全 文 ：第 42 卷第 6 期
2013 年 6 月
应 用 化 工
Applied Chemical Industry
Vol． 42 No． 6
Jun． 2013
收稿日期:2013-03-14 修改稿日期:2013-04-23
基金项目:陕西省教育厅自然科学专项基金(2010JK814)
作者简介:杨颖(1973 －) ，女，陕西泾阳人，西安医学院实验师，从事基础医学方面研究。电话:029 － 86177465，E － mail:
wuyingdeng． yy@ qq． com
通讯联系人:张寒，女，硕士。电话:15319430255，E － mail:zhanghan11nini@ 163． com
正交设计优选白蔹甲醇提取物的提取工艺
杨颖1，梁晓莉3，孙艳平2，张寒2
(1．西安医学院 科研中心，陕西 西安 710021;2．西安医学院 药学院，陕西 西安 710021;
3．陕西步长制药有限公司，陕西 咸阳 712000)
摘 要:用甲醇提取白蔹，以大黄素的含量为指标，考察粒度、固液体积比、煎煮时间对提取效果的影响。结果表
明，最佳工艺为:粒度大小为过 20 目筛，甲醇为原药量的 8 倍，提取时间为 1 h。
关键词:白蔹;提取物;正交设计
中图分类号:R 917 文献标识码:A 文章编号:1671 － 3206(2013)06 － 1033 － 02
Optimizing process of methanol extraction of Ampelopsis Japonica
by orthogonal design
YANG Ying1，LIANG Xiao-li3，SUN Yan-ping2，ZHANG Han2
(1． The Science Research Center，Xi’an Medical University，Xi’an 710021，China;2． College of Pharmacy，Xi’an
Medical University，Xi’an 710021，China;3． Buchang Pharmaceutical Co．，Ltd． of Shaanxi，Xianyang 712000，China)
Abstract:Using methanol extracted Ampelopsis，the contents of emodin as an index，influence of particle
size，the volume ratio of solid to liquid and boiling time on the extraction effect were studied． The results
showed that the optimum conditions were:particle size than 20 mesh size，the amount of methanol as 8
times the original drug，the extraction time is 1 h process．
Key words:Ampelopsis;extract of methanol;orthogonal design
白蔹为葡萄科蛇葡萄属植物白蔹(Ampelopsis
japonica(Thumb．)Makino)的干燥块根，有清热解
毒、消痈散结、敛疮生肌等功效，在临床上用于痈疽
发背、疔疮、瘰疬、烧烫伤等症的治疗。白蔹的主要
有效成分为有机酸、多酚类、三萜、甾醇及其苷类、蒽
醌等［1］。Lee等发现白蔹的甲醇提取物及从中提取
纯化的 momordin 有抑制肿瘤细胞增生的作用［2-3］。
这提示白蔹的甲醇提取物在临床上有用于肿瘤治疗
的希望。但是目前对白蔹甲醇提取物的提取工艺未
见相关报道。因此，本实验采用正交设计，以蒽醌类
大黄素为指标成分，用 HPLC进行含量测定，优化白
蔹甲醇提取的工艺，为进一步开发和拓宽白蔹的临
床应用范围提供科学依据。
1 实验部分
1． 1 材料与仪器
大黄素标准品(中国药品生物制品鉴定所，批
号 110736—200933) ;白蔹饮片(购于西安万寿路药
材市场，经本校生药教研室老师鉴定为白蔹) ;甲
醇，色谱纯。
503N型电热恒温水浴锅;SHB-ⅢⅠ循环水式
真空泵;RE-52AA旋转蒸发仪;岛津 LC-2010AHT高
效液相色谱仪;BL310 电子天平;BS210S 分析电子
天平。
1． 2 实验方法
精密称取白蔹药材 60 g，用甲醇回流提取。过
滤，滤液用旋转蒸发仪进行浓缩。
1． 3 分析方法
1． 3． 1 大黄素标准品配制 精密称取大黄素标准
品 11． 7 mg，置 100 mL 容量瓶中，用甲醇定容。再
用移液管精密移取 25 mL 到 50 mL 的容量瓶中，用
甲醇定容至刻度，即得标准品溶液。
1． 3． 2 高效液相色谱条件 色谱柱为 Au70 Sci-
ence A7-330 柱，流动相为甲醇-0． 1% 磷酸(80 ∶
20) ，流速 1． 0 mL /min，柱温 30 ℃，检测波长
254 nm［4］。
1． 3． 3 标准曲线的绘制 精密移取大黄素标准品
溶液 1，2，3，6，8 mL到 10 mL的容量瓶中，再用甲醇
应用化工 第 42 卷
定容至刻度，摇匀。以上溶液各吸取 10 μL进样，大
黄素标准品高效液相色谱图见图 1。
图 1 大黄素标准高效液相色谱图
