,备用。
#& %& $ 2 只近交系小鼠,平衡饲养 # 周,随机分为阴性对照组
(!, 8 $ *、阳性对照组(, 8 $*、), + #组(#, 8 $)和 ), + $
组 6$, 8 $)。阴性对照组每只左腋皮下注射生理盐水 & # @),
其余组在相同部位注入 #% 个 )’#( 细胞(& # @)),$% N后每日由胃
管分别注入生理盐水 & ! @)(!组、组 *,), + # & ! @)6#组 *和
), + $ & ! @)6$组 *,共 3 /,第 2 日将各组动物处死一半取血,染
色后镜下观察白细胞数。每日记录剩余动物死亡时间,计算生命延
长率 F),(FBOM>?<> GP )AP> ,Q?B)。
动物死后立即称体重,取脾脏称重。对数据进行统计学处理,
组间比较采用 0检验。
+ 结果
$& # ), + # 和 ), + $ 对 #% 个 )’#( 细胞攻击所引起的小鼠白血
病有明显抑制作用,可使受攻击小鼠平均存活时间明显延长,生命
延长率为 %4与 %!4,与对照组相比有显著性差异(! 5 & #),见
表 #。
治疗组平均生存日数
对照组平均生存日数
6 + # * I #4F), 8
中国药业 !#$% &%’(%)*+,#)%-. ·!·
!!年第 ## 卷第 #!期 药品检测
双黄少腹贴的 !#鉴别!
张玉娥,欧阳艳华,于 萍,李德欣,曾丽萍
#广东省江门市五邑中医院,广东 江门 $%&’’’)
中图分类号:!#$% && 文献标识码:’ 文章编号:&(() * +,& -#((# . * ((,& * (&
, 讨论
狼毒大戟主治胁下积癖、痰饮症结 ( $ )。我国民间用狼毒治疗肿
瘤,土耳其民间用其白色乳汁治疣 ( * )。近年来已有许多狼毒抗小鼠
移植性肿瘤和治疗人类晚期癌症的报道 ( %,+ )。本研究所用的狼毒水
浸液是由大戟科植物狼毒大戟(!#$%&’() *(+,$-&().) ,-)的根 ( ! )
#采用传统水煎方法 .制成的。研究结果表明,/,能延缓白血病癌细
胞的增殖,缓解 /*$ 白血病细胞使脾脏肿大的作用,延长小鼠存活
期。本实验结果与吕蕴新报道的瑞香狼毒水浸出液对 /*$ 白血病的
作用的研究结果类似 ( 0 ),说明不同品种的狼毒对 /*$ 白血病有相似
的作用。
狼毒抗白血病的机理尚不清楚。本实验结果显示:受 /*$ 白血
病细胞攻击的小鼠脾脏显著肿大、白细胞显著增高的原因,可能是
/*$ 首先破坏机体的免疫功能,通过某种机制引起白细胞增殖。体
外细胞毒性试验证明,/,并不能直接杀死细胞或破坏细胞膜 (0 )。用
药后,脾脏肿大缓解和白细胞数下降可能是因为免疫系统功能增
强,肿瘤增殖得以抑制。
两种不同剂量的狼毒在患白血病小鼠的生命延长率方面无显
著差异,可能与毒性有关。《本草纲目》谓:“狼毒有大毒,观其名而
知其毒也。”用药剂量增加,则毒性亦增加,从而导致体重减轻,中
毒死亡。因此,对狼毒大戟治疗白血病的最佳剂量需进一步探讨。
参考文献:
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分册,&&*,(*):%$% 2 %$!-
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&3&,&():*3!,*3$-
-收稿日期:#((# * (+ * &(;修回日期:#((# * (/ * &) .
