全 文 :青海胡卢巴植物根瘤形态结构与发育研究
高晓杰 1 ,刁治民1, 2 , 杜军华 1 (1.青海师范大学生命与地理科学学院 ,青海西宁 810008;2.成都大学,四川成都 610106)
摘要 [目的 ]对青海胡卢巴植株根瘤的形态结构与发育情况进行研究。 [方法]选取西宁、大通、乐都等农田栽培的豆科植物胡卢巴植
株 10 ~ 15株 ,进行生态学特征描述;在西宁市连续采集胡卢巴根瘤 ,对根瘤的生长发育进行观察记录。 [结果]从青海省大通 、乐都和西
宁各城区所采集的豆科植物胡卢巴植株根瘤在表型上表现出较大的差异。随着植株的生长 , 根瘤的数量 、大小都有所增长。植株根瘤
的显微切片表明 ,所有根瘤都由 4个部分组成 ,不同时期根瘤的各部分细胞层数不同 ,中心组织占根瘤总面积的百分比及侵染细胞占中
心组织总细胞数的百分比在不同生长时期也有差异。 [结论 ]该研究可为青海省胡卢巴等栽培作物的根瘤及根瘤菌资源保护和开发利
用提供理论与实践依据。
关键词 胡卢巴;根瘤;形态结构;发育
中图分类号 S311 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2010)05-02347-04
DevelopmentandMorphologicalStructureofRootNodulesinTrigonelafoenum-grecumL.ofQinghai
GAOXiao-jieetal (LifeandGeographyScienceCollege, QinghaiNormalUniversity, Xining, Qinghai810008)
Abstract [ Objective] TheresearchaimedtostudythedevelopmentandmorphologicalstructureofrootnodulesinTrigonelafoenum-grecumL.
ofQinghai.[Method] 10-15T.foenum-grecumL.plantswerechosenfromXining, Datong, Ledutobeusedforecologycharacteristicsinvestiga-
tion.TherootnodulesofT.foenum-grecumL.inXiningwerecolectedcontinuouslytobeusedindevelopmentsituationsobservations.[ Result]
TheresultsshowedthattherootnoduleswhichcolectedfromDatong, LeduandXiningofQinghaiProvinceshowedmanydiferencesinpheno-
type.Withthegrowthoftheplants, therootnodules number, sizeincreased.Therootnodules smicro-sectionindicatedthatalrootnoduleswere
madeupoffourparts.Accordingtothestatistics, thenumberofthelayerswerediferentindiferentperiods.Thepercentageofcenterissueoccu-
piedintotalareaandtheinfectiveceloccupiedintotalcelswasdifferent.[ Conclusion] Thisresearchcouldprovidetheoreticalandpracticalba-
sisfortheprotectionandexploitationoftherootnodulesresourcesofT.foenum-grecumL.inQinghai.
Keywords Trigonelafoenum-grecumL.;Rootnodules;Configurationstructure;Development
作者简介 高晓杰(1978-),女 ,河北唐山人 ,硕士 ,讲师 ,从事植物微
生物学研究。
收稿日期 2009-11-30
胡卢巴为豆科(Leguminosae)蝶形花亚科 (Papilion-
oideae)胡卢巴属(Trigonela)一年生草本植物 ,又名香豆
子 [ 1] 、苦豆 [ 2] 、雪莎(藏语),是优良的速生绿肥和饲料作物 ,
原产欧洲南部和非洲北部 、亚洲中部 ,在中国西藏 、新疆 、甘
肃 、青海 、陕西等省(自治区)[ 3]栽培利用时间较长 ,主要用作
饲料 ,也可用作香料和药用作物。据 《古埃及药典 》记载 ,早
在公元前 1500年以前 ,中东地区已将其作为催产草药使用 ,
目前国内外用其作为壮阳 、催欲 、催乳 、排胃肠气 、抗痢疾 、抗
糖尿病的药物 。胡卢巴种子及全草中含有多种化学成分 ,已
