全 文 ：安徽农业技术师范学院学报 , 2000 , 14(3):30～ 32
Journal of Anhui Agro technical Teachers Colleg e
景天三七与轮叶景天同工酶的研究
丁　毅1 ,钱万英2 ,刘　均金2 ,查红光2
(1.安徽大学现代实验技术中心 , 合肥　230039;2.安徽大学生命科学院 ,安徽　合肥 230039)
　　摘　要:采用薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳方法 , 分别测定了景天三七和轮叶景天不同营养器官的同工酶谱 ,
并根据电泳后所显示的酶带数计算出品种间的相似性系数 , 分析同为景天科的两种植物存在的差异及原因。结果
表明:造成这种差异的根本原因在于两种植物基因间的差异。
关键词:景天三七;轮叶景天;同工酶;遗传相似性系数
中图分类号:Q-33　　　文献标识码:A　　　文章编号:1007-3302(2000)03-0030-03
　　同工酶电泳技术是生物化学和分子生物学不断发展的产物 ,是从基因产物的角度来认识基因的存在及
表达 ,由于酶电泳首次鉴定出大量的基因位点 ,故能有效的度量基因组的变异 ,有助于了解基因 ,性状与结构
功能调控关系〔1〕。景天三七(Sedum aigoon L .)和轮叶景天(Sedum restiei llatum L .)是景天科
(Crassulaceae)多年生草本植物。主要分布于我国北部及长江流域 ,景天三七全草含生物碱 ,齐墩果酸 ,景
天庚糖 ,蔗糖 ,果糖 ,蛋白质 ,黄酮类等成分 ,有止血 ,消肿 ,化痰 ,镇痛等功能 。轮叶景天全草入药 ,具有止血 ,
解毒 ,消肿等药效。这两种植物都具有止血消肿 ,治跌打损伤等作用 ,其药效部分近似于人参三七 ,常作为其
代用品用于方剂 ,制剂和成药中〔2〕 。由于其药效存在着一定的差异 ,为了给正确鉴别和恰当使用提供可靠
的依据 ,我们运用超薄层等电聚焦电泳技术对景天三七和轮叶景天不同营养器官的酯酶同工酶(EST)和过
氧化物同工酶(FOR)进行了分析和研究 。
1　材料与方法
1.1　材料
新鲜全株的景天三七和轮叶景天 ,分别取其根 ,茎 ,叶三个部分作为实验材料。
1.2　样品的制备
称取一定量的实验材料 ,按一定比例加入 Tris-H3BO4 提取液 ,研碎 ,离心 ,取上清液备用 。
1.3　薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳〔3〕
按比例混合丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺 ,电极缓冲液储备和水 ,水泵脱气 ,加入过硫酸铵和四甲基乙二胺
轻轻混合 。先用封口胶封口 ,再将分离胶注入玻璃板间 ,插入样品梳 。胶凝固后 ,向电泳糟注入电极缓冲液 ,
其中正极电极缓冲液为 1mol/L H2PO4 ,负极电极液为 1mol/ L NaOH ,上样。电泳:先恒流 4mA , 8mA ,后恒
压 240V , 280V ,580V ,电泳时间:4h染色 ,固定 。
2　结果与分析
2.1　酯酶的分布
样品在不同 pH梯度中的酶带统计见表 1(注:表中 1-景天三七根 ,2-轮叶景天根 , 3-景天三七茎 ,
收稿日期:2000-03-29
4-轮叶景天茎 ,5-景天三七叶 ,6-轮叶景天叶 ,以下同)
表 1　不同梯度样品 EST 酶带分布
Table 1　EST enzyme band in various sample
酶　　带　　数
2.5(pH) 3.0(pH) 3.5(pH) 4.0(pH) 4.5(pH) 5.0(pH)
1 1 1 3 1 2
2 1 1
3 1 1
4 1
5 1 1 2
6 1
2.2　过氧化物同工酶的分布
景天三七和轮叶景天的不同营养器官之间 ,其 EST 酶谱与 FOR酶谱有明显的差异 ,EST 酶带主要分布
