全 文 ：［3］ 蒋 毅，李 鹤，罗思奇，等. 南蛇藤活性成分的研究［J］.中
草药，1996，27(2):73-74.
［4］ 王奎武. 三种卫矛科药用植物的化学成分研究［D］. 浙江大
学，2006.
［5］ 王奎武，胡新玲，沈莲清，等. 三花假卫矛三萜类化学成分
的研究［J］. 中国中药杂志，2007，32(15):1539-1541.
［6］ Jeller A H，Siqueira Silva D H，Liao L M，et al. Antioxidant
phenolic and quinonemethide triterpenes from Cheiloclinium cog-
natum［J］. Phytochemistry，2004，65:1977-1982.
［7］ Yang H J，Chen D. Celastrol，a triterpene extracted from the
Chinese“Thunder of God Vine，”is a potent proteasome inhibitor
and suppresses human prostate cancer growth in nude mice［J］.
Cancer Res，2006，66(9):4758-4765.
［8］ Yang H J，Landis-Piwowar K R，Lu D，et al. Pristimerin in-
duces apoptosis by targeting the proteasome in prostate cancer
cells［J］. J Cell Biochem，2008，103:234-244.
［9］ Chao K P，Hua K F，Hsu H Y，et al. Anti-inflammatory activity
of sugiol，a diterpene isolated from Calocedrus formosana bark
［J］. Planta Med，2005，71:300-305.
［10］ Chen K，Shi Q，Kashiwada Y，et al. Anti-AIDS agents，6.
salaspermic acid，an anti-HIV principle from Tripterycium wilfor-
dii，and the structure-activity correlation with its related com-
pounds［J］. J Nat Prod，1992，55(3):340-346.
［11］ 袁玉英，顾芝萍，石其贤，等. 南蛇藤素抑制豚鼠体外精子
的受精能力［J］. 药学学报，1995，30(5):331-335.
HPLC测定野老鹳草中没食子酸和鞣花酸的总量
金 欣， 王 锋， 姚 岚， 吴秋月， 王琪琳， 刘丽芳*
(中国药科大学 中药分析教研室，江苏 南京 211198)
收稿日期:2009-09-18
资助项目:国家药典委员会 2010 版一部标准研究课题(YS-229，YS-230)
作者简介:金 欣(1985 －)，女，在读硕士研究生，主要从事中药制剂分析研究。Tel:(025)86185373
* 通讯作者:刘丽芳(1969 －)，女，博士，副教授，主要从事中药活性成分和动物药研究。Tel:(025)86185446 E-mail:liulifang69@ 126. com
关键词:野老鹳草;HPLC;没食子酸;鞣花酸;含量测定
摘要:目的:建立野老鹳草中没食子酸和鞣花酸总量测定的方法。方法:采用 HPLC 法。色谱条件:色谱柱为 Diamonsil
C18(2)色谱柱(150 mm ×4. 6 mm，5 μm);流动相为乙腈-0. 1%磷酸溶液梯度洗脱;流速为 1. 0 mL /min;检测波长为 274
nm;柱温为 25 ℃。结果:没食子酸和鞣花酸的线性范围分别是:0. 075 ～ 5. 00 μg(r = 0. 999 5)、0. 05 ～ 2. 00 μg(r =
0. 999 5)，平均回收率分别是 97. 9%(RSD = 0. 53%)、102. 6%(RSD = 2. 14%)。结论:本法简便、准确、重复性好，可用
于野老鹳草药材的质量评价。
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2010)07-1172-05
Determination of gallic acid and ellagic acid in Geranium carolinianum L. by
HPLC
JIN Xin， WANG Feng， YAO Lan， WU Qiu-yue， WANG Qi-lin， LIU Li-fang*
(Department of Analysis of Chinese Medicine，China Pharmaceutical University，Nanjing 211198，China)
KEY WORDS:Geranium carolinianum L.;HPLC;gallic acid;ellagic acid;determination
ABSTRACT:AIM:To establish a method for determining gallic acid and ellagic acid in Geranium carolinianum
L. . METHODS:An HPLC method was performed on a Diamonsil C18 column (150 mm ×4. 6 mm，5 μm)with
acetonitrile-0. 1%H3PO4 as mobile phase. The flow rate was 1. 0 mL /min，the detection wavelength was set at 274
nm and the column temperature was at 25 ℃ . RESULTS:The calibration curve of gallic acid and ellagic acid
were linear in the range of 0. 075 ～ 5. 00 μg (r = 0. 999 5)and 0. 05 ～ 2. 00 μg (r = 0. 999 5)，respectively. The
average recovery of gallic acid and ellagic acid were 97. 9%(RSD = 0. 53%)and 102. 6%(RSD = 2. 14%)，re-
spectively. CONCLUSION:The method is simple，accurate and suitable for the quality control for this herb.
