全 文 ：【收稿日期】2011-07-28
【基金项目】安徽省优秀青年人才基金项目(2010SQRL098) ;安徽科技
学院重点学科基金项目(AKXK20101-2) ;安徽科技学院
重点建设课程项目(ZDKC1130)
【作者简介】李静(1979-) ，女，博士，讲师，从事中草药防治动物疾病方
面的研究，Email:lijing3719@ 163． com
文章编号:1005-376X(2011)12-1060-04 【论 著】
地锦粗提物对脾虚小鼠脏器指数和抗氧化能力的影响
李静1，刘力源1，任捷1，李敬文2，陈会良1，刘德义1
(1．安徽科技学院动物科学学院，安徽 凤阳 233100;2．滁州市第一人民医院，安徽 滁州 239000)
【摘要】 目的 探讨地锦粗提物对脾虚小鼠脏器指数和抗氧化能力的影响，为防治脾虚提供参考。方法 30
只昆明小鼠随机分成 3 组，每组 10 只，即对照组、脾虚组和地锦组。脾虚组和地锦组采用泻下加劳倦方法，灌服大
承气汤 30 g /(kg·d) ，并负重游泳，对照组灌服生理盐水 30 g /(kg·d) ，不游泳，持续 60 d，然后灌胃 60 d，地锦组
灌胃地锦水醇浸出液 30 g /(kg·d) ，脾虚组和对照组给予相当剂量的生理盐水。实验结束后取心、肝、脾、肺、肾，
称重并计算脏器指数，测血浆过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力，测心、肝、脾、肺、肾中超氧
化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果 脾虚组心指数和肺指数极显著增加，左肾指数显著增加，地
锦组心指数显著增加。地锦组的血浆 CAT和 GSH-Px活力显著高于脾虚组，地锦组肝和脾中的 SOD活力显著高于
脾虚组，地锦组脾、肺 MDA含量显著低于脾虚组。结论 地锦粗提物可降低脾虚小鼠的脏器指数，并可提高脾虚
小鼠抗氧化能力。
【关键词】 地锦;脾虚;脏器指数;抗氧化
【中图分类号】R284 【文献标识码】A
Effect of crude extracts of Herba Euphorbiae Humifusae on organ indexes and anti-
oxidative capability of spleen-deficiency mice
LI Jing1，LIU Li-yuan1，REN Jie1，LI Jing-wen2，CHEN Hui-liang1，LIU De-yi1
(1． College of Animal Science，Anhui Science and Technology University，Fengyang 233100，China;2． The First People＇s
Hospital of Chuzhou，Chuzhou 239000，China)
【Abstract】 Objective To study the effect of crude extracts of Herba Euphorbiae Humifusae organ index and anti-
oxidative capability of spleen-deficiency mice． Method Thirty healthy Kunming rats were randomly divided into three
groups:Control group，Spleen-deficiency group and Herba Euphorbiae Humifusae group． The Herba Euphorbiae Humifusae
group and Spleen-deficiency group adopted lapactic and exhaustion were both orally given the Dachengqi decoction with the
dose of 30 g /(kg·d)and burdened swimming for 60 days． The similar dosage of normal saline was orally given to control
group for 60 days but did not burden swimming． The Herba Euphorbiae Humifusae group was given 30 g /(kg·d)Herba
Euphorbiae Humifusae alchol decoction，while the same dosage of normal saline in Spleen-deficiency group and control
