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鬼箭羽提取物解热利尿作用及急性毒性研究



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  布洛芬和阿司匹林属于非甾体抗炎镇痛药,主要
通过抑制环氧化酶、减少前列腺素的合成发挥抗炎和
镇痛作用,临床上主要用于治疗各类关节炎,一般不
单独用于神经病理性痛的临床治疗。本研究结果显
示,单次口服大剂量布洛芬或阿司匹林对CCI模型
小鼠的热痛觉过敏无明显的镇痛作用,这与以往研究
认为布洛芬对CCI模型的机械痛觉超敏和冷痛觉超
敏无镇痛作用的结果一致[5-7]。相反,也有研究证实,
布洛芬不但对L5/L6脊神经结扎(spinal nerve liga-
tion,SNL)、坐骨神经部分结扎(partial sciatic nerve
ligation,PNL)和CCI模型大鼠的机械痛觉超敏具有
明显的镇痛作用,而且对PNL和CCI模型大鼠的热
痛觉过敏也有明显的镇痛作用[6-9]。造成这种同一药
物镇痛效果迥然不同的主要原因,可能与实验动物、
实验模型、反应指标、药物剂量和给药方式等多种实
验因素的不同有关。
  因此,本课题在建立CCI模型小鼠(以往多采用
大鼠)的基础上,对吗啡、曲马多、布洛芬和阿司匹林
等不同镇痛药物的镇痛效果进行深入研究,对于临床
有效治疗神经性痛、减少用药盲目性具有重要的理论
指导意义。
参考文献:
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(收稿日期:2013-01-06)
鬼箭羽提取物解热利尿作用及急性毒性研究
田振虎1,柴 焱1,郭建芳1,朱 萍1,张小丽2,陈 萍2*(1.陕西中医学院,咸阳 712046;2.陕西省中医药研究院,西安
710003)
摘要:目的 研究鬼箭羽提取物的解热利尿作用,并进行急性毒性实验。方法 小鼠ig 1.0,0.5,0.25g·kg-1鬼箭羽提取物,每
天1次,连续7d,采用水负荷法测定尿量,观察鬼箭羽提取物的利尿作用;大鼠ig 0.6,0.3,0.15g·kg-1鬼箭羽提取物,每天1
次,连续3d,采用酵母菌致发热,观察鬼箭羽提取物的解热作用;采用Bliss法测定了其半数致死量(LD50)。结果 鬼箭羽提取
物(0.5,0.25g·kg-1)既可增加摄水量,又可增加排尿量;其提取物0.6,0.3,0.15g·kg-1对酵母菌致发热大鼠体温升高有明
显的抑制作用;其LD50为20.79g·kg-1,LD50的95%可信限为19.36~22.33g·kg-1。结论 鬼箭羽提取物对实验动物模型
具有显著的利尿解热作用,小鼠灌胃(ig)的LD50为20.79g·kg-1。
关键词:鬼箭羽;利尿;解热;急性毒性
doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2013.04.024
中图分类号:R965   文献标志码:A   文章编号:1004-2407(2013)04-0388-03
Study on the antipyretic and diuretic effects and acute toxicity of the extract of
Euonymus alatus(Thunb)Sieb
TIAN Zhenhu1,CHAI Yan1,GUO Jianfang1,ZHU Ping1,ZHANG Xiaoli 2,CHEN Ping2*(1.Shaanxi University of Chinese Medi-
cine,Xianyang 712046,China;2.Shaanxi Province Chinese Medicine Research Institute,Xi′an 710003,China)
基金项目:陕西省中药管理局中医药科研课题(编号:JC94)
作者简介:田振虎,男,在读硕士研究生
*通信作者:陈萍,女,研究员,硕士生导师
883 西北药学杂志 2013年7月 第28卷 第4期
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Abstract:Objective To study the effect of Euonymus alatus(Thunb)Sieb on antipyretic and diuresis and to evaluate the acute tox-
icity.Methods Mice according to 1.0,0.5,0.25g·kg-1 were lavaged Euonymus alatus(Thunb)Sieb once a day,which lasted for
seven days.The water load method was adopted to determine the urine output and to observe the diuretic effect of the extract.Rats
that were induced by the yeast according to 0.6,0.3,0.15g·kg-1 were given Euonymus alatus(Thunb)Sieb once a day for three
days,and its antipyretic effect was observed;The bliss method was used for the determination of the median lethal does(LD50).
Results Euonymus alatus(Thunb)Sieb(0.5,0.25g·kg-1)on mice can increase both water uptake and urine output;The ex-
tract(0.6,0.3,0.15g·kg-1)on rats induced heating temperature rise has obvious inhibition.The LD50of the extract was 20.79
g·kg-1 and its 95%confident limit was 19.36-22.33g·kg-1.Conclusion Euonymus alatus(Thunb)Sieb on the experimental
animal model has significant diuretic antipyretic effect,and mice lavage(ig)LD50was 20.79g·kg-1.