2711
2010 年 7 月
第 32 卷 第 7 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
July 2010
Vol. 32 No. 7
老鹳草是我国常用中药，《中国药典》2005 版中
收载正品老鹳草为牻牛儿苗科植物牻牛儿苗 Erodi-
um stephanianum Willd.、老鹳草 Geranium wilfordii
Maxim.或野老鹳草 Geranium carolinianum L.的干燥
地上部分［1］。据文献报道［2］老鹳草的主要成分为
鞣质、黄酮类、有机酸及挥发油等，其具有广谱抗菌、
抗病毒及抗氧化等多种药理作用［3，4］。其中鞣质类
化合物老鹳草素及其分解产物是抗氧化作用的主要
成分，具有抗氧化、维持体内自由基的稳定和平衡、
消除有害的自由基反应、中断脂质过氧化、减少脂质
过氧化产物等作用［5，6］。没食子酸和鞣花酸为老鹳
草素的主要分解产物，本文采用高效液相色谱法同
时对目前我国老鹳草药材的主流品种———野老鹳草
中没食子酸和鞣花酸的总量进行了测定。该研究为
制定野老鹳草的质量标准和对野老鹳草药材的进一
步开发利用提供了科学依据。
1 仪器与试药
Agilent 1100 HPLC Series 液相色谱仪(Agilent
公司，美国);Diamonsil C18(2)色谱柱，(150 mm ×
4. 6 mm，5 μm)(Dikma 公司，美国);KH3200E 型超
声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司);没食子
酸对照品(中国药品与生物制品检定所，批号:
110831-200302);鞣花酸对照品(自制，纯度大于
98%(HPLC))。老鹳草全部由中国药科大学中药
学院刘丽芳副教授鉴定为野老鹳草 Geranium caro-
linianum L.，标本存放于中国药科大学中药分析实
验室;乙腈为色谱纯(Dikma 公司，美国);水为乐百
氏纯净水;其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱采用 Diamonsil C18(2)色谱
柱，(150 mm × 4. 6 mm，5 μm)。流动相为乙腈-
0. 1%磷酸溶液，洗脱程序见表 1。流速 1. 0 mL /
min，检测波长 274 nm，柱温 25 ℃。色谱图见图 1。
表 1 洗脱程序
梯度时间
/min
流动相
乙腈 /% 0. 1%磷酸 /%
0. 00 2 98
15. 00 10 90
25. 00 15 85
35. 00 30 70
45. 00 50 50
2. 2 溶液的制备
2. 2. 1 供试品溶液的制备 取本品细粉约 1 g(过
4 号筛)，精密称定，置锥形瓶中，加盐酸-50%甲醇
(10%(v / v))50 mL，加热回流 0. 5 h，滤过。残渣同
A
B
C
图 1 没食子酸(A)、鞣花酸(B)、野老鹳草(C)的
HPLC色谱图
1.没食子酸 2.鞣花酸
法再提取 1 次，滤过，合并滤液，减压蒸干溶剂，残渣
用 50%甲醇溶解并定容至 50 mL 量瓶中，摇匀，精
密移取 10 mL蒸干，残渣用 50%甲醇溶解并定容至
25 mL量瓶中，摇匀，用微孔滤膜(0. 45 μm)滤过，
取续滤液，即得。
2. 2. 2 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对
照品适量，加 50%甲醇制成每 1 mL中含 50 μg的溶
液;精密称取鞣花酸对照品适量，加二甲基亚砜制成
每 1 mL中含 50 μg的溶液，即得。
2. 3 标准曲线的绘制
2. 3. 1 没食子酸标准曲线的绘制 精密吸取 0. 25
mg /mL的没食子酸对照品溶液 0. 15、1. 00、3. 00、
5. 00、7. 00 mL 加 50%甲醇稀释定容至 10 mL，摇
匀，分别进样 20 μL，用上述色谱条件测定。以进样
量(μg)为横坐标，测得的峰面积积分值为纵坐标绘
制标准曲线，回归方程:Y = 2 752. 5X + 54. 156，r =
0. 999 5。结果表明在 0. 075 ～ 5. 00 μg 之间有良好
的线性关系。
2. 3. 2 鞣花酸标准曲线的绘制 精密吸取 0. 10
