全 文 ：Vf o
.
7 N o
.
1
天 然产物研究与开发
N AT U R AL R PO U C DT R E SE AR C H AN DE DE VL O P ME N T 一九九五年三月
白鼓单宁化学成分的研究
俞 丈胜 陈新民 杨
( 中国科学院成都生物研究所
磊 李宇飞
成都 6 1 0 0 4 1 )
摘 要 从白蔽 Am p el P os 抬 担p oi nca (T h n ub. )a Mi k n o的乙酸乙酷提取物中分离出 5个单
宁化合物 . 经光谱分析和化学方法鉴定 ,它们为没食子酸 ( ga il o ac id , 1 ) , 1 , 2 , 6 一三氧一没
食子酞基一卜D 一毗喃葡萄糖 ( l , 2 , 6一 t r i一 o 一 s a l lo y l一压 D 一目u e o py r a n os id e , 2 ) , l , 2 , 3 , 6一四氧一没
食子酸基一卜D 一毗喃葡萄糖 ( l , 2 , 4 , 6 一 t e t r a 一。 一 , l一o y l一压 n 一 g x u e o p y r a n os 记。 , s ) , l , 2 , J , 6一四
氧一没食子酞基一卜 D 一毗喃葡萄糖 ( l , 2 , 月, 6一 et t r a 一。 一 sa l xo y l一卜 -n s lu co p y r a n os 记 e , 月) , l , 2 , 3 ,
刁, 6一五氧一没食子酸基一卜 D 一毗喃葡萄糖 ( l , 2 , 3 , 刁, 6 一详 n at 一 as zlo y l手一 D 一 s lu co p y r a n os id e , 5 ) ,
1~ 5 均为首次从该属植物中分离得到 。
关键词 白蔽 ,没食子酸 ,没食子单宁 ,抗毒肝素 ,抗脂质过氧化
葡萄科植物白蔽又名白根 、五爪藤等 , 具有清热解毒 、 消肿止痛的功效 。 主治支气管炎 、 淋
巴结结核 、 烧烫伤 、 跌打损伤等病 1[] , 其化学成分未见报导 。 为充分开发利用白蔽这种药用植
物 ,我们对其单宁化学成分进行了研究 。 从其乙酸乙酷提取物中分离出 5 个单宁化合物 。 通过
波谱分析及化学方法 ,鉴定它们为没食子酸 ( 1 ) , 1 , 2 , 6一三氧一没食子酞基一冬D 一毗喃葡萄糖 ( 2 ) ,
l
,
2 , 3
,
6
一四氧一没食子酞基书一 D 一毗喃葡萄糖 ( 3 ) , l , 2 , 4 , 6一四氧一没食子酞基一压D 一毗喃葡萄糖
( 4 ) 1
,
2
,
3
,
4
,
6
一五氧一没食子酞基 一压D 一毗喃葡萄糖 ( 5 ) 。 据文献报导 : 5 具有很强的抗脂质过氧
化的活性图 , 1 , 2 , 3 , 5 具有很强的抗毒肝素的活性 , 其活性大小为 5> 3> 2 > 1 。 这种抗毒肝素
的活性归用于没食子酞基上的三个邻位轻基 ,这种轻基越多 ,其活性越强阁 。
1 实验部分
红外光谱用 N lc O L E T M X 一 1型仪器测试 ;紫外光谱用岛津 U v 一 2 40 型仪器测试 ; F D 一 M S 用
M
一
S OA 型仪器测试 ;元素分析用 aC lor E R B A l l 0 6 型仪器测试 ;高效液相色谱 ( H P L )C 在w at er s
9 9 0 型仪器上进行 , 流动相 : S ; 0 . 0 2M K H Zp o 。一 H 3 oP , , S : 乙醇 一乙酸乙醋 ( 2 : 1 ) ,溶剂 A : 5 1 : 5 2
一 4 : 1 ;核磁共振谱用 BR U K E R A M 一 4 0 型和 B R U K E R A C 一 3 0 型仪器测试 , 溶剂 : 氖代丙酮加
氖代水 , T M S 为内标 。 酸水解方法 : 取样 品约 s m g 溶于 l m l 6%的盐酸 中 , 于 80 ℃水浴中保持
7h ;纸层析展开剂 ,溶剂 B : 乙酸乙醋一毗咤 一水 ( 6 : 4 : 3 ) ,与标样对照 。 样品于 1 9 8 9 年 9 月采于
华西 医科大学药用植物园 。 原植物经华西 医科大学药学院岳松键教授鉴定为葡萄科蛇葡萄属
白蔽 A m ep lo p s is 担p o n i e a ( T h u n b . )协 k i n o 。
. 国家自然科学基金资助项目 ,研究生论文
收稿日期 : 1 9 9 1 年 1 0 月 名日
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6犯旅/浅、 3
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R
GG HG HH
1
.