从种子中分离到皂甙 、黄酮 、三萜 、生物碱等多种成分 [ 4-6] 。
胡卢巴是西部地区栽培利用时间较长的豆科植物 ,在青
海省分布广泛 ,资源丰富 ,经济价值很高 ,近年来对胡卢巴的
研究多为药用和香料方面 。青海省地域辽阔 ,又有高原独特
生态条件 ,对该环境下长期栽培利用的豆科植物胡卢巴根瘤
的研究少见报道 ,仅在部分地区的豆科植物根瘤菌资源调查
中有提及胡卢巴结瘤的情况 [ 7-10] ,对胡卢巴根瘤的生物学特
性研究未见报道。笔者对胡卢巴根瘤的形态结构与发育进
行了研究 ,以期为青海省胡卢巴等栽培作物的根瘤及根瘤菌
资源保护和开发利用提供理论和实践依据。
1 材料与方法
1.1 根瘤的采集 于 2004年选取西宁 、大通 、乐都等农田
栽培的豆科植物胡卢巴植株 10 ~ 15株 ,进行生态学特征描
述;在固定地点西宁市城西区彭家寨连续采集胡卢巴根瘤 ,
对根瘤的生长发育情况进行观察记录。
1.2 方法 按参考文献 [ 11]的方法制作胡卢巴根瘤石蜡切
片 ,在 Olympus研究用显微镜下观察并照相 ,测量统计根瘤
的大小 、分枝等参数。
2 结果与分析
胡卢巴植物的根瘤均生长在主根和侧根上 ,主根的根瘤
数略少于侧根且根瘤略大于侧根上的根瘤;根瘤外表呈粉红
色或红色。根瘤的形状为掌状 、椭圆 、圆形 、柱形或顶部 2分
叉及顶部多分叉呈花簇状;根瘤的大小不一 ,直径在 1 ~
7mm。
2.1 不同地区胡卢巴根瘤的形态特征 采自不同地区的胡
卢巴根瘤均着生在主根和侧根上。采自大通 、乐都的主根根
瘤数略少于侧根 ,大小多数在 1 ~ 5 mm。采自大通的根瘤形
状多为椭圆形 、根瘤顶部呈 2分叉状;采自乐都的根瘤多为
椭圆形 、掌状 、圆形或根瘤顶部呈 2、3分叉状。西宁市不同
城区胡卢巴主根根瘤数则多于侧根 ,采自城东区的根瘤形状
多为椭圆 、柱形及顶部 2分叉状 ,大小在 1 ~ 2 mm,采自城西
区的根瘤形状多为掌状及根瘤顶部 2分叉状 ,大小在 1 ~ 6
mm(表 1、表 2)。
2.2 不同生长时期胡卢巴根瘤的形态特征 2004年 8月 11
~ 31日连续在西宁市城西区彭家寨固定农田采集胡卢巴植
株。随着植株的生长 ,根瘤的数量 、大小都有所增长 ,根瘤数
量 3 ~ 21个不等 ,大小 0.5 ~ 7.0 mm不等;其根瘤的颜色由
顶端浅粉色※浅粉色※粉色※红色;根瘤的形状由简单的椭
圆 、2分叉等形状到掌状 、花簇状 ,说明随着植株的生长 ,根瘤
细胞分裂也在加剧(表 2)。
2.3 不同生长时期胡卢巴根瘤的显微特征 通过对固定地
点不同生长时期胡卢巴根瘤显微纵 、横切片的观察 ,所有根
瘤都由 4个部分组成 ,由外向内依次为保护层 、皮层 、鞘细胞
层和中心组织。
2.3.1 保护层。一般情况下 ,保护层由 1至数层薄壁组织
细胞构成 ,细胞排列紧密 ,外围细胞扁平状 ,细胞壁木质化 ,
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(5):2347-2350 责任编辑 张彩丽 责任校对 况玲玲
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.05.110
原生质体已死亡 ,在制片过程中往往会脱落 。
2.3.2 皮层。皮层为 1 ~ 9层薄壁组织细胞 ,形状不规则 ,
排列较疏松。其中分布有维管束 ,维管组织呈束状 ,维管束
外围有数层薄壁细胞围绕(图 1)。干旱地区的根瘤较非干
旱地区的根瘤皮层厚 [ 7] 。笔者认为干旱地区根瘤皮层厚为
类菌体提供了一个气体扩散屏障 ,是由于环境变化所产生的
自我调节机制 。这种存在于皮层的气体扩散屏障不仅控制
着根瘤中心区气体透过皮层的扩散和内外交换 ,对于维持根
瘤中心区内部的水分具有重要的意义。
图 1 T2组根瘤切片(示维管束, ×200)
Fig.1 SectionofT2grouprootnodule(showingvascularbundle,
×200)
2.3.3 鞘细胞层。由 1 ~ 9层扁平的砖形薄壁细胞构成
(图 2)。
图 2 T6组根瘤切片(示鞘细胞层 , ×400)
Fig.2 SectionofT6grouprootnodule(showingsheathcelllay-
er, ×400)
2.3.4 中心组织(即侵染组织)。侵染组织能直接参与根瘤
的共生固氮 ,是根瘤最重要的部分 ,它又分为侵染细胞和非
侵染细胞。侵染细胞由薄壁组织细胞构成 ,数量多 ,体积大 ,
其中部分细胞被不同形状的根瘤菌侵染 。非侵染细胞体积
较小 ,一般为薄壁细胞 ,常有 1个含有泡状物质的中央液泡。
表 1 不同地区胡卢巴植株根瘤形态特征
Table1 TherootnodulemorphologicalcharacteristicsofT.foenum-grecumL.indiferentplaces
植株编号PlantNo.
