全 文 ：文章编号:1001 － 4829(2013)04 － 1618 － 04
收稿日期:2012 － 10 － 12
基金项目:重庆市农业科学院院列项目
作者简介:刁 源(1982 －) ，女，助理研究员，研究方向为农产
品贮藏与加工，E-mail:diaoyuanvic@ vip． qq． com，* 为通讯作
者。
纳他霉素复配制剂在锦橙采后保鲜上的应用研究
刁 源1，张 超1，唐偲雨1，张迎君2，曾顺德1*
(1．重庆市农业科学院农产品贮藏加工研究所，重庆 401329;2．重庆市农业科学院果树研究所，重庆 江津 402260)
摘 要:通过平板抑制试验及贮藏保鲜试验对纳他霉素及复配制剂抑杀柑橘采后常见真菌性病害及锦橙贮藏保鲜效果进行了比
较分析。结果显示:0． 02 %纳他霉素 + 0． 01 %咪鲜胺可有效抑杀锦橙采后常见青霉、绿霉病害，该配方处理锦橙，通风库常温贮
藏 3 个月，腐果率仅为 3． 1 %，比常用化学保鲜剂低 2． 1 %，而空白对照腐果率高达 19． 38 %。
关键词:纳他霉素复配制剂;锦橙;保鲜
中图分类号:S666． 4 文献标识码:A
Applied Research of Natamycin Mixture in Jincheng Postharvest Freshness
DIAO Yuan1，ZHANG Chao1，TANG Si-yu1，ZHANG Ying-jun2，ZENG Shun-de1*
(1． Agro-product Storage and Processing Institute，Chongqing Academy of Agricultural Science，Chongqing 401329，China;2． Institute of
Fruit，Chongqing Academy of Agricultural Science，Chongqing Jiangjin 402260，China)
Abstract:Natamycin and its mixed compound using Flat inhibition and Keeping-fresh tests were used to study fungous disease of postharvest
citrus and storage of JinCheng． The result showed that:Penicillium，green mildew disease was controlled effectively by 0． 02% Natamycin +
0． 01 % prochloraz，Jincheng’s rotting rate was 3． 1 %，which were stored in ventilated storage and room temperature using the same agen-
tia，and 2． 1 % lower than common chemical antistaling agent，and the blank’s rotting rate was 19． 38 % ．
Key words:Mixture compound Natamycin;Jincheng;Keeping-fresh
纳他霉素(Natamycin)是一种高效、广谱的真菌
抑制剂［1 ～ 2］，能较好的抑制霉菌、酵母菌生长，除了
能起到防腐作用，还能减少真菌毒素对人的毒害。
青霉病、绿霉病引起的柑橘采后腐烂最为严重，而黑
腐病是柑橘贮藏中后期的重要病害［3］，采后防腐是
柑橘贮藏保鲜的重要环节，化学杀菌剂控制采后病
害一直被认为是最有效的方法［4］，如咪酰胺、抑霉
唑类虽能有效杀灭柑橘青绿霉病菌，但病菌易产生
抗药性、且使用浓度高［5］。随着人们对化学杀菌剂
安全性认识的提高，低度、安全、高效的柑橘防腐保