group for 60 days． At the end of the experiment，weighed body，heart，spleen，liver，lung and kidney，calculated the or-
gan indexes and tested the activity of GSH-Px and CAT in plasma，measured the contents of SOD and MDA in heart，liver，
spleen，lung and kidney． Result The spleen-deficiency group cardiac index and lung index increased，left renal index
higher than control group． Cardiac index of Herba Euphorbiae Humifusae group was increased，GSH-Px and CAT in plasma
activity higher than Spleen-deficiency group，and the content of SOD and MDA in livers and spleens were significantly high-
er． Conclusion Crude extracts of Herba Euphorbiae Humifusae can lessen organ indexes and enhance the anti-oxidation a-
bility in spleen-deficiency Mice．
【Key words】 Herba Euphorbiae Humifusae;Spleen-deficiency;Organ index;Anti-oxidation
地锦具有清热解毒、凉血止血、利湿通乳等功
效［1］，地锦亦具有较强的抗氧化能力，能够清除和抑
制自由基［2，3］。中医理论的脾虚是指消化系统功能
低下为主要表现并涉及其他系统功能低下的综合症
候群。过量或长期服用泻下药物极易伤及元气，形成
脾失健运，消瘦，神疲乏力。此外，劳倦或过量运动可
导致机体脂质过度氧化造成多余自由基积累，引起运
0601 Chinese Journal of Microecology，Dec. 2011，Vol. 23 No. 12
DOI:10.13381/j.cnki.cjm.2011.12.010
动性疲劳，中医理论认为“虚劳”也会出现脾虚症状。
脾虚临床表现以消化系统功能障碍为主，动物出现少
动、腹泻、被毛稀疏无光泽等症状。本实验采用泻下
加劳倦方法复制小鼠脾虚模型，研究地锦粗提物对脾
虚小鼠的脏器指数和抗氧化能力的影响，为地锦的开
发应用及脾虚的防治提供参考依据。
1 材料与方法
1． 1 动物模型复制和处理 50 日龄健康的清洁级
昆明小鼠 30 只，雌雄各半，由安徽科技学院实验动物
中心提供。适应饲养 1 周后，按体重相近的原则随机
分成 3 组，即对照组、脾虚组和地锦组。实验动物分
组和处理给药程序见表 1。采用大承气汤泻下加负
重游泳致劳倦过度方法造成脾虚。劳倦方法:水温为
28 ～ 32 ℃，水深为 50 cm，为保证小鼠运动强度避免
其以尾撑底休息，采用负重游泳方法，所负重量约占
体重的 6% ～ 8%，使小鼠游泳至力竭(勿死亡)。劳
倦 +泻下每天操作 1 次，小鼠出现食欲减退、泄泻、消
瘦、被毛失泽、精神不振、行动迟缓、畏寒、稀便、腹泻、
体温及体重明显下降可判断为造模成功。
表 1 实验小鼠分组和处理给药程序
组别 建模阶段(1 ～ 60 d) 给药阶段(61 ～ 120 d)
对照组 灌胃生理盐水 灌胃生理盐水
脾虚组 灌胃大承气汤 +劳倦 灌胃生理盐水
地锦组 灌胃大承气汤 +劳倦 灌胃地锦水醇浸出液
注:给药剂量均为 30． 0 g /(kg·bw·d)。
1． 2 大承气汤的制备 大黄、芒硝、厚朴、枳实购于
凤阳县华佗药店，按重量 1∶ 2∶ 1∶ 1 配伍，芒硝、厚朴、
枳实一起煎沸 30 min，大黄后下，再共煎沸 10 min。
过滤后药渣二煎 30 min，合并滤液，加乙醇再过滤浓
缩配成大承气汤(1 g生药 /mL)。
1． 3 地锦粗提物的制备 地锦采于安徽科技学院校
园，洗净、干燥后切碎。取 100 g地锦碎片，加 500 mL
水煮沸 1 h后，加乙醇 30 mL，温浸 30 min，过滤后浓
缩成 100 mL地锦水醇浸出液(1 g生药 /1mL)。
1． 4 仪器及试剂 紫外可见分光光度计(型号:
Uvmini-1240)、可调移液器(型号:50 ～ 250 μL)、TDL-
50B型低速台式离心机、STSY-2 型数显恒温水浴箱、
DY89-I 型电动玻璃匀浆机等。超氧化物歧化酶
(SOD)测定试剂盒、丙二醛(MDA)测定试剂盒、过氧
化氢酶(CAT)测定试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶
