全 文 ：天然产物研究与开发 NatProdResDev2009, 21:129-131
文章编号:1001-6880(2009)01-0129-03
　
　
　收稿日期:2008-02-27　　　接受日期:2008-04-02
　基金项目:国家自然科学基金(30371833);湖南省科学技术厅科
技计划项目(2007SK3030)
＊通讯作者 Tel:86-731-4327027;E-mail:lqhxy@126.com
钻地风挥发油化学成分及抗炎活性的研究
曾　光 1 ,梁清华 1＊ ,刘　韶 2 ,吴汉军 1 ,游万辉 1
1中南大学湘雅医院中西医结合研究所;2中南大学湘雅医院药剂科 ,长沙 410008
摘　要:为了研究钻地风挥发油的化学成分及其抗炎药效 , 我们采用水蒸气蒸馏法提取钻地风挥发油并用气相
色谱-质谱(GC-MS)技术分析 ,分别用佛波酯醇(PMA)或二甲苯(xylene)诱导小鼠耳肿胀 , 在致炎部位外涂钻地
风挥发油以观察疗效。从钻地风挥发油中分离并鉴定了 24个组分 , 占总峰面积含量的 96.01%, 主要由萜类 、
芳香羟类成分构成 , 分别为(E)-1, 2-亚甲二氧基 -4-丙烯基-苯(23.47%), 桉树脑 (11.503%), 芳樟醇
(9.558%), β-松油醇(9.201%), α-蒎烯(7.185%)等 , 实验显示钻地风挥发油外用可以显著抑制佛波酯醇或二
甲苯诱导的小鼠耳肿胀。
关键词:钻地风;挥发油;气-质联用;抗炎
中图分类号:R284.1;Q946 文献标识码:A
ChemicalConstituentsandAnti-inflammationEfectofthe
EssentialOilinSchizophragmaintegrifolium
ZENGGuang1 , LIANGQing-hua1＊ , LIUShao2 , WUHan-jun1 , YOUWan-hui1
1InstituteofIntegrativeMedicine, XiangyaHospital, CentralSouthUniversity;
2DepartmentofPharmaceuticalPreparationSection, XiangyaHospital, Changsha410008 , China
Abstract:Tostudythechemicalcomponentsandtheanti-inflammationeffectoftheessentialoilfromSchizophragmain-
tegrifolium, theessentialoilwasextractedbysteamdistilationandanalyzedbyGC-MStechnique.Phogrbol12-myris-
tate13-acetate(PMA)orxylenewasusedtoinduceinflammatoryontheearofmouse.24 componentswereisolatedand
identifiedwhichaccountedfor96.01% ofthetotalcontentsoftheessentialoil.Theessentialoilsignificantlyinhibited
theinflammatorythatcausedbyPMAorxylene.TheessentialoilfromSchizophragmaintegrifoliumwasmainlyconsisted
ofterpenoidandaromatichydrocarbon, andtheoilhastheefectsofanti-inflammatory.
Keywords:Schizophragmaintegrifolium;essentialoil;GC/MS;anti-inflammatory
　　钻地风 (Schizophragmaintegrifolium)为虎耳草
科钻地风属植物钻地风的根皮 ,产于湖南 、湖北 、浙
江等地。味淡 ,性凉 ,具有舒筋活络 ,祛风活血的功
能 。临床常用于治疗风湿筋骨痛 ,四肢关节酸痛 。
目前国内外未见有关钻地风化学成分及其挥发油的
报道 ,本实验用水蒸气法从湖南产钻地风中提取挥
发油 ,采用 GC-MS联用技术分析其化学成分 ,并且
初步研究了钻地风油的抗炎活性。
1　实验器材
1.1　药材
钻地风药材购于湘雅医院药剂科中药房 ,经中
南大学生药教研室鉴定为虎耳草科钻地风属植物钻
地风(Schizophragmaintegrifolium)的根皮。
1.2　实验动物
Balb/c小鼠 ,雄性 , 6 ～ 8周 ,由中南大学动物学
部提供。
1.3　仪器与试剂
HP5890GC-HP5973MS型气相色谱 -质谱联用仪
(美国惠普公司);佛波酯醇(phogrbol12-myristate13-
acetate, PMA, Biovision公司);吲哚美辛 (Sigma公
司)。其他试剂均为国产分析纯。
2　实验方法
2.1　挥发油的提取
称取钻地风药材 300g,加入蒸馏水 2400mL,参照
药典的方法[ 1] ,于挥发油提取器上提取 8h,将所得挥
发油用少量乙醚溶解 ,无水硫酸钠脱水 ,挥去乙醚 ,得
DOI :10.16333/j.1001-6880.2009.01.036
到淡黄色钻地风挥发油 0.5mL(出油率 0.167%)。
2.2　钻地风油的 GC-MS分析
2.2.1　气相色谱条件
HP-5MS色谱柱(0.25 mm×30 m, 0.25 μm),
