全 文 ：农吉利有效成分的 HPLC指纹图谱研究
张 薇1， 樊轻亚2，3， 范华均2* ， 黄晓文2， 佘旭辉2， 刘小琴2
(1. 广东药学院基础学院，广东 广州 510006;2. 广东药学院药科学院，广东 广州 510006;3. 信阳职业技
术学院药学与检验系，河南 信阳 464000)
收稿日期:2011-10-31
作者简介:张 薇 (1963—) ，女，副教授，研究方向:微波技术在中药材中的应用。Tel: (020)39352197，E-mail:gzzhangw@ 163. com
* 通信作者:范华均 (1963—) ，男，教授，研究方向:药物提取分离及分析。Tel: (020)39352135，E-mail:junhuafan@ 126. com
摘要:目的 建立农吉利中生物碱和黄酮化合物两类主要有效成分的指纹图谱。方法 采用 C18色谱柱，分别以甲
醇 － 0. 5%乙酸溶液和甲醇 － 0. 04%氨水溶液作为流动相梯度洗脱，用二极管阵列检测器 (DAD)检测，研究了农吉
利中黄酮类化合物和生物碱两种主要有效成分的色谱分离条件，利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统 (2004 版)
处理。结果 各批药材有 9 个黄酮化合物和 4 个生物碱共有峰，分别以牡荆素和农吉利甲素作为黄酮化合物和生物碱
的参照峰，建立了 10 批农吉利药材的指纹图谱，其相似度分别在 0. 975 ～ 0. 995 和 0. 908 ～ 0. 990 之间，各色谱峰精密
度、稳定性和测定重复性的 RSD 均小于 3%，主要成分牡荆素和农吉利甲素含有量分别在 0. 221 ～ 0. 428 mg /g 和
0. 012 ～ 0. 082 mg /g之间。结论 本法简便、特征性强、可用于不同产地农吉利药材的指纹图谱的鉴定和质量评价。
关键词:农吉利;指纹图谱;HPLC;黄酮化合物;生物碱
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2012)09-1734-06
HPLC fingerprints for effective constituents in Crotalaria sessiliflora L．
ZHANG Wei1， FAN Qing-ya2，3， FAN Hua-jun2* ， HUANG Xiao-wen2， SHE Xu-hui2，
LIU Xiao-qin2
(1. School of Basic Courses，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China;2. College of Pharmacy，Guangdong Pharmaceutical U-
niversity，Guangzhou 510006，China;3. Department of Pharmacy and Inspection，Xinyang Vocational and Technology College，Xinyang 464000，China)
ABSTRACT:AIM To establish HPLC fingerprints for the quality evaluation of Crotalaria sessiliflora L． ．
METHODS Using methanol-0. 5% acetic acid solution and methanol-0. 04% ammonia solution as mobile pha-
ses，the flavonoids and alkaloids extracted from the samples were separated on C18 column in gradient elution
modes，and detected by diode array detector (DAD) ，respectively． The HPLC data of ten batches of samples from
four different origins were processed by the software“Similarity Evaluation System for Chromatographic Fingerprint
of TCM (2004 version)”． And the flavonoids and alkaloids were also identified by HPLC-ESI-MS /MS． RESULTS
