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地锦草对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清心肌酶活力的影响



全 文 :基金项目:内蒙古自治区卫生和计划生育委员会医疗卫生科研计划项目 (201303083)。
作者简介:马宝慧,女,博士,硕士生导师,研究方向:心血管生理。E - mail:247069198@ qq. com
地锦草对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清心肌酶活力的影响
马宝慧1 高永胜2 徐继辉1 吕 军1 齐瑞芳1 王立军1
1. 包头医学院,内蒙古 包头 014060;2. 包头医学院第二附属医院,内蒙古 包头 014010
【摘 要】 目的:观察地锦草对心肌缺血再灌注大鼠血清心肌酶活力的影响。方法:60 只 Wistar大鼠随机分为 6 组:假手术组、模
型组、阳性对照组、地锦草低、中、高剂量 (50、100、200 mg /kg)组,每组 10 只。阳性对照组给予复方丹参片 600mg·kg -1·d -1灌胃,
地锦草组给予低、中、高剂量 (50、100、200mg·kg -1·d -1)地锦草灌胃,其它组给予生理盐水灌胃。各组均灌胃 14d 后,除假手术组
外其余各组大鼠心脏左前降支结扎 30min后再灌注 120 min,建立心肌缺血再灌注模型。测定各组大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶 (AST)、
肌酸激酶 (CK)、肌酸激酶同工酶 (CKMB)的活力。结果:地锦草可降低心肌缺血再灌注大鼠血清 AST、CK、CKMB 活力。结论:地锦
草对缺血再灌注损伤心肌具有一定的保护作用。
【关键词】 地锦草;心肌酶;心肌缺血再灌注损伤;大鼠
【中图分类号】R285. 5 【文献标志码】A 【文章编号】1007 - 8517 (2016)06 - 0044 - 02
地锦草为大戟科植物地锦 (Euphorbian humifusa uilld)
或斑地锦 (Euphorbia maculata L.)的干燥全草,是常用的
中药材,也是一种蒙药材 (蒙文名为马拉根 -扎拉 -乌布
斯) ,具有清热解毒、活血止血的功效。常以单方或复方入
药,用于治疗肝炎、急慢性支气管炎等。地锦草主要含有
黄酮类、鞣质类等化合物,如槲皮素、山奈酚、芹菜素、
木犀草素等。研究表明地锦草具有抗菌、抗氧化、抗炎、
抗过敏、免疫调节、保肝、活血止血等多种生物活性[1]。
研究观察地锦草对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌酶的影响。
1 仪器与材料
1. 1 动物 健康雄性 Wistar 大鼠 60 只,体重 180 ~ 220g,
SPF级,许可证号:SCKK (京)2011 - 0012,购自北京芳
元缘养殖中心。
1. 2 材料 复方丹参片 (批号:12126626,北京同仁堂科
技发展股份有限公司) ;天门冬氨酸氨基转移酶 (AST,批
号:13010705)、肌酸激酶 (CK,批号:13040203)、肌酸
激酶同工酶 (CKMB,批号:13040304)试剂盒为武汉长立
生物有限责任公司生产;地锦草 (自制水煎剂) :取一定量
的地锦草,加水浸泡 30 min,先以武火煎开,再以文火煎
煮 30 min滤取煎液,以同样的方法煎煮第 2、第 3 次,将 3
次取得的煎液合并,静置 24 h,过滤去掉沉淀,浓缩。
1. 3 仪器 东芝全自动生化分析仪。
2 方法
2. 1 动物分组及给药 随机分为 6 组:假手术组、模型
组、阳性对照组、地锦草低、中、高剂量组,每组 10 只。
阳性对照组给予复方丹参片 600mg·kg -1·d -1灌胃,地锦
草组给予低、中、高剂量 (50、100、200mg·kg -1·d -1)
地锦草灌胃,其它组给予生理盐水灌胃。各组均灌胃 14d。
2. 2 造模方法 将大鼠麻醉后于左侧第 3 或第 4 肋间打开
胸腔,轻压将心脏挤出胸腔,剪开心包,左心耳根部下 1 ~
2mm处,用无创伤缝合线结扎冠脉,造成左心室室壁缺血。
迅速将心脏送回胸腔,用长嘴止血钳将胸部皮肤和肌肉以
及心脏挂线夹紧,防止发生气胸。30min后,放松挂线,再