1 提取与分离
取 白蔽干叶 64 0 9, 用 70 %丙酮水高速
粉碎提取二次 , 回收丙酮 后得到约 Z 0 0 0ml
水溶液 。 然后分别用 乙醚 ( 6 5 oml x 1 0 ) , 乙
酸 乙醋 ( 9 0 0m一x 1 0 ) , 正 T 醇 ( g o om l x 一。 )
萃取 ,分别得 到乙醚提取物 16 . 9 9 , 乙 酸乙
酷提取物 16 . 89 ,正丁醇提取物 “ . 59 ,水提
取物 20 . 69 ,共计 “ . 59 ,提取率 10 . 2% 。 取
乙酸乙酷提取物 1 5 . 25 进行 T o y o p e a r l H w -
4 0 ( C oa r se )柱层析 , 乙醇水体系洗脱 。 30 %
乙醇水洗脱物经 S eP h ad ex L H 一 20 柱层析分
离纯化后得 1 ( I O0m g ) ; 50 肠乙醇水洗脱物
H `玩H`器少一 C (” H
G二 一迎
R
,
R
2
经 se p h a d e x L H 一 2 0 柱层 析多次分离纯化后得 2 ( 8 0m s ) , 3 ( 1 0 0m g ) ; 7 0% 乙醇水洗 脱 物 经
eS ph a d e x L H
一
2 0 柱层析多次分离纯化后得到 4 ( 1 o om s ) , 5 ( s o m g ) 。 分离中均用部分收集仪收集
洗脱液 , 每份 1 0ml 。 用紫外固定波长吸收 ( 2 8 0n m )及高效液相色谱检测 。
1
.
2 鉴 定
化合物 l : F D 一M s m / z ; 1 7 0〔M〕+ ,推测其分子式为 c : H ` 0 5 。 与没食子酸标样对照进行 H p L C
测 试 ,两者保持时间一致 (溶剂 A ,保留时间 t ; ~ 5 . 45 m in 。 没食子酸标样 t R 一 5 . 咬4 m i n ) 。 `H -
N M R p pm ; 7
.
1 0 ( ZH
, s )
. ` 3 C一 N N R : 见表 2 。 I R 久盟二e m 一 ` : 3 4 0 0 (宽峰 ) , 1 6 9 0 、 1 6 1 0 、 1 5 4 0 、 1 4 5 0 、
1 3 2 5
、
12 2 0 (宽峰 ) , 1 0 3 0 。 以上数据与没食子酸一致 。
化合物 2 : 无定形粉末 , 元素分析 , c : 7H Z . o ,。 · ZH Zo , 计算值 ( % ) , e 咬a . 2 , H魂. 1 7 ; 实验值
(% )
: C 48
.
5 9
, H 4
.
2 7
。 酸水解产物经 H P L C检出没食子酸 (溶剂 A , t R 一 5 . 49 而 )n , 经纸层析检
出葡萄糖 (溶剂 B) 。 其氢谱及碳谱显示三个没食子酞基及一个 日构型的毗喃葡萄糖残基 。 葡萄
糖残基 1 , 2 , 6 位碳 , 氢的化学位移明显向低场移动说 明其为 1 , 2 , 6 位三取代 。 ` H 一 N M R P m ;
7
.
1刁, 7 . 1 1 , 7 . 0 6 (各 ZH , s ,没食子酞基氢 ) ,葡萄糖残基的氢谱数据见表 1 。 ` 3 e 一N M R : 见表 2 。 IR
久黑 e m 一 ’ : 3理0 0 (宽峰 ) , 1 7 0 0 、 1 6 1 0 、 1 5 J o 、 z魂5 0、 1 3 5 0 (宽峰 ) , 1 2 2 0 (宽峰 ) , 2 0 7 0 、 2 0 5 0 。 波谱数据
与 1 , 2 , 6一三氧一没食子酞基 一压 D 一毗喃葡萄糖的文献值一致闭 。
表 1 化合物 2 , 3 , 刁, 5 糖残基的 ’ H 一N M R
(气p , , 刁o oM H z a e e lo n 。 一 d 。+ n 2 0 ) J 值 (H z )
H一 l H一 2 H 一 3 H一 4 H一 5 H一 6 H一 6
2 5
.
9 4d 5
.
2 6d d 4
.
o l t 3
.
6 9 t 3
.
