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云南鱼藤提取物对2种蚜虫的杀虫活性研究



全 文 :湖 北 农 业 科 学 2012 年
第 51卷第 8 期
2012年 4 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 51 No.8
Apr.,2012
收稿日期:2011-08-25
基金项目:西南林业大学森林培育云南省重点学科资助(XKZ200906)
作者简介:龚秀会(1978-),女,云南曲靖人,实验师,主要从事生物技术教学和研究,(电话)15912578881(电子信箱)gongxiuhui77@yahoo.com.cn;
通讯作者,刘小烛,教授,主要从事生物化学与分子生物学教学和研究。
云南鱼藤 (Derris yunnanensis Chun) 为豆科
(Leguminosae)鱼藤属(Derris Lour.)多年生木质藤
本植物,产于云南。 鱼藤属植物是我国三大传统杀
虫植物之一, 其根部含有的鱼藤酮是主要的杀虫
成分 [1]。鱼藤酮对作物无药害,无残留,不污染环境,
对农作物品质无不良影响。 但对鱼类剧毒,能杀死
鱼类和水生昆虫,不过对浮游生物、微生物、寄生虫
及其休眠卵没有明显作用[2]。 李有志等[3]研究表明,
亮叶中南鱼藤仅根为含有活性成分的部位,其甲醇
提取物对棉蚜等多种害虫有杀虫活性,其主要作用
方式为触杀和胃毒, 鱼藤酮和 6a,12a-脱氢鱼藤素
是主要杀虫活性成分。 还有报道表明鱼藤酮能增加
农作物产量 [4]。 目前对于鱼藤属植物应用的研究除
鱼藤酮的杀虫活性外,还包括鱼藤酮的提取工艺优
化及其制剂制备方式等。 Sea-Yun[5]的研究表明,对
毛鱼藤和马来鱼藤中的鱼藤酮进行加压提取,可缩
短提取时间,提高提取率。杨晓云等[6]建立了鱼藤根
抽提物中鱼藤酮的高效液相色谱分析方法,适用于
鱼藤根抽提物中鱼藤酮的测定分析。 袁青梅等 [7]采
用三聚氰胺甲醛树脂(MF)作为囊壁,用原位聚合法
对生物农药鱼藤酮进行包囊,制备微胶囊制剂。 国
内外也有对鱼藤化学成分研究的报道,Mahidol 等 [8]
云南鱼藤提取物对 2种蚜虫的杀虫活性研究
龚秀会,李 彪,刘小烛
(西南林业大学西南山地森林资源保育与利用省部共建教育部重点实验室,昆明 650224)
摘要:以萝卜蚜(Lipaphis erysimi)、桃蚜(Myzus persicae)为供试昆虫,研究云南鱼藤(Derris yunnanensis
Chun)乙醇提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物的杀虫活性。 结果表明,云南鱼藤乙醇提取
物对萝卜蚜和桃蚜的杀虫活性的大小顺序为: 正丁醇提取物>乙醇提取物>乙酸乙酯提取物>水提取物;
除水提取物外,其他提取物均对供试昆虫有较好的杀虫活性,且浓度越高杀虫活性越强。推断云南鱼藤中
对萝卜蚜和桃蚜有杀虫活性的成分主要分布在高极性的正丁醇萃取部位。
关键词:云南鱼藤(Derris yunnanensis Chun);提取物;萝卜蚜(Lipaphis erysimi);桃蚜(Myzus persicae);
杀虫活性
中图分类号:S763.49;S789.5 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2012)08-1580-03
Study on Insecticidal Activities of Extract from Derris yunnanensis against Two
Kinds of Aphids
GONG Xiu-hui,LI Biao,LIU Xiao-zhu
(Key Laboratory for Forest Resources Conservation and Use in the Southwest Mountains of China, Ministry of Education,
Southwest Forestry University, Kunming 650224, China)
Abstract: The insecticidal activities of the Derris yunnanensis extracts with different solvents and extractions fractions against
Lipaphis erysimi and Myzus persicae were tested. The results showed that the order of their insecticidal activity to L. erysimi
and Myzus persicae were n-butyl alcohol extracts> ethanol extracts> acetic ether extracts> water extracts. Four extracts except
water extracts had good insecticidal effects to the tested pests; and the higher mass concentration of the extracts the stronger
insecticidal activities was. The results implied that the pesticidal active components of Derris yunnanensis against L. erysimi
and M. persicae may be mainly in n-butyl alcohol extracted fraction and was with high polarity.