灌注 120min,制成心肌缺血再灌注模型。同时记录Ⅱ导心
电图。缺血心肌壁呈现发绀、膨出,心肌收缩减弱,同时
心电图示 S - T 段明显上抬,T 波高耸,造成心肌缺血,
30min后复灌 120min,心电图示 S - T 段回落 1 /2 以上,表
示心肌缺血再灌注模型制备成功[2]。其中假手术组只穿线
不结扎冠状动脉。
2. 3 标本留取方法 右颈总动脉取血 5 ml,4000 rpm 离
心,取血清。
2. 4 酶的测定方法 利用全自动生化分析仪测定 AST、
CK、CKMB活力。相对酶活力 = (除假手术组外的其它组
酶活力 /假手术组酶活力) × 100 %。
2. 5 统计分析 采用 SPSS 12. 0 统计软件进行处理,计量
资料用 x ± s表示,采用 t 检验,多组间比较采用单因素方
差分析,P < 0. 05 表示差异有统计学意义。
3 结果
由表 1 可知,与假手术组相比,模型组大鼠血清 AST、
CK、CKMB活力增加。与模型组相比,地锦草组大鼠血清
AST、CK、CKMB活力降低,除地锦草低剂量组 CKMB 活
力无显著性差异外,其余各组大鼠血清 AST、CK、CKMB
活力与模型组相比有统计学意义 (P < 0. 05)。
表 1 各组大鼠血清 AST、CK及 CKMB活性比较
组别
AST相对
酶活力 /%
CK相对
酶活力 /%
CKMB相对
酶活力 /%
假手术组 100. 0 ± 10. 1 100. 0 ± 8. 2 100. 2 ± 7. 6
模型组 320. 7 ± 55. 3a 261. 3 ± 12. 8a 190. 9 ± 31. 1a
阳性对照组 203. 1 ± 23. 2b 160. 6 ± 15. 1b 130. 3 ± 20. 3b
地锦草低剂量组 244. 3 ± 11. 2b 180. 9 ± 20. 3b 167. 8 ± 26. 6
地锦草中剂量组 239. 8 ± 18. 1b 178. 7 ± 19. 3b 152. 4 ± 17. 8b
地锦草高剂量组 212. 0 ± 15. 3b 171. 2 ± 11. 7b 126. 5 ± 12. 9b
注:与假手术组比较,aP < 0. 05;与模型组比较,bP < 0. 05。
4 讨论
心肌缺血再灌注损伤是由于冠状动脉发生闭塞后再通,
造成供血急剧减少或中断后血流恢复,使心肌细胞生物膜
损伤、通透性增加、心肌酶逸出[3]。其中比较重要的有
AST、CK、CKMB。AST在心肌细胞中含量最高,临床一般
常作为心肌缺血再灌注和心肌炎的辅助检查。CK 有三种同
工酶,其中 CKMB主要存在于心肌,含量高达 40 %以上,
对心肌具有相对较高的特异性和敏感性。临床上 CK和 CK-
MB对于诊断心肌损伤具有很重要的意义,并有极高的诊断
(下转第 46 页)
·44· 中国民族民间医药 2016年 3月第 25卷第 6期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy,2016,Vol. 25,No. 6
促排卵:使用氯米芬 (CC) ,在子宫出血第五天起每日口
服 50mg,连服 7d,用基础体温及超声检测排卵,适时给予
人绒毛膜促性腺激素 (HCG)10000U肌注促排卵[24 - 25]。
3. 2. 2 手术治疗 对于中西药物治疗促排卵无效的患者,
应考虑手术治疗。随着现代医学和科技的发展,传统的卵
巢楔形切除术,因其术后卵巢周围粘连的发生率较高已日
益被腹腔镜手术所取代。在腹腔镜下,采用电凝或激光穿
刺打孔,每侧卵巢打孔 4 ~ 10 个,术后不孕患者排卵率为
50% ~90%,妊娠率为 40% ~70%[26]。
4 讨论
多囊卵巢综合征是妇科的常见病和疑难病,其病因病机
具有多源性,临床表现具有多态性,目前诊断仍没有统一的
金标准,也尚无彻底根治多囊卵巢综合征的方法,因此,寻
求更有效的治疗方法,也是多囊卵巢综合征研究的另一大热
点。现代研究显示,运用中医辨证和中药、针灸结合西医病
理生理特点,进行调经促排卵,充分发挥补肾活血药降低胰
岛素、雄激素水平,改善下丘脑 -垂体 -卵巢轴,促进卵泡
发育和排卵的作用,具有更高疗效。但中西医结合治疗多囊
卵巢综合征的治疗方案,还有待进一步研究。
参考文献
[1]中华中医药学会. 中医妇科常见病诊疗指南 [M]. 北京:中国中医药
出版社,2012:104.