9 5 4
.
6 3 d d 4
.
4 l d d
J = 8
.
4 J二 8 . 4 , 9 . 3 J = 9 . 3 J = 9 . 3 m J = 1 2 . 0 J = 5 . 3 , 1 2 . 0
3 6
.
1 4d 5
.
4 8d 5
.
6 9 t 4
.
0 9 t 4
.
1 7 d d d 4
.
6 6 d d d 4
.
5 1d d
J二 8 . 3 J = 8 . 3 , 9 . 5 J = 9. 5 J = 9 . 5 J一 1 . 7 , 4 . 7 , J = 1 . 7 , 12 . 3 J = 4 , 7 , 1 2 . 3
9
.
5
4 6
.
1 3d 5
.
4 8d 4
.
4 l t 5
.
4 5 t 4
.
3 6d d d 4
.
5 9 d d 4
.
2 8 d d
J = 8
.
4 J = 8
.
4
,
9
.
5 J = 9
.
5 J = 9
.
5 J二 1 . 7 , 5 . 1 J一 1 . 7 , 1 2 . 4 J = 5 . 1 , 1 2 . 4
9
.
5
5 6
.
2 8 d 5
.
6 2d 6
.
0 I t 5
.
6 6 t 4
.
5 5 4
.
5 7d d 4
.
3 1d
J = 8
.
4 J = 8
.
4
,
9
.
5 J = 9
.
5 J = 9
.
5 n 1 J = 1
.
7
,
12
.
8 J = 5
.
1
,
1 2
.
8
, 用 3 00 M H z 仪器测试
V o l
. 了 NO . 7 l
表 2化合物 l ~5的 ” c- N NR
(嘛 , , 7 5 或 1 0 0 MH z , ace ot n , d . + n : o , T M s )
1 2 3 」 5
没 C一 1产 1 2 0 . 0 1 ] 9 · 7 1 2 9 . 5 1 1 9 . e
食 1 2 1, 0 22 0 . 7 1 2 0 · 0 1 2 0 . J ( Z e ) 一x9 . 9 ( Z e )
子 1 2 2 . 0 1 2 1· ] 1 2 1 . 2 J Zo . z
酞 ] 2 1 . 5 1 2 1 . 0
基
C一 2 , , 6` 109一 )薰i兹 :.l0{蒸 黑: ’ .09 8 `’ 。c)
C一 3 , , 5` z魂5 . 0 ( Ze ) 1 4 5 · 9 1刁5 · 8 ( 4 e ) 1 4 5 . 8 (刁e ) l刁5 · 8 ( Z c )
l 刁6· o (刁c ) 1刁6 . (刁e ) . 2刁6 . 0 ( Ze ) 1 4 6 · 0 ( 6 c )
1 4 6
.
2 ( ZC )
C一 4 , 1 3 8 . 7 1 3 8 . 9 1 3 8 . 8 1 3 8 . 9
1 3 8
.
0 1 3 9
.
0 1 3 9
.
2 ( ZC ) 1 3 9
.
8 1 3 9
.
2 ( 3 C )
1 3 9
.
5 ] 3 9
.
8 1 3 9
.
2 ( ZC ) 1 3 9
.
5
一 C O : 一 竺 蒸 薰 蒸 揍…
糖 l 93 . 5 9 3 . 5 9 3 . 2 9 3 . 4
2 7 3
.
8 7 1
.
7 7 3
.
8 7 1
.
9
3 7 5
.
0 7 5
.
8 7 3
.
3 7 3
.
5
4 7 0
.
9 6 9
.
3 7 1
.
5
,
6 9
.
5
5 7 5
.
8 7 6
.
2 7 4
.
2 7 4
.
0
6 6 4
.
0 6 3
.
9 6 3
.
0 6 3
.
0
化合物 3 : 无定形粉末 , 元素分析 , e 。 。H Z o o : : · H Zo ,计算值 ( % ) , e s o . 6 2 , H 3 . 7 2 ;实验值
( % )
: e 5 0
.
6 8
,
H 4
.