鲜剂的研究和开发愈来愈受到人们关注，笔者采用
纳他霉素与低剂量化学杀菌剂如咪酰胺、抑霉唑等
进行复配，通过滤纸片抑菌试验和连续 3 年贮藏保
鲜试验，筛选获得了一种新型锦橙防腐保鲜剂，该防
腐保鲜剂防腐保鲜效果良好，不仅能有效缓解锦橙
旺季市场销售难题，还能满足人们反季节消费需求
以及果农增值增收的目的。
1 材料与方法
1． 1 材料与试剂
病原真菌:青霉即意大利青霉(Penicillium itali-
cum)、绿霉即指状青霉(Penicillium digitatum)作为
病原指示菌。生物保鲜剂:纳他霉素(Natamycin) ;
化学杀菌剂:咪酰胺、抑霉唑。供试品种:‘锦橙’。
培养皿、牛津杯、三角瓶、移液枪、镊子等。
1． 2 仪器与设备
恒温培养箱 LRH-250。
1． 3 试验方法
1． 3． 1 培养基制备 PDA 培养基及平板和斜面制
备:去皮马铃薯 200 g、蔗糖 20 g、琼脂 18 g、自来水
1000 mL;平板制备是 65 ℃ PDA培养基内加适量青
霉素抑制细菌生长，倾入平皿平置冷凝制板;斜面制
备是试管内的培养基冷却至 70 ℃倾斜制斜面。
8161
西 南 农 业 学 报
Southwest China Journal of Agricultural Sciences
2013 年 26 卷 4 期
Vol. 26 No. 4
DOI:10.16213/j.cnki.scjas.2013.04.074
1． 3． 2 病原菌株分离筛选 稀释法:挑典型的青、
绿霉病块分别于无菌水，充分洗病块上孢子于水中;
10 倍梯度稀释，对不同稀释浓度病原菌悬液取 0． 1
mL，涂 PDA平板;于 28 ℃下恒温培养 2 ～ 3 d，接种
环选择挑取典型单菌落接种 PDA 斜面，然后 28 ℃
下恒温培养 3 ～ 5 d，待斜面菌株孢子生长好后保藏
冰箱备用。
划线法:从腐烂的柑橘果实上挑取典型青、绿霉
菌，用接种环挑取菌株斑块上的孢子，在 PDA 培养
基上划线分离，28 ℃恒温培养，待长出菌落后再挑
选单菌孢子进行划线分离 2 ～ 3 次，最后转接到 PDA
试管斜面保存，备用。
1． 3． 3 不同保鲜剂的不同浓度对病原菌株拮抗
药剂配制:用无菌水将各药剂配成 100 ×(倍)浓度
的母液于无菌小瓶;按设计处理浓度用无菌水配制
各个试剂于无菌试管，备用。
平皿准备:根据各次试验要求，每次分别准备直
径规格为 90 mm平皿 100 ～ 200 个，160 ℃烘箱干热
灭菌 2 h，备用。
病原指示菌液:将斜面病原菌株分别用 5 ～ 10
mL无菌水洗涤病原菌孢子，倾入盛有玻璃珠的三角
瓶内，再加水少量水振荡 10 min，定溶至 200 mL 后
脱脂棉过滤，用血球记数法测定孢子悬浮液浓度大
约为 106 ～ 107 个 /mL。
指示菌平板:用移液枪分别取各病原指示菌孢
子悬液 1 mL于直径 90 mm 无菌平皿中，将冷却至
大约 60 ℃左右的 PDA三角瓶培养基中加适量青霉
素，混匀后按大约 15 mL /皿量倾入加有病原菌悬液
的平皿内，混匀后平置冷凝制板。
抑菌试验:将牛津杯(4 片滤纸)固样器置于指
示菌平板中央;将不同浓度的不同保鲜剂处理各取
0． 1 mL加于固样器中，用无菌水作空白对照;将各
平板置于 28 ℃培养箱中恒温培养 2 ～ 5 d;用直尺测
定其抑菌圈直径大小(圈内透明度确定)。其中，每
次实验处理做 3 组平行，以上操作均在无菌条件下
进行。
1． 3． 4 保鲜试验 试验连续重复 3 年进行，每年
12 月中下旬采自重庆市农业科学院果树研究所，采
收成熟度为八成熟的锦橙。采后立即挑选大小一
致、无病虫害和机械损伤的果实按试验配方处理 3
～ 5 min，取出室内阴干，预贮 3 ～ 5 d 后塑料袋单果
包装，置于通风库内，定期检查腐果率。
腐果率(%)= 腐烂果实总数 /贮藏总果数 ×