[2]罗颂平,邓高丕,陶莉莉,等. 中西医妇产科治疗学 [M]. 北京:人
民军医出版社,2008:88 - 96.
[3]刘颖华,侯丽辉,李 妍. 中医治疗青春期多囊卵巢综合征的研究进展
[J]. 天津中医药,2015 ,32 (10) :635.
[4]刘宇新,侯丽辉,吴效科. 多囊卵巢综合征中医病因病机 [J]. 天津中
医药,2009,26 (2) :123 - 124.
[5]管隽,谈勇. 重视“肝郁”在多囊卵巢综合征发病机制中的作用 [J].
江西中医药,2011,42 (8) :11 - 14.
[6]张晗,侯丽辉. 多囊卵巢综合征中医病因病机现代研究 [J]. 辽宁中医
药大学学报,2011,13 (2) :40 - 42.
[7]杨鉴冰,孙 康. 多囊卵巢综合症发病因素及论治探讨 [J]. 陕西中医学
院学报,2012,(35)3 :6 - 7.
[8]陈东思,刘建新. 多囊卵巢综合征发病机制研究进展 [J]. 青岛大学医
学院学报,2015,51 (6) :750 - 751.
[9] 罗颂平. 中医妇科学 [M]. 北京:高等教育出版社,2008:266.
[10] RotterdamESHRE/ASRMSponsoredPCOSconsensusworkshopgroup. Revised2003
Consensusondiagnosticcriteriaandlong - term health risks related to poly cystic ovary
syndrome (PCOS) [J]. HumReprod,2004,19 (1):41 -47.
[11] 崔琳琳,陈子江. 多囊卵巢综合征诊断标准和诊疗指南介绍 [J]. 国
际生殖健康 /计划生育杂志,2011,30 (5) :406.
[12]郁 琦,金丽娜,马彩虹,等. 多囊卵巢综合征的诊断和治疗专家共识
[J]. 国外医学妇产科学分册,2007,34:41.
[13]曹泽毅. 中华妇产科学 [M]. 北京:人民卫生出版社,2005:2448
- 2481.
[14]杨东霞,高婷婷,侯丽辉. 多囊卵巢综合征的辨证论治 [J]. 中医药
信息,2003,20 (4) :14 - 15.
[15]李娟彤. 中西医结合方法治疗多囊卵巢综合症临床分析 [J]. 现代中
西医结合杂志,2014,23 (14) :1559 - 1560.
[16]陈剑红. 苍附导痰汤加减与达英 -35 及氯米芬联合治疗多囊卵巢综合
征不孕疗效观察 [J]. 新中医,2014,46 (3) :104 - 106.
[17]周叔平,周然必,林华. 针灸结合中药人工周期疗法治疗月经不调 75
例疗效观察 [A]. 全国第七次中医妇科学术研讨会论文汇编 (C) ,2007 年.
[18]杨准叶. 益肾调周法治疗多囊卵巢综合征 60 例临床观察 [J]. 吉林中
医药,2012,32 (7) :699 - 700.