株高∥cmPlantheight
株重g/株Plantweight
根长∥cmRootlength
根瘤数量Numberofrootnodules
主根Taproot 侧根Lateralroot
根瘤大小∥mmRootnodulesize
根瘤形状Rootnoduleshape
植株分枝情况Branchesofplants
采集地点Samplingsite
采集时间Samplingtime
T501 53.5 8.22 14.6 6 29 1.0~ 2.0 椭圆, 2、3分叉 5分枝开花 大通 08-20
T502 56.8 13.29 16.1 6 15 1.0~ 5.0 掌状,椭圆 , 2分叉 5分枝开花 大通 08-20
T503 52.6 9.30 17.0 6 12 1.0~ 4.0 掌状, 2分叉 6分枝开花 大通 08-20
T504 54.1 9.70 12.7 7 14 0.5~ 2.0 椭圆, 2分叉 5分枝开花 大通 08-20
T505 51.5 8.55 10.4 5 9 1.0~ 3.0 椭圆, 2分叉 5分枝开花 大通 08-20
T506 51.6 7.95 15.7 3 14 1.0~ 3.0 椭圆,掌状 5分枝开花 大通 08-20
T507 48.8 9.30 13.2 8 22 1.0~ 2.5 椭圆, 2分叉 5分枝开花 大通 08-20
T508 51.7 5.31 12.6 2 6 1.0~ 4.5 掌状,椭圆 5分枝开花 大通 08-20
T509 58.9 11.71 15.1 3 8 1.0~ 2.0 椭圆, 2分叉 6分枝开花 大通 08-20
T510 49.3 5.45 11.3 4 5 0.5~ 2.0 椭圆, 2分叉 5分枝开花 大通 08-20
T511 48.6 6.40 11.7 3 7 1.0~ 2.0 椭圆, 2分叉 5分枝开花 大通 08-20
T512 52.3 3.18 14.6 6 2 1.0~ 3.0 椭圆, 2分叉 4分枝开花 大通 08-20
T513 55.1 4.65 14.4 7 14 1.0~ 3.5 椭圆,多分叉花簇 5分枝开花 大通 08-20
T514 46.8 3.75 15.7 5 7 0.5~ 4.0 椭圆,掌状 , 2分叉 3分枝开花 大通 08-20
T701 27.7 2.45 12.7 6 7 1.0~ 2.0 椭圆, 2、3分叉 3分枝 西宁城东 08-28
T702 26.5 1.60 9.0 7 0 1.0~ 2.0 柱形, 2分叉 3分枝 西宁城东 08-28
T703 28.9 1.80 10.8 7 4 1.0~ 2.0 柱形, 2分叉 3分枝 西宁城东 08-28
T704 24.6 1.53 9.6 7 2 1.0~ 1.5 椭圆, 2分叉 3分枝 西宁城东 08-28
T705 27.4 1.55 9.4 6 3 1.0~ 1.5 柱形, 2分叉 3分枝 西宁城东 08-28
T706 30.8 1.51 11.8 6 8 1.0~ 2.0 柱形 2分叉 3分枝 西宁城东 08-28
T707 25.6 2.52 9.4 4 0 1.0~ 1.5 椭圆, 2分叉 3分枝 西宁城东 08-28
T708 24.6 1.30 9.6 9 2 1.0~ 1.5 柱形, 2分叉 3分枝 西宁城东 08-28
T709 24.5 1.28 7.5 4 3 1.0~ 2.0 圆形, 2分叉 3分枝 西宁城东 08-28
T710 24.4 0.70 9.4 4 2 1.0~ 2.0 圆形, 2分叉 2分枝 西宁城东 08-28
T901 21.6 5.28 6.6 5 6 1.0~ 4.0 椭圆,圆形 3分枝 乐都 09-02
T902 23.7 3.97 8.7 4 13 1.0~ 3.0 圆形,扇形 , 2分叉 3分枝 乐都 09-02