Based on obtained HPLC chromatograms，nine flavonoids and four alkaloids presented the common characteristic
peaks． Vitexin and monocrotaline as major constituents were selected as reference substances of alkaloid and fla-
vonoid，respectively． RSDs of above constituents in chromatograms for precision，stability and reproducibility were
less than 3% ． The similarities of ten batches of samples of Crotalaria sessiliflora L． were between 0. 975 － 0. 995
for flavonoids and 0. 908 － 0. 990 for alkaloids． CONCLUSIONS The method developed is convenient and spe-
cific，and could further serve for quality identification and comprehensive evaluation of Crotalaria sessiliflora L．
from different habitats．
KEY WORDS Crotalaria sessiliflora L．;fingerprint;HPLC;flavonoids;alkaloids
农吉利系豆科猪屎豆属植物野百合 Crotalaria
sessiliflora L． 的干燥全草，也称鼠蛋草、响铃草、
芝麻响铃铃、细叶芝麻铃，其味淡、性平，有解
毒、抗癌的功能，主要含有生物碱和黄酮类化合
物。近年来有关农吉利及其有效成分的研究逐渐增
多［1-3］。农吉利主要分布于亚洲东南部和日本等
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地，各地药材的质量及其差异的相关研究还未曾见
有报道。本实验考虑到农吉利中黄酮和生物碱两类
化合物在有效成分的含有量、性质及色谱分离行为
上存在较大差异，通过样品前处理，采用液相色谱-
电喷雾-串联质谱 (LC-ESI-MS /MS)法鉴定其主要
成分，以牡荆素和农吉利甲素分别作为参照峰，利
用高效液相色谱 (HPLC)法建立了黄酮和生物碱
两类化合物有效成分的 HPLC 指纹图谱。考察了
10 批农吉利药材，同时定量测定了牡荆素、农吉
利甲素，为该药材的鉴别以及其质量评价提供
依据。
1 仪器和材料
1. 1 主要仪器与试剂 LC—10 液相色谱仪 (带
LC-Solution色谱工作站，日本岛津公司) ;Aglient
1100 HPLC—MS Trap XCT (美国 Agilent 公司) ;
Acquity UPLC—Q—Tof Micro 联用仪 (美国 Waters
公司) ;PJ21C-AN微波炉 (美的公司) ;HH—6 恒
温水浴锅 (江苏金坛宏华仪器厂) ;RE52CS—1 旋
转蒸发器 (上海亚荣生化仪器厂) ;pHS—25 数显
pH计 (上海精密科学仪器有限公司)。
牡荆素对照品 (中国药品生物制品检定所，批
号:111687-200701) ;异牡荆素对照品 (上海永恒
生物科技公司，批号:38953-85-4) ;农吉利甲素对
照品 (美国 New Jersey公司，批号:315-22-0) ;甲
醇，乙腈 (色谱纯，Merk 公司) ;除注明外其他试
剂均为分析纯;试验用水为超纯水。
指纹图谱分析软件为国家药典委员会的中药色
谱指纹图谱相似度评价系统 (2004A版)。
1. 2 试药 从市场购买不同产地的农吉利样品共
10 份，药材样品来源见表 1，经本校中药学院刘基
柱副教授鉴定均为豆科植物野百合的干燥带叶
茎枝。
2 方法与结果
2. 1 溶液的制备
2. 1. 1 对照品溶液的制备 准确称取牡荆素、异
牡荆素和农吉利甲素对照品各 5. 0 mg，用甲醇溶解
后定 容 至 1 0 mL ，分 别 配 制 成 质 量 浓 度 为
表 1 农吉利药材来源
Tab. 1 Samples of Crotalaria sessiliflora L．
序号 产地 来源 批号
S1 广西 玉林市中药材公司 20061001
S2 广西 玉林市中药材公司 20070301
S3 广西 玉林市中药材公司 20070302
S4 山东 广州康乐药材公司 20070401
