全 文 ：第 6 卷 第 2 期 贵阳学院学报 (自然科学版) (季刊) Vol． 6 No． 2
JOURNAL OF GUIYANG COLLEGE
2011 年 6 月 Natural Sciences (Quarterly) Jun． 2011
GC － MS法分析贵州产飞龙掌血叶中挥发油成分
＊
刘志刚，李 莹，朱芳芳，何 娅，袁淼淼，徐明江
(贵阳学院生物与环境工程系，贵州 贵阳 550005)
摘 要:采用水蒸气蒸馏的方法提取飞龙掌血叶中的挥发油成分，通过正交设计法优选了提取飞龙掌血叶挥
发油的最佳工艺条件;运用气相色谱 －质谱联用技术 (GC － MS)对飞龙掌血叶挥发油中的化学成分进行了
分离鉴定。实验结果表明最佳提取条件为药材粉碎 40 目，用 16 倍量水浸泡过夜，连续提取 12 小时，在最佳
工艺条件下，飞龙掌血叶挥发油得率为 0． 4%，经 GC － MS分析，从飞龙掌血叶挥发油中共鉴定出 28 个化学
成分，鉴定率为 97． 8%，其主要化学成分为烯烃和醇类。
关键词:飞龙掌血叶;挥发油;气 －质联用
中图分类号:Q949. 752. 7 文献标识码:A 文章编号:1673 － 6125 (2011)02 － 0028 － 03
Analysis of Volatile Chemical Constituents of the Leaves of
Toddalia asiatica Lam． from Guizhou by Gas Chromatography / Mass Spectrum
LIU Zhi － gang，LI Ying，ZHU Fang － fang，HE Ya，YUAN Miao － miao，XU Ming － jiang
(Dept． of Biology and Environment Engineering，Guiyang University，Guiyang 550003，China)
Abstract:The volatile oil from the leaves ofToddalia asiatica Lam． of Guizhou was prepared by the method of Steam Dis-
tillation and its chemical compositions were analyzed by GC /MS． The optimal conditions were determined by orthogonal
test as follows:40 mesh of samples，12 h of extraction time，and 16 times of extraction solvent． Under the optimal con-
ditions，the oil yield was 0． 4% ． 28 compounds were identified，in which the main ingredients were arene and alkene，
etc．
Key words:the leaves ofToddalia asiatica Lam． ;volatile oils;GC － MS
飞龙掌血叶为芸香科植物飞龙掌血 Toddalia
asiatica Lam．的叶，主要含有蒎烯，柠檬烯，樟脑烯
等挥发性成分［1，2］，具有抗病原微生物、抗真菌等
药理作用［3］，为贵州民间习用药材，特别在苗族等
少数民族中有广泛应用，具有散瘀止血，消肿解毒
的功效。目前有关飞龙掌血叶的相关研究十分有
限，贵州产飞龙掌血叶挥发油的化学成分研究未见
有文献报道。本研究利用水蒸气蒸馏法优选了贵
州产飞龙掌血叶挥发油的提取工艺，并通过气相色
谱 －质谱(GC － MS)联用法分离并鉴定了挥发油
中的化学成分，为综合利用飞龙掌血这一贵州优势
苗药资源提供科学依据。
1 仪器与材料
1． 1 主要仪器
GCMS － QP5050A气相色谱质谱联用仪(日本
岛津公司) ;KDM型控温电热套装置(山东鄄城华
鲁仪器公司)。
—82—
*收稿日期:2011 － 03 － 01
基金项目:贵阳学院 2010 年度学生科研项目(201002)
作者简介:刘志刚(1976 － ) ，男，山东禹城人，贵阳学院生物与环境工程系讲师，在读博士研究生，主要从事药物分析教学与研究工作。
1． 2 试剂与材料
飞龙掌血叶样品采集于贵州贵阳地区，经贵阳
学院高蓬明教授鉴定为芸香科植物飞龙掌血(Tod-
dalia asiatica Lam．)的叶，洗净、干燥，备用。
2 实验部分
2． 1 水蒸气蒸馏法提取飞龙掌血叶中挥发油
将飞龙掌血叶粉碎后，分别称取 50g置圆底烧
瓶中，加入蒸馏水浸泡过夜，参照挥发油测定法
(《中国药典》2010 年版Ⅰ部附录 XD甲法)提取挥
发油，电热套加热至沸腾并保持微沸状态，至测定
器中油量不再增加，停止加热，分取油层，用乙醚溶
解并定容至 2． 0mL，加入适量无水硫酸钠脱水，微
孔滤膜过滤，即得供试品溶液。根据单因素试验结
果，选取药材粉碎度、料液比、提取时间等几个因素
