全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2011 年
收稿日期：2011－01－28
基金项目：广西自然科学基金项目（2010GXNSFA013050）
作者简介：苏秀芳（1971－），女（壮族），广西扶绥人，副教授，硕士，主要从事天然产物活性成分的提取、分离、鉴定及药理活性研究工作，（电话）
13471121425（电子信箱）suxiufang＿88＠sina．com。
细叶黄皮 ［Clausena anisum －olens （Blanco．）
Merr］为芸香科黄皮属植物，多年生常绿大灌木或小
乔木，主产于我国广西西南部、云南南部、广东新会
及越南北部和菲律宾［1，2］，又称为鸡皮果、山黄皮。细
叶黄皮为珍稀佳果，果皮、果肉、茎皮均可食用，含
有多种氨基酸、维生素及矿物质［2］。 在药用方面，果
实可消积去滞、祛痰化气、疏通肠胃。 枝叶可入药，
有引气、健胃、止痛、治跌打刀伤、消风肿、去疳积等
功效［3］。 细叶黄皮是崇左市大力推广种植的经济树
木，市内有多家细叶黄皮果加工厂，近几年来，细叶
黄皮产业已成为中越边民增收的主要渠道之一。
目前， 有关细叶黄皮的化学成分研究较少，但
已有报道，汪云松等 ［4］从细叶黄皮中提取分离了 5
个化合物， 分别为 4－（3－methoxyphenyl－4－O－β－D－
glucopyanoside）－2－butanone，3－（4－hydroxyphenyl）－
2－propenoic acid，3－（3－methoxyphenyl－4－hydroxy）－
2 －propenoic acid，3 －（3，4 －dihydroxyphenyl） －2 －
propenoic methyl ester，3－hydroxy－4－methoxybenzoic
acid。 Wang 等 ［5］从细叶黄皮中提取到 7 个化合物，
分 别 为 anisumarin， isoscopoletin， umbelliferone，
anisocoumarin H，capnolactone，aurapten 和 7－［（E）－
7′ －hydroxy －3′ ，7′ －dimethylocta －2＇，5 －dienyloxy］ －
coumar。 苏秀芳等［6，7］研究表明，细叶黄皮各个部分
都含有丰富的挥发油，其主要成分为芳香类、烯类
细叶黄皮树茎皮乙醇提取物、挥发油的抑菌作用
苏秀芳，韦良兴，黄丽娟，冯佩珍
（广西民族师范学院化学与生物工程系，广西 崇左 532200）
摘要：采用纸片扩散法进行抑菌试验以探讨细叶黄皮［Clausena anisum－olens（Blanco．）Merr］茎皮乙醇提
取物及其石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇部位的抑菌作用。 结果表明，石油醚、氯仿、乙酸乙酯部位有抑
菌作用，氯仿部位对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、杀螟杆菌、大肠杆菌及枯草杆菌抑菌作用最强，最小抑
菌浓度为 0．026~0．103 mg ／片；石油醚、乙酸乙酯部位最小抑菌浓度均为 0．026~0．412 mg ／片；挥发油对 5
种供试菌均有抑制作用，最小抑菌浓度为 0．412~0．823 mg ／片。
关键词：细叶黄皮［Clausena anisum－olens（Blanco．）Merr］茎皮；提取物；最小抑菌浓度
中图分类号：S482．2＋92 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2011）13－2668-03
Antimicrobial Activity of Ethanol Extracts and Volatile Oil from the Bark of
Clausena anisum-olens
SU Xiu－fang，WEI Liang－xing，HUANG Li－juan，FENG Pei－zhen
（Department of Chemistry and Biological Engineering， Guangxi Normal Universty for Nationalities， Congzuo 532200，Guangxi， China）
Abstract： Bacteriostasis test was conducted to study the antimicrobial activity of petroleum ether， chloroform， ethyl acetate，
n －butanol extracts of the bark from Clausena anisum－olens by disk diffusion method． Results showed that the petroleum
ether， chloroform and ethyl acetate extracts had antimicrobial activity， and the chloroform extracts had the strongest activity
against Staphylococcus aureus， Pseudomonas aeruginosa，Bacillus cereus， Escherichia coli， B. subtilis with a minimal inhibito-