3711
2010 年 7 月
第 32 卷 第 7 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
July 2010
Vol. 32 No. 7
mg /mL 的鞣花酸对照品溶液 0. 25、1. 50、2. 50、
3. 50、5. 00 mL加二甲基亚砜稀释定容至 10 mL，摇
匀，分别进样 20 μL，用上述色谱条件测定。以进样
量(μg)为横坐标，测得的峰面积积分值为纵坐标绘
制标准曲线，回归方程:Y = 2 998. 7X + 44. 347，r =
0. 999 5。结果表明在 0. 05 ～ 2. 00 μg 之间有良好
的线性关系。
2. 4 稳定性试验 精密吸取供试品溶液(南京
(080604))，分别于 0、3、6、9、12、24 h 测定，没食子
酸 RSD =2. 48%，鞣花酸 RSD =4. 65%，表明供试品
溶液在 24 h内稳定。
2. 5 精密度试验 精密吸取等体积的对照品溶液
注入液相色谱仪，重复 6 次，没食子酸 RSD =0. 34%，
鞣花酸 RSD =2. 23%，表明仪器精密度良好。
2. 6 重复性试验 取同一样品(南京(080508))5
份，按“2. 2. 1”项方法制备，在 2. 1 项条件下测定，
总没食子酸含量分别为 0. 305 9%、0. 311 8%、
0. 317 5%、0. 310 5%、 0. 305 0%，平 均 值 为
0. 310 1%，RSD = 1. 62%;总鞣花酸含量分别为
0. 106 5%、0. 103 4%、0. 102 6%、0. 106 8%、
0. 105 1%，平均值为 0. 104 9%，RSD =1. 77%，表明
方法的重复性良好。
2. 7 检测限及定量限 分别将没食子酸和鞣花酸
对照品溶液逐渐稀释后进样，取 S /N = 3 时的浓度
为检测限，经测定，没食子酸检测限为 0. 075 μg /
mL，鞣花酸检测限为 0. 25 μg /mL;取 S /N = 10 时的
浓度为定量限，经测定，没食子酸定量限为 0. 25
μg /mL，鞣花酸定量限为 0. 70 μg /mL。
2. 8 回收率试验 精密称取已知含量的样品(山
东(0708200308))共 6 份，分别精密加入一定量的
没食子酸对照品和鞣花酸对照品，混匀后，按 2. 9 项
方法测定含量，计算平均回收率，结果见表 2。
表 2 回收率测定结果(山东(0708200308))
对照品 峰面积
样品称样
量 / g
样品中含
量 /mg
加入量
/mg
实测量
/mg
回收率
/%
平均回收
率 /%
RSD
/%
没食子酸 5 306. 0 0. 501 2 6. 02 6. 00 11. 93 98. 5 97. 9 0. 53
5 266. 1 0. 498 1 5. 99 6. 00 11. 83 97. 3
5 283. 3 0. 499 7 6. 00 6. 00 11. 87 97. 8
5 259. 0 0. 497 3 5. 98 6. 00 11. 82 97. 3
5 344. 3 0. 510 1 6. 12 6. 00 12. 01 98. 2
5 323. 6 0. 502 4 6. 03 6. 00 11. 96 98. 3
鞣花酸 2 433. 2 0. 501 2 2. 42 2. 50 4. 98 102. 4 102. 6 2. 14
2 386. 4 0. 498 1 2. 41 2. 50 4. 88 98. 8
2 424. 6 0. 499 7 2. 42 2. 50 4. 96 101. 6
2 449. 8 0. 497 3 2. 41 2. 50 5. 01 104. 0
2 492. 7 0. 510 1 2. 47 2. 50 5. 10 105. 0
2 452. 6 0. 502 4 2. 43 2. 50 5. 02 103. 6
结果表明，本法具有较好的准确性。
2. 9 样品的含量测定 取 14 批样品，经干燥、粉碎
后，按 2. 2. 1 项方法处理。精密吸取供试品溶液，进
样 20 μL，用外标法测定含量，结果见表 3。
表 3 样品测定结果
编号 没食子酸含量 /(%，以干燥品计) 鞣花酸含量 /(%，以干燥品计)
