全 文 :!#年第 $期 中国种业 !
摘要:种传真菌可严重降低种子的食用和种用品质。本研
究用吸水纸法和琼脂平板法对 ! 个赤豆品种进行了种子内部带
菌检验。依据 #$%&’()*分类系统鉴定出种内寄藏真菌 + 个属,
包括 ,- 个种和 , 个未定名种。为进一步研究这些真菌与种子的
相互作用,调查储藏期和生长期真菌病害,以及制定防治措施奠
定了科学基础。
关键词:赤豆;种子;寄藏真菌;分离;鉴定
种子在形成、收获和储藏过程中接触到多种真
菌。有的真菌在种子生长期便侵入幼嫩种子的内部或
固着于种子表面,有的真菌则在收获脱粒和储藏过程
中粘附于种子表面而伺机侵入胚部。这些种传真菌可
导致种子变色、腐烂、萌芽率降低,有的真菌还引起下
一代生长期病害 . , /。考虑到许多作物种子带菌造成储
藏期品质下降及生长期病害,作者对河北省赤豆种子
带菌进行了分离和鉴定,为种子储藏、加工和种植提供
科学依据。
# 材料与方法
#$ # 材料 赤豆品种为冀红 ,号、冀红 0号、天津
红、,1-、02-和 3,4。培养基为 56、57或 89.0 /
#$ % 方法 真菌分离 种子表面消毒首先用 :;的
次氯酸钠溶液浸种 :<#$,为抑制种子发芽,再用无菌
水浸泡 :*,然后用 -= 0;的 0,2>6溶液浸泡 0<#$,无菌
水冲洗 3遍 ., /。种内寄藏真菌的培养,首先用吸水纸法
分别将同一品种的整粒种子及解剖后的种皮和胚均匀
摆放在 56平板上,每皿摆放 ,-粒,每个品种处理2--
粒。,0*近紫外光照射 ?30- @ 2--$养 : @ 4B,使种内真菌生长充分,借助显微镜观察生长
状态和显微特征,初步确定真菌类群,记录不同性状真
菌的出现频率。然后根据真菌的具体特点,选择使用
56、57或 89琼脂平板,划线培养 ., /。
真菌纯化 . 0 / 低倍镜下难识别的小或浅色孢子的
纯化,采用稀释平板法,即单菌落分离。用接种环蘸取
上述菌落,在 56、57或 89琼脂平板上划线,直至
为单菌落为止。观察并拍摄真菌形态、颜色和其他特
征,测量有关结构的大小,以便定种。对于低倍镜下易
识别的大且深色的孢子,采用单孢分离法进行纯化。
真菌鉴定 以单孢或单菌落培养所得菌株为依
据,单孢培养设 2个重复,根据真菌的各种特征,依照
#$%&’()*分类系统鉴定到种 . 3 @ 2 /。
% 结果与分析
本试验共从赤豆内部分离到寄藏真菌 +个属,包
括 ,-个种和 ,个未定名种,结果如下。
粟离蠕孢菌:!#$%&’( ()*&’&) ? 7C&CBC A %*’D
*&’&) 7C&CBC A。有性阶段:3$,-%$4$%1( ()*&’&) ? F)’ D)
EG$HCIC%*# A 6(DJ*%K DL 6C%)G(K 分类地位:6DG)D(’
J’)#$C,MIN*’
枝,着孢部分合轴状,比梗基粗,颜色较深,孢痕明显,
梗分隔 0 @ 1(,-)个。分生孢子在梗端顶侧生,茶褐色
到深褐色,多直,少数弯曲,圆筒形,长椭圆形或棍棒
形;隔膜(3): @ ,,个,间距均等 ,- @ 0-!,孢子大小为
:- @ ,2-! P ,3= - @ ,!= :!。孢子两端萌发出芽管。
黑附球霉 5#,$,,1/ 06’1/ Q#$E?异名:57 #1’#1’&(()0(8
57 0)6%),*1/8 57 $’9:&)等 A。分类地位:6DG)D(’
$C,MIN*’
老熟后则大都消失。
串珠镰刀菌 <1(&’1/ =)’*,%%$>)( ?7CJJK A R#(D$HD(S
