全 文 ：收稿日期:2004-12-30;修回日期:2005-03-20
基金项目:广西师范大学科研基金资助项目
联系人简介:卢昕(1962-),女 ,副教授 ,主要研究方向为生物分析及天然产物分离分析。 Email:luxin-chem@tom.com
文章编号:1004-1656(2005)06-0816-02
鸡尾木生物碱的含量分析
卢　昕 1 ,付丽娜 2, 4 ,刘承伟3 ,王　红 2 ,肖朝萍 2
(1.广西师范大学化学化工学院 ,广西　桂林　541004;2.中国科学院成都有机化学研究所 ,四川成都　610041;
3.桂林医学院基础部 ,广西　桂林　541004;4.中国科学院研究生院 ,北京　100039)
关键词:鸡尾木;生物碱;定量分析;哌啶酮;金刚烷胺
中图分类号:O657.71　文献标识码:A
鸡尾木 (ExcoecariaVenenataS.LeeetF.N.
Wei),大戟科 ,海漆属 , 1982年由李树刚 、韦发南鉴
定为一新树种[ 1] 。鸡尾木的化学成分研究刘绍华
等人报道从该植物中分离鉴定出没食子酸 、α-香
树脂醇和 β -谷甾醇[ 2] ,作者在该科属植物中发
现含有异硫氰酸脂[ 3] 。确定其主要生物碱为 2, 2,
6, 6-四甲基 -4-哌啶酮 、金刚烷胺。本文对鸡
尾木叶片中总生物碱及上述两个主要生物碱的含
量做了进一步的分析测定 。
1　实验部分
1.1仪器 、试剂与样品
103型气相色谱仪;2, 2, 6, 6-四甲基 -4-哌
啶酮(TMPD)标准品 ,从鸡尾木中提取 、精制;金刚
烷胺(AAT)标准品 ,均经过红外 、核磁谱分析判
定;试剂均为分析纯;鸡尾木样品:采自广西崇左
县 ,由广西植物研究所韦发南教授鉴定。将其鲜
叶阴干 ,粉碎 ,或将鲜叶剪碎 ,待用。
1.2实验方法
1.2.1总生物碱含量的测定(以哌啶酮计 ,酸碱滴
定法)
准确称取 2g粉碎干叶样品 ,分别进行以下操
作 。a)2%HCl浸泡过夜 ,滤液用石油醚萃取 ,水
层用 NaOH调 pH至 10 ～ 11 ,过滤后滤液用 1/3体
积 CHCl3萃取 3次 ,减压旋转蒸发除去 CHCl3得
酸浸总生物碱;b)80%乙醇提取 ,滤液除去乙醇 ,
浸膏用 2%HCl溶解 ,过滤后滤液用 NaOH继续调
pH至 10 ～ 11, CHCl3萃取 ,除去 CHCl3得醇提总
生物碱;c)25%浓氨水浸泡过夜 , 滤液用 CHCl3
萃取 ,除去 CHCl3得碱浸总生物碱。
准确称取 0.02gTMPD标样 ,加 0.01090mol/
LH2SO4标准溶液 15.00mL,以甲基橙 、溴甲酚绿
为混合指示剂 (V/V=1∶1), 0.01803mol/LNaOH
标准溶液滴定至黄绿色为终点。样品同上测定 ,
计算含量(表 1)。
加适量 TMPD标准品于干叶样品中 ,进行相
同的提取和滴定操作 ,计算回收率。酸浸法平行
测定五次 ,计算相对标准偏差 。
1.2.2哌啶酮含量的测定(气相色谱法)
色谱条件:3%OV-225柱 2m×Υ3mm,柱温
140℃,气化温度 210℃, FID200℃, N2:40mL/min;
H2:65mL/min, air:280mL/min,进样量:lμL。
标准曲线的制作;准确称取 TMPD标准品 10mg,
丙酮溶解并定容至 10.00mL,用移液管吸取 1.00mL、
3.00mL、5.00mL分别稀释并定容至 10.00mL,进样测
量。以峰面积 A对质量浓度 C(g/L)作线性回归 ,得
回归方程为 y=112988+346050X, r=0.9992。浓
度范围为 0.1238 g/L～ 1.238g/L。
样品前处理及测定:准确称取粉碎干叶 4g、鲜
叶 127g, 按照 1.2.1.1中 a)酸浸法处理 。干叶提
取物用丙酮溶解并定容至 1.00mL;鲜叶提取物用
丙酮溶解并定容至 10.00mL。分别进样测量 , 计
算含量(表 2)。
回收率及精密度测定:加适量 TMPD标准品
于已知浓度的样品液中 ,以相同条件进行测定 ,考
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察方法回收率(表 2)。样品液平行进样六次 ,计
算精密度(表 2)。
1.2.3金刚烷胺含量的测定(气相色谱法)
色谱条件:色谱柱 2%KOH+15%聚乙二醇
ChromasorbWNAW(80 ～ 100目), 2m×3mm玻璃
柱 ,内表面涂 2%碱液。柱温 170℃, 气化温度
230℃, FID 200℃, N2:50mL/min, H2:35mL/min:
400mL/min,进样量:1μL。
标准曲线的制作:准确称取 AAT标准品
10mg,乙醇加热溶解并定容至 10.00mL,分别取
1.00mL、2.60mL、 5.00mL稀释定容至 10.00mL,
进样测量。以峰面积 ”A对质量浓度 C(g/L)作线
性回归 ,回归方程为 y=-6389 +254803X, r=
0.9994。浓度范围为 0.1025g/L～ 1.025g/L