(GSH-Px)测定试剂盒均购于南京建成生物工程研究
所，生产批号:20090511。
1． 5 实验动物饲养管理 实验小鼠饲养在安静﹑舒
适的环境。小鼠全价饲料为汤山龙泉牌实验鼠颗粒
饲料。供给小鼠清洁饮用水，室温控制在(20 ±
2)℃，保证通风和一定的湿度，光照时间 12 h /d。实
验期每天更换 1 次干净垫料。
1． 6 样品采集及处理 灌胃 60 d 后，小鼠眶后静脉
丛采血抗凝，检测血浆 CAT 和 GSH-Px 活力，处死小
鼠，取心、肝、脾、肺、肾称重，计算各脏器指数。制备
10%匀浆液，取 0． 5 g左右的组织块在冰冷的生理盐
水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，用移液器量取 9 倍于
组织块质量的预冷生理盐水于烧杯中，用眼科剪尽快
剪碎组织块，将剪碎的组织倒入玻璃匀浆器中，匀浆
10 min，普通离心机 3 000 r /min 离心 10 min，取上清
液备用。测定各脏器匀浆液的 SOD和 MDA活性。
1． 7 检测方法 (1)各脏器指数测定:称体重、剖杀
取内脏。脏器指数 =脏器重(mg)/体重(g)。(2)SOD 活
性测定:采用黄嘌呤氧化酶法。(3)MDA 含量:采用
硫代巴比妥比色法。(4)GSH-Px活性测定:采用 DT-
NB法。全血中 GSH-Px 活力:每 4 μL 全血在 37 ℃
反应 5 min，扣除非酶促反应作用，使反应体系中
GSH浓度降低 1 μmol /L 为一个酶活力单位。(5)
CAT活性测定:采用可见光法。血浆中过氧化氢酶
活力:每 1 mL 血浆每秒钟分解 1 μmol 的 H2O2 的量
为一个活力单位。
1． 8 数据处理 用 SPSS 17． 0 软件对数据进行方差
分析，结果以平均数 ±标准差(x ± s)表示。
2 结果
2． 1 各组小鼠体重的测定 从表 2 可以看出，采用
泻下 +劳倦方法造模 60 d，与对照组比较，脾虚组和
地锦组的体重均显著下降，提示脾虚小鼠模型造模成
功。给药 60 d，脾虚组体重极显著低于对照组，说明
脾虚模型继续成立。地锦组体重极显著高于脾虚组。
表 2 各组小鼠体重比较(g)
组别 初始体重 建模体重(第 60天) 最终体重(第 120天)
脾虚组 22． 96 ± 1． 43 19． 87 ± 1． 37a 15． 62 ± 5． 19b
地锦组 22． 93 ± 1． 29 20． 51 ± 1． 32a 22． 13 ± 5． 15c
对照组 22． 90 ± 1． 30 21． 96 ± 1． 11 23． 19 ± 3． 30c
注:与对照组相比差异有统计学意义，aP ＜ 0． 05，bP ＜ 0． 01;
与脾虚组相比差异有统计学意义，cP ＜ 0． 01。
2． 2 各组小鼠脏器指数的测定 从表 3 可以看出，
与对照组比较，脾虚组的心指数和肺指数极显著增
加，地锦组心指数显著增加;地锦组与脾虚组比较，地
锦组肺指数极显著低于脾虚组，左肾指数显著低于脾
虚组。
1601中国微生态学杂志 2011 年 12 月第 23 卷第 12 期
表 3 各组小鼠脏器指数比较(mg /g)
组别 心指数 肝指数 脾指数 肺指数 左肾指数
脾虚组 5． 11 ± 0． 48a 47． 62 ± 10． 97 4． 48 ± 1． 27 9． 68 ± 7． 71a 7． 58 ± 2． 67b
地锦组 4． 85 ± 0． 39b 43． 76 ± 23． 04 4． 14 ± 0． 87 4． 68 ± 0． 89c 6． 12 ± 0． 78c
对照组 4． 17 ± 0． 46 50． 82 ± 7． 95 3． 55 ± 1． 15 4． 03 ± 0． 75c 6． 18 ± 0． 89c
注:与对照组相比差异有统计学意义，aP ＜ 0． 01，bP ＜ 0． 05;与脾虚组相比差异有统计学意义，cP ＜ 0． 05。
2． 3 各组小鼠血浆 CAT活力和 GSH-Px活力的测定
从表 4 可以看出，与对照组比较，地锦组 CAT 活
力显著增加，高于脾虚组。与对照组比较，脾虚组
GSH-Px活力极显著降低，地锦组 GSH-Px 活力显著
降低;地锦组 GSH-Px活力显著高于脾虚组。
表 4 各组小鼠血浆 CAT活力和 GSH-Px活力的比较
组别 CAT(U /mL) GSH-Px活力(U /mL)
脾虚组 2． 524 ± 1． 396 151． 24 ± 43． 28a
地锦组 5． 311 ± 2． 491b，c 200． 34 ± 34． 27b，c
对照组 3． 312 ± 1． 269 269． 65 ± 54． 21d
注:与对照组相比差异有统计学意义，aP ＜ 0． 01，bP ＜ 0． 05;
与脾虚组相比差异有统计学意义，cP ＜ 0． 05，dP ＜ 0． 01。