Key words:Euonymus alatus;diuresis;antipyretic;acute toxicity
  鬼箭羽系卫矛科植物Euonymus alatus具翅状物
的枝条或翅状附属物和嫩枝;分布于我国北部、中部、
华东以及西南各地,陕西资源丰富[1];其味酸甘涩,性
微寒;具有破血、通经、杀虫、散瘀止痛等功效[2];药理
研究表明,其具有降血糖、调血脂及延缓动脉粥样硬化
等作用[3]。目前有关鬼箭羽解热利尿的研究尚未报
道,为此我们用现代药理学方法对其提取物的解热利
尿作用及急性毒性进行了实验研究,为临床应用提供
依据。
1 材料与方法
1.1 药物与试剂 鬼箭羽(Euonymus alatus)为市售
(陕西省药材公司);鬼箭羽乙醇提取物(每1g相当于
生药17.85g,用时再配成相应的等质量浓度,批号
20120420,陕西省中医药研究院);氢氯噻嗪(批号
A110903,山西云鹏制药有限公司);阿司匹林(批号
BJ06554,中国北京拜耳医药保健有限公司);酵母为
市售(批号20111011,安琪酵母股份有限公司)。
1.2 动物 ICR小鼠,体质量18~22g,清洁级动物;
健康SD大鼠,体质量180~220g,清洁级动物。均由
西安交通大学医学院实验动物中心提供,动物许可证:
SCXK(陕):2007-001。
1.3 仪器 PG-900型电子体温计,亿思达电子(浙
江)公司生产;MP21001型电子天平,上海梅特勒-托
利多仪器有限公司生产。
2 方法
2.1 对小鼠排尿量作用的实验 筛选尿量正常的
ICR小鼠50只,随机分为空白对照组(生理盐水,等容
积),氢氯噻嗪组(0.6g·kg-1),鬼箭羽高、中、低剂量
组(1.0,0.5,0.25g·kg-1),每组10只。连续ig给
药7d,每天1次,记录每组小鼠每天的摄水量。末次
给药前禁食18h,末次给药1h后,轻压每只小鼠下腹
部[4],排尽余尿,各用1mL生理盐水ig作为水负荷,
将小鼠置于铺有三层滤纸的1 000mL干燥烧杯中,
记录水负荷1,2,3,4和5h小鼠的排尿量 (滤纸湿质
量-滤纸干质量)。
2.2 对酵母菌致发热大鼠解热作用的实验 选正常
体温在36.6~38.3℃的雄性大鼠50只,随机分为:空
白对照组(生理盐水,等容积),阿司匹林组(0.1
g·kg-1)[5],鬼箭羽高、中、低剂量组(0.6,0.3,0.15
g·kg-1),每组10只。连续ig给药3d,从给药第2
天开始测体温,取平均值计为基础肛温。末次给药前
0.5h,于每鼠背部皮下注射经34℃孵育活化0.5h,
质量浓度为150g·L-1的酵母菌溶液[6],剂量为10
mL·kg-1,制造发热大鼠模型。分别于致热后1,2,
3,4和5h测量并记录各鼠肛温。测量时将大鼠仰位
固定于鼠板上,待其稳定后,在肛温计顶端涂少许凡士
林,轻缓送入肛门2cm,放置3min,取出读数。
2.3 急性毒性实验 预实验,找出0%动物死亡的最
小剂量(Dn)和100%动物死亡的最大量(Dm)致死剂量,
求出组间比(r)。r=(Dm/Dn)1/(G-1),G为组数,本实
验分为5个组,剂量分别为:26.7,24.1,21.0,19.1和
18.2g·kg-1(r=0.901 9,相邻组剂量等比级数为
1∶0.9),禁食12h,不禁水,正式实验时分别ig给药,
连续观察7d,记录死亡动物数及毒性反应情况。死
亡解剖,肉眼观察心、肝、肾、肺、脾等重要脏器变化。
2.4 数据处理 使用SPSS 11.0软件进行统计学分析。
数据均以珔x±s表示,组间比较用t检验。P<0.05有统
计学意义。
3 结果
3.1 对小鼠摄水量的影响 给药时间内,鬼箭羽提取
物高、中剂量组均能显著增加小鼠的摄水量,与生理盐
水组比较差异有统计学意义。氢氯噻嗪组小鼠的摄水
量更多。见表1。
表1 鬼箭羽提取物对小鼠摄水量的影响(n=10)
Tab.1The effect of Euonymus alatus (Thunb)Sieb extract for
water uptake on mice(n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
每只摄水量/mL·d-1
1d 2d 3d 4d 5d 6d 7d
生理盐水 - 3.5  3.5  4.5  4.4  4  5.5  4
氢氯噻嗪 0.6  5.8  5.7  5.7  6.2  5.5  6.6  4.5
鬼箭羽 1.0  5.0  4.5  5.8  5.5  6.0  6.0  5.0
0.5  5.5  3.5  5.5  5.5  5.5  5.5  5.0
0.25  4.0  4.5  4.5  4.5  4.5  4.5  5.0
3.2 对小鼠排尿量的影响 与空白组比较,氢氯噻嗪