南京(080508) 0. 310 5 0. 106 8
南京(080515) 1. 103 1 0. 782 8
南京(080604) 1. 786 1 0. 506 7
南京(080621) 0. 740 2 0. 017 9
南京(080702) 1. 220 2 0. 218 1
河南(Y080802) 0. 555 3 0. 224 5
安徽(Y080803) 0. 137 3 0. 276 2
江苏(Y080801) 0. 145 8 0. 295 6
河南(080802) 0. 975 0 0. 189 8
安徽(080803) 0. 430 1 0. 350 7
江苏(080801) 0. 419 7 0. 460 9
山东(070425) 0. 782 5 0. 463 0
山东(0708200308) 1. 353 6 0. 548 0
尼泊尔老鹳草(071120) 1. 298 4 0. 352 9
平均值 0. 804 1 0. 342 4
4711
2010 年 7 月
第 32 卷 第 7 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
July 2010
Vol. 32 No. 7
3 讨论
3. 1 精密称取同一批样品 9 份，分别考察了时间
为 0. 5、1、2 h，盐酸浓度为 5%、10%、20%，溶剂为
30%甲醇、50% 甲醇、70% 甲醇，体积为 25、50、75
mL的 4 因素 3 水平的正交试验，结果表明，时间为
0. 5 h，盐酸浓度为 10%，溶剂为 50%甲醇，体积为
50 mL，提取 2 次为最优方案。
3. 2 老鹳草素(geraniin)属于可水解鞣质中的鞣花
鞣质(ellagitannin)，加水分解时分解为没食子酸
(gallic acid)、六羟基联苯二甲酸(hexahydroxydi-
phenic acid)、鞣花酸(ellagic acid)、柯里拉京(corila-
gin)、云实酸(brevifolincarboxylic acid)、云实素(bre-
vifolin)［5］，见图 2。
1.没食子酸 2.六羟基联苯二甲酸 3.鞣花酸 4.柯里拉京 5.云实酸 6.云实素
图 2 老鹳草素及其分解产物
据文献报道［6-8］，没食子酸对结肠运动呈现显著
的抑制作用，因此老鹳草总鞣质(HGH)有较好的
治疗腹泻作用;鞣花酸具有抗氧化功能，抗癌、抗突
变性能，对人体免疫缺陷病毒有抑制作用。本次实
验采用高效液相色谱法同时对野老鹳草中没食子酸
和鞣花酸的含量进行测定。我们在实验中发现，野
5711
2010 年 7 月
第 32 卷 第 7 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
July 2010
Vol. 32 No. 7
老鹳草的 50%甲醇提取物中成分组成非常复杂，样
品不经水解直接进样分析，70 min 内有包括上述两
种待测成分在内的 80 多个色谱峰被分离出来，因
此，样品液不经水解直接分析所需时间长，且对色谱
柱的柱效要求非常高，给分析测定带来一定的难度。
两种含量相对较高的待测成分平均值也仅为
0. 125 2%和 0. 175 8%。而将样品水解后，由于多
种多酚类化合物具有相同的水解产物，因而使样品
溶液所含成分大大减少，所需分析时间缩短，柱效要
求更适中，水解后样品中没食子酸和鞣花酸总量平
均值达到 0. 804 1%和 0. 342 4%。综合上述原因，
我们将该药材水解后再进行含量测定。
3. 3 我们从各地共收集药材样品 14 批，除一批从
云南药材公司购置的鲜药材经鉴定为尼泊尔老鹳草
(G. nepalense Sweey.)外，其它药材均为野老鹳草
(G. carolinianum L.)的干燥地上部分。由此说明，
该种目前为老鹳草药材的主流品种。样品测定结果
表明，各地野老鹳草水解后的没食子酸含量在
0. 137 3% ～1. 786 1%之间，平均值为 0. 804 1%;鞣
花酸含量在 0. 017 9% ～ 0. 782 8%之间，平均值为
0. 342 4%。各批药材中没食子酸和鞣花酸含量的
差异可能与产地气候，采收期等因素有关，值得进一
步探讨。
参考文献:
［1］ 中国药典［S］.一部. 2005:80.