Key words: Derris yunnanensis Chun; extract; Lipaphis erysimi; Myzus persicae; insecticidal activity
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2012.08.031
第 8 期
研究表明,鱼藤属植物含黄酮、异黄酮、二氢黄酮、
二氢异黄酮、查尔酮、黄酮苷、鱼藤酮等黄酮类化合
物。 徐鲁荣等 [9]从三叶鱼藤的乙酸乙酯提取物中分
离得到 5 种鱼藤酮类化合物, 分别是去氢鱼藤素、
去氢鱼藤酮、12α-去氢鱼藤酮、 灰叶素、12αβ-hy-
droxyrot-2′-enonic acid。目前,对云南鱼藤的化学成
分及其活性的研究鲜有报道。
为了更充分地利用云南鱼藤这一植物资源,研
究了云南鱼藤提取物对萝卜蚜(Lipaphis erysimi)和
桃蚜(Myzus persicae)的杀虫活性,对于拓宽云南鱼
藤的应用范围和开发丰富的云南鱼藤资源以及寻
求农业害虫防治新途径具有重要意义。
1 材料与方法
1.1 材料
云南鱼藤采集自云南省建水县,风干粉碎过 60
目筛,冷藏备用。 供试昆虫为萝卜蚜及桃蚜,均采自
云南省昆明市寻甸回族彝族自治县。
1.2 方法
1.2.1 云南鱼藤提取物制备 称取制备好的云南
鱼藤干粉 100 g倒入 1 000 mL烧杯, 加入 1 000 mL
95%的乙醇浸泡 24 h,过滤;滤渣再加 95%的乙醇浸
泡过滤,共处理 3 次。 汇集滤液置于圆底烧瓶中水
浴加热回流 3 h 后, 得到浓缩的云南鱼藤乙醇提取
浸膏。 称取 10 g云南鱼藤乙醇提取浸膏, 加入 100
mL 蒸馏水, 依次用乙酸乙酯和正丁醇等体积各萃
取 3 次,浓缩,得到不同极性萃取物(提取物)浸膏,
所剩水相也浓缩成水提取物浸膏。
1.2.2 杀虫活性检测 采用等量稀释法,用水将制
备的各浸膏分别配制成相当于每毫升含 1.000 0、
0.500 0、0.250 0、0.125 0、0.062 5 g 云南鱼藤干粉浸
提物的溶液。 设 1.000 0、0.500 0、0.250 0、0.125 0、
0.062 5 g / mL 5 个处理浓度 , 以清水作为对照
(CK)。 在直径 15 cm 的培养皿中垫一张滤纸,加少
量水使之湿润。 甘蓝叶用各处理液浸渍,晾干后放
入培养皿,每处理 3 个重复,每重复 30 头虫,连续
饲喂至 12 h。处理后 6 h、12 h分别记录死亡虫口数,
并计算死亡率和校正死亡率: 死亡率=(死亡虫口
数 /供试虫口总数)×100%; 校正死亡率=(处理死亡
率-对照死亡率) / (1-对照死亡率)×100%;并用SPSS
软件计算出毒力回归方程及半致死浓度(LC50)[10]。
2 结果与分析
2.1 云南鱼藤提取物对萝卜蚜杀虫活性测定结果
云南鱼藤不同提取物对萝卜蚜的杀虫活性见
表 1。从表 1可见,云南鱼藤的水提取物只有当浓度
达到 1.000 0 g / mL 时才对萝卜蚜有一定的杀虫活
性, 浓度小于 1.000 0 g / mL时对萝卜蚜基本无杀虫
活性。 萝卜蚜经不同浓度的云南鱼藤乙醇提取物、
乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物处理后出现不同程
度死亡,且提取物浓度越高对萝卜蚜虫的杀虫活性
越强。高浓度(1.000 0 g / mL)的正丁醇提取物可以在
短时间(6 h)内将萝卜蚜全部致死,1.000 0 g / mL 的
乙醇提取物处理 12 h 后萝卜蚜全部死亡,说明云南
鱼藤中对萝卜蚜有杀虫活性的物质易溶于正丁醇
及乙醇等高极性的物质中,不易溶于水。
2.2 云南鱼藤提取物对桃蚜杀虫活性测定结果
云南鱼藤不同提取物对桃蚜的杀虫活性见表
2。 从表 2可见,云南鱼藤提取物对桃蚜的杀虫活性
与对萝卜蚜的相似 。 表现为水提取物浓度达到
1.000 0 g /mL时才对桃蚜有一定的杀虫活性,处理12 h
后桃蚜校正死亡率为 10.00%, 浓度低于 1.000 0
g / mL 的水提取物对桃蚜无杀虫活性。 云南鱼藤的
极性溶剂提取物对桃蚜的杀虫活性较强, 1.000 0 g /mL
