全 文 ： 来稿日期：２０１１－１１－０７
基金项目：安徽科技学院青年科研基金项目：滁州地区白鲜皮的生物学特性及引种驯化研究 （ＺＲＣ２０１１２８２）；安徽科技学院大学生
创新课题 （滁州白鲜成分提取及产地加工工艺研究）
作者简介：周丽丽（１９８０－），女，山东烟台人，讲师，硕士，主研方向为中药栽培与质量评价．
不同产地白鲜皮中黄柏酮含量测定及聚类分析
周丽丽，左 玲，马冬磊
（安徽科技学院，安徽 凤阳２３３１００）
摘要：目的 测定不同产地白鲜皮中黄柏酮含量并进行聚类分析．方法 采用 ＨＰＬＣ法测定不同产地白
鲜皮中黄柏酮含量，色谱柱：ＺＯＲＢＡＸ ＳＢ－Ｃ１８ （４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ）；流动相：甲醇－水 （６０∶４０）；检
测波长：黄柏酮２１５ｎｍ；柱温：４０℃；流速：１ｍＬ·ｍｉｎ－１；进样量：１０μＬ；记录时间：２０ｍｉｎ．然后采用计
算机的模式识别方法进行聚类分析．结果 不同产地白鲜皮药材中黄柏酮的含量分别为：辽宁０．１５１ ６％，内
蒙古０．２３４ ８％，黑龙江０．１４９ ９％，吉林０．１５０ ８％，河北０．１９４ ６％，陕西０．１５９ ８％，山东０．１６２ １％，安徽
０．２１０ ２％．范围为１．４９９～２．３４８ｍｇ／ｇ．结论 不同产地白鲜皮中黄柏酮含量不尽相同、东北部地区大致可归
为一类．
关键词：白鲜皮；ＨＰＬＣ；黄柏酮；含量测定；聚类
中图分类号：Ｓ ５６７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３－１４９２ （２０１２）０１－００１２－０３
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｈｉｅｒａｃｈｉｃａｌ Ｃｌｕｓｔｅｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｏｂａｃｕｎｏｎｅ
ｉｎ Ｃｏｒｔｅｘ Ｄｉｃｔａｍｎｉ ｉｎ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ａｒｅａｓ
ＺＨＯＵ Ｌｉ－ｌｉ，ＺＵＯ Ｌｉｎｇ，ＭＡ Ｄｏｎｇ－ｌｅｉ
（Ａｎｈｕｉ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｅｎｇｙａｎｇ ２３３１００，Ａｎｈｕｉ，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｏｂａｃｕｎｏｎｅ ｉｎ Ｃｏｒｔｅｘ Ｄｉｃｔａｍｎｉ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｒｅａｓ ａｎｄ ｔｏ ｃｏｎｄｕｃｔ ｈｉ－
ｅｒａｃｈｉｃａｌ ｃｌｕｓｔｅｒ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＨＰＬＣ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｒｋ ｋｅｔｏｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ Ｄｅｎｓｅｆｒｕｉｔ Ｐｉｔｔａｎｙ
Ｒｏｏｔ－ｂａｒｋ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｒｅａｓ，Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ：ＺＯＲＢＡＸ ＳＢ－Ｃ１８ （４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ），
Ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ：ｍｅｔｈａｎｏｌ－ｗａｔｅｒ（６０∶４０）；Ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ：Ｏｂａｃｕｎｏｎｅ ２１５ｎｍ；Ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａ－
ｔｕｒｅ：４０℃；Ｖｅｌｏｃｉｔｙ：１ｍＬ，ｍｉｎ－１；Ｓａｍｐｌｅ ｓｉｚｅ：１０μＬ；Ｒｅｃｏｒｄｅｄ ｔｉｍｅ：２０ｍｉｎ．Ｐａｔｔｅｒｎ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ
ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｃｏｍｐｕｔｅｒ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｃｏｎｄｕｃｔ ｈｉｅｒａｃｈｉｃａｌ ｃｌｕｓｔｅｒ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔ Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｏｂａｃｕｎｏｎｅ ｉｎ
Ｃｏｒｔｅｘ Ｄｉｃｔａｍｎｉ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｒｅａｓ ｗｅｒｅ：Ｌｉａｏｎｉｎｇ ０．１５１６％，Ｎｅｉｍｅｎｇ ０．２３４８％， Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ
０．１４９９％，Ｊｉｌｉｎ ０．１５０８％，Ｈｅｂｅｉ ０．１９４６％，Ｓｈａｎｘｉ ０．１５９８％，Ｓｈａｎｄｏｎｇ ０．１６２１％，ａｎｄ Ａｎｈｕｉ
０．２１０２％．Ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｗａｓ １．４９９～２．３４８ｍｇ／ｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｏｒｔｅｘ Ｄｉｃｔａｍｎｉ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｒｅａｓ ｃｏｎｔａｉｎｓ ｄｉｆ－
ｆｒｅｒｅｎｔ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｏｂａｃｕｎｏｎｅ．Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｏｆ ｎｏｒｔｈｅａｓｔ ｒｅｇｉｏｎ ｃａｎ ｂｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｅｄ ｉｎｔｏ ｓａｍｅ ｃａｔｅｇｏｒｙ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｃｏｒｔｅｘ Ｄｉｃｔａｍｎｉ；ＨＰＬＣ；ｏｂａｃｕｎｏｎｅ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｈｉｅｒａｃｈｉｃａｌ ｃｌｕｓｔｅｒａｎａｌｙｓｉｓ
白鲜皮为芸香科白鲜 （Ｄｉｃｔａｍｎｕｓ ｄａｓｃａｒｐｕｓ Ｔｕｒｃｚ．）的干燥根皮［１］，主产地为辽宁、内蒙古、黑龙
江、河北、安徽等，它具有清热燥湿、祛风解毒、抗菌、抗癌作用［２］．２０１０版中国药典中将梣酮、黄柏
酮作为主要有效成分进行含量测定．白鲜皮主要活性成分含有白鲜碱、茵芋碱等生物碱及梣酮、黄柏酮等
内脂类化合物［３－５］．其中黄柏酮可增强抗肿瘤药的细胞毒作用，但目前对于不同产地白鲜皮中黄柏酮含量
研究还较少［６，７］．文中采用 ＨＰＬＣ法测定了不同产地白鲜皮中黄柏酮含量，对主产地白鲜皮进行质量评
价，并用计算机模式识别方法对其进行了聚类分析．
·２１·
第２８卷第１期
２０１２年２月
（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ Ｎｏｒｔｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ）
Ｖｏｌ．２８Ｎｏ．１
Ｆｅｂ．２０１２
１ 材料
１．１ 实验药材
辽宁、内蒙古、黑龙江、吉林等产地的白鲜皮从安徽亳州药材大市场购得，安徽白鲜皮采自滁州市凤
阳县狼巷迷谷，捶打后抽去木心干燥即得．甲醇为色谱纯，黄柏酮标准品，纯度≥９８％ （ＨＰＬＣ），购自
上海源叶生物有限公司，批号Ａ０２６５．
１．２ 仪器
ＣＰ２２５０准微量天平 （塞多利斯仪器有限公司）；Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪．
２ 方 法
２．１ 色谱条件
色谱柱：ＺＯＲＢＡＸ ＳＢ－Ｃ１８ （４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ）；流动相：甲醇 （Ａ）－水 （Ｂ）＝６０∶４０；检
测波长：２１５ｎｍ；柱温：４０℃；流速：１ｍＬ·ｍｉｎ－１；进样量：１０μＬ；记录时间：２０ｍｉｎ．
２．２ 黄柏酮标准品溶液的制备
精密称取黄柏酮对照品０．０００ ５０ｇ于５ｍＬ的容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，配制成０．１ｍｇ／ｍＬ的
黄柏酮标准品溶液，备用．
２．３ 供试品溶液的制备
图１ Ａ：黄柏酮紫外吸收图 Ｄ：黄柏酮色谱图 Ｆ：样品色谱图
·３１·
２０１２年２月 周丽丽 等：不同产地白鲜皮中黄柏酮含量测定及聚类分析 第１期
２．３．１ 供试材料的准备实验
取各产地干燥白鲜皮用粉碎机粉碎，过４０目筛，备用．
２．３．２ 加热回流法对供试品溶液的提取
精密称取白鲜皮粉末１．００ｇ装入２５０ｍＬ的锥形瓶中，准确量取２５ｍＬ甲醇加入锥形瓶．粉末溶液
静置２ｈ，称定重量，加热回流提取１ｈ，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取
滤液，即得．
２．４ 检测波长及保留时间的确定
取黄柏酮标准品溶液和供试品溶液，分别进样１０μＬ．如下图１所示，黄柏酮最佳检测波长２１５ｎｍ，
保留时间为８．６４７ｍｉｎ，样品色谱图显示黄柏酮峰能和杂质峰达到基线分离．
２．５ 标准曲线的制备
取黄柏酮标准品溶液，连续进样，进样量分别为１０μＬ，２０μＬ，３０μＬ，４０μＬ，５０μＬ，测定峰面
积．以峰面积对含量进行线性回归，求得黄柏酮标准曲线回归方程为：Ｙ＝９７２１３１Ｘ－８３５６１，Ｒ２＝０．９９９ ９．
结果表明黄柏酮在１．０～５．０μｇ范围内线性关系良好．
３ 实验结果与分析
表１ 含量测定试验结果
产地 黄柏酮峰面积 黄柏酮百分含量／％
辽宁
内蒙古
黑龙江
吉林
河北
陕西
山东
安徽
１７１３ ２７０
２６３８ ９５０
１５９４ ７３８
１６２４ ６４３