S5 山东 广州康乐药材公司 20070901
S6 山东 广州康乐药材公司 20080301
S7 河北 安国冷背药材有限公司 20080401
S8 河北 安国冷背药材有限公司 20080402
S9 湖北 广州清平药材市场 20080501
S10 湖北 广州清平药材市场 20080502
0. 50 mg /mL贮备液，保存于冰箱。使用时按需要
逐级稀释。
2. 1. 2 供试品溶液的制备［4-6］ 称取 80 目的药材
粉末 5. 0 g于烧瓶中，加入 150 mL甲醇，置于微波
炉中，调节微波功率 780 W，分别加热回流 50 min
和 100 min后，旋干，得到浸膏。平行制备两份。
黄酮化合物供试品溶液的制备一份加入
60 mL水溶解，再将其通过 AB-8 大孔吸附树脂
柱，用水洗涤后，吸附的黄酮化合物再用 90%乙
醇 (V /V)洗脱，旋干洗脱液，用甲醇溶解，定
容至10 mL。
生物碱供 试 品 溶 液 的 制 备 另 一 份 加 入
0. 1 mol /L HCl溶液 50 mL 溶解，转移至分液漏斗
中，加入 20 mL 三氯甲烷萃取，弃去下层，重复 3
次;再滴加氨水，调节上层溶液酸度至 pH 10 ～ 11，
然后用 20 mL 三氯甲烷萃取 3 次，合并三氯甲烷
层，旋干溶剂后用甲醇溶解，并定容至 5 mL。
2. 2 色谱分析
2. 2. 1 HPLC分析条件 黄酮化合物和生物碱的
供试品溶液分别以甲醇 (A)-0. 5% 冰乙酸溶液
(B)和甲醇 (C)-0. 04%氨水溶液 (D)为流动
相，采用梯度洗脱程序分离 (见表 2) ;UltimateTM
C18色谱柱 (4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ;DAD 检测
器;柱温 30 ℃;体积流量 1. 0 mL /min;进样
量10 μL。
表 2 HPLC梯度洗脱程序
Tab. 2 Procedures of gradient elution for flavonoids and alkaloids by HPLC
黄酮提取液 生物碱提取液
时间 /min 乙腈 (A) 0. 5%冰醋酸水溶液 (B) 时间 /min 甲醇 (C) 0. 04%氨水溶液 (D)
0 ～ 10 25% ～30% 75% ～70% 0 ～ 10 25% 75%
10 ～ 65 30% ～38% 70% ～62% 10 ～ 40 25% ～30% 75% ～70%
65 ～ 90 38% ～100% 62% ～0 40 ～ 55 30% ～100% 70% ～0
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2. 2. 2 LC-MS分析条件
2. 2. 2. 1 黄酮化合物的分析条件 紫外检测器，
检测波长 330 nm;其他条件同 2. 2 项下黄酮化合
物的色谱分离条件。
电喷雾离子阱多级质谱仪 ESI离子源;正离子
和负离子检出模式;离子源温度 110 ℃;质量扫描
范围 50 ～ 600 m/z;干燥气 (N2)体积流量 600
L /h;干燥气温度 350 ℃;毛细管电压 3. 5 kV;雾
化气压力 50 psi (1 psi = 6. 895 kPa)。
2. 2. 2. 2 生物碱的分析条件 Aquity UPLC BHE
C18色谱柱 (2. 1 mm ×50 mm，1. 7 μm) ;流动相为
乙腈 (E) － 0. 5%乙酸胺水溶液 (F) ，采用梯度
洗脱程序 (0 ～ 3 min，5% E;3 ～ 15 min，5% ～
30%E;15 ～ 17 min，30% ～ 50% E;17 ～ 20 min，
50%E;20 ～ 21 min，50% ～ 95% E) ;紫外检测波
长 216 nm;柱温 30 ℃;体积流量 0. 3 mL /min;进
样量 5 μL。
电喷雾 Q-TOF 质谱仪 ESI 离子源;正离子检
出模式;离子源温度 100 ℃;质量扫描范围 10 ～
600 m/z;气化室温度 350 ℃;雾化气 (N2)体积
流量 60 L /h;脱溶剂气 (N2)体积流量 600 L /h;
毛细管电压 3. 5 kV;锥孔电压 15 eV。
2. 3 方法学的考察
2. 3. 1 精密度、重复性、稳定性考察 根据多批
药材的色谱图谱的初步分析结果，取如图 1、图 2
所示的 9 种黄酮化合物和 4 种生物碱组分作为共有
峰，通过取同一批药材按实验方法制备供试品溶
液，用 HPLC测定，考察了方法的精密度、重复性
(取 6 份药材)和稳定性试验 (分别在 0、4、8、
12、24 和 48 h测定)。
