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Central South Pharmacy. July 2016, Vol. 14 No.7　中南药学 2016 年 7月 第 14卷 第 7期
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（收稿日期：2015-12-02；修回日期：2016-02-01）
铁冬青不同产地不同部位质量分析
王晓博1，张俏2，曹爱兰2*，杜文娟2，赵新礼2（1. 陕西新药技术开发中心，陕西省创新药物研究中心，西安　
710075；2. 陕西中药研究所，陕西省创新药物研究中心，陕西　咸阳　712000）
摘要：目的　铁冬青不同产地不同部位的质量分析。方法　采用高效液相色谱法测定铁冬青不同产地、
不同药用部位中长梗冬青苷和紫丁香苷的含量。结果　铁冬青的果实和树叶中无长梗冬青苷，含有微量
的紫丁香苷；不同产地的铁冬青中长梗冬青苷和紫丁香苷含量差别也很大。结论　在开发铁冬青药用资
源时要充分考虑药用部位及产地对其质量的影响。
关键词：铁冬青；救必应；产地；药用部位；长梗冬青苷；紫丁香苷
中图分类号：R917　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2016)07-0728-03
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2016.07.013
Quality analysis of different parts of Ilex rotunda Thunb. with different origins
WANG Xiao-bo1, ZHANG Qiao2, CAO Ai-lan2*, DU Wen-juan2, ZHAO Xin-li2 (1. Shaanxi Pharmaceutical
Development Center, Innovative Drug Research Center of Shaanxi Province, Xi’an 710075; 2. Shaanxi Chinese
Medicine Institute, Innovative Drug Research Center of Shaanxi Province, Xianyang Shaanxi 712000)
Abstract: Objective To analyze different parts of Ilex rotunda Thunb. with different origins. Methods The
contents of syringin and pedunculoside in different parts with different origins were analyzed by HPLC. Results
There was little pedunculoside and a small amount syringin in the fruits and leaves of Ilex rotunda Thunb..
There was a big difference in the content with different origins. Conclusion In the development of Ilex rotunda
Thunb., the effect of deferent parts and origins on the quality of medicinal resources should be considered.
Key words: Ilex rotunda Thunb.; Ilicis rotunda Cortex; origin; medicinal part; pedunculoside; syringin
　　冬青科植物铁冬青 Ilex rotunda Thunb.的干燥树皮
是救必应药材的法定来源 [1]。救必应具有清热解毒、利
湿止痛的功效。救必应在民间以及临床应用较多，是一
味药理活性较强的中药 [2-4]。近年来，救必应中紫丁香
苷和长梗冬青苷越来越多的药理活性为世人所发现 [5-9]，
并且救必应中紫丁香苷和长梗冬青苷含量极高 [10-11]，具
有开发中药一类新药的资源优势。为了提高铁冬青药用
资源的利用率，本文对不同产地铁冬青的不同药用部位
进行含量测定，为铁冬青的合理开发、利用鉴定基础。
1　仪器与试药
1.1　仪器
　　Agilent 1260高效液相色谱仪（1260 VWD检测器，
