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银合欢种子中含羞草素的提取和纯化



全 文 :银合欢种子中含羞草素的提取和纯化
华南热带作物学院基抽部下桩旅贞 黎任钊 黎小鸡
华南热带作物研究院热作所 :陈考兰
银合欢 ( L .e Luc 。二 Ph以a ) 是一种蛋白
质含量高 , 并且氨基酸组成合理的热带地区
优良饲料作物 , 其营养成分与首楷接近 , 被 ·
誉为热带 、 亚热带地区的蛋白质库 。 据文献
报导及我们的研究工作表明 , 银合欢叶不仪
粗蛋 白含量高 , 而且含有全部必需和半必需
氨基酸 , 属于完全蛋白。
但银合欢含相当量 的 含羞 草 素 ( 日一
【N 一 3 一 经基 一 4 一 氧代毗吮 基 〕 一 2 一
氨基丙酸 ) , 它对禽畜有害 , 使银合欢用作 、 ,
饲料的价值受到限制 。 为减免含羞草素的毒
性 , 曾采用过多种方法 , 其中最简易的是采
用混合料喂饲或牧场混播 , 使禽畜食入的饲
料中 , 含羞草素的含量低于有害水平 。 根本
的方法是选育低毒品种 。 在达生土作中都得
进行含羞草素含量的测定 , 需要高纯度含羞
草素标准样品 。 另据报导 , 含羞草素是一种
颇有希望的脱毛剂 。 因此 , 为了推进银合欢
的推广和综合利用 , 提取和纯化含羞草素具
有一定的实际意义 。
我们试验了用银合欢种子 、 叶片和豆英
等提取含羞草素 , 其中从种子提 取 较 为方
便 , 从叶片和豆荚虽然也能提取出 , 但同时
被提取出来的有大量杂质 , 不易处理 。
为了从种子中提取含羞草素 , 可以用热
水作为提取剂 , 也可以用含氨的甲醇溶液作
为提取剂 。 前法提取率较高 , 但产品缚度较
低 , 而且提取过程中有大量粘性物质 , 操作
相当困难 。 后法提取率稍低 , 但 产 品 纯 度
高下 而且操作比较简易 。 我们主 要 采用后
法 。
, 一 `一 、 提取原料
本院栽培的新银合欢种子 。 , 六 `
二 、 提取方法
风干或晒干银合欢种子用粉碎机粉碎 ,
叮 妙 二 .
称取50 克 , 置锥形瓶中 , 用水 10 0毫升浸泡 ,
加盖静置过夜 。 转入烧杯 , 加比重为 。 。 g 左
右的浓氨水 13 ~ 15 毫升和甲醇 4 0 毫升 的 混
合液 , 搅拌 2 小时 , 抽滤去渣 , 滤 液 在 近
.
40 ℃的水浴中减压浓缩至 50 一 70 毫升 , 静置
}给待结晶 , 然后离心分离。 晶体用少量95 %
))乙醇
、 丙酮 、 乙醚分别洗涤 2 次 , 真 空 干
}燥矽即得产品 0 . 5~ 0 . 6克 。 按照银合欢种子矫含羞草素含量约为 3 一 6 % , 可算得提取
娜为2 0~ ` o% 。
犷 ` ’ `重复提取试验 : 用袅过一次 提 取 的 残
· 被 , `再按上述方法处理 , 得含羞 草 素 结 晶
0
.
1 3克 , 约为第一次提取的四分之一 。
三 、 纯化方法
拔 .弓 方法* : 提取所得含羞草素每。 . 1 克加
水 10 毫升 , 在沸水浴上加热溶解半小时 , 如有
未溶解物质可过滤 , 然后在不高于 50 ℃的条
件下减压浓缩 , 静置等待结晶。 离心分离 ,甩少量冷水洗涤 , 常温减压干燥约一小时 ,
再千弧℃减压千燥一小时 , 即得提纯产品。份法二 : 重结晶方法同方法一 , ·但离石
` .
分离后用少量冷水 , 95 %乙醇 、 丙酮 、 乙醚
各洗徐 2次 , 常温减压干操一小时。
重结晶提纯得率约 4() % 。
四 、 产品展姆摘扮 ’ 一或 ` 八
1
. 本法提取所得含羞章素与澳大利亚
科学与工业 研 究 组 织 ( c o nu o n w
e a l t h
S d e n t i f i e a n d I n d u . t r i a l R e s e a r e h o r g a n
-
让at ot n) 提供的分析标准样品进行下列两项
比较 。
( I ) 与 F e C 1 3反应能力的比较
二者基本相符 , 本法提取所得产品光吸
收率略低于澳大利亚标准样品 。 数字见下表 。
浓 度 ( % ) ` ’ 母 兮补 ` ’ 一 丁 0 。 0 7 5 0。 1 0 0 0。 1 5 0 0 。 2 0 0
0
。 ’叮25 O。廿肋
光 本法提取产品 0 。 3 0 ’ O。 叻 0 . a p Q , 1 2 0 0 。 1 8 5 0 一 2 5
吸 澳 大利亚标样 0 。 3 0 0 。 6 3 0 . 8 0 0 。 1 3 5 0 。 2 0 0 0 。 2 6 0收率
( 2 ) 纸上属析谱嘴麟
展开剂: 丁醇 , 乙醉 ,水二肠 , 心 , 25
显色剂 : 0 。 1%荀三酮乙醇溶液
展层方法及时间 . 常谁毒行展层两个半
小时。
测得形值 : 本法提取的 产 品 为 0 . 25 及
。 . 2尽, 与澳大利亚标准样。 。 24 是一致的 , 与
J u gn

Y ao iL n 等所得数值亦相同 ,
2
. 对经过重结晶提纯的产品进行了红
外光谱侧定 , 拮果见图 l , 多 ,
巧 公 .
1.阳
之乙奋抽照
:柳 · 。 月钾姆 ·妇 脚二 娜 ·明 4油 ·甲被歇 ( , ,
1 1 方法 , 城结 . , 次产品红外漪日 (即一次重结晶图 )
五 、 结果讨论
由上述结果可见 , 本法是从银合欢种子
提取含羞草素的一种较简便的方法 , 提取率
虽然不高 , 但产品纯度较高 , 而 耳 操作 简
易。 由红外光谱分析判断 , 绎过一次重结晶
后 ( 无论是方法一或方法二 ) 即可达到相当
好的纯化 , 可作为分析标准样品 。 一般无需
重结晶二次 , 增加重结晶次数产量会有较大
损失 。

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( 参考文献 8 篇从略 )
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