ry concentration （MIC） of 0．026~0．103 mg ／ piece， and petroleum ether extracts and ethyl acetate showed stronger activity with
the MIC of 0．026~0．412 mg ／ piece． The volatile oil had antimicrobial activity against the five tested bacilus with the MIC of
0．412~0．823 mg ／ piece．
Key words： Clausena anisum－olens bark； extracts； minimal inhibitory concentration（MIC）
第 50卷第 13期
2011年 7 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 50 No.13
Jul．，2011
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2011.13.056
第 13 期
及酸类。 有关细叶黄皮的抑菌活性研究鲜见报道，
为了综合利用细叶黄皮资源， 提高中越边民的收
入，本研究对细叶黄皮茎皮提取物的抑菌效果进行
了实验观察，现将结果报道如下。
1 材料和方法
1．1 试验仪器
LDZX－50KBS 型立式电热压力蒸汽灭菌器（上
海申安医疗器械厂）；ZHJH－C1214B 型垂直流超净
工作台 （上海智城分析仪器制造有限公司）； GNP－
9270 型隔水式恒温培养箱（上海精寄宏实验设备有
限公司）；SPH－211B 摇床培养箱 （上海世平实验设
备有限公司）。
1．2 菌种
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureu）、绿脓
杆菌（Pseudomonas aeruginosa） 菌种购于广东微生
物研究所 ；枯草杆菌 （Bacillus subtilis）、大肠杆菌
（Escherichia coli）、杀螟杆菌（Bacillus cereus）菌种
由广西大学农学院提供。
1．3 植物材料
细叶黄皮茎皮于 2010 年 7 月采摘于龙州校县
响水镇，由广西民族师范学院化学与生物工程系黄
秋婵副教授鉴定为细叶黄皮 （Clausena anisum－
olens）。
1．4 方法
1．4．1 细叶黄皮茎皮提取物的提取
1）细叶黄皮茎皮乙醇及各部分提取物的提取。
细叶黄皮茎皮阴干，粉碎，用体积分数为 75％的乙
醇浸泡 3 d，减压蒸馏至浸膏状，乙醇浸膏一部分留
做抑菌实验，一部分依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯
及正丁醇萃取，得到各部位浸膏，置 4 ℃冰箱保存备
用。
2）细叶黄皮茎皮挥发油的提取。 称取切碎的新
鲜细叶黄皮树茎皮 500 g，进行水蒸气蒸馏，馏出液
用 50 mL 石油醚萃取 3 次，合并萃取液，加入无水
Na2SO4 静置 12 h，回收溶剂得挥发油，挥发尽溶剂
后得乳黄色油状物，置 4 ℃冰箱保存备用。
1．4．2 抑菌试验
1）细菌悬液的制备。 分别用无菌棉签蘸取供试
菌接种于 10 mL牛肉膏蛋白胨液体培养基，于 37 ℃
下摇床培养 18 h，进行菌种活化。 活化后的细菌做
10 倍系列稀释，并活菌计数。 用无菌水将细菌分别
配制成约 106 CFU ／ mL浓度的细胞悬浮液。
2）抑菌圈的测定。小滤纸片（直径为 6 mm）放入
干燥培养皿中，在 120 ℃下蒸气灭菌 20 min。
把培养基倒入培养皿中，待培养基自然冷却凝
固后，用移液枪从每种菌种吸取 100 μL，放入到相
应的培养皿中，然后均匀涂布。 将试药（以哈药集团
制药总厂生产的头孢拉定为对照药剂）浸泡的纸片
置于平板内，于 37 ℃左右恒温培养，18～24 h 后观察
结果。 如果滤纸片周围无菌则说明有抑菌作用，即
有抑菌圈。 有明显抑菌作用的测其抑菌圈的直径。
2 结果与分析
2．1 抑菌活性初筛
按照上述试验方法，发现细叶黄皮茎皮乙醇提
取物（浓度约为 1．21 mg ／片）对金黄色葡萄球菌、绿
脓杆菌、大肠杆菌、杀螟杆菌、枯草杆菌有抑制作
用， 因而用丙酮将乙醇提取物倍比稀释为系列浓
度，浸泡滤纸片过夜，做抑菌试验，同时算出滤纸片
所含的药液量［8］，结果如表 1。
试验结果表明，细叶黄皮茎皮乙醇提取物对金
黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、杀螟杆菌、枯
草杆菌具有较强的抑制作用，其对大肠杆菌抑制作
用最强，最低抑菌浓度为 0．026 mg ／片。
考虑到乙醇提取物为粗提物， 成分很复杂，为
了了解抑菌物质所存在的溶剂部位，因此做了乙醇
提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯及正丁醇部位初
步抑菌试验（浓度均为 1．645 mg ／片），结果如表 2 所
示。
试验结果表明，石油醚、氯仿、乙酸乙酯部位对
供试菌均有抑制作用，正丁醇部位在该浓度下对供
表 1 细叶黄皮茎皮乙醇提取物的抑菌圈直径（mm）
提取物浓度
mg/片
1.645
0.823
0.412
0.206
0.103
0.052
0.026
0.013
金黄色
葡萄球菌
10.0
9.4
9.1
8.0
7.9
6.7
6.5
-
绿脓
杆菌
10.0
9.5
8.6
8.0
7.2
-
-
-
大肠
杆菌
11.4
11.2
10.0
9.5
9.0
8.0
7.5
-
杀螟
杆菌
12.0
10.5