1. 荭草素 2. 异荭草素 3. 牡荆素 4. 异牡荆素 5. 金雀
花黄酮苷
1. orientin 2. isoorientin 3. vitexin 4. isovitexin 5. trematin
图 1 农吉利药材黄酮化合物色谱图
Fig. 1 HPLC chromatogram of flavonoids in Crotalar-
ia sessiliflora L．
1. 农吉利甲素 3. 9-当归酰基倒千里光碱 4. 全缘千里光碱
1. monocrotaline 3. 9-angelylretronecine 4. integerrimine
图 2 农吉利药材生物碱的色谱图
Fig. 2 HPLC chromatogram of alkaloids in Crotalaria
sessiliflora L
黄酮化合物 9 种组分的色谱峰峰面积的精密
度、重复性、稳定性的 RSD 分别为 0. 20% ～
1. 7%，0. 11% ～ 1. 19%，0. 23% ～ 1. 4%，保留时
间的 RSD在 0. 53% ～1. 1%之间;4 种生物碱组分
的色谱峰峰面积精密度、重复性、稳定性的 RSD
分别为 0. 19% ～ 2. 2%，0. 39% ～ 2. 4%，0. 22% ～
2. 8%，保留时间的 RSD 在 0. 47% ～ 2. 1% 之间。
结果表明农吉利的黄酮化合物和生物碱组分的保留
时间稳定，方法的精密度、重复性和稳定性良好，
符合指纹图谱中相对标准偏差不得大于 3%的规
定，因此选定这 9 个黄酮化合物和 4 个生物碱组分
作为指纹图谱的共有峰。
2. 3. 2 共有峰的 LC-MS鉴别 分别取农吉利的黄
酮化合物和生物碱的供试品溶液，按照 HPLC-MS
条件，对色谱图 1 和图 2 中的各组分分别采用 LC-
IonTrap-MS和 LC-Q-TOF-MS 进行了分析，其结果
见表 3 和表 4。
根据表 3 和表 4 所示的一级质谱和二级质谱信
息，黄酮化合物中的峰 3 和峰 4 (图 1)及生物碱
峰 1 (图 2)经与对照品对比，保留时间、紫外光
谱、质谱数据均一致，确定为牡荆素、异牡荆素和
农吉利甲素 (由于农吉利生物碱的稳定性，实验采
用 Q-TOF-MS 更容易获得更精确的分子量信息，有
利于结构的鉴别) ，其他色谱峰通过分析 UV 光谱、
MS 及 MS /MS 谱图数据，并参考相关的文献报道结
果［7-14］，初步推导了 4 个黄酮化合物和 2 个生物碱
可能的化学结构。
2. 3. 3 指纹图谱的建立 取 10 个批次的农吉利药
材，分别按 2. 1. 2 项制备黄酮化合物和生物碱的供
试品溶液，并用 HPLC 依次测定，分别记录黄酮化
合物和生物碱 90 min和 40 min的色谱图，在 10 批
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表 3 农吉利中黄酮化合物的 LC-MS分析结果
Tab. 3 Obtained data of flavonoids in Crotalaria sessiliflora L． by LC-MS
峰序号
保留时间
/min
［M + H］
/ (m/z)
［M-H］
/ (m/z)
MS /MS
/ (m/z) 化合物
1 24. 8 449. 2 447. 3 431. 1、413. 3、383. 5、353. 6、329. 7、299. 7 荭草素［7-10］
2 28. 2 449. 2 447. 4 431. 1、413. 1、383. 1、353. 2、329. 3、299. 3 异荭草素［7-10］
3 30. 9 433. 2 431. 3 415. 1、397. 2、367. 3、337. 5、313. 5、271. 5 牡荆素［7-10］
4 39. 7 433. 2 431. 4 415. 1、397. 3、367. 2、337. 2、313. 5、283. 5 异牡荆素［7-10］
5 44. 2 463. 2 461. 3 445. 1、427. 2、397. 2、367. 4、343. 5、313. 5 金雀花黄酮苷［9-10］
6 54. 6 433. 1 431. 6 271. 1 —
7 58. 9 433. 5 431. 3 271. 1 —
8 62. 5 493. 1 491. 2 331. 1 —
9 68. 9 531. 2 529. 3 277. 0 —
表 4 农吉利中生物碱化合物的 LC-MS分析结果
Tab. 4 Obtained data of alkaloids in Crotalaria sessiliflora L． by LC-MS