［2］ 金晴昊，崔京浩，郭建鹏.老鹳草的研究进展［J］. 时珍国医国
药，2005，16(9):840-841.
［3］ Küpeli E，Tatli I I，Akdemir Z S，et al. Estimation of antinocicep-
tive and anti-inflammatory activity on Geranium pratense subsp.
Finitimum and its phenolic compounds［J］. J Ethnopharmacol，
2007(114):234-240.
［4］ LI Jiyang，Huang Hai，Zhou Wei，et al. Anti-hepatitis B Virus
Activities of Geranium carolinianum L. Extracts and Identification
of the Active Components［J］. Biol Pharm Bull，2008，31(4):
743-747.
［5］ 杜晓鸣，郭永泗.老鹳草素及抗氧化作用［J］.国外医药·植物
药分册，1990，5(2):57-61.
［6］ 邹建华.尼泊尔老鹳煎液成分对离体肠管运动的影响［J］.国
外医学·中医中药分册，1993，15(4):44-45.
［7］ 王丽敏，卢春风，路雅真.老鹳草鞣质类化合物的抗腹泻作用
研究［J］.黑龙江医药科学，2003，26(5):29-30.
［8］ 丁运生，孙小虎，李有桂，等.鞣花酸及其衍生物研究进展［J］.
合肥工业大学学报(自然科学版)，2008，31(11):1809-1812.
臭椿果实化学成分研究
杨成见1， 唐文照1， 王晓静1* ， 张朝辉2
(1.山东省医学科学院药物所，山东省天然药物重点实验室，山东 济南 250062;2.山东省郓城县中医院药剂
科，山东 郓城 274700)
收稿日期:2009-11-17
作者简介:杨成见(1980 －)，男，硕士研究生，研究方向:天然药物化学。Tel:15063383618 E-mail:chengjian0327@ tom. com
* 通讯作者:王晓静，女，研究员，硕士生导师，研究方向:天然药物研究与开发。Tel:(0531)82629336 E-mail:xiaojing6@ gmail. com
关键词:臭椿果实(凤眼草);化学成分
摘要:目的:研究臭椿 Ailanthus altissima (Mill.)Swingle的果实(凤眼草)的化学成分。方法:采用硅胶和凝胶柱色谱进
行分离纯化，通过理化常数测定结合波谱学分析鉴定化合物的结构。结果:从臭椿果实中分离并鉴定了 7 个化合物，分
别为东莨菪内酯(Scopoletin，1)，十六烷酸(palmitic acid，2)，(+)-异落叶松树脂醇((+)-isolariciresinol，3)，楂杷壬酮
(chaparrinone，4)，excelsin (5)，β-谷甾醇 (β-sitosterol，6)，胡萝卜苷(daucoserol，7)。结论:化合物 1、2、3、5 为首次从该
植物中分离得到。
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2010)07-1176-04
Chemical constituents from the fruits of Ailanthus altissima (Mill.)Swingle
YANG Cheng-jian1， TANG Wen-zhao1， WANG Xiao-jing1， ZHANG Zhao-hui2
6711
2010 年 7 月
第 32 卷 第 7 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
July 2010
Vol. 32 No. 7