可明显增加2和3h滤纸质量,鬼箭羽提取物中、低剂
量组在2h滤纸质量有明显的增加,说明鬼箭羽0.5
和0.25g·kg-1对小鼠利尿作用有显著的增强,但鬼
箭羽高剂量组与生理盐水组比较,差异无统计学意义。
见表2。
3.3 对酵母菌所致发热大鼠解热作用的影响 与生
983西北药学杂志 2013年7月 第28卷 第4期
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理盐水组比较,鬼箭羽物高、中、低剂量组对酵母菌致
发热大鼠体温升高有明显的抑制作用,主要起效时间
在2h。与阿司匹林组比,差异有统计学意义。见
表3。
表2 鬼箭羽提取物对小鼠排尿量的影响(珔x±s,n=10)
Tab.2The effect of Euonymus alatus(Thunb)Sieb extract for urinary output on mice(珔x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
滤纸增质量/g
1h 2h 3h 4h 5h
生理盐水 - 0.12±0.18  0.11±0.10  0.06±0.08  0.11±0.11  0.04±0.08
氢氯噻嗪 0.6  0.20±0.18  0.67±0.27** 0.23±0.18* 0.10±0.18  0.06±0.09
鬼箭羽 1.0  0.06±0.12  0.16±0.19  0.14±0.17  0.05±0.08  0.06±0.09
0.5  0.25±0.17  0.26±0.13** 0.11±0.11  0.05±0.06  0.06±0.07
0.25  0.27±0.23  0.37±0.20** 0.12±0.08  0.02±0.04  0.06±0.08
 注:与生理盐水组比较:*P<0.05,**P<0.01
表3 鬼箭羽提取物对酵母菌所致发热大鼠解热作用的影响(珔x±s,n=10)
Tab.3The antipyretic effect of Euonymus alatus(Thunb)Sieb extract on rats(珔x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
基础体温
/℃
给药后各时间点肛温升高值/℃
1h 2h 3h 4h 5h
生理盐水 - 38.02±0.34  0.18±0.26  0.54±0.37  1.06±0.21  1.27±0.23  1.40±0.32
阿司匹林 0.1  37.98±0.28 -0.30±0.38** -0.16±0.52** 0.65±0.31** 0.77±0.39** 0.86±0.51**
鬼箭羽 1.0  37.55±0.36  0.01±0.30 -0.04±0.21* 0.94±0.31  1.32±0.38  1.30±0.42
0.5  37.79±0.34 -0.27±0.21** -0.25±0.27** 1.05±0.48  1.03±0.43  1.33±0.36
0.25  37.88±0.34  0.00±0.41 -0.05±0.33* 0.92±0.30  1.06±0.41  1.26±0.32
 注:与生理盐水组比较:*P<0.05,**P<0.01
3.4 急性毒性 小鼠ig鬼箭羽提取物后,大部分动
物出现活动减少,蜷曲,呼吸急促,动物多在24h内中
毒死亡。死亡动物解剖肉眼观察未见心、肝、肾、肺、脾
等重要脏器出血、坏死等异常表现。用Bliss法计算出
小鼠ig鬼箭羽提取物的LD50为20.79g·kg-1,LD50
的95%可信限为19.36~22.33g·kg-1。
4 讨论
  本研究结果表明,鬼箭羽提取物可显著降低酵母菌
诱导的发热大鼠体温,并且起效快,但作用不持久。鬼
箭羽提取物可明显增加饮水量,与生理盐水组比较,其
尿量也有明显的增加,但无长效利尿作用,且剂量不宜
过大,鬼箭羽高剂量组并未有利尿作用趋势,说明利尿
作用并无一定的量效关系。有关其解热利尿作用机制
有待 于 进 一 步 研 究。鬼 箭 羽 提 取 物 的 LD50 为
20.79g·kg-1,95%可信限为19.36~22.33g·kg-1。
如按鬼箭羽生药、药理实验中动物和人体间的等效剂量
换算[7],以成人60kg体质量计算,即得相当于387.76g
生药,其在一定剂量范围内应用是安全的。
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(收稿日期:2012-12-18
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093 西北药学杂志 2013年7月 第28卷 第4期