免费文献传递   相关文献

不同产地倒地铃挥发油化学成分GC-MS分析



全 文 :(总 )广西中医药 2016年 6月第 39卷第 3期
基金项目:广西自然科学基金项目(编号:2014GXNSFAA118213);广西高校科学技术
研究项目(编号:ZD2014071)
*通信作者,副教授,主要从事中药、民族药化学成分及质量控制研究;E-mail:weijian-
hua607@tom.com
倒地铃(Cardiospermum hali-
cacabum L.)为无患子科植物,是广
西壮族民间特色药材,具有清热、
利尿、凉血、去瘀、解毒之效,多用
于治疗糖尿病、肺炎、黄疸、淋病、
疔疮、湿疹等[1-2]。近年来,倒地铃
的研究在国内外引起广泛关注。多
项研究表明倒地铃具有良好的抗
氧化、抗疟疾、抗炎作用[3-7]。本课
题组对其化学成分进行初步研究,从
中分离了 18个化合物[8-10]。但目
前对倒地铃挥发油化学成分的分析
尚未见有文献报道,因此,本实验对
倒地铃的挥发油化学成分进行研
究,旨为进一步研究与开发倒地铃
提供科学依据。
1 实验材料
1.1 仪器 HL -(5 +1)/50MPa -
IIAQ 超临界流体(CO2)萃取装置
(杭州华黎泵业有限公司);Agilent
6890N-5973N 型气相-质谱联用
仪(美国安捷伦科技有限公司)。
1.2 药村 倒地铃药材于 2014
年分别采自广西柳州、南宁,经广
西中医药大学中药鉴定教研室廖
不同产地倒地铃挥发油化学成分
GC-MS分析
吴 玲 蒙秋艳 莫惠雯 韦建华 *
广西中医药大学 530001 南宁市明秀东路 179号
摘 要 目的:研究不同产地倒地铃挥发油的化学成分。方法:采用
超临界 CO2萃取法提取挥发油,用气相色谱-质谱联用法分析鉴定其化
学成分,用面积归一化法确定其相对含量。结果:南宁产倒地铃挥发油共
鉴定出 21 个化合物,占总挥发油的 90.82%,主要成分为棕榈酸
(27.50%)、亚麻酸(11.19%)、甲氧基肉桂酸乙酯(6.96%)、亚油酸
(5.05%),烷烃类化合物占的比重为 23.74%;柳州产倒地铃挥发油共鉴定
出 25个化合物,占总挥发油的 89.4%,主要成分为 1-二十六(碳)烯
(12.71%)、甲氧基肉桂酸乙酯(8.53%)、棕榈酸甲酯(6.17%)、叶绿醇
(5.90%)、棕榈酸乙酯(5.79%),烷烃类占的比重为 37.92%。结论:超临界
CO2萃取法提取得到的南宁产地倒地铃主要成分以棕榈酸、亚麻酸、甲氧
基肉桂酸乙酯和亚油酸为主,柳州产地倒地铃主要成分以 1-二十六(碳)
烯、甲氧基肉桂酸乙酯、棕榈酸甲酯、叶绿醇和棕榈酸乙酯为主,两种不同
产地倒地铃的挥发性成分及含量有较大的差异。
关键词 倒地铃;挥发油;超临界 CO2萃取法;GC-MS
中图分类号:R284.1 文献标识码:A
文章编号:1003-0719(2016)03-0073-04
·中药方剂·宁中医药大学学报,2008,10(4):
107-108.
[2]全国慢性支气管炎临床专题会议.慢
性支气管炎临床诊断及疗效判定标
准[J].中华结核和呼吸杂志,1980,3
(1):61.
[3]郑筱萸.中药新药临床研究指导原则
(试行)[M].北京:中国医药科技出
版杜,2002:55.
[4]国家中医药管理局.中医病证诊断疗
效标准[S].南京:南京大学出版社,
1994:59.
[5]中华人民共和国职业分类大典(修
订)[M].北京:中国劳动社会保障出
版杜,2015:2.
[6]丛雅静. 我国城乡收入差距与居民
消费需求研究——基于 ECM 模型
[J].调研世界,2014(6):11-16.
[7]高文革,曹书颖,冯华,等. 石家庄市
大中型企业慢性支气管炎发病情况
调查[J]. 河北医药,2009,31(9):
1125-1127.
[8]江毅芳,乐家振,杨海斌.慢性咳嗽的
病因分布及其治疗研究[J].临床肺
科杂志,2011,16(9):1359-1360.
[9]洪敏俐,曾奕明,陈晓阳,等.闽南地
区不明原因慢性咳嗽病因分布调查
[J]. 中国医师杂志,2011,13(7):
998-1000.