进样口温度 250 ℃,程序升温从 80 ℃开始 ,以 5.0
℃/min升至 250 ℃,保温 15min,载气为氦气 ,进样
量 0.4μL。分流比为 30∶1。
2.2.2　质谱条件
离子源为 EI源 ,电离能量 70eV,离子源温度 230
℃,电子倍增管电压 1684V,扫描质量 m/z29 ～ 550。
2.3　钻地风挥发油的抗炎作用研究
2.3.1　钻地风挥发油对佛波酯醇(phogrbol12-my-
ristate13-acetate, PMA)诱导小鼠耳肿胀的影响
参照 Bermejo[ 2] 等的方法 , 将小鼠分为 4组 ,
PMA用丙酮溶解 ,浓度为 100 μg/mL,用移液器吸
取 20μL,在小鼠右耳内外侧各涂 10 μL,左耳涂丙
酮作为对照 。钻地风挥发油用丙酮稀释 ,在涂 PMA
前涂在小鼠右耳 ,吲哚美辛组作为阳性对照。在
PMA造模 4 h后处死小鼠 ,用直径 8 mm的打孔器
取下左右耳片 ,电子天平称重。以(右耳重量 -左
耳重量)作为肿胀度 ,计算抑制率 。以组间 t检验比
较药效有无显著性 。
2.3.2　钻地风油对二甲苯(xylene)诱导小鼠耳肿
胀的影响
参照文献 [ 3] ,将小鼠分为 4组 ,按上述同样方法
进行分组 、给药 。给药后 ,立即在每只小鼠右耳廓两
面均匀涂抹二甲苯 30μL致炎 ,左耳不涂作对照。 4h
后处死动物 ,用直径 8mm的打孔器取下左右耳片 ,分
别称重。以(右耳重量 -左耳重量)作为肿胀度 ,计算
抑制率。以组间 t检验比较药效有无显著性。
3　实验结果
3.1　钻地风挥发油化学成分分析
按上述 GC-MS条件对钻地风挥发油进行分析 ,
对总离子流图中的各峰经质谱扫描后得到质谱图 ,
通过 Xcalibur工作站数据处理系统 ,初步鉴定出 24
个化学成分 ,并按峰面积归一法定量测出它们的相
对含量 ,占总成分的 96.01%,结果见表 1。
表 1　钻地风挥发油成分鉴定表
Table1　ComponentsoftheessentialoilfromSchizophragmaintegrifolium
编号
No.
保留时间
tR(min)
化合物
Compound
分子式
Molecularformula
分子量
M
相对含量
Relativecontent
1 4.54 alpha.-Pineneα-蒎烯 C10H16 136.13 7.19%
2 4.885 Camphene樟脑萜 C10H16 136.13 3.55%
3 5.52 beta.-Pineneβ-蒎烯 C10H16 136.13 6.65%
4 5.924 beta.-Myrceneβ-月桂烯 C10H16 136.13 0.87%
5 6.375 3-Carene3-蒈烯 C10H16 136.13 3.50%
6 6.63 Bicyclo[ 4.1.0] hept-2-ene, 3, 7, 7-trimethyl-2-蒈烯 C10H16 136.13 0.40%
7 7.01 Eucalyptol桉树脑 C10H18O 154.14 11.50%
8 7.925 1, 4-Cyclohexadiene, 1-methyl-4-(1-methylethyl)-1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1, 4-环己二烯 C10H16 136.13 0.60%
9 9.326 1, 6-Octadien-3-ol, 3, 7-dimethyl-芳樟醇 C10H18O 154.14 9.56%
10 9.707 Fenchol小茴香醇 C10H18O 154.14 1.46%
11 10.627 Camphor樟脑 C10H16O 152.12 5.13%
12 11.06 Isoborneol异冰片 C10H18O 154.14 0.28%
13 11.393 Borneol冰片 C10H18O 154.14 0.98%
14 11.803 3-Cyclohexen-1-ol, 4-methyl-1-(1-methylethyl)-, (R)-(R)-L-4-松油醇 C10H18O 154.14 3.58%
15 12.391 β-menth-1-en-8-olβ-松油醇 C10H18O 154.14 9.20%
16 12.408 3-Cyclohexene-1-methanol, .alpha., .alpha.4-trimethyl-α-松油醇 C10H18O 154.14 1.20%
17 15.235 Bornylacetate乙酸龙脑酯 C12H20O2 196.15 0.85%
18 15.698 Benzene, 1, 2-(methylenedioxy)-4-propenyl-, (E)-(E)-1, 2-亚甲二氧基-4-丙烯基-苯 C10H10O2 162.07 23.48%
19 18.02 Copaene古巴烯 C15H24 204.19 0.37%
130 天然产物研究与开发　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　Vol.20
20 20.134 Benzene, 1, 2-dimethoxy-4-(2-propenyl)-1, 2-二甲氧基-4-(2-丙烯基)-苯 C11H14O2 178.1 1.65%
21 22.634
Naphthalene, 1, 2, 3, 5, 6, 8a-hexahydro-4, 7-dimethyl-1-(1-methyleth-
