全 文 ：HPLC法测定不同采收期猴耳环中没食子酸的含量
李镜友 1 ,罗巧红1 ,张　曼 1 ,陈　军 1 ,张志坚1 ,黄桂芳 2
(1.广州市花城制药厂 ,广东 广州 510555;2.广州钢铁企业集团医院 ,广东 广州 510425)
　　摘要　目的:考察猴耳环的最佳采收时期。方法:采用 HPLC法测定不同采收期猴耳环中没食子酸的含量 ,以
HypersilC18为色谱柱 ,以水-甲醇-乙腈(450∶50∶1)用冰醋酸调至 pH3.0为流动相 ,检测波长为 270 nm,流速为 1.0
mL/min。结果:没食子酸平均回收率为 98.86%, RSD为 1.57%。结论:该方法灵敏 、准确 ,重现性好 , 能有效控制
猴耳环药材的质量 , 为选择其最佳采收期提供了可靠依据。
关键词　HPLC;猴耳环;没食子酸;采收期
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2009)06-0915-02
收稿日期:2008-11-14作者简介:李镜友(1968-),男,制药工程师 ,在读硕士 ,从事药品标准研究工作;Tel:020-87487035, E-mail:hcljy@21cn.com。
　　猴耳环为豆科植物猴耳环 Archidendronclypear-
ia(Jack.)Nielsen.的干燥叶 。主要分布于广东 、广
西 、福建等地 。猴耳环主要含没食子酸 、槲皮苷和连
苯三酚 〔1〕等成分 ,其中没食子酸是猴耳环中消炎 、
止咳的主要有效成分 〔2〕 ,此外没食子酸还具有抗
菌 、抗病毒 〔3〕和抗肿瘤等作用 〔4〕。 《广东省中药材
标准》中猴耳环项下只有性状和没食子酸薄层鉴
别 ,不能有效控制其药材质量 ,为此笔者对猴耳环进
行研究 ,用高效液相色谱法测定猴耳环中没食子酸
含量 ,并对不同采收期猴耳环药材样品(13份)进行
测定 ,以期为选择其最佳采收期提供参考 ,为药材的
质量控制提供依据。
1　仪器与试药
岛津 LC-10AT高效液相色谱仪;SPD-10A型紫
外检测器;HW-2000色谱工作站。色谱柱 Hypersil
C18(4.6mm×250mm, 5μm)。日本 AND电子天平
FR-200,超声波清洗机 HN1006B(广州华南设备厂 ,
25kHz, 300W)。没食子酸对照品(批号:0831-9501,
中国药品生物制品检定所)。
猴耳环植株采于广州市帽峰山 ,经笔者鉴定为
豆科植物猴耳环 Archidendronclypearia(Jack.)
Nielsen.。同一猴耳环植株每月采收一次 ,晒干 ,连
续采收 13个月 ,依次编号 1 ～ 13,具体采收时间见
表 1。甲醇 、乙腈为色谱纯 ,水为超纯水 ,其余试剂
均为分析纯 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件〔5〕与系统适用性试验　色谱柱 Hy-
persilC18 (4.6mm×250mm, 5μm)。水-甲醇-乙腈
(450∶50∶1)用冰醋酸调至 pH3.0为流动相 ,流速
为 1.0mL/min,柱温:室温 ,检测波长:270 nm,理论
塔板数按没食子酸峰计应不低于 1 500。
2.2　对照品溶液的制备　精密称取没食子酸对照
品适量加流动相溶解 ,制成每 1 mL含没食子酸 50
μg的对照品溶液 ,即得。
2.3　供试品溶液的制备　取猴耳环药材粉末约
0.5 g,精密称定 ,置锥形瓶中 ,加入流动相 100 mL,
密塞 ,称定重量 ,浸泡 1 h后 ,超声(功率 300W,频率
25kHz)提取 30min,放冷 ,再称定重量 ,用流动相补
足减失的重量 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液 ,即得。
2.4　线性关系的考察　精密量取 “ 2.2”项下的没
食子酸对照品溶液 5.0、7.5、10.0、 15.0、20.0 μL,
分别注入高效液相色谱仪 ,按照 “ 2.1”项下条件测
定 ,以没食子酸的量 X为横坐标 ,峰面积 Y为纵坐
标 ,进行线性回归 ,得回归方程为:Y=4 097+734
800X, r=0.9992(n=5)。结果表明:没食子酸在
0.25 ～ 1.00 μg间线性关系良好 。
2.5　精密度试验　取同一供试品溶液(编号 1含
