全 文 ：第 44 卷第 4 期 郑 州 大 学 学 报(理 学 版) Vol. 44 No. 4
2012 年 12 月 J． Zhengzhou Univ．(Nat． Sci． Ed．) Dec. 2012
收稿日期:2012 06 01
基金项目:河南省科技厅攻关项目，编号 0624420031;河南省科技厅基础项目，编号 022463001．
作者简介:薛倩倩(1984 －) ，女，硕士研究生，主要从事有机合成和天然产物化学研究;通迅作者:龙跃(1960 －) ，男，教授，硕士，主要从事
天然产物化学和光谱分析研究，E-mail:longyue@ zzu． edu． cn．
DOI:10． 3969 / j． issn /1671 －6841． 2012． 04． 021
中草药雀儿舌头中总生物碱含量的测定
薛倩倩1， 陈彦君2， 雷 强1， 王 超1， 龙 跃1
(1．郑州大学 化学与分子工程学院 河南 郑州 450001;2．焦作大学 化工与环境工程学院 河南 焦作 454003)
摘要:以苦参碱为对照品，溴甲酚绿为显色剂，采用紫外分光光度法测定中草药雀儿舌头中总生物碱的含量．结果
表明，吸光度与总生物碱的含量呈良好线性关系，样品在 1 h内测定稳定．该方法能够准确、简便、快速地测定雀儿
舌头中的总生物碱含量．
关键词:雀儿舌头;生物碱;紫外测定
中图分类号:O 657． 32 文献标志码:A 文章编号:1671 － 6841(2012)04 － 0098 － 03
0 引言
雀儿舌头系大戟科黑钩叶属，一年生草本植物，其嫩苗、叶有毒，用于治疗腹痛及杀虫;其枝用于治疗全
身瘫痪;其根性辛、温，归胃、大肠二经，理气止痛，用于治疗脾胃气滞所致的脘腹胀痛、食欲不振、寒疝腹痛、
下痢腹痛等．雀儿舌头广泛分布于吉林、辽宁、河北、山西、河南、山东、江苏、陕西、四川、云南、湖南和湖北．在
河南民间主要用于治疗病毒性肝炎、肾炎以及癌症等疾病．
生物碱是雀儿舌头全草中的重要组成部分之一．一些生物碱因其能抗癌抗肿瘤及具有低毒性、低成本成
为近年来研究的热点，因此确定中药材中生物碱含量的测定方法就显得尤其重要．目前，文献报道的有关测
定生物碱含量的方法有滴定法［1］、分光光度法［2］、毛细管电泳法［3］、高效液相色谱法［4］等．其中，滴定法灵敏
度低，测定所需样品量多，高效液相色谱法则是操作步骤繁琐，成本高．雀儿舌头中总生物碱含量的测定尚未
见报道．作者以苦参碱为对照品，溴甲酚绿为显色剂，确定了测定雀儿舌头中总生物碱含量的紫外检测方法．
结果表明，该方法能准确、简便、快速地测定生物碱的含量，可为全面评价雀儿舌头药材的质量提供科学依据．
1 仪器与试剂
TU-1901 双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司) ，PHS-3C 酸度计(上海佑科) ，
电子天平(上海菁海仪器有限公司) ，RE-52-99 型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)．
苦参碱(贵州迪大生物有限公司) ，溴甲酚绿(西陇化工股份有限公司) ，其他试剂均为分析纯．
2 溶液的配制
2． 1 显色试剂的配制
精密称取溴甲酚绿 0． 200 g，溶于 15． 0 mL 0． 02 mol /L NaOH 溶液中，用蒸馏水定容至 500 mL． 摇匀，
备用［5］．
2． 2 标准品溶液的配制
精密称取苦参碱标准品 20． 0 mg，用氯仿定容至 100 mL，配成 0． 2 g /L的苦参碱标准溶液．
第 4 期 薛倩倩，等:中草药雀儿舌头中总生物碱含量的测定
2． 3 待测样品溶液的制备
将粗粉碎后的雀儿舌头全草在鼓风干燥箱中 60 ℃干燥 24 h，精密称取 20 g 样品，加入无水乙醇
150 mL，回流提取 6 h，提取液浓缩回收乙醇得到浸膏 1． 5 g［6］．将所得浸膏旋至近干，用 500 mL 体积分数
5%的盐酸溶液溶解，过滤． 取酸液，加入质量分数 5%的 NaOH 溶液调节 pH = 10，用氯仿萃取 3 次，每次
20 mL．将萃取溶液转移至 100 mL容量瓶中，用氯仿定容．
3 实验方法与结果
3． 1 测量波长的选择
精密量取标准品溶液、待测样品溶液各 2． 0 mL，置于 125 mL分液漏斗中，加入 5． 0 mL pH 值为 3． 8 的
乙酸 －乙酸钠缓冲溶液和 2． 0 mL溴甲酚绿显色试剂，再加入氯仿 10． 0 mL，振摇 1 min，静置至氯仿液澄清，
取氯仿层于带塞的锥形瓶中，用无水硫酸钠(在无水条件下进行，少量的水会影响测定的准确性)［7］干燥
5 min．分别取氯仿层、样品溶液和溴甲酚绿显色剂，在 200 ～ 700 nm波长范围内进行扫描，见图 1、图 2．结果
表明，标准品溶液和待测样品溶液在(417 ± 2)nm有最大吸收，且不受样品溶液、溴甲酚绿显色剂的干扰，选
择测定波长为 417 nm．
3． 2 标准曲线的绘制
精密移取标准品溶液 0． 1，0． 2，0． 3，0． 4，0． 5，0． 6 mL，用氯仿定容到 10 mL． 再分别移取 2． 0 mL 置于
125 mL分液漏斗中，加入 5． 0 mL pH值为 3． 8 的乙酸 －乙酸钠缓冲溶液和 2． 0 mL溴甲酚绿显色试剂，再加
入氯仿 10． 0 mL，振摇 1 min，静置至氯仿液澄清，分别移取氯仿层于具塞锥形瓶中，用无水硫酸钠干燥5 min，
在 417 nm波长下测定紫外吸收．
以质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，作图所得标准曲线的回归方程为:Y = 0． 011 7X + 0． 056，r =
