全 文 ：第 35 卷第 3 期 中南民族大学学报(自然科学版) Vol． 35 No． 3
2016 年 9 月 Journal of South-Central University for Nationalities(Nat． Sci． Edition) Sep． 2016
收稿日期 2016-5-24 * 通讯作者 陈龙清，研究方向:园林植物物质资源及其利用，E-mail:chenlq@mail． hzau． edu． cn
作者简介 吴瑞云(1968-)，女，博士研究生，讲师，研究方向:药用植物资源学，E-mail:wurain2008@126． com
基金项目 国家科学技术部科技基础性工作专项重点项目(2014FY110100);中南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金项
目(ZZY10008)
不同产地鸡眼草总黄酮含量及动态变化研究
吴瑞云1，2，黄丽丹2，蒋 婷2，梁宇萍2，吴美琳2，刘 虹2，陈龙清1，*
(1 华中农业大学 园艺林学学院，园艺植物生物学教育部重点实验室，武汉 430070;
2 中南民族大学 生命科学学院，南方少数民族地区生物资源保护与综合利用工程中心，武汉 430074)
摘 要 目的:对鸡眼草种质资源进行了总黄酮含量的测定和评价，并探讨了鸡眼草中总黄酮的动态变化规律． 方
法:超声波辅助提取总黄酮，以三乙胺为介质紫外分光光度法考察了鸡眼草的总黄酮含量． 结果:不同产地鸡眼草
总黄酮含量差异极显著，其中贵州凯里榕江鸡眼草为最高，贵州余庆龙溪鸡眼草含量最低;根、茎、叶的总黄酮含量
差异极显著，由高到低为叶 ＞茎 ＞根;鸡眼草中总黄酮的积累高峰为 6、7、8 月;鸡眼草干燥低温中存放，总黄酮含
量远高于常温保存． 结论:鸡眼草叶片是合成和积累总黄酮的主要器官，夏季是采收鸡眼草的最佳时期并适宜低温
干燥保存． 鸡眼草总黄酮含量不仅与产地和采收时间有关，而且与生境也有关．
关键词 鸡眼草;总黄酮含量;产地;动态变化
中图分类号 Q949． 95 文献标识码 A 文章编号 1672-4321(2016)03-0051-04
Total Flavonoid Analysis and Flavonoid Accumulation
Dynamics in Kummerowia striata from Different Areas
Wu Ｒuiyun1，2，Huang Lidan2，Jiang Ting2，Liang Yuping2，Wu Meilin2，Liu Hong2，Chen Longqing1
(1 Key Laboratory of Horticultural Plant Biology (Ministry of Education)，College of Horticulture ＆ Forestry Sciences，
Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China;2 Engineering Ｒesearch Centre for the Protection and Utilization of
Bioresource in Ethnic Area of Southern China，College of Life Science，South-Central University for Nationalities，Wuhan
430074，China)
Abstract Objective:To determinate and analyze the total flavonoids of Kummerowia striata． collected in different places，
and to analyze the variety trends of total flavonoids in K． striata． Methods:Using spectrophotometry with the medium of
triethylamine，the contents of total flavonoids were determined by ethanol solution extraction assisted with ultrasonic．