的乙醇提取物和正丁醇提取物在短时间(6 h)将桃
蚜全部杀死。 1.000 0 g / mL 的乙酸乙酯提取物处理
12 h后,桃蚜的校正死亡率也达 71.27%。 云南鱼藤
的乙醇提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对
桃蚜表现出了相似的规律,浓度越高杀虫活性越强。
表 1 云南鱼藤提取物对萝卜蚜的杀虫活性
处理
乙醇
提取物
乙酸乙酯
提取物
正丁醇
提取物
水提取物
浓度
g/mL
1.000 0
0.500 0
0.250 0
0.125 0
0.062 5
1.000 0
0.500 0
0.250 0
0.125 0
0.062 5
1.000 0
0.500 0
0.250 0
0.125 0
0.062 5
1.000 0
0.500 0
0.250 0
0.125 0
0.062 5
6 h
78.67
62.23
44.33
18.90
7.77
47.77
28.90
21.10
11.10
3.33
100.00
74.43
55.57
36.67
8.90
0.00
0.00
0.00
0.00
0.00
12 h
100.00
84.43
58.90
37.77
13.33
68.90
44.43
32.23
17.77
6.67
100.00
91.10
67.77
43.33
22.23
15.56
7.77
0.00
0.00
0.00
6 h
77.94
60.93
42.41
16.11
4.59
47.77
28.90
21.10
11.10
3.33
100.00
74.43
55.57
36.67
8.90
0.00
0.00
0.00
0.00
0.00
12 h
100.00
83.51
56.48
34.10
8.01
67.46
41.85
29.01
13.96
2.34
100.00
90.46
65.47
39.28
16.67
15.56
7.77
0.00
0.00
0.00
不同时间
死亡率//%
不同时间
校正死亡率//%
龚秀会等:云南鱼藤提取物对 2 种蚜虫的杀虫活性研究 1581
湖 北 农 业 科 学 2012 年
(责任编辑 陈 焰)
表 2 云南鱼藤提取物对桃蚜的杀虫活性
处理
乙醇
提取物
乙酸乙酯
提取物
正丁醇
提取物
水提取物
浓度
g/mL
1.000 0
0.500 0
0.250 0
0.125 0
0.062 5
1.000 0
0.500 0
0.250 0
0.125 0
0.062 5
1.000 0
0.500 0
0.250 0
0.125 0
0.062 5
1.000 0
0.500 0
0.250 0
0.125 0
0.062 5
6 h
100.00
65.56
37.77
18.53
6.67
55.57
41.10
23.33
11.10
0.00
100.00
76.67
54.43
33.33
17.76
0.00
0.00
0.00
0.00
0.00
12 h
100.00
84.43
58.90
36.67
22.23
72.23
52.23
34.43
18.90
5.57
100.00
100.00
66.67
37.77
22.23
10.00
0.00
0.00
0.00
0.00
6 h
100.00
64.37
35.63
15.72
3.46
55.57
41.10
23.33
11.10
0.00
100.00
75.29
51.74
29.40
12.91
0.00
0.00
0.00
0.00
0.00
12 h
100.00
83.31
55.96
32.14
16.67
71.27
50.58
32.17
16.11
2.32
100.00
100.00
63.41
31.69
14.63
10.00
0.00
0.00
0.00
0.00
不同时间
死亡率//%
不同时间校正
死亡率///%
表 3 云南鱼藤提取物的毒力分析(12 h)
处理
乙醇提取物
乙酸乙酯提取物
正丁醇提取物
毒力回归方程
y=3.877 3x -3.697 2
y=1.911 9x -0.261 4
y=2.500 2x - 0.507 4
相关系数
0.896 2