[10]许西琳,刘冬,季宏志.应用临床路
径规范社区上呼吸道感染与急性
气管原支气管炎抗生素合理使用
的研究[J].临床和实验医学杂志,
2013,12(16):1323-1324.
[11]赖克方,李斌恺,王法霞,等.慢性咳
嗽患者的诊疗现状调查[J].国际呼
吸杂志,2011,31(9):645-647.
(2015-11-26 收稿/编辑 陈明伟)
·73·233
(总 ) 广西中医药 2016年 6月第 39卷第 3期
月葵高级实验师鉴定为无患子科
植物倒地铃(Candiospermum hali-
cacabum L.)的全草。
2 方法与结果
2.1 挥发油的提取 倒地铃阴
干、切碎、粉碎,过 10目筛,分别称
取柳州产样品 40 g和南宁产样品
60 g,用 CO2 超临界萃取装置提
取。提取条件:萃取釜 25 MPa,
41 ℃;分离釜Ⅰ4 MPa,35 ℃;分
离釜Ⅱ 5 MPa,25 ℃;萃取 1 h。柳
州产倒地铃得透明粘稠油状物
0.87 g,收率为 2.18%;南宁产倒地
铃得透明粘稠油状物 1.78 g,收率
为2.97%。
2.2 气相色谱-质谱联用分析条件
2.2.1 气相色谱条件
2.2.1.1 柳州产倒地铃气相色谱
条件 色谱柱为 HP-5MS 毛细管
柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm),载气
为氮气,流速为 1.0 ml/min,进样量
为 0.4 μl,倍增器电压 1 294 V,接
口温度为 280 ℃;柱温:初始温度
80 ℃,保持 1 min;以 10 ℃/min升
至 180 ℃,保持 2 min;以 15 ℃/min
升至 230℃,保持 3 min;以 15℃/min
升至 280 ℃,保持 2 min;再以
20 ℃/min升至 280 ℃,保持 2 min。
2.2.1.2 南宁产倒地铃气相色谱
条件 色谱柱为 HP-5MS 毛细管
柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);载气
为氮气,流速为 1.0 ml/min,进样量
为 0.4 μl,倍增器电压 1 294 V,接
口温度为 280 ℃;柱温:初始温度
90 ℃,保持 1 min;以 8 ℃ /min 升
至 180 ℃,保持 2 min;以 3 ℃/min
升至 200℃,保持 4 min;以 4 ℃/min
升至220℃,保持2min;再以20℃/min
升至 280 ℃,保持 2 min。
2.2.2 质谱条件 质谱接口温度
280 ℃,电离方式 EI,电子能量 70
eV,离子源温度 230 ℃,四极杆温
度 150 ℃,加速电压 2 019 V,扫描
范围 45~450 amu,扫描间歇为每
秒 2.94次,溶剂延时 3 min。
2.3 结果与成分分析 按上述测
定条件对两种样品进行 GC- MS
分析鉴定,所得色谱信息和质谱信
息经计算机数据处理系统进行自
动检索和人工检索,并进行对照和
解析,其中柳州产倒地铃共鉴定出
25 个化合物,占总挥发油的
89.4%,主要成分(相对峰面积大于
5%)为 1-二十六(碳)烯(12.71%)、
甲氧基肉桂酸乙酯(8.53%)、棕榈
酸甲酯(6.17%)、叶绿醇(5.90%)、
棕榈酸乙酯(5.79%),烷烃类占的
比重为 37.92%,结果见表 1。南宁
产倒地铃挥发油鉴定出 21 个成
分,占总挥发油的 90.82%,主要成
分(相对峰面积大于 5%)为棕榈酸
(27.50%)、亚麻酸(11.19%)、甲氧
基肉桂酸乙酯(6.96%)、亚油酸
(5.05%),烷烃类化合物占的比重
为 23.74%。结果见表 2。
表 1 柳州产倒地铃挥发油的化学成分分析结果
序号 tR(min) 化合物 分子式 相对含量(%)
1 5.1550 芳樟醇 C10H18O 2.12
2 9.3406 十四烷 C14H30 1.62
3 10.4328 β-瑟林烯 C15H24 0.89
4 10.5495 白菖烯 C15H24 0.86
5 10.5871 十五烷 C15H32 2.61
6 11.1415 3-己烯-1-醇苯甲酸 C13H16O2 2.74
7 11.8461 十六烷 C16H34 3.24
8 12.3922 3-亚丁基-1(3H)-异苯并呋喃酮 C12H12O2 1.37
9 12.4506 Α-毕橙茄醇 C15H26O 1.66
10 13.3927 十七烷 C17H36 3.51