100。锦橙腐果评判标准为引起腐烂的青霉病害、绿
霉病害、褐腐病害、酸腐及黑腐病害的所有果实。
2 结果与分析
2． 1 不同保鲜剂配制浓度对意大利青霉病害抑制
效果的影响
单一保鲜剂对意大利青霉(Penicillium itali-
cum)的 PDA平板具有清晰的抑菌圈，抑杀作用明显
(图 1)。各保鲜剂抑制青霉病菌的效果随稀释倍数
的不断增加呈下降趋势。采用 mm刻度尺测量抑菌
圈直径，获得不同保鲜剂不同稀释浓度的抑杀面积。
纳他霉素作为食用安全性能较好的保鲜剂，抑杀青
霉病菌的效果在稀释倍数低时较好，随稀释倍数增
加其抑杀效果明显下降;而化学药剂咪酰胺、抑霉唑
尽管稀释倍数较高，仍具有明显的抑杀作用，随稀释
倍数不断升高，尽管对青霉病菌的抑杀灭作用有所
下降，但变化不明显。
2． 2 不同保鲜剂配制浓度对指状青霉病害抑制效
果的影响
单一保鲜剂对指状青霉(Penicillium digitatum)
的 PDA 平板具有清晰的抑菌圈，抑杀作用明显(图
2)。各保鲜剂抑杀绿霉病菌的效果随稀释倍数的
不断增加呈下降趋势。纳他霉素作为食用安全性能
较好的保鲜剂，其抑杀绿霉病菌的效果在稀释倍数
低时较好，随稀释倍数增加其抑杀效果明显下降;而
化学药剂咪酰胺、抑霉唑尽管稀释倍数较高，仍具有
明显的抑杀作用，随稀释倍数的不断升高，尽管对绿
霉病菌的抑杀灭作用有所下降，但变化不明显。
图 1 不同保鲜剂对意大利青霉病害的抑制效果
Fig． 1 Inhibitory effect of different preservation Penicillium italicum
91614 期 刁 源等:纳他霉素复配制剂在锦橙采后保鲜上的应用研究
图 2 不同保鲜剂对指状青霉的抑制效果
Fig． 2 Inhibitory effect of different preservation on Penicillium digitatum
2． 3 纳他霉素与低剂量化学保鲜剂复配对青绿霉
病害抑制效果的影响
通过前期对不同保鲜剂稀释倍数抑杀青绿霉病
菌的效果分析并从经济角度考虑，进一步进行各保
鲜药剂抑杀青绿霉病菌的优化试验。图 3 结果显
示:0． 2 ‰纳他霉素抑杀柑橘采后常见青绿霉病害
的效果不甚理想，而 0． 1 ‰的咪酰胺、0． 1 ‰抑霉唑
抑杀效果较好，后者效果优于前者。纳他霉素与咪
酰胺、抑霉唑复配抑杀效果明显提高，尤其是 0． 2 ‰
纳他霉素和 0． 1 ‰的咪酰胺复配效果良好。
2． 4 纳他霉素复配制剂在锦橙贮藏保鲜上的应用
将 In vitro试验获得的最优保鲜配方(处理)和
常用锦橙保鲜配方(对照)连续 3 年开展贮藏保鲜
试验，通风库贮藏 3 个月其腐果率如图 4 所示，结果
表明筛选获得的纳他霉素复配制剂保鲜效果优于常
用保鲜配方，证明纳他霉素复配制剂用于锦橙保鲜
具有较好地开发应用前景。
3 结论与讨论
化学保鲜［3，5］、中草药［6］、生物保鲜［7］及生物保
鲜剂纳他霉素在柑橘［1］、葡萄［8 ～ 9］、草莓［10 ～ 11］、甜樱
桃［12］、哈密瓜［2］、冬枣［13］等的保鲜应用均有研究报
道，但从经济和食用安全性角度开展生物保鲜剂同
图 3 纳他霉素与低剂量化学保鲜剂复配对青绿霉病害
抑制效果
Fig． 3 Inhibitory effect of Natamycin mixture on Penicillium italicum
and Penicillium digitatum disease
图 4 不同保鲜剂对锦橙保鲜腐果率的影响
Fig． 4 Effect of different preservatives on the Jincheng orange de-
cay rate
低剂量化学保鲜剂复配对果蔬采后常见病原真菌的
抑杀效果研究却鲜有报道。
本文通过单因子及多因子复配试验研究表明:
纳他霉素、咪酰胺、抑霉唑对青霉、绿霉病原指示菌
株单因子抗菌效应比咪酰胺、抑霉唑对柑桔青绿霉
病原真菌抑制效果佳，3000 倍稀释倍数的抑制青霉
病菌面积均值达 2170 和 2459 mm2，对绿霉病菌面
积均值达 2109 和 1965 mm2;而纳他霉素 100 倍稀
释倍数最大抑菌面积青霉病菌均值达 1143 mm2，最
大抑菌面积绿霉病菌均值达 1256 mm2，稀释倍数
5000 倍抑菌面积青霉病菌均值达 272 mm2，绿霉病
菌均值达 49 mm2;从经济角度和食用安全性考虑，3
种保鲜剂单独使用均存在问题;多因子复配并结合
经济和食用安全性，筛选获得纳他霉素稀释 5000 倍
与咪酰胺稀释 10 000 倍作为优选配方，其青霉病菌
抑菌面积均值达 2787 mm2，绿霉病菌抑菌面积均值
达 2964 mm2，通过复配抑菌效力明显增强，且大大
降低了化学杀菌剂的用量;连续 3 年采用该试验配
方与常用保鲜剂和空白对照进行锦橙保鲜比较试验
发现:纳他霉素复配制剂保鲜效果优于常用保鲜剂。
平均腐果率仅为 3． 1 %，比常用保鲜剂低 2． 1 %，而
空白对照腐果率高达 19． 38 %。
参考文献:
［1］孙远功，呼玉侠，冯 晰． 纳他霉素在柑桔防腐保鲜中的应用
0261 西 南 农 业 学 报 26 卷
［J］．食品研究与开发，2006，27(7) :190 － 192．
［2］Cong Feng-song，Zhang Yun-gui，Dong Wen-yan． Use of surface coat-
ings with natamycin to improve the storability of Hami melon at ambi-
ent temperature［J］． Postharvest Biology and Technology，2007，46:
71 － 75．
［3］董行健．用双胍盐等药剂防治柑桔采后病害［J］．中国南方果树，
1985(3) :40 － 41．
［4］胡美姣，高兆银，李 敏，等． 72 中草药提取物对香蕉、杧果果实
采后病害病原菌的抑菌活性［J］．果树学报，2007，24(3) :349
－ 354．
［5］姜丽英，陈国庆，陈健民，等．衢州椪柑贮藏期主要病害及防治关
键技术［J］．浙江农业科学，2011(4) :875 － 878．
［6］刘 畅，任艳芳，何俊瑜，等．中草药提取液对 3 种柑橘病原菌的
抑制作用［J］．西南农业学报，2011，24(1) :132 － 136．
［7］曾顺德，张 超，尹旭敏，等． 生物保鲜剂对“白凤”桃和“巨峰”
葡萄采后贮藏生理的影响［J］． 食品科学，2010，31(24) :457 －
460．
［8］白 鹤，寇晓红，周志红，等．纳他霉素对葡萄贮藏品质和生理变
化的影响［J］．农产品加工·学刊，2009(8) :61 － 64．
［9］刘美通，周会玲，吴主莲，等．纳他霉素复合涂膜处理对红地球葡
萄的防腐保鲜效果［J］．西北农业学报，2012，21(4) :115 － 120，
141．
［10］段丹萍，乔勇进，鲁莉莎，等． 纳他霉素壳聚糖复合涂膜对草莓
保鲜的影响［J］． 湖南农业大学学报(自然科学版) ，2010，36
(2) :237 － 241．
［11］姜爱丽，胡文忠，田密霞，等． 纳他霉素在草莓保鲜中应用的研
究［J］．食品科学，2007，28(12) :515 － 520．
［12］姜爱丽，胡文忠，李 慧，等． 纳他霉素处理对采后甜樱桃生理
代谢及品质的影响［J］． 农业工程学报，2009，25(12) :351 －
355．
［13］王建国，姜兴印，张 鹏．纳他霉素对冬枣浆胞病菌的毒力及保
鲜生理效应研究［J］．农药学学报，2006，8(4) :313 － 318．
(责任编辑 姚永红)
12614 期 刁 源等:纳他霉素复配制剂在锦橙采后保鲜上的应用研究