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复方杠板归胶囊的薄层色谱研究



全 文 :3. 2 “四大血”提取物对急性血瘀大鼠全血还原黏度、红 细胞压积等的影响 结果见表 2
表 2 “四大血”对急性血淤模型大鼠血液流变学的影响(x ± s)
组别
剂量
(g /kg)
全血还原黏度
低切 高切
红细胞压积
红细胞聚
集指数
血浆黏度
空白组
模型组
阳性组
低剂量
中剂量
高剂量
———
———
1. 41
1
2
4
42. 635 ± 6. 96
66. 94 ± 24. 89△
40. 58 ± 3. 45*
32. 65 ± 3. 34*
61. 35 ± 1. 34
48. 04 ± 1. 43*
7. 86 ± 0. 7
9. 29 ± 2. 19
7. 30 ± 0. 69*
8. 84 ± 0. 99
8. 09 ± 0. 70
7. 76 ± 1. 02*
0. 46 ± 0. 03
0. 45 ± 0. 03
0. 45 ± 0. 02
0. 46 ± 0. 05
0. 47 ± 0. 02
0. 48 ± 0. 04
4. 00 ± 0. 55
5. 29 ± 1. 17△△
3. 64 ± 0. 48**
3. 25 ± 0. 35*
5. 17 ± 0. 84
4. 01 ± 0. 91**
1. 70 ± 0. 23
1. 73 ± 0. 43
2. 14 ± 0. 22
1. 83 ± 0. 06
1. 69 ± 0. 10
1. 89 ± 0. 30
注:模型组与空白组比较,△P < 0. 05,△△P < 0. 01;给药组与模型组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01。
表 2 结果表明,用此方法所造成的血瘀模型中,全血的
低切还原黏度、红细胞聚集指数明显增高(△P < 0. 05,△△P
< 0. 01)。“四大血”高、低剂量组均可降低全血还原黏度、
红细胞聚集指数,与模型组比较有显著差异(* P <
0. 05,**P < 0. 01)。而对红细胞压积和血浆黏度无明显影
响。表明“四大血”在一定程度上可使血瘀模型之粘、浓、
凝、聚状态得到改善,提示有活血作用。
4 讨论
血瘀是指血液循行迟缓不畅的病理状态,血液的浓、
粘、稠、聚中任何一方面发生改变均反映有瘀血存在[4],其
临床表现主要为疼痛、肿块,瘀斑、气虚等症候。近年来研
究表明,测定血液流变性指标是判定血瘀证的诊断标准之
一。“四大血”在苗医临床应用中,常用于治疗各种气阴血
瘀病证,本研究采用肾上腺素加冰水刺激的方法复制急性
血瘀证模型,该模型大鼠的血液流变性特点为粘、浓、凝、
聚。实验表明“四大血”水提醇沉液能够改善血瘀后血液
流变学的粘、浓、凝、聚状态,改善血液循环。提示“四大
血”具有一定的活血化瘀作用。由于血液“高凝态”与血小
板功能异常及血栓形成有密切关系,活血化瘀药往往通过
抑制血小板聚集和血栓形成而改善血液“高凝态”,使“通
则不痛”,从而消除血瘀证[5],而“四大血”是否具有抑制血
小板聚集和改善微循环的作用,还有待进一步研究。
参考文献
[1] 曾定伦,熊传榘,王毅刚,等 . 苗药方“四大血”形性特征与
适应症范围[J]. 中国民族,医药杂志,2004,s1:153 - 154.
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[3] 陈奇 . 中药药理实验方法学[M]. 北京:人民卫生出版社,
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[4] 陈可冀 . 血瘀症与活血化瘀研究[M]. 上海:上海科学出版
社 . 1990:389.
[5] 陈维旗,任卫琼,魏云 . 舒冠宁片活血化疲作用的实验研究
[J]. 湖南中医杂志,2004,20(2):58.