[19]倪晓容,徐莲薇,孙卓君,等. 补肾活血调周法治疗多囊卵巢综合征
的临床观察 [J]. 四川中医,2012,30 (7) :102 - 104.
[20]王利红. 补肾化痰调周法治疗肾虚痰湿型多囊卵巢综合征 50 例 [J].
实用中医内科杂志,2012,26 (10) :88 - 90.
[21]周建华,王治洁,王东建,等. 针药结合治疗多囊卵巢综合征临床观
察 [J]. 上海中医药杂志,2012,46 (5) :72 - 74.
[22]李荔,莫蕙,文斌,等. 针灸联合二甲双胍治疗肥胖型多囊卵巢综合
征不孕症的临床研究 [J]. 中华中医药杂志,2014,29 (7) :2115 - 2119.
[23]孙博,丛慧芳,赵海波,等. 穴位埋线配合中药对多囊卵巢综合征不
排卵现象的干预作用 [J]. 上海针灸杂志,2013,32 (6) :487 - 488.
[24] 邹荔. 达英 -35结合药物促排卵治疗多囊卵巢综合征的临床研究 [J] .
中国妇幼保健,2010,25 (7) :895 -896.
[25] 戴芳芳,郑波,程书清,等. 超促排卵过程中穿刺小卵泡治疗顽固性
多囊卵巢综合征的临床应用 [J]. 中国优生与遗传杂志,2013,21 (9) :
113 - 114,118.
[26]叶敦敏,许丽绵,卢如玲,等. 腹腔镜卵巢打孔术结合中医周期疗法
治疗痰湿型难治性多囊卵巢综合征的临床观察 [J]. 广州中医药大学学报,
2007,24 (6) :445 - 448.
(收稿日期:2016. 01. 07
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
)
(上接第 44 页)
符合率[4]。CK与 CKMB值增高,反映了心肌细胞的受损程
度[5]。地锦草具有抗氧化、抗炎等多种生物活性,研究表
明地锦草能抑制肾缺血再灌注时引起的肾功能损伤[6]。实
验通过测定血清中 AST、CK、CKMB 活力观察心肌缺血再
灌注对心肌是否造成损伤以及地锦草对心肌缺血再灌注损
伤的保护作用。结果显示,模型组大鼠血清中 AST、CK、
CKMB活力升高,说明心肌缺血再灌注引起大鼠心肌细胞
严重损伤,使胞浆和细胞器中大量酶蛋白释放入血;阳性
对照组和地锦草组大鼠血清中 AST、CK、CKMB 活力较模
型组降低,说明地锦草的作用可通过改善心肌酶对心肌缺
血再灌注损伤具有一定的保护作用。
参考文献
[1]王婷婷,文今福,金松南. 地锦草的化学成分及药理学研究进展 [J].
泰山医学院学报,2012,33 (8) :629 - 632.
[2]徐叔云,卞如镰,陈修. 药理实验方法学 (3 版) [M]. 北京:人民卫
生出版社,2002:1052.
[3]周朝伟,严冬. 心肌缺血再灌注损伤中医药研究进展 [J]. 辽宁中医药
大学学报,2014,16 (3) :217 - 219.
[4]Roqueta MC,Sabate A,Sopena R ,et al. Specificity of CK - MB enzyme in
the diagnosis of acute myocardial infaction in the postoperative period following non-
cardiac surgery [J]. Rev Esp Anestesiol Reanim,1995,42 (1) :3 - 6.
[5]Murphy E,Steenbergen C. Mechanisms underlying acute protection from car-
diac ischemia reperfusion injury [J]. Physiol Rev,2008,88 (2) :581 - 609.
[6]张振涛,吴仁奇,张威,等. 地锦草抗氧化作用及对肾缺血再灌注损伤
保护作用的实验研究 [J]. 中国中医药科技,1999,6 (1) :30 - 31.
(收稿日期:2016. 01. 10)
·64· 中国民族民间医药 2016年 3月第 25卷第 6期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy,2016,Vol. 25,No. 6