基金项目：陕西省社会发展科技攻关项目（No. 2015SF2-06）。
作者简介：王晓博，女，高级工程师，主要从事新药研究工作，E-mail：ant_wxb1978@163.com　﹡通讯作者：曹爱兰，女，研究员，
主要从事新药研究工作，E-mail：caoailan118@163.com
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中南药学 2016年 7月 第 14卷 第 7期　Central South Pharmacy. July 2016, Vol. 14 No.7
美国安捷伦）；双频数控超声波清洗器（KQ-300 VED
型，昆山市仪器有限公司）；电子分析天平（Ag-135
型，德国梅特勒公司，d＝ 0.01 mg/0.1 mg）。
1.2　试药
　　铁冬青的果实、树叶、树皮（经陕西中药研究所
赵新礼老师鉴定为铁冬青正品，符合 2010年版中国药
典一部要求）；甲醇（分析纯，天津市富宇精细化工有
限公司）；水（纯净水，西安娃哈哈桶装水有限公司）；
乙腈（色谱纯，Fisher scientific）；长梗冬青苷对照品
（批号：111868-201001，含量：89.3%）、紫丁香苷对
照品（批号：111574-200603，含量：99.9%）（中国食
品药品检定研究院）。
2　方法与结果
2.1　色谱条件及系统适用性
　　本检测方法为 2010年版中国药典一部救必应含量
测定方法 [1]，Kromasil C18色谱柱（150 mm×4.6 mm，
5 μm），柱温 30℃，进样量 20 μL，流速 1 mL·min－ 1；
以乙腈为流动相 A，以水为流动相 B，按表 1规定进
行梯度洗脱；检测波长 210 nm。理论板数按紫丁香苷
峰计算应≥ 3000。在此条件下，长梗冬青苷、紫丁香
苷对照品，供试品的 HPLC图谱见图 1。
表 1　梯度洗脱
Tab 1　Gradient elution
时间（time）/min A乙腈（acetonitrile）/% B水（water）/%
0～ 10
10～ 20
20～ 30
30～ 45
10
10→ 40
40
40→ 10
90
90→ 60
60
60→ 90
图 1　铁冬青 HPLC图
Fig 1　HPLC chromatogram of Ilex rotunda Thunb.
A.混合对照品（mixed reference）；B.供试品（sample）；1.长梗冬
青苷（pedunculoside）；2.紫丁香苷（syringin）
2.2　对照品溶液的制备
　　取紫丁香苷对照品、长梗冬青苷对照品适量，精
密称定，加 50%甲醇制成 1 mL含紫丁香苷 0.1 mg，
长梗冬青苷 0.3 mg的混合溶液，即得。
2.3　供试品溶液的制备
　　取供试品粉末（过三号筛）约 0.1 g，精密称定，置
具塞锥形瓶中，精密加入 50%甲醇 25 mL，密塞，称
定重量，超声处理 30 min，放冷，再称定重量，用 50%
甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.4　线性关系考察
　　精密称定长梗冬青苷对照品 19.78 mg、紫丁香苷对
照品 6.71 mg置 10 mL量瓶中，加 50%甲醇溶解并定
容至刻度，摇匀，即得混合对照品母液。精密量取混
合对照品母液 0.1、0.5、1、1.5、2、2.5 mL置 10 mL量
瓶中，加 50%甲醇至刻度，摇匀即得。按“2.1”项下色
谱条件进样检测，以对照品浓度 C为横坐标，峰面积
A为纵坐标，分别绘制 2种对照品的标准曲线得到的
回归方程依次为 A长梗冬青苷＝ 1.004×103C－ 974.3（r＝
0.9996）、A紫丁香苷＝ 337.4C－ 323.4（r＝ 0.9996），长梗
冬青苷、紫丁香苷依次在 0.0176 6～ 0.4416 mg·L－ 1、
0.006 71～ 0.167 75 mg·L－ 1呈良好的线性关系。
2.5　 精密度试验
　　精密吸取“2.4”项下 4号混合对照品溶液 10 μL，
重复进样 6次，记录峰面积，长梗冬青苷和紫丁香苷
对照品 RSD均为 0.1%。
2.6　稳定性试验
　　精密吸取“2.4”项下 4号混合对照品溶液和供试
品溶液 10 μL，在 0、1、2、3、6、12 h进样，记录峰
面积，考察 12 h混标液和供试品溶液稳定性，RSD分
别为 0.2%、0.1%。
2.7　重复性试验
　　取同一供试品制备供试品溶液 6份，吸取 10 μL
进样，记录峰面积，测定含量，RSD为 0.3%。
2.8　加样回收试验
