免费文献传递   相关文献

白鲜根皮化学成分研究



全 文 :收稿日期:2015-05-07; 修订日期:2015-09-13
基金项目:黑龙江省自然基金面上项目资助(No. D201207) ;
黑龙江省教育厅面上项目资助(No. 12541913)
作者简介:郭丽娜(1965-) ,女(汉族) ,黑龙江齐齐哈尔人,齐齐哈尔医学
院教授,博士学位,主要从事天然药物化学研究工作.
* 通讯作者简介:刘吉成(1953-) ,男(汉族) ,黑龙江齐齐哈尔人,齐齐哈
尔医学院教授,博士学位,主要从事中药活性成分药理活性研究工作.
白鲜根皮化学成分研究
郭丽娜1,裴月湖2,刘吉成1*
(1.齐齐哈尔医学院药学院,黑龙江 齐齐哈尔 161006; 2.沈阳药科大学中药学院,辽宁 沈阳 110016)
摘要:目的 为明确白鲜皮的药效物质基础,对白鲜皮的化学成分进行研究。方法 白鲜皮的乙醇提取物乙酸乙酯萃取层
反复硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、制备 HPLC分离得到单体化合物,通过光谱方法对其化学成分进行结构鉴定。结果 从白
鲜皮乙醇提取物的乙酸乙酯萃取层中分离得到 7 个化合物,分别为南烛树脂醇(1) ,补骨脂酸(7←1)β - D 葡萄吡喃糖
苷(2) ,3 -[(1R)- 1,2 -二羟乙基 - 4 -甲氧基 - 2(1H)-喹啉酮(3) ,4 -甲基喹啉酮(4) ,柠檬苦素(5) ,吴茱萸苦素
(6) ,梣酮(7)。结论 其中化合物 1,2,3,4 为属内首次分离。
关键词:白鲜皮; 生物碱; 柠檬苦素
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 12. 021
中图分类号:R284. 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)12-2872-02
白鲜皮 Dictamnus dasycapus 为芸香科白鲜属多年生草本植
物白鲜的干燥根皮,俗称八股牛,是常用的中药材及民间用药。
中国植物志中记载白鲜属共有植物 5 种,我国有 2 种,分别是白
鲜 Dictamnus dasycarpus.及新疆白鲜 Dictamnus angustifolius。《中
国药典》2010 年版收载白鲜为药材白鲜皮的正品来源。白鲜皮
是一种传统中药,在皮肤病的治疗中极其常用。几千年的临床实
践证明它具有清热燥湿、祛风解毒、止痒功效[1];近年来临床上
还用于保肝及抗癌,为白鲜皮的用药开创了新的方向。在 2007
年对白鲜种质资源进行研究中发现,白鲜皮在民间还将粉末用作
止血药,用于外伤出血及内脏出血等病症。但是药物物质基础未
见报道。为明确白鲜皮的药效成分,对其进行了化学成分的研
究。
1 仪器与材料
熔点用日本 Yanaco MP - S3 型显微熔点测定仪测定(未校
正) ;NMR 谱用 Bruker - ARX - 300 型核磁共振仪测定(TMS 内
标) ;EI - MS谱用日本岛津 GCMS - QP5050 仪测定;所用药材由
沈阳药科大学中药学院陆金才教授鉴定;制备高效液相色谱仪:
PU - 2089(泵) ,RI - 2031 和 UV - 2075(检测器) [美国 waters
];制备 HPLC色谱柱:YMC - PackODS - A SH - 343 - 5 (20
mm@ 250 mm,5Lm) ;Econosphere silica(22 mm@ 250 mm,10Lm,
Alltech) ;GPC柱:GS - 310 20G(20 mm@ 500 mm,5Lm Shodex)。
凝胶色谱柱:Toyopearl HW - 40C(Tosoh) ;柱色谱和薄层色谱用
硅胶均系青岛海洋化工厂生产,所用试剂均为分析纯。薄层色谱
用硅胶(10 ~ 40μm)与柱色谱用硅胶(200 ~ 300 目)均为青岛海
洋化工有限公司生产;试剂规格均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 提取与分离 白鲜皮 50kg,加乙醇置于提取罐中回流提取 3
次,每次 2 h,合并提取液,减压回收乙醇以水分散,采用石油醚、
氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。乙酸乙酯层浸膏 100g,采用硅胶
柱色谱(洗脱剂氯仿∶ 甲醇 100∶ 0 - 0∶ 100 部分)得到 BY19 个
馏分,其中馏分 BY2 经过反复硅胶柱色谱得到化合物 7(2. 3g) ,
经过 Sephadex - LH20、制备液相色谱分离得到化合物 4
(7. 5mg) ;其中馏分 BY6 经过反复硅胶柱色谱,经过 Sephadex -
LH20、制备液相色谱分离得到化合物 5(110mg) ,化合物 6
(35mg) ;其中馏分 BY15 经过反复硅胶柱色谱,经过 Sephadex -
LH20、制备液相色谱分离得到化合物 1(5mg) ,化合物 3(7mg) ;
其中馏分 BY16 经过反复硅胶柱色谱,经过 Sephadex - LH20、制
备液相色谱分离得到化合物 2(4. 5mg)。