样品测定:取 1.2.2.3项中鲜叶提取液进样
测量 ,含量计算见表 2。
回收率及精密度测定:加适量 AAT标准品于
已知浓度的样品液中 ,以相同条件进行测定 ,考察
方法回收率(表 2)。样品液平行进样六次 ,计算
精密度(表 2)。
2　结果与讨论
2.1鸡尾木总生物碱
从表 1可见酸浸法所得到的总碱量最高 ,碱
浸次之 ,两者回收率亦合理;醇提法含量则明显偏
低 。若欲使用醇提法提取生物碱 ,可使用阳离子
交换树脂分离纯化[ 4] ,以降低生物碱损失率 。
表 1　不同方法提取的鸡尾木总生物碱含量测定结果(n=3)
Table1Analyticalresultsofcontentoftotalalkaloidin
theleavesofExcoecariaVenenataextractedby
diferentmethods(n=3)
提取方法 平均相对含量% 回收率% RSD%
酸浸 0.554 105.4 2.3
醇提 0.131 96.5 3.0
碱浸 0.445 98.3 1.8
2.2　鸡尾木哌啶酮
干 、鲜叶中哌啶酮 [ 5]的含量测定结果见表 2。
测定结果显示干叶中的含量远远低于鲜叶 ,这与
鸡尾木民间药用经验特别强调鲜叶入药相吻合。
表 2　鸡尾木叶哌啶酮及金刚烷胺含量测定结果(n=3)
Table2 AnalyticalresultsofcontentsofTMPDandAAtin
theleavesofExcoecariaVenenata(n=3)
干叶 鲜叶
生物碱 哌啶酮 哌啶酮 金刚烷安
平均含量% 0.25 1.94 1.616×10 -2
回收率% 98.6 102.1 101.6
RSD% 1.8 1.2 0.8
2.3鸡尾木金刚烷胺
鲜叶中金刚烷胺含量见表 2。从表 2中看到:
金刚烷胺含量低 ,其性质易升华 ,在叶片阴干过程
中损失量大 ,故在干叶中未准确检出 ,只在鲜叶中
检出 。
参考文献:
[ 1] 李树刚 , 韦发南.广西植物 , 1982, 2(3):129-123.
[ 2] 刘少华 , 谢运昌 , 程菊英.广西植物 , 1992, 12(2):133
-135.
[ 3] 卢昕 , 张新申 ,刘承伟.化学研究与应用 , 2003, 15(5):
676-677.
[ 4] 谭远友 , 洪子鹏 ,郭庆宏.畜牧兽医学报 , 2002, 33(4):
352-353.
[ 5] 齐迎春 , 胡诚 ,谭远友.特产研究 , 2001, (1):22-23.
QuantitativeAnalysisofalkaloidintheleavesofExcoecariavenenata
LUXin1 , FULi-na2, 4 , LIUCheng-wei3 , WANGHong2 , XIAOhao-ping2
(1.CollegeofChemistryandChemicalEngineering, GuangXiNormalUniversity, Guilin541004, China;
2.C、hengduInstituteofOrganicChemistry, ChineseAcademyofSciences, Chengdu610041, China;
3.DepartmentofFoundation, GuilinMedicalCollege, Guilin541004, China;
4.GraduateSchooloftheChineseAcademyofScience, Beijing100039, China)
Abstract:Inthispaper, weusedacid-basetitrationtodeterminethecontentoftotalalkaloidinExcoecariavenenataextractedby
differentmethods.Thecontentsof2, 2, 6, 6-tetramethy1-4-piperidone(TMPD)andaminoadantane(AAT)insameplantwere
determinedbygaschromatography(GC).Theresultshowedthatthemostquantityofalkaloidwasgotwith2%HCIaqueoussolu-
tion.Thecontentoftotalalkaloidinthedryleaveswas0.554% .ThecontemtsofTMPDandAATwere1.94%and1.62×10 -2%
inthefreshleaves, respectively.
Keywords:Excoecariavenenata;alkaloid;quantitativeanalysis;2, 2, 6, 6-tetramethy1-4-piperidone;aminoadantane
(责任编辑　李　方)
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