?异名 <7 /$0%?$’/) 7*DOB’$,<7 ?1@A1’$ R#(D$HD(SA
菌丝侧枝上产生分生孢子梗,分生孢子梗由 ,个生有
0 @ 3个顶生瓶状小梗的单细胞组成或形成 0 @ 3个梗
基,依次生成单个的瓶状小梗。大型分生孢子纤细、薄
壁、无色,拟纺锤形,顶细胞尖而弯曲,基细胞为足胞。
3 @ 4个分隔,3隔孢子为主。小孢子呈链状排列,产孢
瓶梗从菌丝上垂直生出,单出产孢。孢子无色,一端尖
细,一端钝圆,呈雨滴形。
半裸镰刀菌大孢变种 <1(&’1/ ()/*),*1/ TC(K
/&@1( U’OOD$& 分生孢子座因分生孢子的堆积而呈现
赤豆种子内部寄藏真菌的分类研究
田平芳 葛喜珍
?北京化工大学生命科学与技术学院,,---0+ A ?北京联合大学生物化学工程学院,,---03 A
张志铭
?河北农业大学植物保护学院,保定 -4,--, A
研究简报
!#年第 $期中国种业!
桔黄色的疣状突起。分生孢子梗在气生菌丝中形成,
具松散的分枝结构,其末端或尖端有产孢细胞,产孢细
胞可发育为多芽产孢细胞。分生孢子座中形成的分生
孢子梗短而紧缩,具一球形的基细胞,大小为 ! # $
% &! ’ ( $ !!,上生几个短单孢分枝;在其顶部着生
) $ (个短柱状至梨形的瓶状小梗,大小 * ( # + # & $
! &! ’ , &!,没有明显的小型分生孢子,大型分生孢
子的大小和形态不整齐,有些甚至和小型分生孢子相
似,大型分生孢子透明,堆积时呈桔黄色,弯曲纺锤形
状,足胞楔形,, $ -隔。厚垣孢子球形、光滑、散生,在
菌丝和分生孢子中皆为间生,直径为 - # $ .&!。
微紫青霉 !#$%$&&$’( )*#+,$#&&’( /012345*异名:
!- ).,*##$.&$ 678, !- (*/+#0$$ /013245 + 分类地位:
952:531;<=1:0>7,?<@A1;<=5:5B,?<@A1;<=5:785B,1.#$&2
$*%*,!#$%$&&$’(C 帚状枝 ,层,不对称,在不同的水
平面上产生间枝与小梗,小梗疏松,大小 D $ .)! ’
) & $ ) #!,分生孢子梗光滑,直径 , & $ , #!。分生
孢子稍粗糙。
茎点霉豆类变种 !,.(* (3$%*4$#$0 E73C 5$#2
.3&&* * FC GC H1>5B + /1535;7*异名:60%.%,7+* 5$#.3&&*
FC IC H1>5B,!,.(* +/$8.&$$ JC KC H1A>B1> 5: L788572 +分类
地位:952:531;<=1:0>7M N1581;<=5:5B O@A7531@B0P785BM
!,.(* 分生孢子器褐色、壁薄,产孢细胞由分生孢子
器内壁细胞产生,分生孢子器外无刚毛,直径 .&& $
,&&!,分生孢子柱形,长椭圆形,有时中生一隔膜,两
端各有一油滴,大小 ! & $ % #! ’ ) # $ , #!。菌丝浅
褐色至墨绿色,明显分隔和分枝,厚垣孢子单孢,不呈
交链孢型孢子,圆形,直径 .& $ .D!。
皮思霉 !$+,.(7%0 B@C 分类地位:952:531;=1:0>7,?<@A1;<=5:5B,?<@A1;<=5:785B,95;7:07=575M
!$+,.(7%0 椭球形厚垣孢子,大小 ( & $ .- #! ’ ( & $
! #!,内含 . $ )个球状物。分生孢子梗从褐色多隔的
特化菌丝上生出,极短、楔形或柱形,长 # $ .&!,顶端单
生多胞分生孢子;孢子隔膜处缢缩,褐色或黑色。