２１６５ ４７４
１８７４ ５４３
１９３６ ７５４
２２８７ ２３２
０．１５１ ６
０．２３４ ８
０．１４９ ９
０．１５０ ８
０．１９４ ６
０．１５９ ８
０．１６２ １
０．２１０ ２
３．１ 试验结果
采用 ＨＰＬＣ法测定的不同产地白鲜皮中黄柏酮含量与
黄柏酮峰面积如表１所示：
３．２ 聚类分析
采用不同产地白鲜皮黄柏酮含量与黄柏酮峰面积为数量
性状，对８个白鲜皮样品 （１：辽宁、２：内蒙古、３：黑龙
江、４：吉林、５：河北、６：陕西、７：山东、８：安徽）进
行聚类分组．聚类分析前，先对样本数据进行归一化，即对
表１中的８个样本中的两个数据性状进行数据归一．层次聚
类分析的树形图见图２．
图２ 不同产地白鲜皮黄柏酮含量聚类树形图
聚类结果表明，文中所分析的８个白鲜皮样品大致可
以聚为三组，第一组中主要是东北地区省份的白鲜皮药材
分布，如１号辽宁、３号黑龙江、４号吉林的样品，而６号
陕西和７号山东的白鲜皮样品中黄柏酮含量和第一组相近，
聚类为一组；５、８号被聚分在另一组中；２号内蒙古的样
品单独被聚分在第三组中，其白鲜皮样品中黄柏酮含量最
高．
４ 讨 论
２０１０版中国药典将梣酮和黄柏酮标准品混合测定，色
谱条件中检测波长为２３６ｎｍ．本试验将黄柏酮对照品溶液
于紫外２００～４００ｎｍ处进行波长扫描，测得最大吸收波长分别为２１５ｎｍ，故本实验采用２１５ｎｍ做检测波
长．
目前中国白鲜皮主产于内蒙古及东北三省，２０１０年中国药典中规定白鲜皮中黄柏酮含量≥０．１５％．实
验结果表明安徽和内蒙古白鲜皮中黄柏酮含量比较高，辽宁作为最大产区之一其黄柏酮含量为０．１５１ ６％，
偏低，可能与不合理的产地加工方法有关．
５ 结 论
采用高效液相色谱法进行含量测定操作简单、快捷、结果准确．不同产地白鲜皮中黄 （下转第２０页）
·４１·
２０１２年２月 河北北方学院学报 （自然科学版） 第１期
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Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ ｏｆ ＣＡＮＳ ２００５ （ＬＮＣＳ ３８１０）［Ｃ］．Ｂｅｒｌｉｎ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，２００５：１３－２５
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Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ２０ｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｓｅｃｕｒｉｔｙ（ＩＦＩＰ／ＳＥＣ２００５）［Ｃ］．Ｂｅｒｌｉｎ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，
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Ｗｏｒｋｓｈｏｐ’０５ ［Ｃ］．Ｂｅｒｌｉｎ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，２００５：８２５－８３４
［１５］ Ｓｅｏａ ＳＨ，Ｈｗａｎｇｂ ＪＹ，Ｃｈｏｉｂ ＫＹ，ｅｔ ａｌ．Ｉｄｅｎｔｉｔｙ ｂａｓｅｄ ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ｄｅｓｉｇｎａｔｅｄ ｍｕｌｔｉ－ｖｅｒｉｆｉｅｒｓ ｓｉｇｎａｔｕｒｅ ｓｃｈｅｍｅｓ［ＯＬ］．
ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓｃｉｅｎｃｅｄｉｒｅｃｔ．ｃｏｍ
［１６］ Ａｌ－Ｒｉｙａｍｉ ＳＳ，Ｐａｔｅｒｓｏｎ ＫＧ．Ｃｅｒｔｉｆｉｃａｔｅｌｅｓｓ ｐｕｂｌｉｃ ｋｅｙ ｃｒｙｐｔｏｇｒａｐｈｙ［Ａ］．Ｉｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｃｒｙｐｔｏｌｏｇｙ－
Ａｓｉａｃｒｙｐｔ’０３ ［Ｃ］．Ｂｅｒｌｉｎ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，２００３：４５２－４７３
［１７］ Ｍｉｎｇ Ｙ，Ｓｈｅｎ ＸＱ，Ｗａｎｇ ＹＭ．Ｃｅｒｔｉｆｉｃａｔｅｌｅｓｓ ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ｄｅｓｉｇｎａｔｅｄ ｖｅｒｉｆｉｅｒ ｓｉｇｎａｔｕｒｅ ｓｃｈｅｍｅ［Ｊ］．Ｊ Ｃｈｉｎａ Ｕｎｉｖ Ｐｏｓｔｓ
Ｔｅｌｅｃｏｍｍ，２００７，１４ （３）：８５－９４
［责任编辑：刘守义 英文编辑：刘彦哲
櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴
］
（上接第１４页）
柏酮含量有一定差异：内蒙古含量最高，单独分在一组；河北、安徽被聚分在一组；辽宁、黑龙江、吉林
被聚分在一组，陕西、山东被聚分在另一组．
参考文献：
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［责任编辑：刘守义 英文编辑：刘彦哲］
·０２·
２０１２年２月 河北北方学院学报 （自然科学版） 第１期