峰序号
保留时间 /
min
［M + H］ /
(m/z)
［M-H］ /
(m/z)
MS /MS /
(m/z) 化合物
1 2. 74 326. 2 324. 4 280. 1、237. 1、194. 1、138. 1、120. 1、94. 1、93. 1 农吉利甲素［10-15］
2 6. 88 － － － －
3 12. 40 238. 2 236. 1 138. 1、120. 1、94. 1、83. 0、67. 1 9-当归酰基倒千里光碱［10-15］
4 12. 58 336. 1 334. 3 291. 1、220. 1、138. 1、120. 1 全缘千里光碱［10-15］
样品中选择了稳定的 9 个黄酮化合物和 4 个生物碱
组分作为共有峰，非共有峰占总峰面积均小于
10%。鉴于牡荆素和农吉利甲素为农吉利的主要有
效成分，且含有量较高、稳定，其色谱峰所占比例
大，故分别将其作为黄酮化合物和生物碱图谱的参
照峰。采用国家药典委员会开发的中药色谱指纹图
谱相似度评价系统研究版 (2004A)处理，设定 S1
样品为参照图谱，将其它样品的色谱峰与参照图谱
进行自动匹配，获得农吉利药材指纹图谱共有模
式，以及 10 个批次农吉利药材的指纹图谱和相对
峰面积，结果分别见表 5、图 3。
表 5 10 批药材中黄酮与生物碱化合物共有峰面积及相似度分析结果
Tab. 5 Relative peak area of common characteristic peaks and similarity analysis for flavonoids and alkaloids in ten batches
of samples
样品
黄酮化合物共有峰相对峰面积值 生物碱化合物共有峰相对峰面积值
1 2 3 4 5 6 7 8 9 相似度 1 2 3 4 相似度
S1 0. 372 0. 180 1. 000 0. 494 0. 618 0. 132 0. 134 0. 252 0. 092 0. 995 1. 000 0. 595 0. 215 0. 325 0. 921
S2 0. 356 0. 181 1. 000 0. 641 0. 661 0. 124 0. 144 0. 233 0. 098 0. 993 1. 000 0. 643 0. 124 0. 441 0. 951
S3 0. 288 0. 133 1. 000 0. 482 0. 507 0. 129 0. 142 0. 218 0. 094 0. 988 1. 000 0. 405 0. 111 0. 402 0. 908
S4 0. 332 0. 153 1. 000 0. 606 0. 654 0. 131 0. 139 0. 282 0. 098 0. 994 1. 000 0. 395 0. 113 0. 264 0. 949
S5 0. 431 0. 194 1. 000 0. 626 0. 847 0. 128 0. 144 0. 384 0. 107 0. 993 1. 000 0. 428 0. 227 0. 330 0. 983
S6 0. 378 0. 170 1. 000 0. 529 0. 739 0. 131 0. 142 0. 326 0. 106 0. 995 1. 000 0. 458 0. 217 0. 317 0. 984
S7 0. 474 0. 233 1. 000 0. 497 0. 839 0. 145 0. 129 0. 413 0. 117 0. 979 1. 000 0. 536 0. 223 0. 369 0. 986
S8 0. 502 0. 230 1. 000 0. 531 0. 987 0. 114 0. 146 0. 468 0. 100 0. 982 1. 000 0. 549 0. 209 0. 435 0. 990
S9 0. 294 0. 137 1. 000 0. 628 0. 561 0. 132 0. 138 0. 246 0. 093 0. 989 1. 000 0. 542 0. 127 0. 337 0. 974
S10 0. 498 0. 212 1. 000 0. 484 0. 839 0. 137 0. 145 0. 384 0. 088 0. 975 1. 000 0. 402 0. 170 0. 319 0. 913
图 3 农吉利药材中黄酮化合物 (A)和生物碱 (B)的指纹色谱图
Fig. 3 HPLC fingerprints of flavonoids (A)and alkaloids (B)in Crotalaria sessiliflora L.