　　取已知含量的供试品 6份，精密称定后置 100 mL
三角瓶中，精密吸取浓度为 0.17 mg·L－ 1的长梗冬
青苷、0.05 mg·L－ 1的紫丁香苷混合对照品溶液（精
密称定长梗冬青苷对照品 47.60 mg、紫丁香苷对照
品 12.52 mg，置 250 mL量瓶中，加入 50%甲醇溶解
并定容至刻度，摇匀即得）25 mL于各三角瓶中，按
“2.3”项下方法制备溶液，按“2.1” 项下色谱条件测定
结果，RSD分别为 0.4%、0.2%。
2.9　不同产地对含量的影响结果
　　对广西省内不同产地铁冬青的树皮进行长梗冬青
苷和紫丁香苷含量测定，检测结果见表 2。
2.10　不同药用部位对含量影响结果
　　对广西宾阳县、金秀县、鹿寨县 3个县铁冬青的
树皮、树叶、果实进行长梗冬青苷和紫丁香苷含量测
定，测定结果见表 3。
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Central South Pharmacy. July 2016, Vol. 14 No.7　中南药学 2016 年 7月 第 14卷 第 7期
表 2　不同产地铁冬青树皮含量测定结果
Tab 2　Content of pedunculoside and syringin in the bark of Ilex
rotunda Thunb. from different origins
产地
（origin）
长梗冬青苷含量
（content of pedunculoside）
/mg·g－ 1
紫丁香苷含量
（content of syringin）
/mg·g－ 1
广西北流市 7.11 3.72
广西南宁市宁明县 23.81 20.03
广西南宁市 64.71 27.64
广西玉林市 5.63 7.48
广西桂林市 47.06 24.48
广西龙州县 36.98 31.71
广西容县 15.65 29.54
广西玉林市 42.24 27.78
广西百色市 34.52 29.85
广西桂平市
广西靖西县
27.19
32.38
31.01
29.56
广西金秀县 32.67 33.00
广西武鸣县 54.42 32.17
广西南宁市兴宁区 55.75 35.28
广西邕宁县 75.47 30.54
广西南宁市 57.85 26.86
广西防城县 45.69 26.98
广西昭平县 16.26 23.52
广西荔浦县 97.70 31.33
广西宾阳县 80.88 16.43
广西金秀县 88.06 28.01
广西鹿寨县 未检出 10.91
表 3　不同药用部位含量测定结果
Tab 3　Content of pedunculoside and syringin in different parts of
Ilex rotunda Thunb. from different origins
药用部位
（medicinal
part）
产地
（origin）
长梗冬青苷含量
（content of pedunculoside）
/mg·g－ 1
紫丁香苷含量
（content of syringin）
/mg·g－ 1
树皮 广西鹿寨县 未检出 15.25
树皮 广西金秀县 0.70 17.25
树皮 广西宾阳县 53.52 18.88
树叶 广西宾阳县 未检出 0.92
树叶 广西金秀县 1.45 4.22
树叶 广西鹿寨县 未检出 3.39
果实 广西宾阳县 未检出 2.26
果实 广西金秀县 未检出 4.01
果实 广西鹿寨县 未检出 3.47
3　讨论
　　2010年版中国药典一部规定救必应中长梗冬青
苷和紫丁香苷的含量以干燥品计长梗冬青苷不得少于
4.5%（即 45 mg·g－ 1）、紫丁香苷不得少于 1.0%（即
10 mg·g－ 1）[1]。从以上 22个不同县铁冬青树皮的含
量测定结果来看，紫丁香苷含量除北流市和玉林市不
符合中国药典规定外，其他均符合要求，而超过一半
产地的长梗冬青苷含量不符合中国药典规定，因此，
产地对铁冬青树皮中长梗冬青苷的含量影响较大，可
能与当地的光照、温度、土壤、树龄等因素有关，还
需有待于进一步深入研究。
　　从广西宾阳县、金秀县、鹿寨县 3个县铁冬青的
树皮、树叶、果实进行长梗冬青苷和紫丁香苷含量测
定结果来看，产地对铁冬青树皮中长梗冬青苷含量影
响较大；铁冬青的果实和树叶中几乎不含有长梗冬青
苷，含有微量的紫丁香苷。因此，铁冬青的树叶和果
实不能替代树皮应用来提取长梗冬青苷和紫丁香苷。
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（收稿日期：2015-12-30；修回日期：2016-01-24）