2. 2 结构鉴定
·2782·
时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 12 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 12
图 1 7 个化合物化学结构式
2. 2. 1 化合物 1 为淡黄色油状物,254nm 有暗斑,365nm 处有
荧光。10% H2SO4 显紫色斑点。
1H - NMR(600 MHz,Acetone -
d6)中,δ6. 56,(1H,s,H - 2) ,2. 63(2H,m,H - 7) ,1. 97(1H,
m,H - 8) ,3. 64(2H,m,H - 9) ,6. 42(2H,s,H - 2,6) ,4. 26
(1H,d ,J = 6. 0Hz,H - 7) ,1. 63(1H,m,H - 8) ,3. 51(2H,m,H
-9) ,7. 10(1H,s,OH) ,3. 88(1H,t ,J = 2. 7 Hz,OH)6. 93(1H,
s,OH) ,3. 99(1H,t,J = 2. 7 Hz,OH) ,3. 35(3H,s,OH) ,3. 83(3H,
s,OCH3) ,3. 69(6H,s,OCH3) ;
13 C - NMR(150 MHz,Acetone -
d6)126. 4(C - 1) ,107. 0(C - 2) ,147. 9(C - 3) ,138. 5(C -
4) ,147. 2(C - 5) ,129. 8(C - 6) ,33. 8(C - 7) ,49. 3(C - 8) ,
66. 5(C - 9) ,139. 2(C - 1) ,107. 2(C - 2) ,148. 3(C - 3) ,134. 8
(C - 4) ,148. 3(C - 5) ,107. 2(C - 6) ,42. 6(C - 7) ,41. 2(C -
8) ,63. 5(C - 9) ,56. 3(OCH3) ,59. 4(OCH3) ,56. 7(2 × OCH3) ,
与文献[2]比较基本一致,故化合物确定为(7R,8R,7R)+ lyoni-
resinol。该化合物为属内首次分离。
2. 2. 2 化合物 2 无色结晶,254nm 有暗斑,365nm 处有荧光。
10%H2SO4 显紫色斑点。
1H NMR(600MHz,DMSO - d6)数据如
下:δH 7. 84(1H,d,J = 1. 8 Hz,H - 2) ,6. 82(1H,d,J = 1. 8 Hz,H
-3) ,7. 37(1H,s,H - 5) ,7. 33(1H,s,H - 8) ,2. 92(2H,m,H -
10) ,2. 63(2H,m ,H - 11) ,4. 03(2H,q,J = 7. 2 Hz,H - 13) ,
1. 42(3H,t,J = 7. 2 Hz,H - 14) ,4. 78(1H,d ,J = 7. 2 Hz ,H - 1
) ,3. 29(1H,d ,J = 3. 6 Hz ,H -2) ,3. 29(1H,d ,J = 3. 6 Hz,H -
3) ,3. 17(1H,d ,J = 4. 8 Hz,H - 4 ) ,3. 47(1H,m,H - 5) ,
3. 72(1H,m,H -6) ,3. 38(1H,m,H - 6) ;13 C - NMR(150 MHz,
Acetone - d6)145. 2(C - 2) ,106. 4(C - 3) ,120. 9(C - 4) ,121. 1
(C - 5) ,125. 5(C - 6) ,153. 5(C - 7) ,98. 4(C - 8) ,153. 8(C -
9) ,25. 8(C - 10) ,34. 1(C - 11) ,172. 7(C - 12) ,59. 7(C - 13) ,
14. 2(C - 14) ,101. 4(C - 1) ,73. 5(C - 2) ,76. 8(C - 3) ,69. 9
(C - 4) ,77. 2(C - 5) ,60. 9(C - 6)。综合以上数据,与文献[3]
数据对照,基本一致。确定化合物为 psoralic acid(7←1)β - D -
gluco - pyranoside,该化合物为属内首次分离。
2. 2. 3 化合物 3 淡黄色油状物。254nm 有暗斑,365nm 有荧
光。1H NMR (300 MHz,DMSO - d6)谱中,7. 73(1H,dd,J = 8. 7
Hz,1. 2 Hz,H - 5) ,7. 23 (1H,dt ,J = 8. 7 Hz,1. 2 Hz,H - 6) ,
7. 53(1H,dt,J = 8. 7 Hz,1. 2 Hz,H - 7) ,7. 37(1H,d ,J = 8. 7
Hz,H -8) ,4. 86(1H,dd,J = 6. 9 Hz,H - 11) ,3. 68(2H,m,H -
12) ,3. 93(3H,s,4 - OCH3) ,5. 15(1H,d,J = 8. 7 Hz,11 - OH) ,
4. 74(1H,brs,12 - OH) ,11. 87(1H,s,1N - H)。13 C - NMR(75