量 1.42%),按照 “ 2.1”项下条件重复测定 6次 ,结
果测得没食子酸平均峰面积为 320 310.5, RSD=
1.09%(n=6)。表明仪器的精密度良好 。
2.6　稳定性试验　取同一供试品溶液(编号 1含
量 1.42%),按 “ 2.1”项下条件 , 每间隔 2h测定一
次 ,结果没食子酸平均峰面积为 320 315.6, RSD为
1.01%(n=6)。表明样品在 12 h内稳定性良好 。
2.7　重复性试验　取同一编号药材粉末(编号 1
含量 1.42%),制备 6份供试品溶液进行试验 ,按照
“2.1”项下条件测定 , 结果没食子酸平均含量为
1.42%, RSD为 1.45%(n=6)。表明本方法重复性
良好 。
2.8　加样回收率试验　取已知含量(编号 1含量
1.42%)的供试品 6份 ,取约 0.25g,精密称定 ,分别
精密加入没食子酸对照品 2.5 mg,按 “2.1”项下条
件测定 ,计算回收率 ,平均回收率为 98.86%, RSD
为 1.57%(n=6)。
·915·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 6期 2009年 6月DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2009.06.013
2.9　含量测定　对 13批猴耳环药材进行检测 ,照
上述方法 ,每批药材制备供试品溶液 2份 ,分别吸取
供试品溶液各 10 μL,依法测定。结果见表 1。
　表 1　　　　猴耳环没食子酸的测定结果(按干燥品计)
编号 采收时间 没食子酸 /%枝 叶
1 08.01.18 0.90 1.42
2 08.02.11 0.80 1.48
3 08.03.19 0.78 1.30
4 08.04.19 0.91 1.50
5 08.05.18 0.90 1.45
6 08.06.19 1.20 2.01
7 08.07.20 1.22 1.97
8 08.08.24 1.31 2.05
9 08.09.28 1.40 2.11
10 08.10.20 1.22 1.92
11 08.11.20 1.05 1.90
12 08.12.20 0.91 1.55
13 09.01.20 0.80 1.50
3　讨论
3.1　猴耳环枝 、叶全年均含没食子酸成分 ,叶中没
食子酸的含量约为枝中的 2倍 , 6 ～ 11月没食子酸
含量与其它月份比较明显较高 。
3.2　笔者曾用乙腈 -磷酸盐缓冲液 [称取磷酸二氢
钾(KH2PO4)6.8g,溶解至 1 000mL水中 ,加磷酸调
pH3.0 ,即得 ] (20∶80)为流动相 ,检测波长 270 nm
和 350 nm,同时测定猴耳环中没食子酸和槲皮苷含
量 ,但由于没食子酸和槲皮苷的峰面积相差太大 ,分
离效果差 ,无法在同一色谱条件下进行同时检测 。
3.3　根据上述 13批猴耳环药材中没食子酸含量
的测定结果 ,可知猴耳环以没食子酸量计 , 最高为
2.11%,最低为 0.78%,总平均含量 1.36%,考虑到
中药材的化学成分较复杂 ,不同产地 、不同采收期含
量变异较大等特点 ,故含量限度下浮 30%,拟定为
本品按干燥品计 ,含没食子酸(C7H6O5)不得少于
1.0%。
参 考 文 献
[ 1] 王永刚 , 淡墨 , 李咏华 , 等 .猴耳环化学成分的研究
[ J].中药材 , 2005, 28(9):774-775.
[ 2] 柯铭清 .中草药有效成分理化与药理特性 [ M] .长沙:
湖南科学技术出版社 , 1982:105, 233.
[ 3] 国家医药管理局中草药情报中心 .植物药有效成分手
册 [ M] .北京:人民卫生出版社 , 1986:479.
[ 4] 季宇彬 , 张广美 .中草药抗肿瘤有效成分药理与应用
[ M] .哈尔滨:黑龙江科学技术出版社 , 1998:239.
[ 5] 李尔伟 , 万安凤 ,李镜友 , 等.猴耳环消炎片质量标准研
究 [ J] .中药材 , 2003, 26(8):592-593.
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·916· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 6期 2009年 6月