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从大翼豆根瘤中分离出快生型根瘤菌



全 文 :从大翼豆根瘤中分离出快生型根瘤菌
江木兰 佘群新 张学江
(中国农科院油料作物研究所 )
【摘要】 在引种试验田中采集大翼豆根瘤 , 进行了分离 、 纯化 、 回接 , 平均代时和 p H 反
应测定 , 以及在花生 、 大豆上的结瘤试验 . 结果表明 , 首次从大翼豆根瘤中分离到的快生型根瘤
菌 , 平均代时与p H反应类似于U S D A : . : 快生根瘤菌 . 在原寄主上回接能结瘤 , 接种在花生 、 大
豆上也能结瘤 .
大翼豆 ( 万。 c r o P *` l`。二 a * , o P 。 , P o r e 。 , C V . S i r a t r o ) 属于虹豆族根瘤菌的广 谱 寄
主 〔 l 〕 . 过去人们一直认为虹豆族寄主植物只与慢生型根瘤菌共生 . 近几年来 , F . D . D a k -
o a o r 〔 2 〕 和 N . A . M o r r i s o n等 〔 3 〕从 可 豆 ( 厂匆。 a o n习u ` e u l a t 。 ( L . )W a l p ) 等 植 物 根
瘤中分离到快生型根瘤菌 . 但还没有见到从花生 、 大翼豆根瘤中分离快生型根瘤菌的报道 。
本文报道了从大翼豆根瘤中分离出快生型根瘤菌 。
材料和方法
菌株和寄主 M ` 、 M一 , 、 M : 3 、 M : ` 一 1 、 M 3 。 一 : 、 M : 卜 : 分离自 50 个 大 翼 豆 根瘤 ,
U S D A
: 。 : 是 1 9 8 5年引自土肥所的一株美国快生型大豆根瘤菌 , 1 13 一 2为油料所筛选的一 株
慢生型大豆根瘤菌。 大翼豆于 1 9 82 、 1 9 8 4年先后从印度 、 澳大利亚引入武汉种植。 春大豆品
种泰兴黑豆和花生品种红安直立均由油料所育种二室提供 .
分离与纯化 在引种试验 田中 , 采集大翼豆根瘤 , 用刚果红酵母甘露醇培养基 ( Y M A )
划线分离 。 三天后 , 挑取单个大菌落移接于试营斜面上 。 分离物采用稀释平板法纯化 。
平均世代时间与p H反应 采用酵母粉甘油培养基 ( Y E P ) , p H 二 8 . 。 , 在对数生 一长期
用稀释平板测数法侧定菌数 . 96 小时后在雷磁 25 型酸度计上测定 p H值 .
植物结瘤试验 大其豆用试管结瘤方法 〔 4 〕 , 根瘤菌接种后 10 一 20 天内观察结瘤反应 。
大豆 、 花生采用水培法 〔 6 〕 , 接种 10 一 20 天内观察结瘤反应 。
表 1
结果与讨论
大皿豆根瘤快生型分离物的代时与产酸性
菌 株
平均代时
( 小时 )
PH值
M 4 M g一 1 M 13 M 2 4一 1 M 3 5一 2 M 3 6一 1 U S D A 1 9 1
(
e
k )
1 13一 2
(
e
k )
3

6 1 3
.
5 2 4

2 5 4

3 8 4
.
6 1 4
.
3 8 4
.
0 5 9
.
0 8
从表 1 看出 , 1 9 8 6年分离获得的大翼豆快生型分离物不同于典型的慢生根瘤 菌 ( 1 13 一
2 )
, 而与标准快生根瘤菌 U S D A ; . : 一样 表现生长快 ( 平均代时为 3 . 52 一 4 . 51 小时 ) 、 产
酸 ( 从 p H S . 0下降到 p H 6 . 6一 6 . 9 ) . 这些特征符合快生型根瘤菌的分类标准 〔 5 〕 . 6 个快
生型分离物的原始分离物 ( SI ) 、 纯化物 ( P ) 和结瘤后的重新分离物 ( R l ) 三次回接大翼
x o s 7年 2 第期 3 5
豆的试验结果表明 , M一 : 和M : 。 一 : 都能感染结瘤 ( 表 2 ) 。 另一方面 , 大翼豆快生型分离物
还可使大豆 、 花生感染结瘤 ( 表 3 ) .
表 2
供试 菌株
M ` (大翼豆原始 分离菌 5 1)
M O一 1 夕
M 13 ,
M 2 4 一 l 护
M 35一 1 甲
M 3 6一 1 扩
M峨 ( 51的纯化物 P )
“ . .目
M g一 1 护
M 13 口
大砚豆报启快生型分离物回镇试验
回接大翼豆结瘤盈兰一{一竺哩竺一—{ M 2 4一 1 ( 5 1的纯化物 P )
( 10 8 6年兰次试验结果 )
回接大翼豆结瘤反应
M 35一 1 1
M 3 6一 1 1
M 4 (接种 P的根瘤分离物 R仆
M g一 1 扩
M 1 3 口
M 24一 1 ,
M 3 5一 1 1
M 3 6一 1 护
+
. 十表示结瘤 , 一表示不结瘤 。
表 3 大耳豆快生型分离物搜种花生 、 大豆结右反应 ( 1 98 6年二次试脸结果 )
M g 一 x M 13 M 2 4一 1 M 3 5一 1 M 36 一 1 0 一 e k
+
.
+ + + + + 一
+ + 十 一 + + 一
. 十表示 结瘤 , 一表示不结脚 。
从表 1 一 3 所列结果来看 , ( 一 ) 大翼豆根瘤分离物中 ,至少 M 。 一 : 、 M : 。 一 : 是大翼豆 快
生型根瘤菌 。 这就说明 , 不仅大翼豆能接受非本身根瘤分离的快生型根瘤菌 感 染 结瘤 〔 .2
3

