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鬼箭羽抗心肌缺血作用的实验研究



全 文 :中国科技 核心期刊
2015年第 28卷第 3期
鬼箭羽为卫矛科植物(Euonymus alatus Buch.),
又名卫矛。味苦、辛,性寒,入肝脾经,具有活血化
瘀、破血、通经之功,用于治疗癥瘕、闭经、产后瘀
滞腹痛等症[1]。主要含有黄酮类、甾体类、多糖等
系数无明显差异;血液学指标、血液生化学指标各剂
量组与空白对照组比较,虽有个别检测指标存在
一定差异,但其测定值仍在正常值范围内或停药
后恢复到正常值范围内,故无实际意义[5]。主要
脏器的病理检查表明,组织形态学正常,未见与药
物毒性相关的明显病变;停药4周后也未见药物
延迟性毒性反应。表明抗疏健骨颗粒在规定剂量
下口服是安全的,无明显毒性反应。
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究指导原则汇编[M].北京:人民卫生出版社,1993:199-
200.
收稿日期:2014-02-22
*基金项目:2012年陕西省科技统筹创新工程计划项目(编
号2012KTCL03-22);陕西省中管局中医药科研项目(编号13-LC069);
陕西省教育厅科研项目(编号11JK0674)。
作者简介:史传道(1965—),男,硕士研究生导师,教授。研究
方向:退行性骨病的中西医结合诊治。
方 药·药理研究
鬼箭羽抗心肌缺血作用的实验研究
赵成国 1,秦书芝 1,2,张 瑶 1,夏 婷 1,肖洪彬 2△
1吉林大学珠海学院,广东 珠海 519041;2 黑龙江中医药大学
[摘 要]目的:探讨鬼箭羽抗大鼠急性心肌缺血损伤的作用机制。方法:将健康Wistar大鼠经ECG筛选
后随机分为鬼箭羽高、中、低剂量组,模型组,假手术组,阳性对照组,每组10只。采用冠状动脉结扎法建立大
鼠急性心肌缺血模型,检测血清中肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶
(LDH)、血清丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、一氧化氮(NO)等指标。结果:鬼箭羽高、中剂量组能降低模型
大鼠血清CK、CK-MB、AST、LDH和MDA水平,提高模型大鼠血清SOD、NO含量,与模型组比较差异有统计学意义
(P<0.05)。结论:鬼箭羽对急性心肌缺血大鼠的心肌细胞具有一定的保护作用,有一定防治心肌缺血的作用。
[关键词]急性心肌缺血;冠状动脉结扎;鬼箭羽;心肌酶
[中图分类号]R285.5[文献标识码]A [文章编号]1004-6852(2015)03-0019-03
ExperimentalStudiesontheAnti-ischemicFunctionofGuiJianYu
ZHAO Chengguo1, QIN Shuzhi1,2, ZHANG Yao1, XIA Ting1, XIAO Hongbin2△
1 Zhuhai College of Jilin University, Zhuhai 519041, China;
2 Heilongjiang University of Chinese Medicine
AbstractObjective: To evaluate the mechanism of GuiJianYu fighting against the impairment induced by a-
cute myocardial ischemia (AMI) in rats. Methods: After performed ECG screening, the healthy Wistar rats were ran-
domly divided into the high, middle and low dose groups of GuiJianYu, the model group, the sham group as well as
the positive control group with 10 cases in each. The AMI models were established by coronary artery ligation and
the levels of serum creatine kinase (CK), creatine kinase MBmass (CK-MB), aspartate aminotransferase (AST), lac-
tate dehydrogenase (LDH), serum malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD) and nitric oxide (NO)
were detected in different groups. Results: The levels of rats serum CK, CK-MB, AST, LDH and MDA markedly de-
creased in the high and middle dose groups of GuiJianYu and the serum SOD and NO significantly increased, and
the differences in comparing these groups with the model group had statistical meaning (P<0.05). Conclusion: Gui-
JianYu has certain protective function for the the myocardial cells of the AMI rats and can prevent AMI occurrence
in a certain degree.