进行正交实验［4］，选取最优提取条件。
2． 2 飞龙掌血叶挥发油的 GC －MS分析
2． 2． 1 分析条件
气相色谱条件:色谱柱为 HP －5 毛细管色谱柱
(30m ×0． 25mm ×0． 25μm) ，柱温起始温度 80℃，以
10℃ /min升温至 105℃，保持 2min ，以 0． 5 ℃ /min
升温至 110 ℃，保持 2 min，以 1℃ /min 升温至
120 ℃，保持 2min，以 5℃ /min 升温至 180℃，以
15℃ /min 升温至 280℃，保持 3min;进样口温度
260℃;载气为高纯氮气，载气流速 15． 0mL． min －1;
进样量 1μL(乙醚溶液) ;分流比 20:1。
质谱条件:离子源为 EI 源;离子源温度
200℃;电离能量 70eV;扫描速率 1000amu /s;接口
温度 280℃;质量范围 20 ～ 500amu。
2． 2． 2 定性分析
取飞龙掌血叶挥发油 1μL(乙醚溶液) ，用 GC
－ MS联用仪分析鉴定，通过 NIST质谱数据库定性
分析飞龙掌血叶挥发油的化学成分，由计算机质谱
数据系统检索，并与标准图谱对照，结合有关文献
进行人工谱图解析，确定挥发油中的化学成分，要
求匹配度大于 0． 85。
2． 2． 3 相对含量分析
通过 Agilent Chemstation化学工作站数据处理
系统，采用峰面积归一化法进行计算，求得各化学
成分在挥发油中的相对含量。
3 结果与讨论
3． 1 结果
3． 1． 1 正交设计法优化结果
以飞龙掌血叶挥发油提取率为指标，根据单因
素试验结果，以药材粉碎度(A)、料液比(B)、提取
时间(C)三个因素进行正交设计，选取最优提取条
件。结果见表 1。
表 1 正交实验结果及数据分析
Tab． 1 Orthogonal experiment results and data analysis
序号
A
药材粉
碎度(目)
B
料液比
C
提取时间
(小时)
挥发油
得率%
1 26 1∶ 6 4 0． 21
2 26 1∶ 10 8 0． 29
3 26 1∶ 16 12 0． 38
4 40 1∶ 6 8 0． 37
5 40 1∶ 10 12 0． 42
6 40 1∶ 16 4 0． 39
7 80 1∶ 6 12 0． 31
8 80 1∶ 10 4 0． 25
9 80 1∶ 16 8 0． 30
K1 0． 88 0． 89 0． 85
K2 1． 18 0． 96 0． 96
K3 0． 86 1． 07 1． 11
K1 0． 29 0． 30 0． 28
K2 0． 39 0． 32 0． 32
K3 0． 29 0． 36 0． 37
极差 0． 1 0． 06 0． 09
最优组合 A2 B3 C3
从表 1正交实验极差分析结果表明，三因素对
飞龙掌血叶挥发油提取率的影响顺序为 A ＞ C ＞
B ，即药材粉碎度 ＞提取温度 ＞料液比，最佳的工艺
条件组合为 A2B3C3，即药材粉碎 40 目，用 16 倍量
水浸泡过夜，连续提取 12 小时，在此优化工艺条件
下重复做 3次提取实验，挥发油平均收率为 0． 40%。
3． 1． 2 成分鉴定结果
用 GC － MS联用仪对样品中挥发性成分进行
分析，其总离子流图见图 1，所鉴定的飞龙掌血叶
挥发油中的 28 种化学成分及其在挥分油中的相对
含量列于表 2。
—92—
表 2 飞龙掌血叶挥发油 GC/MS分析结果
Tab． 2 Analysis results of GC/MS for volatile oils of the leaves ofToddalia asiatica Lam
序号 化合物名称 分子式 保留时间(分钟) 相对含量%
1 δ －榄香烯 C15H24 17． 47 6． 88
2 α －荜澄茄油烯 C15H24 18． 43 0． 42
3 可巴烯 C15H24 20． 57 0． 65
4 α －波旁烯 C15H24 21． 34 0． 83
5 β －榄香烯 C15H24 21． 97 13． 43
6 石竹烯 C15H24 24． 42 23． 21
7 大根香叶烯 B C15H24 25． 69 0． 81
8 大根香叶烯 D C15H24 26． 65 0． 31
9 蛇麻烯 C15H24 27． 51 5． 67
10 绿叶烯 C15H24 29． 87 0． 60
11 异喇叭烯 C15H24 30． 39 0． 79
12 β －蛇床烯 C15H24 32． 05 0． 87
13 α －衣兰油烯 C15H24 32． 82 0． 36
14 δ －荜澄茄烯 C15H24 35． 85 1． 15
15 榄香醇 C15 H26O 39． 76 0． 98
16 反式橙花叔醇 C15 H26O 42． 67 18． 83
17 氧化石竹烯 C15 H24O 44． 88 4． 75
18 斯巴醇 C15 H24O 51． 44 12． 91
19 4，4 －二甲基－四环［6．3．2．0(2，5)．0(1，8)］十三烷－9 －醇 C15 H24O 51． 84 0． 33