T903 27.9 7.58 7.9 5 10 1.0~ 4.0 椭圆, 2、3分叉 3分枝 乐都 09-02
T904 28.7 4.75 8.3 4 5 1.0~ 6.0 掌状,圆形 ,扇形 3分枝 乐都 09-02T905 23.2 3.39 8.7 4 3 1.5~ 3.0 柱形, 2分叉 3分枝 乐都 09-02
T906 26.9 3.25 10.9 4 4 1.0~ 4.0 掌状,椭圆 , 2分叉 3分枝 乐都 09-02
T907 26.2 4.18 8.2 5 9 1.5~ 3.0 掌状, 2分叉 3分枝 乐都 09-02
T908 28.3 3.81 9.3 4 11 1.0~ 2.5 掌状,椭圆 ,柱形 3分枝 乐都 09-02
T909 23.9 3.08 9.4 7 5 1.0~ 3.5 扇形, 2分叉 3分枝 乐都 09-02
T910 22.6 1.47 8.6 3 4 1.0~ 3.0 椭圆, 2、3分叉 2分枝 乐都 09-02
2348 安徽农业科学 2010年
表 2 固定地点不同生长时期胡卢巴根瘤外部形态特征
Table2 TherootnodulemorphologicalcharacteristicsofT.foenum-grecumL.indiferentgrowthperiods
植株编号PlantNo.
株高∥cmPlantheight
株重g/株Plantweight
根长∥cmRootlength
根瘤数量Numberofrootnodules
主根Taproot 侧根Lateralroot
根瘤大小∥mmRootnodulesize
根瘤形状Rootnoduleshape
根瘤颜色Rootnodulecolor
植株分枝情况Branchesofplants
采集时间Samplingtime
T201 26.2 3.74 8.0 2 1 1.5~ 3.0 椭圆, 2分叉 顶端浅粉 4分枝 08-11
T202 26.7 2.56 9.2 3 1 2.0~ 2.5 掌状, 2分叉 顶端浅粉 4分枝 08-11
T203 30.0 2.53 10.0 5 2 2.0~ 2.5 掌状, 3分叉 顶端浅粉 4分枝 08-11
T204 25.0 2.62 10.0 5 0 1.0~ 3.0 2分叉 顶端浅粉 4分枝 08-11
T205 28.5 2.60 10.0 4 1 1.0~ 3.5 椭圆, 2分叉 顶端浅粉 4分枝 08-11
T206 31.0 2.07 15.0 4 1 1.0~ 3.5 椭圆, 2分叉 顶端浅粉 4分枝 08-11
T207 29.5 2.98 12.0 3 7 3.0~ 4.0 椭圆, 2分叉 顶端浅粉 4分枝 08-11
T208 26.0 2.59 7.0 7 1 1.0~ 6.0 花簇状 , 2分叉 顶端浅粉 4分枝 08-11
T209 28.5 2.35 11.0 4 1 1.5~ 3.0 椭圆, 2、3分叉 顶端浅粉 4分枝 08-11
T210 24.5 2.68 8.0 4 2 1.5~ 3.0 椭圆, 2分叉 顶端浅粉 4分枝 08-11
T211 25.0 2.45 10.0 2 0 2.0~ 2.5 2分叉 顶端浅粉 4分枝 08-11
T401 38.6 6.55 10.5 5 8 4.0~ 7.0 2、3分叉,掌状 浅粉 2分枝 08-17
T402 33.3 6.37 10.3 6 4 2.0~ 4.0 2、3分叉 浅粉 3分枝 08-17
T403 34.5 5.40 12.0 6 15 3.0~ 5.0 花簇状 ,掌状 浅粉 4分枝开花 08-17
T404 35.0 6.20 10.0 4 2 1.5~ 3.0 2、3分叉,掌状 浅粉 4分枝 08-17
T405 32.6 3.74 10.2 5 7 2.0~ 4.0 花簇状 ,掌状 浅粉 4分枝 08-17
T406 37.6 6.49 16.1 5 3 2.0~ 4.0 2、3分叉,掌状 浅粉 5分枝 08-17