MHz,Acetone - d6)163. 9(C - 2) ,122. 1(C - 3) ,162. 8(C - 4) ,
123. 1(C - 5) ,122. 1(C - 6) ,130. 7(C - 7) ,115. 6(C - 8) ,138. 3
(C - 9) ,116. 1(C - 10) ,68. 2(C - 11) ,64. 2(C - 12) ,62. 8(C -
3)。综合以上数据并与文献数据对照[4],基本一致,化合物确定
为 3 -[(1R)- 1,2 -二羟乙基 - 4 -甲氧基 - 2(1H)-喹啉酮。
2. 2. 4 化合物 4 为淡黄色粉末。1H - NMR(300MHz,CDCl3)
δ6. 01(1H,s,H -3) ,7. 20(1H,t,J = 7. 5 Hz,H - 6) ,7. 35(1H,d,
J = 8. 1 Hz,H -5) ,7. 51(1H,t,J = 7. 2 Hz,H - 7) ,7. 90(1H,d,J
= 8. 1Hz,H - 8) ,11. 55(1H,s,NH) ,3. 97(3H,s,4 - OCH3)。
13 C
- NMR (75MHz,CDCl3)δ165. 4(C - 2) ,162. 2(C - 4) ,138. 1(C
-9) ,131. 2(C - 7) ,122. 8(C - 5) ,122. 3(C - 6) ,115. 6(C - 8) ,
115. 9(C - 10) ,95. 9(C - 3) ,56. 1(4 - OCH3)。综合以上数据,
与文献[5]数据对照,基本一致。确定该化合物为 4 -甲基喹啉酮
(4 - methoxy - 2(1H)- quinolinone)
2. 2. 5 化合物 5 白色针晶,白色针晶,10%的硫酸反应显棕
色。1H - NMR(300MHz,DMSO - d6)δ,)2. 62 (1H,dd,J = 16. 8
Hz,3. 6 Hz) ,1. 26 (1H,m,) ,1. 75(2H,m) ,1. 83(1H,m) ,2. 24
(1H,dd,J = 14. 7 Hz,2. 7Hz) ,2. 29 (1H,dd,J = 14. 7 Hz,
2. 7Hz) ,3. 12 (1H,t,J = 15. 0Hz) ,2. 52 (1H,s) ,,2. 80 (1H,d,J
= 16. 5 Hz) ,4. 12(2H,m,H - 1)5. 48(H,s) ,,4. 50 (1H,d,J =
12. 9Hz) ,1. 18(3H,s) ,4. 94(1H,d,J = 12. 9Hz,) ,7. 62(H,s) ,
6. 51(H,s) ,7. 72(H,s) ,1. 03(3H,s) ,1. 00(3H,s) ,1. 22(3H,
s)。13C - NMR (75MHz ,DMSO - d6) :δδ78. 5(C - 1) ,35. 8(C
-2) ,170. 3(C - 3) ,79. 6(C - 4) ,58. 0(C - 5) ,36. 3(C - 6) ,
208. 2(C - 7)50. 3(C - 8) ,46. 5(C - 9) ,45. 3(C - 10) ,17. 6(C -
11) ,29. 2(C - 12) ,37. 7(C - 13) ,66. 7(C - 14) ,53. 8(C - 15) ,
167. 4 (C - 16) ,77. 5(C - 17) ,19. 7(C - 18) ,64. 8(C - 19) ,
120. 3(C - 20) ,δ143. 5(C - 21) ,110. 3(C - 22) ,141. 8(C - 23) ,
17. 1(C - 24) ,29. 8(C - 25) ,21. 5(C - 26)。根据波谱数据并结
合文献[6],确定化合物柠檬苦素。
2. 2. 6 化合物 6 白色针晶。10%的硫酸反应显紫红色。1H -
NMR(300MHz,DMSO - d6) :δ4. 53(1H,s,H -1) ,2. 68 (1H,d,J
= 15. 9Hz,H - 2) ,2. 98 (1H,dd,J = 15. 9,2. 4 Hz,H - 2) ,4. 21
(1H,d,J = 3. 6Hz,H -7) ,1. 57(2H,m,H -11) ,1. 65 (1H,s,H -
12) ,1. 81 (1H,s,H -12) ,4. 09(1H,s,,H - 15) ,5. 47 (1H,s,H
-17)1. 23(3H,s,H -18) ,4. 33(2H,s,H - 19) ,7. 76(H,s,H -
21)6. 54(1H,s,H - 22) ,7. 69 (1H,s,H - 23) ,0. 57 (3H,s,H -
24) ,1. 00(3H,s,H -25) ,1. 25 (3H,s,H -26)5. 70 (1H,s,C7 -
OH) ;13C - NMR (75MHz ,DMSO - d6)δ82. 0(C - 1) ,36. 0(C -
2) ,170. 9 (C - 3) ,81. 4(C - 4) ,64. 5(C - 5) ,207. 4 (C - 6) ,82.