Keywordsacute myocardial ischemia AMI; coronary artery ligation; GuiJianYu(euonymus alatus);
myocardium enzyme
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中国科技 核心期刊
Western Journal of Traditional Chinese Medicine,2015 Vol.28 No.3方 药·药理研究
多种化学成分[2]。具有抗心肌缺血、降血糖及延
缓动脉粥样硬化等作用[3-4]。本实验探讨鬼箭羽
抗急性心肌缺血的药理作用及作用机制,为新药
开发及指导临床用药提供依据。
1 材料与方法
1.1 实验用药鬼箭羽水提物(简称鬼箭羽,
16.13g生药/g)由黑龙江中医药大学中药化学
实验室提供;阳性对照药为心得安片(常州康普药
业有限公司,批号:0509011)。
1.2 实验动物选 Wistar 大鼠,体质量 180~
220g,雌雄各半,由黑龙江中医药大学实验动物
中心提供。实验动物合格证号:黑动字第P00101006号。
1.3 实验仪器Lisa300全自动生化分析仪(法
国);Medlab多通道生物信号分析系统(南京美易
科技有限公司);HX-200动物呼吸机(成都泰盟科
技有限公司);755型分光光度计(山东高密分析
仪器厂);电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公
司);KDC-40离心机(科大创新有限公司)。
1.4 主要试剂肌酸激酶(CK)试剂盒(批号:
090061);肌酸激酶同工酶(CK-MB)试剂盒(批号:
100031);乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒(批号:130021);
谷草转安酶(AST)试剂盒(批号:120032),以上试
剂盒均购于中生北控生物科技有限公司。丙二醛
(MDA)试剂盒(批号:20100621);超氧化物岐化酶
(SOD)试剂盒(批号:20101109);一氧化氮(NO)试
剂盒(批号:20101217),均购于南京建成生物工程
研究所。
1.5 方法
1.5.1 分组及给药将健康 Wistar 大鼠进行
ECG筛选,弃去S-T段、T波及心律异常者。将筛选合
格大鼠随机分为鬼箭羽高、中、低组剂量组,模型组,
假手术组,阳性对照组,每组10只。鬼箭羽高、中、低
组给药剂量分别为12.0、6.0、3.0g/kg。模型组和假手
术给予同体积蒸馏水,阳性对照组剂量为2.8mg/kg。
均灌胃给药。1次/d,给药7天。
1.5.2 模型制备大鼠末次给药2小时后,戊巴
比妥麻醉(30mg/kg),备毛,分离肌肉层,剪断第
四、五肋骨,气管插管,连接呼吸机辅助呼吸(吸呼比
为1∶2,频率为64次/min,潮气量为12mL/kg)。钝性
分离心包膜,暴露心脏,结扎冠状动脉左前降
支,结扎后放回心脏,关闭胸腔,缝合肌肉及皮肤。
模型制备过程中大鼠死亡8只,其中假手术组2
只,模型组1只,鬼箭羽高组2只、中组2只,阳性
对照组1只,均为手术过程中痰液清理不及时窒
息死亡。
1.5.3 血样采集与处理结扎5小时后,下腔静
脉取血,离心(3 000 转,l0 分钟)取血清,测定
CK-MB、CKLDH、MDA等指标。
1.5.4 梗死面积计算取血后迅速剪下心脏,生
理盐水冲洗,清除血管及脂肪组织,吸去水分,全
心称重。将心脏置于冰箱中速冻,取出后由心尖至
心底切成等厚5片,放入新配制的1%氯化三苯基
四氮唑(TTC)溶液中,37℃恒温水浴,染色 15 分
钟。染色后流水冲洗去除多余染料,梗死区不染
色,未梗死区呈红色。切取梗死区称重,计算梗死
面积(%)。
1.6 统计学方法数据采用SPSS 10.0统计学软
件分析,计量资料以(χ±s)表示,采用方差分析,
P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 对急性心肌缺血模型大鼠心肌梗死面积的
影响 与模型组比较,各给药组心肌梗死面积均
减少,其中以鬼箭羽高、中组作用显著,差异有统
计学意义(P<0.05),见表1。
表1 对急性心肌缺血模型大鼠心肌梗死面积的影响(χ±s)
组别 例数 剂量/(g·kg-1) 梗死面积/%
假手术组 8 - 0
模型组 9 - 11.76±2.49
鬼箭羽高组 8 12.0 8.39±1.95**
鬼箭羽中组 8 6.0 9.46±2.21*
鬼箭羽低组 10 3.0 9.97±1.78
阳性对照组 9 0.0028 8.26±2.50**