T407 34.5 4.15 10.7 4 4 1.0~ 3.0 2、3分叉 浅粉 5分枝 08-17
T408 31.1 4.65 10.1 5 4 1.0~ 3.0 2、4分叉,掌状 浅粉 4分枝 08-17
T409 32.3 3.90 9.5 4 5 1.0~ 2.0 椭圆, 2、3分叉 浅粉 4分枝 08-17
T410 42.4 6.28 17.1 5 3 2.0~ 7.0 花簇状 ,掌状 浅粉 5分枝开花 08-17
T411 40.3 7.61 16.8 2 7 3.0~ 4.0 掌状 浅粉 4分枝开花 08-17
T601 43.8 17.35 15.0 6 15 1.0~ 5.0 扇形,柱形 ,掌状 粉红 6分枝开花 08-23
T602 46.5 12.23 12.6 5 5 1.5~ 5.0 掌状,柱形 粉红 6分枝开花 08-23
T603 41.6 13.21 12.6 4 7 2.0~ 6.0 掌状,多分叉 粉红 7分枝开花 08-23
T604 49.6 15.19 10.6 6 5 2.0~ 3.5 2、3分叉,扇形 粉红 7分枝开花 08-23
T605 38.0 12.36 11.7 4 5 1.5~ 2.0 圆形, 2分叉 粉红 5分枝开花 08-23
T606 46.9 14.20 12.5 8 7 1.0~ 4.0 掌状, 柱形 粉红 6分枝开花 08-23
T607 41.3 5.70 10.8 4 2 2.0~ 7.0 多分叉花簇状 粉红 6分枝开花 08-23
T608 47.0 6.31 11.3 3 0 2.5~ 4.0 掌状 粉红 6分枝开花 08-23
T609 43.2 4.55 10.7 5 2 1.0~ 3.0 掌状, 柱状 粉红 6分枝开花 08-23
T610 42.4 7.72 12.1 2 5 0.5~ 2.5 柱状 粉红 6分枝开花 08-23
T611 42.5 12.47 12.5 6 6 1.0~ 2.0 2分叉 粉红 6分枝开花 08-23
T801 62.2 20.40 17.2 5 5 5.0~ 12.0 掌状,多分叉 红色 4分枝开花 08-31
T802 55.7 14.43 10.7 4 5 3.5~ 10.0 掌状,圆形 红色 2分枝开花 08-31
T803 53.1 14.89 15.3 4 13 1.0~ 5.0 掌状, 2分叉 红色 5分枝开花 08-31
T804 47.2 11.00 7.4 3 7 4.0~ 6.0 掌状, 2分叉 红色 3分枝开花 08-31
T805 51.4 21.55 16.1 3 5 3.0~ 6.0 掌状, 3分叉 红色 6分枝开花 08-31
T806 49.2 14.10 11.6 3 5 1.0~ 6.0 掌状,柱形 红色 5分枝开花 08-31
T807 61.1 28.56 17.1 2 10 3.0~ 6.0 掌 ,圆形 , 2分叉 红色 5分枝开花 08-31
T808 59.5 7.20 12.5 7 4 1.0~ 4.0 掌状, 2、3分叉 红色 3分枝开花 08-31
T809 48.6 8.92 13.3 3 19 5.0~ 6.0 掌状,圆形 ,花簇状 红色 3分枝开花 08-31
T810 61.1 16.75 13.6 6 7 1.5~ 7.0 掌状,椭圆 , 2分叉 红色 3分枝 08-31
图 3 T4组根瘤切片(示早期侵染细胞 , ×200)
Fig.3 SectionofT4 grouprootnodule(showingearlyinfected
cel, ×200)
图 4 T8组根瘤切片(示成熟侵染细胞 , ×600)
Fig.4 SectionofT8 grouprootnodule(showingmatureinfected
cel, ×600)