在 pH3.0 ～ 6.0之间 ,其中位于 pH3.5 ～ 4.0之间的酶带较多(表 1 、2)。在不同样品中 ,以景天三七根的
EST 谱带较多 ,共有 8条 。轮叶景天的酶带较少 ,其茎 ,叶只有一条极弱的酶带 。
表 2　不同梯度中样品 FOR酶带分布
Table 2　FOR enzyme band in varius sample
酶　　　带　　　数
2.5(pH) 3.0(pH) 3.5(pH) 5.5(pH) 6.0(pH) 6.5(pH) 7.5(pH) 8.0(pH)
1 1 2 1
2
3 2 1 1
4 1 1 1 1 1
5
6 1 2 2 2 1
2.3　遗传差异性　
景天三七的根 、茎 、叶在 pH2.5和 pH4.0处分别有一条共同的酶带 ,说明其 EST 由 2个基因位点控制 ,
这与文献报道 EST 由 2 ～ 10个基因位点控制相符合 。其 FOR酶谱也存在明显差异 ,以碱性区域分布较多 ,
轮叶景天叶的酶谱较强。
根据遗传相似性系数计算公式:S=2C/(A+B)。其中 ,A ,B为不同植物各自的酶带数 ,C 为其共有的酶
带数 。
表 3　样品 EST 酶谱的遗传相似系数
Table 3　Coef ficient of heredity on EST enzyme band
1 2 3 4 5 6
1 1
2 0.4 1
3 0.4 0.5 1
4 0.22 0.67 1
5 0.36 0.4 0.8 0.5 1
6 0.11 0.5 1
3114 卷第 3 期　　　　　　　　　　　　丁　毅　等　景天三七与轮叶景天同工酶的研究　　　　　　　　　　　　　　
表 4　样品 FOR酶谱的遗传相似性系数
Table 4　Coeffcient of heredi ty on FOR enzyme band
1 2 3 4 5 6
1 1 1
2 1
3 0.25 0.22 1
4 0.67 1
5 0.17 1
6 0.33
根据计算出的相似性系数可以看出 ,两种植物的不同部位间存在着程度不同的遗传差异 ,其中 ,以轮叶
景天的差异最明显。
迄今为止 ,从三七不同生长部位已分离出 20种单体皂苷成分〔4〕 ,将其酸水解 ,得到人参二醇和三醇 ,未
得到齐墩果酸 ,这与景天三七有明显区别。三七中含有其特有的皂苷成分 ,仅部分与景天三七和轮叶景天相
似 ,并且其皂苷含量及总皂苷中各单体皂苷比例与这两种景天植物不同。
综上所述 ,景天三七和轮叶景天以及与三七之间在遗传相似性 ,主要药用成分上有明显的差异 ,因此对
于这两种景天植物能否完全替代三七 ,及代用后的疗效 ,有待于进一步研究 。
〔参　考　文　献〕
〔1〕胡能书.同工酶技术及其运用〔M〕.湖南科技出版社 , 1985 年:72～ 76
〔2〕中国植物志〔M〕.北京:科学出版社.34 卷第一分册 1990 年
〔3〕李建武.生物化学实验原理和方法〔M〕.北京:北京大学出版社 , 1994;197 ～ 203
〔4〕甘烦远.中国药学杂志〔J〕.27(3), 1992年:138
Isoenzyme of Sedum aigoon L .and Sedum restieillatum L .
DING Yi ,QIAN Wanying
(Anhui University , Anhui Hefei 230039)
　　Abstract:The different of sedum aigoon L .and Sedum restieillatum L .resulted in both gene dif ferent
basesed on analyses of their isoenzyme of EST and FOR.
Key words:Sedum aigoon L .;Sedum rest ieil latum L .;Iso enzyme
32　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　安徽农业技术师范学院学报　　　　　　　　　　　　　　　　　　2000 年