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通过计算得出农吉利样品指纹图谱的共有模
式，并依此为标准进行比较，各产地的 10 批农吉利
药材相似度均大于 0. 90，黄酮和生物碱类组分相似
度计算结果分别在 0. 975 ～ 0. 995 和 0. 908 ～ 0. 990
之间，符合国家药品监督管理局对中药指纹图谱相
似度的要求;但不同产地的药材各个组分的色谱峰
之间的相对峰面积并不相同，表明药材之间各组分
含有量有明显差异，以牡荆素和农吉利甲素含有量
最高，作为药材的主要特征有效成分对于药效学、
质量标准研究及其开发利用具有重要意义。
2. 3. 4 主要有效成分测定 按照实验方法制备黄
酮化合物和生物碱供试品溶液，在文献 ［5，7］基
础上分别测定了 10 批药材农吉利中主要有效成分
牡荆素和农吉利甲素，结果见表 6。
表 6 不同产地农吉利中牡荆素和农吉利甲素的测定结
果(x ± s，n =3)
Tab. 6 Results of determination of vitexin and monocrotal-
ine in ten batches of samples (x ± s，n =3)
样品
牡荆素
质量分数 /
(mg·g － 1)
RSD /
%
农吉利甲素
质量分数 /
(mg·g － 1)
RSD /
%
S1 0. 268 1. 2 0. 075 1. 3
S2 0. 252 1. 7 0. 069 1. 8
S3 0. 246 2. 0 0. 082 1. 7
S4 0. 428 1. 0 0. 027 1. 5
S5 0. 401 1. 8 0. 012 2. 1
S6 0. 412 2. 1 0. 017 1. 6
S7 0. 254 1. 8 0. 053 1. 8
S8 0. 198 1. 0 0. 047 1. 7
S9 0. 235 1. 4 0. 032 1. 7
S10 0. 221 2. 0 0. 031 1. 3
由表 6 可知，牡荆素和农吉利甲素的质量分数
分别在 0. 221 ～ 0. 428 mg /g 和 0. 012 ～ 0. 082 mg /g
之间，表明各个产地和批次的农吉利药材含有的牡
荆素和农吉利甲素的量有较大差异，其 RSD 在
1. 0% ～2. 1%之间，均小于 3. 0%，质量稳定，方法
的重复性好，精密度高。
3 讨论
3. 1 通过实验条件优化，比较了溶剂回流提取、
超声提取和微波辐射溶剂回流提取 3 种方法对药材
的提取效果，结果表明，3 种方法均含有共同两类
有效成分的色谱峰，但微波辐射溶剂回流提取方法
的提取效率更高。
3. 2 采用甲醇-水、乙腈-水、甲醇-磷酸溶液、乙
腈-磷酸溶液、甲醇-乙酸以及甲醇-三乙胺溶液、甲
醇-氨水溶液等体系作为流动相分别考察了对黄酮
化合物、生物碱成分色谱分离的影响。结果表明:
采用甲醇-0. 5 %乙酸水溶液，在 85 min 内可完全
分离出黄酮提取液中的 11 个组分，用 DAD 检测出
9 种组分在 250 ～ 280 nm 以及 300 ～ 350 nm 之间有
两个较强的特征吸收带，与黄酮化合物的紫外特征
吸收吻合;采用甲醇 － 0. 04%氨水溶液梯度洗脱，
在 35 min内可较好地洗脱分离出生物碱提取液中
的 6 个组分，用 DAD 检测其紫外光谱发现 4 个组
分分别在 200 ～ 215 nm和 215 ～ 270 nm有两个吸收
谱带，与文献报道的吡咯里西啶生物碱紫外吸收光
谱吻合［16］。
3. 3 通过对 10 批不同产地的农吉利药材提取液色
谱图的研究，利用 HPLC-ESI-MS /MS鉴定和推断了
几种黄酮化合物和生物碱成分，以含有量较高的牡
荆素和农吉利甲素分别作为黄酮化合物和生物碱指
纹图谱的特征参照峰，建立了农吉利中黄酮化合物
和生物碱的 HPLC指纹图谱分析方法。分别用通过
样品前处理后的黄酮化合物和生物碱色谱图建立指
纹图谱，各组分分离更简单、纯度更高、指纹图谱
的特征性更强，方法的精密度、稳定性、重复性更