234938卷 5期 高晓杰等 青海胡卢巴植物根瘤形态结构与发育研究
在早期的侵染细胞中(图 3),即侵染细胞发育早期 ,根
瘤菌非常少 ,体积很小 ,近似圆形或杆形 ,分散在细胞壁附近
的细胞质中。随着侵染细胞的发育 ,细菌数量逐渐增多 ,并
不断扩展 ,最后几乎充满了寄主细胞质。由参考文献 [ 12-
13]可知 ,细菌继续发育的最明显变化是细菌周膜变大 ,在细
菌周膜与细胞壁之间形成一个宽大的环形电子透明区 。此
时 ,根瘤菌多数形成被周膜包裹的类菌体形式。
成熟的侵染细胞(图 4)内根瘤菌已发育成形态不同的
类菌体 ,体积越来越大 ,形状也日趋复杂 ,除少数类菌体仍是
杆状外 ,其余大多数类菌体已变为短杆状 , “V”、“Y”状或其
他形状 。依据参考文献 [ 12-13]可知 ,它们一般是 1个类菌
体 1个周膜 ,但有时也有几个类菌体位于 1个周膜的情况。
细菌大小虽然不同 ,性状多种多样 ,但基本结构一样 ,都由细菌
周膜 、细胞壁 、质膜和原生质体组成。
中心组织占根瘤总面积的百分比及侵染细胞占中心组织
总细胞数的百分比在不同生长时期存在差异 ,随着根瘤的增
大 ,浸染细胞所占比例随之增大(表 3)。根瘤中心区侵染细胞
所占比例多少 ,可以作为选择豆科固氮植物的一个指标。
表 3 固定地点不同生长时期胡卢巴根瘤显微镜形态特征
Table3 TherootnodulemorphologicalcharacteristicsofT.foenum-grecumL.undermicroscopeindifferentgrowthperiods
采集时间
Samplingtime
植株采集组数
Plantcolecting
groups
保护层细胞层数∥层
Celsinprotective
layer
皮层细胞层数∥层
Corticalcellayers
鞘细胞层数∥层
Sheathcellayers
中心组织∥%
Centraltissue
侵染细胞∥%
Infectedcels
08-11 T2 1~ 2 2~ 3 1~ 2 56.0 41.0
08-17 T4 1~ 2 2~ 3 1~ 2 60.0 63.0
08-23 T6 1~ 3 2~ 4 1~ 3 77.3 82.6
08-31 T8 1~ 3 2~ 4 1~ 3 80.2 90.5
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(上接第 2343页)
的活性推断各株系代谢活动的强弱 。试管苗和田间叶片的
APX活性高度相关 ,因此 ,可以根据试管苗期间的 APX活性
预测各株系在田间的生长状况 ,对大量四倍体株系进行早期
筛选以获得代谢活动强 、清除活性氧能力强 、生长旺盛的四
倍体株系。
在供试的 5个四倍体株系中 , Z-90的 SOD、POD活性低 ,
APX活性不稳定。在栽培过程中结合对其外部性状和生长
情况的观察 ,发现 Z-90生长缓慢 、抗逆性差 ,因此四倍体株
系 Z-90应被淘汰。
3 讨论
SOD、APX和 POD等酶类是细胞抵御活性氧伤害的重
要保护酶系统 。它们在清除超氧自由基 、过氧化氢和过氧化
物以及阻止或减少羟基自由基形成等方面起着重要作用 [ 8] 。
植物体内保护酶活性的高低可以通过其外在表现的抗逆性
得到体现。结果表明 ,四倍体株系与二倍体比较 ,其保护酶
系统中各抗氧化酶的活性普遍都能得到提高 ,因此为药用植
物的抗性育种提供了新的思路和依据。
由于除虫菊在试管苗期间与田间的各抗氧化酶活性呈
正相关 ,因此还可以应用组织培养技术在育种初期的试管苗
阶段进行早期筛选 。这样 ,不仅极大地缩短了选育时间 ,还
可以节约大量的人力物力 ,因而能为利用生理生化指标进行
白花除虫菊优良品种的前期选育提供了一定的参考依据。
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2350 安徽农业科学 2010年