yl)-, (1S-cis)-(1S-顺式)-1, 2, 3, 5, 6, 8a-六氢-4, 7-二甲基-1-(1-甲
基乙)-萘
C15H24 204.19 0.55%
22 25.853 Naphthalene, 1, 2, 3, 4, 4a, 7-hexahydro-1, 6-dimethyl-4-(1-methyleth-yl)-1, 2, 3, 4, 4a, 7-六氢-1, 6-二甲基-4-(1-甲基乙基)-萘 C15H24 204.19 0.20%
23 26.281 tau.-MuurololT-萘醇 C15H26O 222.2 1.01%
24 26.542 Bicyclo[ 4.4.0] dec-1-ene, 2-isopropyl-5-methyl-9-methylene-2-异丙基-5-甲基-9-亚甲基-二环 [ 4.4.0]癸烯-1 C15H24 204.19 2.26%
3.2　钻地风挥发油对 PMA诱导的小鼠耳肿胀的影
响
小鼠耳朵在涂抹 PMA4 h后发生了显著的肿
胀 ,钻地风油在剂量为 1 ～ 2 μL/只时显著抑制了耳
肿胀 ,结果见表 2。
表 2　钻地风挥发油与吲哚美辛对 PMA诱导的小鼠耳肿胀
的抑制作用(x±s, n=10)
Table2　Efectofindomethacinandtheessentialoilfrom
Schizophragmaintegrifolium onthePMA induced
mouseearedema(x±s, n=10)
组别
Group
剂量(/耳)
Dosage
肿胀度(mg)
Edemalevel
抑制率(%)
Inhibitionrate
模型组 — 5.12±1.21 —
吲哚美辛 1 mg 2.50±1.34＊ 51.17
钻地风油 1μL 3.14±1.03＊ 38.67
钻地风油 2μL 2.84±1.22＊ 44.53
　　注:与 模型组比较 , ＊P<0.01。 Note:Comparewiththecontrol
group＊P<0.01.
表 3　钻地风挥发油与吲哚美辛对二甲苯诱导的小鼠耳肿
胀的抑制作用(x±s, n=10)
Table3　Efectofindomethacinandtheessentialoilfrom
Schizophragmaintegrifoliumonthexyleneinduced
mouseearedema(x±s, n=10)
组别
Group
剂量(/耳)
Dosage
肿胀度(mg)
Edemalevel
抑制率(%)
Inhibitionrate
模型组 - 6.16±1.01 -
吲哚美辛 1 mg 3.53±1.14＊ 42.69
钻地风油 1μL 4.14±1.06＊ 32.79
钻地风油 2μL 3.72±0.63＊ 39.61
　　注:与模型组比较 , ＊P<0.01。 Note:Comparewiththecontrol
group＊P<0.01.
3.3　钻地风挥发油对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀的
影响
小鼠耳朵在涂抹二甲苯 4h后发生了显著的肿
胀 ,钻地风油在剂量为 1 ～ 2 μL/只时显著抑制了耳
肿胀 ,见表 3。
4　讨论
4.1　本研究采用水蒸法从中药饮片钻地风中提取
挥发性成分 ,经 GC-MS分析 ,鉴定出 24个成分 ,主
要由萜类 、芳香羟类组成 ,其中(E)-1, 2-亚甲二氧
基-4-丙烯基-苯(23.47%)、桉树脑 (11.503%)、芳
樟醇 (9.558%)、 β-松油醇 (9.201%)、 α-蒎烯
(7.185%)等为主要成分。
4.2　钻地风能驱风活血 ,治筋骨 , 去风湿 ,止痛。
中药复方痹肿消汤中使用钻地风与其他祛风湿药配
伍 ,临床应用于治疗类风湿性关节炎 ,取得了良好的
效果 [ 4] 。在两种致炎剂造成的急性炎症动物模型
上 ,实验组动物的炎症程度均显著低于模型组 ,提示
钻地风挥发油对急性炎症具有良好的抑制作用。这
也许是钻地风能治疗风湿筋骨痛 ,四肢关节酸痛的
物质基础之一 。而钻地风非挥发性化学成分及其药
理活性还有待进一步的研究 。
参考文献
1　ThePharmacopoeiaCommissionofPRC(国家药典委员
会).PharmacopoeiaofthePeople sRepublicofChina(中
国药典).Beijing:ChemicalIndustryPress, 2005.128.
2　BermejoBP, AbadMM, SilvanSA, etal.Invivoandinvitro
antinflammatoryactivityofsaikosaponins.LifeSci, 1998, 63:
1147-1156.
3　XuSY(徐叔云), BianRL(卞如廉), ChenX(陈修).The
methodologyofpharmacologyexperiments(药理实验方法
学), 2ndEd.Beijing:People sMedicalPublishingHouse,
1994.719-722.
4　LiangJH(梁静华), TangT(唐涛), ZhangHX(张花先),
Clinicalinvestigationofefectsofbizhongxiaodecoction
(BZX)onrheumatoidarthritisonactivephase.BullHunan
MedUniv(湖南医科大学学报), 2000, 25:449-452.
131Vol.21 曾　光等:钻地风挥发油化学成分及抗炎活性的研究