注:同模型组比较,*表示P<0.05,**表示P<0.01。
2.2对急性心肌缺血模型大鼠血清心肌酶 CK、
CK-MB、LDH及AST的影响与模型组比较,假手术
组血清CK、CK-MB、LDH、AST含量均降低(P<0.01);鬼
箭羽高、中组血清 CK、CK-MB、LDH、AST 含量降低
(P<0.05),见表2。
表2 对急性心肌缺血模型大鼠血清CK、CK-MB、LDH及AST的影响(χ±s)
组别 例数 剂量/(g·kg-1) 肌酸激酶/(U·L-1)肌酸激酶同工酶/(U·L-1)乳酸脱氢酶/(U·L-1)谷草转氨酶/(U·L-1)
假手术组 8 - 43.30±9.48** 28.3±5.09** 89.9±12.4** 212.2±21.3**
模型组 9 - 75.10±18.00 44.0±9.83 158.7±22.8 333.3±4 .5
鬼箭羽高组 8 12.0 52.80±11.90** 30.5±7.31** 123.3±17.3** 270.6±34.2**
鬼箭羽中组 8 6.0 58.10±13.80* 34.1±9.44 133.8±17.4* 282.7±36.0*
鬼箭羽低组 10 3.0 65.60±16.60 37.8±7.45142 3±20.2 298.7±38.7
阳性对照组 9 0.0028 51.30±11.60** 35.1±8.14** 109.0±17.3** 285.4±39.5**
注:与模型组比较,*表示P<0.05,**表示P<0.01。
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中国科技 核心期刊
2015年第 28卷第 3期
3 讨论
冠心病是一种由冠状动脉粥样硬化或痉挛导
致其狭窄或堵塞引发的心肌缺血缺氧性病变[5-9]。
近年来,随着人民生活水平的提高,冠心病的发病
率逐年上升,作为高发病率、高危险性、高死亡率
的重大疾病严重威胁着人类的健康[10-12]。心肌缺
血缺氧使心肌细胞受损,导致多种酶体大量释放
进入血液。因此,检测血中相关酶的活性变化可反
映心肌坏死的演变过程,这些酶学指标有LDH、
AST、CK等[13]。MDA是脂质过氧化产物,可作为脂
质过氧化反应强弱的指标,所以检测MDA的含量
可间接反映细胞损伤的程度[14-15];超氧化物歧化
酶(SOD)的活力可反映机体清除氧自由基的能力,
可对缺血的心肌起保护作用[16-17];NO具有减弱心
肌收缩力的作用,使心肌耗氧量减少[18]。
本研究表明,鬼箭羽能够缩小冠状动脉结扎
引起的模型大鼠心肌梗死面积,能降低模型大鼠
血清CK、CK-MB、AST、LDH、MDA的含量,提高模型大
鼠血清NO、SOD含量,说明鬼箭羽可通过不同途径
对心肌细胞起保护作用,具有一定的抗心肌缺血
作用。
参考文献
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收稿日期:2014-02-10
作者简介:赵成国(1978—),男,硕士学位,讲师。研究方向:
中药分析及药理学。
△通讯作者:肖洪彬(1957—),男,博士后合作导师,博士研
究生导师,教授。研究方向:方剂配伍规律及方剂疗效客观化的研
究。
方 药·药理研究
表3 对急性心肌缺血大鼠血清MDA、SOD及NO的影响(χ±s)
组别 例数 剂量/(g·kg-1) 丙二醛/(nmol·L-1) 超氧化物歧化酶/(U·L-1) 一氧化氮/(μmol·L-1)
假手术组 8 - 6.03±1.78** 255.8±25.5** 124.6±17.9**
模型组 9 - 9.71±2.10 131.4±33.9 67.8±17.9
鬼箭羽高组 8 12.0 6.97±2.20** 179.9±29.2** 102.2±20.7**
鬼箭羽中组 8 6.0 7.61± .95* 168.9±29.2* 95.1±18.7*
鬼箭羽低组 10 3.0 8.44±2.05 158.2±34.6 86.2±20.1
阳性对照组 9 2.8mg 6.99±2 02** 180.0±42.2** 104.8±23.1**
注:与模型组比较,*表示P<0.05,**表示P<0.01。
2.3对急性心肌缺血模型大鼠血清MDA、SOD、NO
的影响 同模型组比较,假手术组MDA升高(P<0.01),
SOD、NO 均下降(P<0.01);鬼箭羽高、中组血清
MDA含量降低(P<0.05),SOD、NO升高(P<0.05),
其差异有统计学意义,见表3。
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