7 〕 , 而且从栽培在 田间的大翼豆根瘤中也可分离出快生型根瘤菌 . ( 二 ) 从大翼豆根瘤
中分离的快生菌可使花生 、 大豆感染结瘤 . 象慢生型虹豆族根瘤菌的广潜寄主一样 , 大翼豆
也是可分离出能在花生 、 大豆上结瘤的快生菌的寄主 。 ( 三 ) 大翼豆快生菌能使花生 、 大豆
感染结瘤 , 或许快生型根瘤菌与慢生菌一样 , 在侵染力上 , 也存在着大豆 、 虹豆族 ( 包括花
生 ) 等豆科植物 ` 根瘤菌一寄主 ” 交互感染的共生混交性 〔幻 。 本文的研究范围还存在局限
性 , 对于大翼豆快生型 根瘤菌的有效性 ( 固氮 ) 和血清学反应等问题 , 尚需进一步研究 .
今 考 文 橄
[ l 〕 F r e d , E . B · , B a l d , 泣 , I · L · a n d M e C o 了 , E · : R o o t n o d u l e b a e t e r i a a n d l e gu m i n o 让 5 P l a n t s . U n i -
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36 中国油杆
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葡 萄 籽 油 的 性 质 与 成 份
毕琼斯 林辉祥 戴桂林
(湖 南 尺学化工系 )
葡萄籽油 是一种有营养价值的食用油。 汁后剩下的葡萄籽榨油 , 出油率为 12 . 4呱 。
早在六十年代苏联 、 法国 、 美国 、 波兰 、 意 我们对这种油的性质和成份进行了研究 .
大利以及 日本和朝鲜等国家就进行研究 . 这 一 、 翻萄籽油的性质 黄色透明 , 无异
种油不仅亚油酸含量高达 70 帕以上 , 而且还 味 ,折光指数 ( 20 ℃ )为 1 . 4 63 1 , 比重 ( 20 ℃ )为
含有维生素 E . 与其他食用油 比较 , 有害成 0 . 91 87 , 酸价 1 . 03 , 水份及挥发物。 . 1 肠 , 碘
份含量少或基本不含 , 如多环芳烃这种致癌 值 137 · 8 ,不皂化物 .0 7 1帕 , 皂化值 1 98 . 40
物质在葡萄籽油中含量最 低 〔 1 〕 ( 2 . 93 协g 二 、 荀萄籽油的脂肪酸组成 油样经皂
/ k g )
. 葡萄籽油具有较好的热稳 定性 , 在 化后用 S P一 2 3 0 5 E气相色谱仪测定脂肪酸甲
18 0℃烧 45 分钟 , 除碘价略有降低 , 过 氧 化 醋含量 。 按归一化方法计算 , 脂肪酸平均值
物有所增加外 , 其他成份基 本 不 变 〔 2 〕 。 为A , 扣除不皂化物 ( l 肠 ) 即得平均 值 B
葡萄籽油除食用外 , 还可为医药 、 食品提供 ( 见下表 ) . 葡萄籽油中不饱和脂肪酸如亚
原料 , 也可用于制革 工 业 、 涂料 工业 。 油酸含量高达 72 . 8肠 , 油酸 17 . 0肠 , 显然葡
我省国营千山红葡萄酒厂 , 用榨取葡萄 萄籽油的品质比菜籽油好 。
有蔺籽油和菜籽油脂肪谈组成比较表
喜一望一{鳖…一矍兰,…少亡…三鳖一阵鳖1 卜进矍生…一丛二熏{竺 ~ }」巴生1一卫翌一卜一卫上竺一{一一竺塑 - 1一一二一一一卜一 -二 一1一- 二- - -渔上少一{二纠一二竺一卜- ~ ~竺竺l ~卜一兰竺一 , {一一止二一一卜一 二 一一卜- 止二一莱 籽 佃 } “ · ” 2 ! ` · 2 8 } ` 8 · 。0 } ` 3 · 4 0 } 。 · 4 6 1 ’ 0 · “ 0 } 盛2 · 2 0
今 考 文 献
( l 〕 K o l a r o v i e , L . e t a l . : J . e h r o m a t o g r . 2 3 7 ( 2 ) l 。吕2 : 2 6 3 es 2了2
〔 2 〕 E l一 K a d y , s . e t a l : E l e l m i , z e r u i z s g a l a t i K o l z . 2 7 ( 6一 6 ) 1 08 1 : 2 0 7一 3 02
19 8 7年第 2 期