Ｒesults:The contents of total flavonoids in K． striata from different producing areas were significantly different，which was
the highest in K． striata from Ｒongjiang，Guizhou province，but the K． striata from Yuqing，the same province showed the
lowest content． The total flavonoids among leaf blade，stem and root system were significantly different and the sequence
from high to low was leaf blade ＞ stem ＞ root system． The peak time of total flavonoids accumulation was June，July and
August． The total flavonoids of K． striata stored in low-temperature and dry places were much higher than that in usual
storage． Conclusions:Leaf was the main organ for the biosynthesis and accumulation of total flavonoids in K． striata．
Summer was the best time to harvest K． striata，and it is suitable to store at low-temperature and dry places． The results
suggest that contents of total flavonoids relate not only to collecting place and collecting time，but also to plant biotope．
Keywords Kummerowia striata;total flavonoid content;producing area;variety trends
鸡眼草为蝶形花科鸡眼草属鸡眼草 Kummerowia
striata (Thunb．)Schindl 和长萼鸡眼草 Kummerowia
stipulacea (Maxim．)Makino 的干燥全草 ，分布很
广［1］． 民间应用历史悠久． 可治疗胃肠炎、痢疾、肝
炎、夜盲症，泌尿系统感染、跌打损伤、疗疮疖肿等．
鸡眼草提取物具有多种生物活性，如抗炎、抗病毒、杀
菌、抗肿瘤作用等［2］． 近年来，已从鸡眼草中分离得
到多种化合物，主要成分为黄酮类化合物，包括染料
木素、槲皮素、山柰酚、木犀草素、芹菜素及其葡萄糖
苷等［3，4］． 王春景等对鸡眼草抗氧化活性部位进行了
筛选［5］，但是有关鸡眼草不同产地、有效成分含量动
态等均还未见报道． 本 研 究 首 次 对 鸡 眼 草
(Kummerowia striata)不同产地、不同时间等的黄酮类
化合物含量动态变化进行了分析，以期对鸡眼草药材
的质量评价、质量控制和开发利用提供参考．
1 材料和方法
1． 1 材料和仪器
6月至 11月(每月中旬)鸡眼草采于中南民族大
学南湖校区，用于分析总黄酮含量的时间动态变化;
不同产地鸡眼草于 7、8 月份野外采集，各采集 30 个
样，采集后自然阴干，密封保存． 经中南民族大学药
学院万定荣教授鉴定为蝶形花科鸡眼草属鸡眼草
Kummerowia striata (Thunb．)Schindl．的干燥全草．
对照品:芦丁(槲皮素-3-O-芸香糖苷)标准品购
于中国生物制品检定所，批号:100080-200707，供 UV
法测定，含量为 92． 5% ． 其余试剂均为分析纯．
UV-2401分光光度计(日本岛津公司)，UV-752