0.976 6
0.994 6
LC50 //mg/mL
251.19
501.19
158.49
毒力回归方程
y=3.616 6x-3.003 7
y=2.040 2x-0.470 6
y=5.045 6x-5.719 6
相关系数
0.859 4
0.974 5
0.837 3
LC50 //mg/mL
163.31
478.63
131.83
对萝卜蚜的杀虫活性 对桃蚜的杀虫活性
注:因云南鱼藤水提取物对供试蚜虫的杀虫活性弱,试验所设的浓度梯度内无法计算毒力回归方程和半致死浓度。
2.3 云南鱼藤提取物对供试昆虫的杀虫活性分析
云南鱼藤提取物饲喂萝卜蚜和桃蚜 12 h 后的
毒力分析见表 3。 从表 3可以看出,3种云南鱼藤提
取物对萝卜蚜和桃蚜有一定的杀虫活性,提取物浓
度和杀虫活性相关性良好。 云南鱼藤提取物对萝卜
蚜和桃蚜的杀虫活性顺序为: 正丁醇提取物>乙醇
提取物>乙酸乙酯提取物>水提取物。 由于云南鱼藤
水提取物杀虫活性很弱,在本试验设置的浓度范围
内无法计算水提取物对供试昆虫的毒力回归方程
以及半致死浓度。 从半致死浓度来看,云南鱼藤的
乙醇提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对桃
蚜的杀虫活性均强于对萝卜蚜的杀虫活性。
综合来看,云南鱼藤不同提取物对萝卜蚜和桃
蚜均具有一定的杀虫活性,正丁醇提取物对供试蚜
虫有较强的毒杀能力,说明云南鱼藤中对供试昆虫
有杀虫活性的物质主要分布在高极性的正丁醇萃
取部位。
3 小结与讨论
1) 云南鱼藤的水提取物对萝卜蚜及桃蚜的杀
虫活性很弱,但是乙醇提取物、乙酸乙酯提取物和
正丁醇提取物对 2 种蚜虫的杀虫活性强,且浓度越
高杀虫活性越强。
2) 云南鱼藤不同提取物对萝卜蚜和桃蚜的杀
虫活性表现出相似的规律,杀虫活性由大到小顺序
为: 正丁醇提取物>乙醇提取物>乙酸乙酯提取物>
水提取物,说明云南鱼藤中对供试昆虫有杀虫活性
的成分主要分布在高极性的正丁醇萃取部位。 对于
云南鱼藤杀虫活性成分的分离纯化及鉴定,需要进
一步研究。
3) 本试验只进行了云南鱼藤的 4 种提取物对
萝卜蚜和桃蚜的杀虫活性研究,云南鱼藤的其他溶
剂提取物的杀虫活性及杀虫成分的杀虫机理有待
进一步研究。 本研究的结果仅是基于实验室研究,
并未得到田间验证,田间试验是否与此结果一致有
待进一步探讨。
参考文献:
[1] 吴征镒. 新华本草纲要(第二册)[M]. 上海:上海科学技术出版
社,1991.
[2] 武艳玲. 常用药物清塘的方法及效果 [J]. 河北渔业,1996(8):
41-42.
[3] 李有志,徐汉虹,魏孝义 . 亮叶中南鱼藤的杀虫活性及有效成
分[J]. 昆虫学报,2007,50(7):695-702.
[4] 张秀玲.三大农药植物[J].安徽农学通报,2007,13(3):143-144.
[5] SEA-YUN A. Extraction of rotenone from Derris elliptica and
Derris malaceensis by pressurized liquid extraction compared
with maceration[J]. J Chromatogr A,2006,1125(2):172-176.
[6] 杨晓云,张志祥,黄继光,等. 鱼藤根抽提物中鱼藤酮的高效液
相色谱分析[J]. 上海师范大学学报(自然科学版),2006,35(2):
43-46.
[7] 袁青梅,杨红卫,张发广,等. 原位聚合法制备鱼藤酮微胶囊[J].
应用化学,2006,23(4):382-385.
[8] MAHIDOL C, PRAWAT H, KAWEETRIPOB W, et al. Two
new pyranoflavanones from the stems of Derris reticulate [J].
Heterocycles,2002,57(7):1287-1292.
[9] 徐鲁荣,李 杉,吴 军,等 . 三叶鱼藤的鱼藤酮化学成分[J].
中药材,2007,30(6):660-661.
[10] 深见顺一,上杉康彦,石塚皓造,等.农药实验法-杀虫剂篇[M].
章元寿译. 北京:农业出版社,1994.
1582