0． 997 1(n = 6) ，表明吸光度和含量的线性关系良好．
3． 3 缓冲液 pH的选择
精密移取待测样品溶液 5 份，每份 2． 0 mL，置于 125 mL 分液漏斗中，依次加入 5． 0 mL pH = 3． 8，4． 2，
4． 6，5． 0，5． 4 的乙酸 －乙酸钠缓冲液及 2． 0 mL 溴甲酚绿显色试剂，用 3． 2 所述的实验方法进行操作，在
417 nm处测定吸光度值．结果表明，当缓冲液 pH =3． 8 时，吸光度值最大，即最灵敏．
3． 4 缓冲液用量的选择
精密移取待测样品溶液 5 份，每份 2． 0 mL，置于 125 mL分液漏斗中，依次加入 pH = 3． 8 的缓冲液 2． 0，
3． 0，4． 0，5． 0，6． 0 mL，用 3． 2 所述的实验方法进行操作，在 417 nm处测定吸光度值．结果表明，当缓冲液用
量为 5． 0 mL时，吸光度值最大．
3． 5 稳定性实验
精密移取待测样品溶液 2． 0 mL，置于 125 mL分液漏斗中，用 3． 2 所述的实验方法进行操作，在 417 nm
波长下，每隔 10 min 测定一次吸光度值．实验所得吸光度值的 RSD 为 1． 05% ．结果表明，在室温环境下，待
测样品在 10 ～ 60 min范围内吸光度基本保持稳定．
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郑 州 大 学 学 报 (理 学 版 ) 第 44 卷
3． 6 精密度实验
精密移取待测样品溶液 6 份，每份 2． 0 mL，分别置于 125 mL 分液漏斗中，用 3． 2 所述的实验方法进行
操作，在 417 nm波长下测定其吸光度值．实验所得吸光度值的 RSD为 0． 89%，表明用本法来测定总生物碱
含量，精密度符合要求．
3． 7 加样回收率实验
精密移取待测样品溶液 3 份，每份 2． 0 mL，分别置于 125 mL 分液漏斗中，依次加入标准品溶液 1． 0，
2． 0，3． 0 mL，用 3． 2 所述的实验方法进行操作，在 417 nm 波长下测定其吸光度值． 所得平均回收率为
99． 2%，RSD为 0． 3% ．
3． 8 样品含量测定
精密移取待测样品溶液 6 份，每份 2． 0 mL，置于 125 mL分液漏斗中，分别加入 5． 0 mL pH 值为 3． 8 的
乙酸 －乙酸钠缓冲溶液和 2． 0 mL溴甲酚绿显色试剂，再各加入氯仿 10． 0 mL，振摇 1 min，静置至氯仿液澄
清，移取氯仿层于具塞锥形瓶中，用无水硫酸钠干燥 5 min，移取到 20 mL 容量瓶中，用氯仿定容，在 417 nm
处测定吸光度值，所得吸光度的平均值为 1． 210，RSD为 0． 56%，将所得值带入回归方程可计算出雀儿舌头
中总生物碱的平均含量为 0． 29% ．
4 结论
利用酸性染料比色法对雀儿舌头中总生物碱含量进行测定，消除了两相滴定法因终点观察困难所带来
的误差，且分光光度计为常备仪器，操作简单，实验条件容易控制，稳定性好，所选用的溴甲酚绿显色剂灵敏
度高，干扰较小．因此以苦参碱为对照品，溴甲酚绿分光光度比色法可以成为测定雀儿舌头中总生物碱含量
的理想方法．
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Determination of Total Alkaloid Content in Leptopus
chinensis of Chinese Herbal Medicine
XUE Qian-qian1， CHEN Yan-jun2， LEI Qiang1， WANG Chao1， LONG Yue1
(1． College of Chemistry and Molecular Engineering，Zhengzhou University，Zhengzhou 450001，China;
2． College of Chemical and Environmental Engineering，Jiaozuo University，Jiaozuo 454003，China)
Abstract:The acid dye colorimetry determination of alkaloid content in Leptopus chinensis was established
through the ultraviolet spectrophotometry with marine as control and bromocresol green as colour-develo-
ping agent． The results showed that the linear relationship between absorbance and content was good and
the sample was stable during 1 h determination time． This was an accurate，simple and quick method to
determine the content of the total alkaloid in Leptopus chinensis．
Key words:Leptopus chinensis;alkaloid;ultraviolet determination
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