9.5
9.0
7.0
6.5
-
-
枯草
杆菌
10.5
9.0
9.0
8.4
7.8
6.7
6.5
-
注：“-”表示无抑菌效果。 下同。
表 2 细叶黄皮茎皮各溶剂提取物抑菌效果
溶剂部位
石油醚
氯仿
乙酸乙酯
正丁醇
金黄色
葡萄球菌
+
+
+
-
绿脓
杆菌
+
+
+
-
大肠
杆菌
+
+
+
-
杀螟
杆菌
+
+
+
-
枯草
杆菌
+
+
+
-
注：“+”表示有抑菌效果。
苏秀芳等：细叶黄皮树茎皮乙醇提取物、挥发油的抑菌作用 2669
湖 北 农 业 科 学 2011 年
2．3 细叶黄皮茎皮挥发油最低抑菌浓度
用石油醚将挥发油倍比稀释为系列浓度进行
抑菌活性检测。结果如表 4，细叶黄皮茎皮挥发油对
5种供试菌均有抑制作用， 最小抑菌浓度为 0．412~
0．823 mg ／片。
3 结论
试验结果表明，细叶黄皮茎皮乙醇提取物对革
兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌均有抑制作用，抑菌成
分主要在石油醚、氯仿和乙酸乙酯部位，氯仿部位
抑菌作用最强，最低抑菌浓度为 0．026~0．206 mg ／片。
细叶黄皮的茎皮挥发油对 5 种供试菌均有抑制作
用，最小抑菌浓度为 0．412~0．823 mg ／片，其抑菌浓
度比石油醚部位相对较小。
有关细叶黄皮茎皮的有效成分提取分离及抑
菌作用值得深入研究。
参考文献：
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学出版社，1997．138．
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西林业，2004（4）：22－23．
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化学，2003，23（增刊）：144．
［5］ WANG Y S，HUANG R，LI N Z，et al． Coumarins from
Clausum－olens Merr ［J］． Biosci Biotechnol Biochem，2010，74
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tivities of Dracontomelon dao． ［J］． Fitoterapia，2002，73（4）：
327－330．
表 4 细叶黄皮挥发油的抑菌圈直径（mm）
提取物浓度
mg/片
1.645
0.823
0.412
0.206
0.103
金黄色
葡萄球菌
7.5
6.5
-
-
-
绿脓
杆菌
9.4
6.7
-
-
-
大肠
杆菌
9.3
6.5
6.5
-
-
杀螟
杆菌
9.3
8.0
-
-
-
枯草
杆菌
9.3
8.0
6.6
-
-
试菌均无抑制作用。
2．2 石油醚、氯仿和乙酸乙酯部位最低抑菌浓度
将细叶黄皮茎皮石油醚、 氯仿和乙酸乙酯部
位用丙酮倍比稀释为系列浓度进行抑菌活性检测
（4片 ／皿），结果见表 3。 由表 3可以看出，细叶黄皮
茎皮乙醇提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯部位对
金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、杀螟杆菌、
枯草杆菌均有抑制作用。 这 3个部位对大肠杆菌抑
制作用都较强，最低抑菌浓度均为 0．026 mg ／片。 而
对照药剂头孢拉定对 5 种供试菌均具很强的抑制
作用，最小抑菌浓度只有 0．408 μg ／片；细叶黄皮茎
皮提取物对 5 种菌的抑制作用相对较弱，但其作为
一种植物药，具有安全、无毒的特点，值得深入研
究。
（责任编辑 王贵春）
表 3 细叶黄皮茎皮各溶剂部位的抑菌圈直径（mm）
提取物浓度
mg/片
1.645
0.823
0.412
0.206
0.103
0.052
0.026
0.013
0.006 5
石油
醚
8.5
8.0
7.5
7.0
6.5
-
-
-
氯仿
12.4
11.0
9.5
9.0
7.5
-
-
-
乙酸
乙酯
9.4
9.0
8.4
-
-
-
-
-
头孢
拉定
34.8
31.0
28.0
24.5
24.3
19.8
石油
醚
9.8
8.7
8.3
8.0
7.8
-
-
-
氯仿
10.0
9.3
8.1
7.0
-
-
-
-
乙酸
乙酯
9.4
8.5
8.0
-
-
-
-
-
头孢
拉定
36.0
34.5
30.5
27.8
25.8
19.3
石油
醚
12.0
10.0
9.5
9.1
7.6
7.0
6.5
-
氯仿
14.2
13.0
12.1
9.0
8.5
6.5
6.5
-
乙酸
乙酯
12.0
10.0
9.6
9.0
7.5
7.0
6.5
-
头孢
拉定
30.3
30.0
28.5
25.0
22.5
19.3
石油
醚
11.0
9.0
8.5
-
-
-
-
-
氯仿
11.2
10.5
9.5
8.9
7.5
7.0
－
－
乙酸
乙酯
12.0
9.3
8.1
7.5
7.0
－
－
－
头孢
拉定
33.3
31.0
27.2
26.0
19.8
18.6
石油
醚
9.3
8.2
7.3
7.0
6.4
-
-
-
氯仿
11.0
10.5
10.0
9.0
8.3
7.0
－
－
乙酸
乙酯
10.5
9.6
8.2
7.7
－
－
－
－
头孢
拉定
36.0
34.5
30.5
27.8
25.8
21.3
金黄色葡萄球菌 枯草杆菌杀螟杆菌大肠杆菌绿脓杆菌
2670