丝核菌 9,$:.%+.#$* B@C 分类地位:952:531;=1:0>7,?<@A1;<=5:5B,R41>1;<=5:785BM 9,$:.%+.#$* 菌
丝簇拥成团,褐色至黑色,彼此以菌丝相连,在基物上
均匀分布,直径 #& $ .#&!。
匍枝根霉 9,$:.5’0 0+.&.#$8/ * JA35>S534T U3C +
L20885;0> *异名:9- #$4/$%*#0 JA35>S534+分类地位:641;<=1:0>7M 6<41;<=5:5BM K2=13785BM K2=137=575M 9,$2
:.5’0有潜生的营养菌丝和匍匐菌丝,后者呈弓形向四
周蔓延,与基质相接处有假根;匍匐菌丝无色,假根极发
达,褐色,孢囊梗直立 ) $ ,根成 .束,少数单生或 ( $ -
根成 .束;孢囊梗不分枝、光滑稍粗糙、灰褐色至褐色,
大小((&&)#&& $ ,&&&(,#&&)! ’ .( $ )&(())!。孢囊球
形或近球形,老熟后黑色,孢囊直径(#&).&& $ )&&(,#&)
!;囊轴球形,壁光滑,囊托大而呈楔形,无厚垣孢子。
圆孢霉 ;+*5,7&.+/$%,’( B@C 分类地位:952:531;=1:0>7,?<@A1;<=5:5B,?<@A1;<=5:785B,95;7:07=575,
;+*5,7&.+/$%,’(菌丝初无色,后为白色,发达,毯状或
絮状。自菌落中部产生色素,变红。出现黑褐色孢子带,
基物被染红。老熟菌丝粗壮,直径 ( $ -!。分生孢子梗
粗壮、分枝、分隔、深褐色。球形分生孢子自分枝上顶生
和单生,单孢、褐色,表面具疣突,直径 .& $ )#!。
未定名种,暂称菌丝 #号 菌落生长缓慢,致密毯
状,表面青灰色,背面暗红色,菌丝纤细、分枝、分隔,直
径 & # $ ) #2,膨大菌丝内分布颗粒状代谢物。
! 讨论
种子内部真菌可从两方面影响种子品质。一方面,
种内寄藏真菌在储藏期造成种子变色和霉烂,甚至分
泌有毒物质,严重影响种子食用价值。另一方面,某些
真菌伴随种子萌发而侵染,造成下一生长期病害 V . W。通
过改善储藏条件,如调节湿度、温度和除尘等手段,可
以降低种子带菌量,以保证其食用或种用价值。
本研究分离到的粟离蠕孢菌( <- 0+*/$*)、串珠镰
刀菌( =- >/+$%$&&$.$30)、茎点霉豆类变种( !- (32
$%*4$#$0 E73C 5$#.3&&*)均曾造成作物病害 V ( W。这些真菌
是否造成赤豆生长期病害有待进一步研究。在分离方
法上,对于锈菌、黑粉菌、白粉菌、霜霉菌等难培养菌,
用分离培养法有可能造成漏检,而这些真菌很可能具
有致病性,所以还要结合表面洗涤镜检方法。另外,分
离真菌应设两个或多个温度范围,在单一温度下分离
真菌,也会导致某些真菌生长不良而遗漏,原因是真菌
有嗜高温和嗜低温之分 V , W。只有充分阐明种传真菌种
群数量、侵入机制、代谢活动和消长规律,才能求解保
证种子品质的最优方案。
参考文献
V . W O0>4A XM X30E5P0M Y NC O55P Y7:A1814
D.Q-&((Q#)# $ !,)&&&
V) W方中达 C 植病研究方法 C 北京:中国农业出版社,.%%D
V, W裘维蕃 C 菌物学大全 C 北京:科学出版社,.%%D
V( W裘维蕃M等 C 农业植物病理学 C 北京:农业出版社,.%%.
*收稿日期:)&Q&DQ +
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联系人:唐海东 电话:.,&%,#!D!D#
研究简报