* 基金项目:贵州省中医药管理局中医药、民族医药科学技术研究课题,合同编号: QZYY2011 - 40。
* 通讯作者:曹佩雪,女,助理研究员,E - mail: snowcpx@ 126. com
收稿日期: 2014 - 03 - 20
复方杠板归胶囊的薄层色谱研究*
屈相玲1,马四补2,曹佩雪3*
( 1. 贵阳中医学院第二附属医院,贵州贵阳 550003; 2. 贵阳中医学院,贵州贵阳 5500022;
3. 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室,贵州贵阳 550002)
摘要:目的:建立和完善复方杠板归胶囊的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法鉴别复方杠板归胶囊中杠板归、赤
芍、丹参、虎杖、熟大黄。结果:鉴别各斑点之间分离度良好,阴性对照无干扰。结论:该方法快捷,方便,重复性好,可作为
该复方的质量控制指标。
·22·
第 36 卷 第 4 期
2014 年 7 月
贵阳中医学院学报
JGCTCM
No. 4 Vol. 36
July 2014
关键词:复方杠板归胶囊;薄层色谱法鉴别;质量控制
Doi: 10. 3969 / j. issn. 1002 - 1108. 2014. 04. 009
中图分类号:R927. 11 文献标识码:B 文章编号:1002 - 1108( 2014) 04 - 0022 - 03
复方杠板归胶囊是贵阳中医二附院院内制剂,主要由
赤芍、丹参、杠板归、虎杖、熟大黄等七味药物组成,具有清
热解毒、活血化瘀、消积止痛之功效,用于女性盆腔炎及慢
性盆腔炎急性发作,经临床观察具有良好疗效。本文采用
薄层色谱法对复方中的五味药材进行了薄层色谱研究,以
提高其质量控制标准,现报道如下。
1 材料
1. 1 仪器
紫外点样分析仪;十万分之一电子分析天平(瑞士梅
特勒 -托利多公司);CQ - 400B 型超声波清洗机(上海跃
进医用光学器械厂,功率:250 W,频率:40 kHz)。
1. 2 试药
赤芍对照药材(批号:121092 - 201003,由中国药品生
物制品检定所提供);丹参对照药材(批号 120923 -
201113,由中国药品生物制品检定所提供);杠板归对照药
材(批号:130802,由重庆慧远药业有限公司提供);虎杖对
照药材(批号:120980 - 201005,由中国药品生物制品检定
所提供);熟大黄对照药材(批号:120701041,由成都康美
药业生产有限公司提供);复方杠板归胶囊(贵阳中医学院
二附院自制,批号:20140120,20140207,20140211);薄层层
析用硅胶 G,硅胶 GF254(青岛海洋化工有限公司);其余试
剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 杠板归[1]
取复方杠板归胶囊内容物 0. 6g,加甲醇 10mL,超声提
取 10min,滤过,滤液浓缩至 2mL,作为供试品溶液。同法
制备缺杠板归的阴性对照溶液。另取杠板归对照药材粉
末 1g,加 20mL水直火回流提取 1h,滤液水浴上挥干,残渣
加甲醇 10mL 转入量瓶中,超声提取 10min,滤液浓缩至
2mL,作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》
2010 年版一部附录Ⅵ B)试验,分别取对照药材溶液、阴性
对照溶液、复方供试溶液各 10μL ~ 20μL,点于同一硅胶
GF254 薄层板上,以氯仿 -乙酸乙酯 -甲酸(3 ∶ 2 ∶ 0. 1)为
展开剂,上展二次,取出,晾干,于 254nm 紫外光灯下检视。
供试品溶液在与对照药材同位置有相同颜色斑点,阴性对
照溶液无干扰。结果见图 1。
2. 2 赤芍
取复方杠板归胶囊内容物 0. 3g,加甲醇 10mL,超声提
取 10min,滤过,滤液浓缩至 1mL,作为供试品溶液。取缺
赤芍的阴性模拟制剂 0. 2g,加甲醇 10mL,超声提取 10min,
滤液浓缩至 1mL,作为阴性对照溶液。另取赤芍对照药材
粉末 0. 5g,加 20mL水直火回流提取 1h,滤液水浴上挥干,