11 13.5762 甲氧基肉桂酸乙酯 C12H14O3 8.53
12 14.7518 十八烷 C18H38 3.86
13 14.9144 植烷 C20H42 2.43
14 15.8440 二十烷 C20H42 4.52
15 15.9274 十九烷 C19H40 2.36
16 16.5736 棕榈酸甲酯 C17H34O2 6.17
·74· 234
(总 )广西中医药 2016年 6月第 39卷第 3期
表 2 南宁产倒地铃挥发油化学成分分析结果
序号 tR(min) 化合物 分子式 相对含量(%)
1 3.7624 芳樟醇 C10H18O 0.51
2 9.3319 十五烷 C15H32 1.40
3 10.4574 3-己烯-1-醇苯甲酸 C13H16O2 2.17
4 10.7744 十六烷 C16H34 1.81
5 12.0293 3-亚丁基-1(3H)-异苯并呋喃酮 C12H12O2 1.64
6 12.2492 十七烷 C17H36 3.03
7 12.3463 2,6,10,14-四甲基十五烷 C19H40 2.50
8 13.4201 甲氧基肉桂酸乙酯 C12H14O3 6.96
9 14.1381 十八烷 C18H38 2.57
10 15.1278 6,10,14-三甲基-2-十五烷酮 C18H36O 1.67
11 16.3309 十九烷 C19H40 2.63
12 16.9713 棕榈酸甲酯 C17H34O2 1.58
13 17.974 棕榈酸 C16H32O2 27.50
14 18.6273 棕榈酸乙酯 C18H36O2 3.09
15 18.7308 二十烷 C20H42 2.56
16 21.3571 二十一烷 C21H44 3.39
17 21.7969 叶绿醇 C20H40O 4.16
18 22.5279 亚油酸 C18H32O2 5.05
19 22.7349 亚麻酸 C18H30O2 11.19
20 23.3429 亚油酸乙酯 C20H36O2 2.57
21 27.2241 1-二十三碳烯 C23H46 2.85
(续表 1)
序号 tR(min) 化合物 分子式 相对含量(%)
17 16.7946 棕榈酸乙酯 C18H36O2 5.79
18 17.5241 二十烷 C20H42 1.86
19 17.6242 11,13-二甲基-12-十四碳烯-1-醇醋酸酯 C18H33O2 2.93
20 17.8326 1-二十六(碳)烯 C26H52 12.71
21 18.2995 叶绿醇 C20H40O 5.90
22 18.4079 (Z)-13-二十二碳六烯酸 C20H38O2 3.80
23 18.8874 二十四烷 C24H50 1.39
24 19.6753 1-氯二十一碳烷 C21H41Cl 4.31
25 20.1922 环二十四烷 C24H48 2.16
3 讨 论
研究结果表明,两种不同产地
倒地铃挥发油的化学成分有较大
差别,其中柳州产倒地铃共鉴定出
25 个化合物,占总挥发油的
89.4%,烷烃类占 37.92%;南宁产
倒地铃共鉴定出 21 个化合物,占
总挥发油的 90.82%,烷烃类占
23.74%;其中两个产地的倒地铃共
有化合物只有 12种,并且含量相
差较大,提示植物挥发油的化学成
分以及含量高低与其生长环境有
着密切关系。
甲氧基肉桂酸乙酯的含量在
·75·235
(总 ) 广西中医药 2016年 6月第 39卷第 3期
两个产地的倒地铃中差不多,其中
柳州产地为 8.53%、南宁产地为
6.96%;药理实验证明,甲氧基肉桂
酸乙酯具有抗促癌活性,可在肿瘤
发生的启始阶段和促进阶段分别
发挥阻抑作用,具有化学防癌的功
效,是一种安全性强、防癌效果好
的天然化合物[11]。
叶绿醇的含量在两个产地的
倒地铃中分别为 5.90%(柳州)、
4.16%(南宁),叶绿醇简称“叶醇”,
亦称“植物醇”,是植物叶绿素分子
上一个支链,属于链状双萜类物
质,是一种含有多支链的脂肪醇。
叶绿醇及其代谢产物在调控机体
糖脂代谢和脂肪细胞分化聚酯方
面具有重要作用,可通过上调肝脏
中脂肪酸氧化的基因表达水平,从
而减少肝脏中的脂肪累积,对肝脏
糖脂代谢有一定调节作用[12-13]。
本研究结果可为倒地铃的质
量标准制定及进一步开发利用提
供科学依据,对该植物资源的综合
开发利用具有参考价值。
参考文献
[1]中华本草编委会. 中华本草[M]. 上
海:上海科学技术出版社,1999:
108.
[2]广西科学院. 广西植物志[M]. 广西:
广西科学技术出版社,1991:182.