0(C - 7) ,48. 6(C - 8) ,45. 3(C - 9) ,45. 7 (C - 10) ,19. 4(C -
11) ,31. 0(C - 12) ,37. 2(C - 13) ,65. 9(C - 14) ,50. 8(C - 15) ,
167. 0 (C - 16) ,,77. 5(C - 17) ,20. 6(C - 18) ,69. 8(C - 19) ,
120. 1(C - 20) ,143. 5 (C - 21) ,110. 4(C - 22) ,141. 8(C - 23) ,
14. 7(C - 24) ,28. 8(C - 25) ,23. 8(C - 26)。经与文献报道数
据[7]对比,确定化合物为吴茱萸内酯 Rutaevin。
2. 2. 7 化合物 白色针晶。10%的硫酸反应显紫红色 1H - NMR
(300MHz,CDCl3)δ7. 43(1H,t,J =1. 8Hz,H -2) ,6. 35(H,d,J = 0.
6 Hz,H -4) ,7. 46(H,s,H -5) ,4. 88(H,s,H -3) ,1. 82(3H,m,H
-5,H -4) ,1. 50(1H,m,H -4) ,2. 22(2H,m,H -6) ,0. 85(3H,s,
H -10) ,2. 13(3H,s,H -11) ;13C - NMR (75MHz ,CDCl3) :169. 6
(C -1) ,83. 1(C - 2) ,20. 1(C - 4) ,31. 8(C - 5) ,31. 4(C - 6) ,
148. 4(C -7) ,127. 8(C -8) ,42. 8(C -9) ,18. 2(C -10) ,18. 0(C -
11) ,139. 5(C - 2) ,120. 4(C - 3) ,108. 3(C - 4)143. 2(C - 5) ,
根据波谱数据并结合文献[8],确定化合物为梣酮。
3 讨论
从白鲜皮乙醇提取物的乙酸乙酯萃取层中分离得到 7 化合
·3782·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 12 时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 12 期
物,分别为南烛树脂醇(1) ,补骨脂酸(7←1)β - D 葡萄吡喃糖
苷(2) ,3 -[(1R)- 1,2 -二羟乙基 - 4 -甲氧基 - 2(1H)-喹啉
酮(3) ,4 -甲基喹啉酮(4) ,柠檬苦素(5) ,吴茱萸苦素(6) ,梣酮
(7)。其中化合物 1,2,3,4 为属内首次分离。其中化合物 1、2、
5、6、7 为柠檬苦素类成分,化合物 3、4 为生物碱类成分。
参考文献:
[1] 宋业强.白鲜皮治疗神任性皮炎 140 例[J]. 河南中医,1999,19
(6) :59.
[2] 曹煦一,李创军,杨敬芝,等.雷公藤叶化学成分研究[J].中国中药
杂志,2011,36(8) :1028.
[3] Hamed AI,Springuel IV,El - Cmary NA. Benzofuran glycosides from
Psoralea plicata seeds[J]. Phytochemistry,1999,50:887.
[4] Chen JJ,Chang YL,Teng CM,et al. Quinoline alkaloids andanti -
platelet aggregation constituents from the leaves of Melicope seme carp
ifolia[J]. Planta Med,2002,68(9) :790.
[5] 龚运淮,丁立生.天然产物核磁共振碳谱分析[M].昆明:云南科技
出版社,2004:687.