Fig． 1 The standard HPLC diagram of emodin
以大黄素浓度(μg /mL)为横坐标，峰面积为纵
坐标，绘制标准曲线，进行线性回归，得回归方程
y = 0． 566 4x + 0． 231 9(R = 0． 999 6，n = 5) ，大黄素
浓度在 5． 87 ～ 46． 96 μg /mL，浓度与峰面积呈良好
的线性关系。
1． 3． 4 样品分析 白蔹浓缩液用甲醇定容于
250 mL容量瓶中。精密吸取 25 mL，置于 50 mL 圆
底烧瓶中，挥去甲醇，加 0． 25 mol /L 的硫酸 30 mL，
水浴加热水解 2 h。冷却，移至分液漏斗中，用等量
三氯甲烷萃取 3 遍，合并氯仿萃取液，水浴蒸干，用
甲醇定容至 25 mL 容量瓶中［5］。吸取 10 μL 进样，
高效液相色谱图见图 2。将所得的峰面积带入回归
方程，即可计算出药材样品中大黄素的含量。
图 2 白蔹样品高效液相色谱图
Fig． 2 The HPLC diagram of Ampelopsis sample
2 结果与讨论
2． 1 白蔹提取分离正交实验
根据单因素预实验的结果，设计正交实验表，以
大黄素为指标，考察粒度大小、加甲醇量、提取时间
3 个因素，优化提取工艺条件，因素水平见表 1，正交
实验结果见表 2，方差分析见表 3。
由表 2、表 3 可知，优水平为 A1B2C3 即白蔹粉
碎过 20 目筛，加 8 倍量的甲醇水浴回流 2 次，每次
1 h。
表 1 因素水平
Table 1 Factors and levels
水平
A B C
粒度大小 /目 甲醇与药量之比 /倍 提取时间 /h
1 20 10 2． 0
2 30 8 0． 5
3 40 6 1． 0
表 2 正交实验结果
Table 2 The results of orthogonal experiment
实验号 A B C
大黄素平均含量(n = 3)
/(μg·g － 1)
1 1 1 1 37． 547
2 1 2 2 27． 420
3 1 3 3 33． 274
4 2 1 2 25． 927
5 2 2 3 40． 218
6 2 3 1 29． 845
7 3 1 3 31． 398
8 3 2 1 32． 865
9 3 3 2 25． 384
K1 98． 241 94． 872 100． 257
K2 95． 990 100． 503 78． 731
K3 89． 647 88． 503 104． 89
R 8． 594 12． 000 26． 159
表 3 方差分析
Table 3 Analysis of variance
方差来源 离均差平方和 自由度 方差 F值 结果
A 13． 24 2 6． 62 3． 12
B 24． 03 2 12． 02 5． 65 *
C 129． 90 2 64． 95 30． 56 ＊＊
误差 e 38． 25 18 2． 13
注:F0． 05(2，18)= 3． 55，F0． 01(2，18)= 6． 01，* 有显著影响，
＊＊有极显著性影响。
2． 2 正交实验结果验证
精密称取 3 份白蔹药材，按正交优选的最佳提
取工艺进行提取，平行制备 3 份样品溶液，进样测
定，结果见表 4。
表 4 白蔹药材中大黄素的含量
Table 4 The content of emodin in Ampelopsis
实验号 大黄素含量 /(μg·g － 1)
1 40． 154
2 41． 152
3 39． 271
由表 4 可知，正交实验优选出的最佳提取工艺
提取时，药材大黄素平均含量为 40． 192 μg /g，工艺
稳定可靠。 (下转第 1042 页)
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应用化工 第 42 卷
所示，线性方程 I = 0． 003 7 c + 0． 013 9，相关系数
0． 997，检测限 1． 0 × 10 －6 mol /L(S /N = 3)。
3 结论
采用电化学方法制备了聚亚甲基蓝掺杂二氧化
硅纳米复合材料修饰玻碳电极，详细研究了它的电
催化能力，并运用多种方法对其进行了表征和分析。
相对于裸玻碳电极，纳米复合膜修饰层能更有效地
促进 NADH和电极之间的电子转移，而且具有良好
的可重复性、重现性和稳定性。研究表明，作为一种
导电聚合物纳米复合材料在构建传感器方面有较好
的应用前景。
参考文献:
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1959．
(上接第 1034 页)
3 结论
(1)白蔹中含有大黄素、芦荟大黄素、大黄素-8-
O-β-D-吡喃葡萄糖苷等成分。苷类成分在酸性条件
下易水解，因此本文采用甲醇回流加酸水解的方法
来提取大黄素，大黄素的含量确有很大提高。
(2)白蔹甲醇提取物有抗肿瘤的活性，这提示
白蔹的甲醇提取物有望应用于临床肿瘤的以大黄素
为含量检测指标，通过正交实验优化白蔹甲醇提取
物的最佳提取工艺为:白蔹粉碎过 20 目筛，加 8 倍
量的甲醇水浴回流 2 次，每次 1 h。此工艺提取的大
黄素含量较高，工艺稳定可行，可为白蔹应用于临床
提供一定的数据参考。
参考文献:
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应用化工
———中国科技核心期刊
2401