20 τ －杜松醇 C15 H26O 52． 36 0． 38
21 β －桉叶醇 C15 H26O 52． 85 0． 96
22 表蓝按醇 C15 H26O 53． 36 0． 57
23 3 －乙基 － 3 －羟基 －雄甾 － 17 －酮 C21 H34 O2 53． 52 0． 30
24 6，11 －二甲基 － 2，6，10 －十二烷三烯 － 1 －醇 C14H24 O 57． 30 0． 21
25 六氢法呢基丙酮 C18H36O 60． 90 0． 20
26 金合欢醇丙酮 C18H30O 62． 12 0． 43
27 反式植醇 C20H24O 64． 28 0． 71
28 三十六烷 C36H74 65． 70 0． 25
(下转第 61 页)
—03—
如果想获得保护卡密码的话，可以参考以下步
骤:第一，找到 Int13h 原始点设回中断向量表。第
二，读出 MBR，然后分析这份 MBR，找到存放加密
密码的扇区得出解密算法。
2. 4 进入 Windows的虚拟 DOS 窗口，在命令提示
符下输入一下命令:
－ debug
－ a 100
－ 0213:100 XOR AX，AX
－ 0213:102 INT 13
－ 0213:104 INT 3
－ 0213:105
－ d 0:4c
假设返回值是鼠标箭头所指的白色区域 5D
04 12 02，则:
－ A 0212:045D
－ 0212:045D JMP f000:9854
－ 0212:0454
－ q
通过以上步骤之后就可以解除还原卡的保护
了，但下次进入系统时，还需重写地址 0:4C，才能
让还原卡存储以上内容。
2. 5 以 Award BIOS 6. 0 为例，开机时，按“DEL”
健，进入 BIOS 系统设置程序，移动高亮条到第二
项“Advanced BIOS Features(高级 BIOS 功能设
定)”，将“First Boot Device(设置首先检测哪个设
备启动)”的值设为“USB Floppy”，然后按 F10，弹
出“Save ＆ Exit Setup(存储后退出设置程序)”对
话框，直接按回车或者键入 Y 键，再按回车，保存
退出。在软驱中放入 DOS 启动盘启动，进入 DOS
界面如下，键入“C:”，按回车键:
A:\ ＞ c:＜ Enter ＞
C:\ ＞ cd windows ＜ Enter ＞
C:\Windows ＞ win ＜ Enter ＞
则直接进入Windows系统，跳过还原卡保护程
序的装载，则可以解除还原卡的保护，但下次启动
还是会受到还原卡的保护。只有将系统配置文件
config. sys中有关还原卡保护程序加载的项删除，
并修改注册表，这样才能达到解除还原卡保护的目
的。
2. 6 最后就是如果有机会接触机箱的话，可以开
机拔除还原卡，解除还原卡的保护功能。
2. 7 使用在 Windows窗口下运行的第三方破解工
具，如 packofdisk. exe(硬盘还原卡保护破解) ，执行
硬盘还原卡破解程序后，选择硬盘和欲操作的方式，
点击确定，重新启动。该程序不但可以破解多种硬
件还原卡或软件还原卡对硬盘的保护，甚至能完全
格式化硬盘，是还原卡和还原精灵的真正克星
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
。
(上接第 30 页)
由表 2 可知，已鉴定的化合物占总组分的
97. 8% ，其中相对含量较高的成分有石竹烯
(23. 21%) ，β －榄香烯(13. 43%)和反式橙花叔醇
(18. 83%)等。
3. 2 讨论
3. 2. 1 本研究通过水蒸气蒸馏法正交设计实验，
考察了粉碎度、料液比和提取时间对飞龙掌血叶挥
发油提取率的影响，最终确立了收率较高的实验条
件，飞龙掌血叶挥发油得率为 0. 4%。
3. 2. 2 由于挥发油含有的未知物多，组成复杂，本
实验通过选择色谱分离的参数，优化了色谱条件，
选用了非极性柱 HP － 5 毛细管色谱柱进行分离，
考察了多个程序升温的条件，最终确定了“2. 2. 1”
项下的条件，在此条件下，各色谱峰分离较好，而且
在 60min以内达到洗脱完全。
3. 2. 2 本文首次对贵州产飞龙掌血叶挥发油的化
学成分进行了分析，其中化学成分主要包括烯烃和
醇等，如石竹烯，β －榄香烯，反式橙花叔醇，以及
烷烃类化合物，如三十六烷等，上述成分具有多种
药理活性［5］，本研究为综合开发利用飞龙掌血这
一贵州优势苗药资源提供了科学依据。
参考文献:
［1］国家中医药管理局中华本草编委会． 中华本草［M］.
上海:上海科技出版社，2005.
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［4］方开泰 . 均匀设计与均匀设计表［M］. 北京:科学出
版社，1994.
［5］滑艳，邓雁如，汪汉卿 . 各种挥发油的药理活性及在医
学方面的应用［D］. 武汉:华中农业大学，2003.
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