[3]Thabrewa I,Munasinghe J b,Chack-
rewarthia S,et al.The effects of Cassia
auriculata and Cardiospermum halica-
cabumteas teas on the steady state
blood level and toxicity of carba-
mazepine[J].Journal of Ethnopharma-
cology,2004,90(1):145-150.
[4]Thomas T D,Maseena E A.Callus in-
duction and plant regeneration in
Cardiospermum halicacabum Linn.an
important medicinal plant[J].Scientia
Horticulturae,2006,108(8):332- 336.
[5] Sheeba M S,Asha V V.Cardiosper-
mum halicacabum ethanol extract in-
hibits LPS induced COX -2,TNF -α
and iNOS expression,which is medi-
ated by NF -kB regulation in
RAW264.7 cells [J].Journal of
Ethnopharmacology ,2009,124(1):
39-44.
[6]Waako P J,Gumede B,Smith P,et al .
The in vitro and in vivo antimalarial
activity of Cardiospermum halica-
cabum L.and Momordica foetida
Schumch.Et Thonn [J].Journal of
Ethnopharmacology,2005,99(1):137-
143.
[7] Kumar R,Murugananthan G,Nan-
dakumar K,et al.Isolation of anxiolyt-
ic principle from ethanolic root extract
of Cardiospermum halicacabum[J].
Phytomedicine,2011,18(2-3):219-
223.
[8]韦建华,陈君,蔡少芳,等.倒地铃化
学成分研究 (Ⅰ)[J]. 中草药,
2011,42(8):1509-1511.
[9]陈君,韦建华,蔡少芳,等.倒地铃有
效部位化学成分研究[J]. 中药材,
2013,36(2):228-230.
[10]陈君,韦建华,李兵,等.UV测定广
西不同产地倒地铃中总黄酮的含
量[J]. 中国实验方剂学杂志,
2012,18(13):105-107.
[11]Huanga M H,Shyun H S,Wang B
S,et al.Antioxidant and anti-inflam-
matory properties of Cardiospe -
rmum halicacabum and its reference
compounds ex vivo and in vivo[J].
Journal of Ethnopharmacology ,
2011,133(2):743-750.
[12]林厦,菁朱晓,彤江青,等.叶绿醇对
脂肪细胞分化及糖脂代谢的调节
作用[J]. 动物营养学报,2012,24
(10):1866-1870.
[13]Huanga M H,Huang S S,Wang B
S,et al.Antioxidant and anti -inflam
matory properties of Cardiospe -
rmum halicacabum and its reference
compounds ex vivo and in vivo[J].
Journal of Ethnopharmacology ,
2011,133(2):743-750.
(2016-04-22 收稿/编辑 陈明伟)
龙脷叶 Sauropus spatuli folius
Beille为大戟科植物,主要分布在
广西、广东、福建等地,具有清肺
热、抗菌、止咳作用,壮族民间常用
于治疗急性支气管炎、上呼吸道感
染、支气管哮喘,是临床常用的壮
药[1]。龙脷叶含有皂苷、甾体类、
氨基酸和脂肪酸等成分[2-3]。氨基
酸是一种重要生物活性物质[4],其
中组氨酸、苏氨酸的缺乏可使小鼠
对伤寒沙门氏菌的易感性增高,赖
氨酸缺乏可使小鼠炭疽芽胞杆菌
的抵抗力下降,而皮下注射半胱氨
酸可增强动物的某些非特异性免
疫功能及增强对可产气荚膜梭状
芽胞杆菌、葡萄糖球菌毒素的抵抗
力[5]。氨基酸是龙脷叶的抗菌活
性成分,目前对龙脷叶中氨基酸成
分的研究尚未见报道。本实验对龙
脷叶中 L-谷氨酸、精氨酸、脯氨
酸、亮氨酸进行薄层色谱分析,并
采用全自动氨基酸分析仪测定龙
脷叶中氨基酸的含量,旨为进一步
研究龙脷叶的活性成分提供实验
基础。
1 实验材料
1.1 仪器 L-8800型全自动氨基
酸分析仪(日立);BP211D型电子
天平(德国赛多利斯公司);CD-
UPT型超纯水机(成都超纯科技有
限公司);KQ5200B 型超声提取仪
(昆山市超声仪器有限公司);
DHG-9240A 型电热恒温干燥箱
(上海齐欣科学仪器有限公司);
FW135型中草药粉碎机(天津市泰
斯特仪器有限公司)。
1.2 试药 L-谷氨酸对照品(批
号:111576-200201,供鉴定用);精
氨酸对照品 (批号:140685 -
201305,供含量测定用);脯氨酸对
照品(批号:111659-200301,供鉴
定用);亮氨酸对照品(批号:
110876-200204,供鉴定用);龙
脷叶对照药材(批号:121623 -
·76· 236