分光光度计(上海分析化学仪器公司)．
1． 2 实验方法
1． 2． 1 样品预处理
所采集鸡眼草干品，研磨成粉末，过二号筛，充分
混匀备用．
1． 2． 2 标准溶液的制备
120℃下干燥至恒重的芦丁标准品 10 mg，加入
30 mL 70%的乙醇至 50 mL容量瓶中，置水浴上微热
溶解，放冷，加乙醇，摇匀配置成0． 2 mg /mL芦丁标准
液．
1． 2． 3 标准曲线的制备
芦丁标准液 0． 0，1． 0，2． 0，3． 0，4． 0，5． 0，6． 0 mL，
分置于 25 mL 容量瓶中，加 70%乙醇至刻度，摇匀．
不同梯度的芦丁标准液各 5 mL，加 1%三乙胺溶液至
10 mL，摇匀，静置 12 min 后，以试剂空白作参比，在
400 nm波长下测定吸光度． 经回归处理，求得回归方
程总黄酮浓度在 1． 0 ～25． 0 μg /mL范围内，相应吸光
度有良好线性关系，回归方程为 A = 0． 04258C －
0． 0138(r =0． 9991)．
1． 2． 4 鸡眼草总黄酮提取
鸡眼草粉末 0． 1 g，加入 70%的乙醇 10 mL，温度
75℃，超声波功率 500 W，提取 45 min，放冷，称重，用
70%乙醇补足减失重量，摇匀，离心，取上清液 ［6］．
1． 2． 5 三乙胺法测定总黄酮含量
取供试品溶液 0． 5 mL，按文献［6］方法测定总黄
酮含量．
1． 2． 6 数据统计与分析
采用 SPSS20． 0和 Excel 软件进行总黄酮含量差
异的方差分析［7］．
2 结果与分析
2． 1 不同产地鸡眼草的总黄酮含量比较
供试鸡眼草样品不同器官中总黄酮含量有明显
差异(p ＜0． 01)． 其中，叶中的质量分数为 2． 895% ～
2． 167%，茎中为 1． 182% ～ 0． 968%，根中为0． 198%
～0． 173% (表 1)．
表 1 不同产地鸡眼草的总黄酮含量
Tab． 1 Total flavonoid contents of K． striata． in different producing areas
序号 产地 采集地 采集时间 叶 茎 根 全草
1 贵州 凯里市榕江县平阳乡岭培村 08． 08 ～08． 15 2． 895 1． 182 0． 195 1． 974
2 湖南 吉首市龙山县三元乡 07． 26 ～08． 17 2． 822 1． 174 0． 184 1． 936
3 湖北 恩施自治州恩施市 08． 07 ～08． 24 2． 800 1． 171 0． 183 1． 923
4 湖北 黄冈市英山县大别山吴家山 07． 11 ～07． 15 2． 725 1． 131 0． 198 1． 869
5 湖北 武汉市武昌区 08． 07 ～08． 12 2． 647 1． 109 0． 185 1． 820
6 广西 河池市都安县高岭镇 08． 04 ～08． 17 2． 522 1． 084 0． 183 1． 745
7 广西 桂林市恭城县恭城镇 08． 06 ～08． 18 2． 509 1． 064 0． 177 1． 723
8 安徽 安庆市大观区十里乡 07． 23 ～07． 31 2． 424 1． 043 0． 175 1． 680
9 广西 崇左市龙州县下冻镇 08． 02 ～08． 16 2． 292 0． 972 0． 176 1． 580
10 贵州 余庆县龙溪镇 08． 12 ～08． 23 2． 167 0． 968 0． 173 1． 520
其中以贵州凯里榕江所产鸡眼草含量最高，叶可
达 2． 895%，茎 1． 182%;以贵州余庆龙溪所产鸡眼草
含量最低，叶 2． 167%，茎 0． 968%;鸡眼草总黄酮含
量从高到低的变化顺序是:1-贵州凯里榕江县 ＞ 2-湖
南吉首市龙山 ＞ 3-湖北恩施 ＞ 4-湖北英山县大别山
＞5-湖北武昌 ＞ 6-广西河池市都安 ＞ 7-广西桂林市
25 中南民族大学学报(自然科学版) 第 35 卷
恭城 ＞8-安徽安庆市大观 ＞ 9-广西崇左市龙州 ＞ 10-
贵州余庆县龙溪 (表 1)． 方差分析表明不同产地、不
同部位总黄酮含量的差异具有显著性(p ＜ 0． 01)．可
见总黄酮含量与供试样品的产地和器官直接相关．