[6] Zhao W,Wolfender JL,Xu RS,et al. Anrtifungal alkaloids and linonoids
Derivatives from dictamnus dasycarpus[J]. Phytochemistry,1998,47
(10) :7.
[7] Zhao PH,Sun LM,Lin XJ,et al. Limonoids from the Root of Dictamnus
radicis Cortex[J]. Chem Pharm Bull,2008,56(1) :102.
[8] 李 翔,汤华钊,苟小军,等. 白鲜皮的化学成分研究[J]. 中药材,
2008,31(12) :1816.
收稿日期:2015-05-05; 修订日期:2015-09-27
基金项目:江西省自然科学基金(No. 2009GZY0099)
作者简介:陈兰英(1966-) ,女(汉族) ,江西丰城人,江西中医药大学教授,博士学位,主要从事中药药效评价与作用机制研究工作.
车前草水提物对肾小球肾炎大鼠的保护作用研究
陈兰英 ,王昌芹,罗园红,骆 瑶,陈 卓,段 萌,王木兰
(江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心,江西 南昌 330006)
摘要:目的 研究车前草水提物对实验性肾小球肾炎(GN)大鼠的保护作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法 采用
一次性尾静脉注射阿霉素(ADR)复制肾小球肾炎模型,随机分为正常组、模型组、泼尼松组(10mg·kg -1)、车前草水提物
高(12. 5g生药·kg -1)、中(6. 25g生药·kg -1)、低(3. 125g 生药·kg -1)剂量组,灌胃给药 8 周。于第 2 周开始,每周末
收集 24h尿液,用全自动生化仪测定尿蛋白含量。于末次给药 24h 后,眼眶取血,利用全自动生化仪测定血清尿素氮
(BUN)、肌酐(CRE)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量;采用酶联免疫法测定血清转化生长因子(TGF - β1)含量;黄嘌呤
氧化酶法和硫代巴比妥法分别测血清 SOD和 MDA含量;光镜下观察肾脏病理变化。结果 车前草水提物高剂量组在第
2、3 周能明显减少肾小球肾炎大鼠 24 h尿蛋白含量;给药第 8 周后,车前草水提物高剂量组有升高阿霉素肾病大鼠血清
TP、ALB含量;车前草高剂量组能明显降低血清 TGF - β1 含量;车前草水提物高、中剂量组能明显降低血清 MDA 含量,
增加 SOD含量;光镜下病理形态学观察显示车前草高、中剂量组肾组织损伤明显改善。结论 车前草水提物对 GN 大鼠
具有保护作用,其机制可能与清除氧自由基,抑制脂质过氧化反应,抑制肾小球纤维化有关。
关键词:车前草; 肾小球肾炎; 保护作用
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 12. 022
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)12-2874-04
Protective Effect of Plantain Extract on Glomerulonephritis in Rats
CHEN Lan-ying,WANG Chang-qin,LUO Yuan-hong,LUO Yao,CHEN Zhuo,DUAN Meng,WANG Mu-lan
(National Pharmaceutical Engineering Center for Solid Preparation in Chinese Herbal Medicine ,Jiangxi Uni-
versity of Traditional Chinese Medicine,Nanchang 330006,China)
Abstract:Objective To investigate the protective efficacy and possible mechanism of plantain on the Glomerulonephritis in rats.
Methods The rats model of Glomerulonephritis were induced by intravenous injection of adriamycin(ADR). The rats were ran-
domly divided into six groups,including normal group,model group,predisone group,high dose (12. 5g·kg -1) ,middle dose
(6. 25g·kg -1) ,and low dose (3. 125g·kg -1)plantain decoction group,treated for 8 weeks. After two weeks,urine protein
excretion during 24 hours was tested respectively in every week by automatic biochemistry analyzer. BUN,CRE,TP,ALB were
examined by automatic biochemistry analyzer in the last day of administration drugs. The content of serum TGF - β1 was used to
measure by ELISA. The content of SOD and MDA in serum was detected by xanthine oxidase and TBA technique respectively.
The histological and pathological changes in the renal interstitium was observed by light microscope. Results Plantain aqueous ex-
tract in high dose group could significantly reduce urinary protein within 24 hours in glomerulonephritis rats on the 2th,3th week
after injecting ADR;After 8 weeks,plantain aqueous extract in high dose group could increase the content of TP and ALB in ser-
um obviously;Plantain aqueous extract in high and middle dose groups could significantly reduce the content of serum MDA and
increase the content of serum SOD;Plantain in high dose group can obviously reduce the content of serum TGF - β 1;The path-
·4782·
时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 12 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 12