#广东省中医药管理局、江门市科委资助课题
- 盐酸小檗碱 %- 样品
!- 阴性样品 0- 对照药材
- 延胡索乙素 %- 样品
!- 阴性样品 0- 延胡索药材
图 % 延胡索薄层色谱图
图 黄连薄层色谱图
- 川芎对照药材
%S 0- 样品
!- 阴性样品
图 ! 川芎薄层色谱图
%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%
摘要 双黄少腹贴是治疗痛经及盆腔炎的中药复方巴布剂,由黄
连、延胡索、丹参、川芎等中药组成,因组分多,采用不同的展开剂
分别对方中各药材进行薄层色谱鉴别,方法简便灵敏、重复性好。
关键词 双黄少腹贴;薄层色谱;鉴别;黄连;延胡索
双黄少腹贴是由黄连、延胡索、丹参、川芎等组成的中药巴布
剂,为治疗痛经及盆腔炎有效药物,具有活血祛瘀、消肿止痛的功
效,为了控制其质量,笔者对其主药分别进行了薄层色谱鉴别,现
报道如下。
& 仪器与材料
双黄少腹贴 #自制 .;盐酸小檗碱、延胡索乙素、丹参酮!C 均由
中国药品生物制品检定所提供;硅胶 R为青岛海洋化工厂生产;微
样点样器 #上海医用激光仪器厂 .;所用试剂均为分析纯。
# 薄层色谱鉴别
%- 黄连的鉴别 (% )
从巴布剂上刮取含药基质 % @,用
适量硅藻土分散均匀,加 %’ J/乙醇超
声提取 !’ J7?,滤过,滤液蒸干,残渣
加乙醇定容至 $ J/ 量瓶中,作为供
试品液。另取缺黄连的阴性样品,同
法制成阴性对照品液。再取盐酸小檗
碱适量,加乙醇制成 J@ T J/ 的对
照品液。取黄连药材粉碎,以乙醇提
取制成 U ’ 提取液。照《中国药典》%’’’ 年版一部薄层色谱法试
验 ( ),吸取上述溶液各 $ /,分别点于同一硅胶 R薄层板上,以正
丁醇 2醋酸 2水(+ U U %)为展开剂,展开,取出,晾干。紫外灯下检
视,供试品色谱在与对照品及黄连对照药材色谱相应的位置上显
相同颜色的荧光斑点,而阴性对照品色谱无此斑点 #见图 .。
%- % 延胡索的鉴别 ( % )
从巴布剂上刮取含药基质 ! @,
用适量硅藻土分散均匀,以氨水润
湿,加 $’ J/乙醇超声提取 !’ J7?,
滤过,滤液蒸干,残渣加水溶解,加
浓氨试液调成碱性,用乙醚提取 %
次,合并乙醚液,挥干乙醚,以乙醇
定容至 % J/ 量瓶中,即为供试品
液。另取缺延胡索的阴性样品,同法
制成阴性对照品液。再取延胡索乙
素适量,加乙醇制成 $ J@ T J/ 的对照品液。取延胡索药材 % @ 粉
碎,同法制成对照药材液,照《中国药典》%’’’ 年版一部薄层色谱法
试验 ( ),吸取上述溶液各 ’ /,分别点于同一硅胶 R薄层板上,以
正己烷 2氯仿 2甲醇(+- $ U 0 U )为展开剂 #必须用滤纸饱和 .,展
开,取出,晾干。碘蒸气显色定位,日光下检视,供试品色谱在与对
照品及对照药材色谱相应的位置上
显相同颜色的斑点,而阴性对照品色
谱无此斑点 #见图 % .。
%- ! 川芎的鉴别 (% )
从巴布剂上刮取含药基质 0 @,
用适量硅藻土分散均匀,加入甲醇 2
甲酸(&$ U $ .的混合溶剂,超声提取
!’ J7?,滤过,滤液蒸干,残渣加入甲
醇 2甲酸(&$ U $)的混合溶剂溶解并定
容至 $ J/ 量瓶中,即为供试品液。另
取缺川芎的阴性样品,同法制成阴性
对照品液。再取川芎药材 % @粉碎,同