2． 4 各组小鼠脏器 SOD 活力的测定 从表 5 可以
看出，与对照组相比较，脾虚组小鼠心、肝、脾和肾中
SOD活力均极显著降低，肺中 SOD活力降低，但差异
无统计学意义;地锦组小鼠心、肝、脾和肾中 SOD 活
力均显著降低，肺中 SOD活力降低，但差异无统计学
意义。地锦组与脾虚组比较，地锦组小鼠肝和脾中的
SOD活力显著高于脾虚组，心、肺、肾的 SOD 活力差
异无统计学意义。
2． 5 各组小鼠脏器 MDA 活力的测定 从表 6 可以
看出，与对照组相比较，脾虚组小鼠心、肝、脾、肺和肾
表 5 各组小鼠脏器 SOD活力的测定结果
组别 心 肝 脾 肺 肾
脾虚组 357． 63 ± 120． 10a 226． 01 ± 99． 37a 257． 41 ± 19． 01a 225． 19 ± 32． 31 218． 86 ± 43． 25a
地锦组 375． 24 ± 111． 29b 273． 60 ± 52． 55b，c 270． 09 ± 29． 47b 240． 15 ± 34． 49 264． 95 ± 64． 15b，c
对照组 466． 56 ± 68． 46 325． 21 ± 83． 28d 428． 06 ± 193． 26 259． 14 ± 130． 92 320． 12 ± 63． 02d
注:与对照组相比差异有统计学意义，aP ＜ 0． 01，bP ＜ 0． 05;与脾虚组相比差异有统计学意义，cP ＜ 0． 05，dP ＜ 0． 01。
中 MDA 含量均极显著升高，地锦组小鼠心、肝中
MDA含量均显著升高;地锦组与脾虚组比较，地锦组
肝中 MDA 显著低于脾虚组，脾、肺、肾中 MDA 极显
著低于脾虚组。
表 6 各组小鼠脏器 MDA含量的测定结果
组别 心 肝 脾 肺 肾
脾虚组 3． 06 ± 1． 29a 4． 25 ± 3． 22a 1． 17 ± 0． 48a 1． 78 ± 1． 62a 1． 44 ± 0． 64a
地锦组 2． 49 ± 1． 36b 2． 73 ± 1． 37b，c 0． 66 ± 0． 17d 0． 48 ± 0． 28d 0． 98 ± 0． 49d
对照组 1． 59 ± 1． 04 1． 99 ± 1． 24c 0． 61 ± 0． 31d 0． 41 ± 0． 15d 1． 00 ± 0． 43d
注:与对照组相比差异有统计学意义，aP ＜ 0． 01，bP ＜ 0． 05;与脾虚组相比差异有统计学意义，cP ＜ 0． 05，dP ＜ 0． 01。
3 讨论
目前对脾虚证的动物模型研究比较广泛。陈小
野等［4］对脾虚证动物模型的规范化进行初步研究，
复制的脾虚模型有小肠吸收功能障碍、细胞免疫功能
低下和植物神经功能紊乱的改变，与临床脾虚证较为
吻合;曲长江等［5］采用大黄泻下与劳倦过度方法建
立脾虚模型，并对脾虚模型的免疫学影响进行比较研
究，结果表明劳倦过度不失为一种确切有效的、便于
长期施加的脾虚造模因素。同时，亦表明复合因素在
脾虚造模上占有绝对的优势［6，7］。本实验采用泻下
+劳倦方法复制脾虚模型，小鼠出现大、小便明显增
多、消瘦、少动、四肢无力、毛发枯涩、畏寒等“脾虚”
症状，体重、抗应激能力明显下降，模型组小鼠体重与
对照组比较差异有统计学意义(P ＜ 0． 05) ，出现的各
种症状也符合临床脾虚症状，因此判断脾虚模型建造
成功。地锦具有清除和抑制自由基的作用。本实验
中，由脾虚组小鼠心、肺指数显著增加判断，一方面与
体重下降有关，另一方面脏腑的虚损导致气血流通不
畅常常出现肾瘀血的征象［8］，脾虚组可能出现肺瘀
血，心脏代偿增强，心肌肥大等一系列症状。从实验
结果来看，地锦组小鼠血浆 CAT活性明显升高，其机
制可能是地锦粗提物中的有效成分提高了 CAT抗氧
化系统的活性，并通过增强氧自由基清除系统的功
能，从而提高机体血液抗氧化能力。与脾虚组比较，
地锦组能够提高血浆中的 GSH-Px 活性，提示地锦能
够在一定程度上改善小鼠血浆中抗氧化能力降低，帮
助恢复机体正常的抗氧化能力。地锦组肝、脾 SOD
活性较脾虚组高，差异有统计学意义，而二者肺中
SOD活性差异无统计学意义(P ＞ 0． 05) ，这反映了地
锦粗提物对抗氧化酶影响的组织差异以及酶在不同
组织中的代谢差异。地锦水煎剂粗提物能显著抑制
MDA的产生，尤其是在心、肺、肾的组织中，地锦组
2601 Chinese Journal of Microecology，Dec. 2011，Vol. 23 No. 12
MDA 含量明显低于脾虚组，差异均有统计学意义
(P ＜ 0． 01) ，并有接近对照组趋势，进一步表明地锦
粗提物具有明显的抗氧化能力。地锦在临床治疗由
于脂质过度氧化损伤引起的脾虚疾病、运动补剂的开
发、改善机体内部环境等方面具有较大的开发和应用
前景。
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