2． 2 不同采集期鸡眼草的总黄酮含量比较
幼嫩期和花前期(6 ～ 8 月)，鸡眼草的总黄酮含
量均较高;花期(9月)总黄酮含量有所下降;果期(10
月)、果后期(11 月)，鸡眼草总黄酮含量均大幅度降
低 (表 2)． 以上结果表明，总黄酮含量的差异与不同
的采集时间直接相关． 根据鸡眼草的生长规律及实
验结果，6、7、8月份含量较高，均可以采集入药． 方差
分析表明不同采集期间总黄酮含量的差异达极显著
水平(p ＜0． 01)． 以上结果说明总黄酮含量与供试样
品的不同采集期直接相关．
表 2 不同采集期鸡眼草总黄酮含量
Tab． 2 Total flavonoid contents of K． striata． collected in different growth periods
总黄酮得率(%)
幼嫩期 花前期 初花期 盛花期 果期 果后期
6 ～10 7 ～10 8 ～10 9 ～4 9 ～12 10 ～10 11 ～10
鸡眼草 1． 873 1． 839 1． 824 1． 759 1． 642 1． 589 1． 219
2． 3 存储条件、时间不同对鸡眼草不同部位总黄酮
含量的影响
将 7月份采集于湖北武昌的鸡眼草的叶、茎、根
研磨成粗粉，每间隔 3 个月测定总黄酮含量，连续 12
个月;并测定 2年前鸡眼草样品，结果表明，在干燥低
温(4℃)下存放，总黄酮含量均远高于常温自然存放
(表 3)．
表 3 不同存储条件、不同存储时间及不同部位的总黄酮得率
Tab． 3 The yields of total flavonoids in different storage conditions，times and parts
存放条件 存储时间 鲜品 3个月 6个月 9个月 1年 2年 下降速率 /年
常温自
然存放
叶 2． 663 2． 432 2． 259 2． 189 2． 009 1． 452 28． 9%
茎 1． 133 1． 016 0． 928 0． 892 0． 806 0． 587 28． 6%
根 0． 193 0． 173 0． 158 0． 148 0． 138 0． 099 29． 2%
全草 1． 834 1． 662 1． 548 1． 485 1． 359 0． 985 28． 8%
4℃干
燥保存
叶 2． 663 2． 612 2． 574 2． 542 2． 477 2． 311 6． 84%
茎 1． 133 1． 109 1． 091 1． 084 1． 062 0． 982 6． 89%
根 0． 193 0． 189 0． 184 0． 182 0． 180 0． 168 6． 70%
全草 1． 834 1． 801 1． 774 1． 750 1． 713 1． 595 6． 74%
3 讨论
鸡眼草在我国分布广泛，本研究中，不同产地的
鸡眼草总黄酮含量差异极为显著(p ＜ 0． 01)．除了贵
州余庆县龙溪镇的鸡眼草之外，其他来自贵州榕江
县、湖南龙山县、湖北(恩施市、英山县大别山及武汉
市武昌区)的鸡眼草的总黄酮含量均比来自广西(都
安县、恭城县、龙州县)、安徽安庆市的样品高，地理因
素可能是影响种质资源的关键因素． 不同产地鸡眼
草根、茎、叶的总黄酮含量测定结果均表明，叶 ＞茎 ＞
根，差异极显著(p ＜0． 01)，这表明总黄酮在不同器官
中的积累量有显著差异．
采于贵州省余庆县龙溪镇鸡眼草总黄酮含量显
著低于贵州省凯里榕江鸡眼草(p ＜0． 01)． 这可能与
产地的气候因素等有关． 贵州省凯里市榕江县平阳
乡位于国家级雷公山自然保护区南麓，属亚热带季风
性湿润气候． 而同在贵州省、纬度接近的余庆县属亚
热带温润季风气候;四季分明． 采于余庆县的鸡眼草
药材较干燥、木质化程度较高可能受盛夏伏旱影响较
大． 药用植物有效成分的积累受诸多因素的影响，植
物的生境除气候因素之外，土质条件等可能对植物次
生代谢成分的积累均有重大影响． 其生境如何具体
影响鸡眼草的有效成分有待于进一步深入研究．
鸡眼草黄酮含量动态变化结果表明，鸡眼草在干
燥低温(4℃)下存放，总黄酮含量均高于常温自然存
放的含量;产地在武汉的不同生长发育时期鸡眼草的
总黄酮含量各不相同，幼嫩期 ＞花前期 ＞初花期 ＞盛