好，10 个产地样品的农吉利黄酮和生物碱的相似
度均在 0. 9 以上，符合国家对中药指纹图谱的技术
要求。
3. 4 通过对不同产地药材指纹图谱的研究和牡荆
素和农吉利甲素等组分的峰面积比较，可以发现不
同产地的药材基本特征相似，质量稳定，但各个组
分的色谱峰面积及含有量不尽相同，尤其是牡荆素
和农吉利甲素主要成分的含有量相差较大 (分别
最大相差近 2 倍和 8 倍) ，如要进一步研究有效成
分，控制药材质量和筛选药材，应固定产地及加工
方法，以减少因此而导致药材成分的变化。
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鲜铁皮石斛 HPLC特征图谱研究
魏 刚1， 刘宏源2， 黄月纯3* ， 谢学新2， 杨丽娥1， 刘星华2， 刘东辉1
(1. 广州中医药大学，广东 广州 510405;2. 广东永生源生物科技有限公司，广东 饶平 515736;3. 广州中
医药大学第一附属医院，广东 广州 510405)
收稿日期:2011-01-17
基金项目:广东省产学研结合项目 (2009B090300333) ;广东省产学研结合项目 (2011B090400319) ;广州市番禺区科技计划项目
(2010-专-12-11)
作者简介:魏 刚 (1969—) ，男，研究员，博士生导师，研究方向:中药新药与指纹图谱分析。Tel: (020)39358166，E-mail:weigang021
@ 163. com
* 通信作者:黄月纯 (1968—) ，女，主任中药师，硕士生导师，研究方向:中药新药与指纹图谱分析。Tel: (020)36591724，E-mail:
huangyuechun@ 163. com
摘要:目的 研究不同产地鲜铁皮石斛 HPLC特征图谱。方法 采用 Zorbax SB C18色谱柱;流动相为乙腈-0. 2%的甲
酸溶液梯度洗脱;检测波长为 270 nm;柱温为 35 ℃;体积流量为 1. 0 mL /min。结果 鲜铁皮石斛标示出 35 个特征共
有峰，10 批样品的相似度为 0. 900 ～ 0. 956。主要特征峰紫外光谱可分成四类，第Ⅰ类在 202、265 nm附近有最大吸收;
第Ⅱ类在 207、270 nm附近有最大吸收;第Ⅲ类在 200、220 及 280 nm附近有最大吸收;第Ⅳ类在 220、270 及 340 nm
附近有最大吸收，为黄酮类成分。结论 方法准确可靠，重复性好。
关键词:鲜铁皮石斛;特征图谱;HPLC
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2012)09-1739-05
HPLC characteristic spectrum on fresh Dendrobium officinale
WEI Gang1， LIU Hong-yuan2， HUANG Yue-chun3* ， XIE Xue-xin2， YANG Li-e1， LIU Xing-hua2，
LIU Dong-hui1
(1. Guangzhou University of TCM，Guangzhou 510405，China;2. Guangdong Yongshengyuan Microbial Sci． ＆ Tech． Co．，Ltd．，Raoping 515736，
China;3. The First Affiliated Hospital of Guangzhou University of TCM，Guangzhou 510405，China)
ABSTRACT:AIM To study the characteristic spectrum on fresh Dendrobium officinale from different habitats by
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第 34 卷 第 9 期
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