0 2
。 酸水解产物经 H p L c 检出没食子酸 (溶剂 A , t R = 5 . 5 0m i n ) ,经纸层析检
出葡萄糖 (溶剂 B ) 。 氢谱及碳谱显示四个没食子酞基及一个 日构型的毗喃葡萄糖残基 。 碳谱数
据证明葡萄糖残基为 一, 2 , 3 , 6 位四取代 。 `H 一N M R p p m : 7 . 0 1 、 7 · 0 8 、 7 . 0 9 、 7 . 1 8 (各 ZH , s , 没食
子酞基氢 ) . 葡萄糖残基的氢谱数据见表 1 。 ` 3C 一N M R : 见表 2 。 IR 久欲 c m 一 ` : 3 d 0 0( 宽峰 ) , 1 7 0 5 、
1 6一。 、 1 5 3 0 、 1` 5 0 、 1 3 5 0 (宽峰 ) , 1 2 0 0 (宽峰 ) , 1 0 9 0 、 1 0 3 0 。波谱数据与 1 , 2 , 3 , 6一四氧一没食子酞基
冬D 一毗喃葡萄糖的文献值一致 4[] .
化合物 魂: 无定形粉末 , 元素分析 , e : 。 H : 。 0 2 2 · H Zo , 计算值 ( % ) , C 5 0 · 6 2 , H 3 . 7 2 ; 实验值 :
c5 o
.
4 0
,
H 4
.
26
。 酸水解产物经 H P L C 检出没食子酸 (溶剂 A , t R一 5 . 4 4m in ) , 经纸层析检出葡萄
糖 (溶剂 B ) 。 氢谱及碳谱同化合物 4 相似 , 只是碳谱数据证明葡萄糖残基为 1 , 2 , 4 , 6 位四取
代 。 ` H 一 N M R p p m : 7 . 1 3 、 7 . 1 6 、 7 . 2 0 、 7 · 2 2 (各 ZH , s ,没食子酞基氢 ) 。 葡萄糖残基的氢谱数据见
表 1。 ` 3 c 一 N M R : 见表 2 。 波谱数据与 l , 2 , 4 , 6 一四氧一没食子酸基一压D 一毗喃葡萄糖的文献值一
致 [`1 .
V o l
。
7 N o
-
化合物 5 : 无定形粉末 , 酸水解产物经 H P L C 检出没食子酸 (溶剂 A , t : 一 5 . 4 4m 初 ) , 经纸层
析检出葡萄糖 (溶剂 B) 。 其氢谱及碳谱显示五个没食子酸基及一个 日构型的五取代毗喃葡萄
糖残基 。 故确定其分子式为 c , : H , 2 0 : 。 。 ` H一 N M R p p m : 6 · 9 7 、 7 . 0 0 、 7 . 0 5 、 7 . 0 5 、 7 . 2 4 (各 ZH , s ,没
食子酞基氢 ) 。 葡萄糖残基的氢谱数据见表 l 。 ` 3 C一 N M R : 见表 2 。 波谱数据与 1 , 2 , 3 , 4 , 6一五氧
一没食子酞基一压D 一毗喃葡萄糖的文献值一致〔幻 。
参 考 文 献
《全国中草药汇编 》 , 人民卫生出版社 , 1 975 , 30 1
T
.
o k时 a 时 al . C he m . hP a r m . B u l l . , 19 8 3 , 3 1 ( 5 ) : 16 2 5
H
.
H i幻 n o 已 公 . J . o f F t h n e p h a r m a co lo g y , 1 9 8 5 , 1 4 : 1 9
T
.
aT n a k
a 时 a l . Ph yOtC h e m is t r y
,
1 9 8 3 , 2 2 ( 1 1 ) : 2 5 7 5
E
.
A
.
H a d d o心 k 材 时 . J . C he m . S心e . eP r ki n T ar n s
.
1
,
1 9 8 2 子2 5 1 5
S T U D I E S O N T H E T A N N IN C O N S T IT U E N T S O F
A M P E L O P S IS J A P O N I C A
Y u w e n s h e n g
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A加 t r a e t iF v e at n n i n e o m P o u n d s we er 主s o l a t ed f r o m th e A e O E t ex t扭 e it o n o f A m pe loP s is aj P o n i ca
( T h u n b
.
) M a k i n o
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li e a e id ( 1 )
.
1 , 2
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6
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g a l l o y l
一压D 一g l u e o Py ar n仍 id e ( 2 ) , 1 , 2 , 3 , 6一 t e t r a 一 0 一 g a l lo y l一压 D 一 g l u e o Py r a -
n困d e ( 3 ) , 1 , 2 , 4 , 6一 t e t r a 一 0 一 g a l loy l一压D 一 g l u e oP y r a n os id e , ( 4 ) , 1 , 2 , 3 , 4 , 6一 Pe n t a 一 0 一 g a l l o y l一压D 一 g l-u
e op y r a n os id e ( 5 )
.
K e y w o r d s A m pe l oP s is aj P o n ie a
,
t a n n i n
,
g a l l o at n n i n
, a n t ih e Pa t o t o x i e
,
l i Pi d ep r o x i d a ti o n
.