花期 ＞果期 ＞果后期，因此盛花期以前总黄酮含量较
高，鸡眼草均可以采集入药． 本研究在确定鸡眼草最
佳采收期与产地上初步取得一定结果，但影响植物用
药的安全与疗效的因素很多，比如季节、气候、海拔
等，还需要进行更全面深入的研究．
(下转第 61页)
35第 3 期 吴瑞云，等:不同产地鸡眼草总黄酮含量及动态变化研究
验研究表明，与正常对照组比较，高低剂量芳香新塔
花茶与阈下剂量戊巴比妥钠合用分别可以使小鼠睡
眠潜伏时期缩短(p ＜ 0． 05 或 0． 01)和睡眠持续时
间(p ＜ 0． 05 或 0． 01)延长且增加小鼠入睡只数，从
而认为芳香新塔花茶有明显的镇静催眠作用．
胸腺和脾脏是动物体内主要的免疫器官，肝脏
是动物机体重要的代谢器官，同时也是动物的免疫
器官之一． 胸腺、脾脏、肝脏等免疫器官的重量变
化，是反映动物体免疫功能的重要指标［5］． 本实验
结果表明，给予不同浓度的芳香新塔花茶，小鼠的体
重、免疫器官指数有明显的变化，且随着浓度的升高
体重有明显的增加(p ＜ 0． 05 或 0． 01)，免疫器官指
数也明显增大(p ＜ 0． 05 或 0． 01)．
结果预示芳香新塔花茶具有明显的镇静催眠、
增强免疫力的作用，经常饮用具有很好的保健作用，
其镇静催眠作用、免疫增强作用机理有待于进一步
研究．
参 考 文 献
［1］ 米吉提·胡达尔拜地，潘晓玲． 新疆植物志·第 4 卷
［M］．乌鲁木齐:新疆科学技术出版社，2004:327．
［2］ 李彦华，汪常伟，江 华，等． 唇香草聪耳片治疗突发
性耳聋 30 例疗效分析［J］．地方病通报，2006，21(3):
84-85．
［3］ 杨伟俊，哈木拉提，孙玉华，等． 芳香新塔花对大鼠急
性心肌缺血和乳鼠心肌细胞的保护作用［J］． 现代药
物与临床，2010(3):194-198．
［4］ Belyaev N F，Demeubaeva A M． Chromatographic study
of the composition of the essential oil of Ziziphora
clinopodioides，a vicarious form of Origanum vulgare［J］．
Chemistry of Natural Compounds，1999，35(1) :52-54．
［5］ 华 实，马 琪，宋海涛，等．唇香草对油酸-内毒素序
贯致 AＲDS大鼠心、肺的干预作用［J］．新疆医科大学
学报，2009，32(11):1536-1538．
［6］ 沙爱龙，陈红玲，孟庆艳．维药芳香新塔花水提物的抗
炎镇痛作用及其急性毒性［J］．中国实验方剂学杂志，
2012，18(4):202-204．
［7］ 沙爱龙，阿卜杜吉力力·麦麦提，孟庆艳．维药芳香新
塔花和小新塔花对小鼠离体十二指肠收缩性影响的
比较研究［J］．江苏农业科学，2012，40(5):171-172．
［8］ 孙翠婷．失眠的危害及预防措施［J］．健康大视野·医
学分册，2007，17(5):
櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖櫖
29-30．
(上接第 61 页)
参 考 文 献
［1］ 江苏新医学院． 中药大辞典(上册)［M］． 上海:上海
人民出版社，1977:1215．
［2］ 《全国中草药汇编》编写组． 全国中草药汇编(上册)
［M］． 2 版． 北京:人民卫生出版社，2000:443．
［3］ 唐人九． 人字草黄酮类化学成分研究［J］． 华西药学
杂志． 1996，11(1):5-10．
［4］ 李胜华． 鸡眼草中黄酮类化学成分研究［J］． 中国药
学杂志． 2014，49(10):817-820．
［5］ 王春景，胡小梅，张 鼎，等． 鸡眼草抗氧化活性部位的
筛选及其黄酮和总酚含量［J］． 中药材，2014，37(5):
868-871．
［6］ 池玉梅，居 羚，邓海山，等． 分光光度测定总黄酮法
的适用性［J］． 分析化学，2010，38:893-896．
［7］ 李云雁，胡传荣． 试验设计与数据处理［M］． 北京:化
学工业出版社，2005:79．
16第 3 期 沙爱龙，等:芳香新塔花茶对小鼠镇静催眠、生长发育及免疫器官指数的影响研究