残渣加甲醇 10mL转入量瓶中,超声提取 10min,滤液浓
图 1 复方杠板归胶囊中杠板归的薄层鉴别图
注:1、2、3,复方杠板归胶囊供试品溶液(批号:20140120,
20140207,20140211);4. 杠板归对照药材溶液;5. 缺杠板归阴性
对照溶液
缩至 1mL,作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药
典》2010 年版一部附录Ⅵ B)试验,分别取对照药材溶液、
阴性对照溶液、供试品溶液各 5μL ~ 10μL,点于同一硅胶 G
薄层板上,以氯仿 - 乙酸乙酯 - 甲醇 - 甲酸(40 ∶ 5 ∶ 10 ∶
0. 2)为展开剂,上展二次,取出,晾干,喷以 0. 5%香草醛的
60%硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰,日光下检
视。供试溶液在与对照药材同位置有相同颜色斑点,阴性
对照溶液无干扰。结果见图 2。
图 2 复方杠板归胶囊中赤芍的薄层鉴别图
注:1、2、3,复方杠板归胶囊供试品溶液(批号:20140120,20140207,
20140211);4. 赤芍对照药材溶液;5. 缺赤芍阴性对照溶液
2. 3 丹参
取复方杠板归胶囊内容物 0. 25g,加甲醇 10mL,超声
提取 10min,滤过,滤液浓缩至 1mL,作为供试品溶液。同
法制备缺丹参的阴性对照溶液。另取丹参对照药材粉末
0. 5g,加甲醇 10mL,超声提取 10min,滤液浓缩至 1mL,作为
·32·第 4 期 屈相玲,马四补,曹佩雪.复方杠板归胶囊的薄层色谱研究
对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010 年版一
部附录Ⅵ B)试验,分别取对照药材溶液、阴性对照溶液、
供试品溶液各 5μL ~ 10μL,点于同一硅胶 G 薄层板上,以
氯仿 -丁酮 -甲酸 -水(4∶ 4∶ 1∶ 0. 2)为展开剂展开,取出,
晾干,喷以 0. 25%磷钼酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色
清晰,日光下检视。供试品溶液在与对照药材同位置有相
同颜色斑点,阴性对照溶液无干扰。结果见图 3。
图 3 复方杠板归胶囊中丹参的薄层鉴别图
注:1、2、3,复方杠板归胶囊供试品溶液(批号:20140120,20140207,
20140211);4. 丹参对照药材溶液;5. 缺丹参阴性对照溶液
2. 4 虎杖
取复方杠板归胶囊内容物 0. 25g,加乙酸乙酯 2mL,超
声提取 10min,摇匀,静置,取上清液,作为供试品溶液。同
法制备缺虎杖的阴性对照溶液。另取虎杖对照药材粉末
1g,加 20mL水直火回流提取 1h,滤液水浴上挥干,残渣加乙
酸乙酯 2mL转入量瓶中,超声提取 10min,摇匀,静置,取上
清液,作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010
年版一部附录Ⅵ B)试验,分别取对照药材溶液、阴性对照溶
液、复方供试溶液各 10μL,点于同一硅胶 G薄层板上,以石
油醚 - 乙酸乙酯(20 ∶ 11)为展开剂展开,取出,晾干,于
254nm紫外光灯下检视。复方供试溶液在与对照药材同位
置有相同颜色斑点,阴性对照溶液无干扰。结果见图 4。
图 4 复方杠板归胶囊中虎杖的薄层鉴别图
注:1、2、3,复方杠板归胶囊供试品溶液(批号:20140120,20140207,
20140211);4. 虎杖对照药材溶液;5. 缺虎杖阴性对照溶液
2. 5 熟大黄
取复方杠板归胶囊内容物 0. 6g,加甲醇 10mL,超声提
取 10min,滤液浓缩至 1mL,作为供试品溶液。同法制备缺
熟大黄的阴性对照溶液。另取熟大黄对照药材粉末 0. 3g,
加 20mL水直火回流提取 1h,滤液水浴上挥干,残渣加甲醇
10mL转入量瓶中,超声提取 10min,滤液浓缩至 1mL,作为
对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010 年版一
部附录Ⅵ B)试验,分别取对照药材溶液、阴性对照溶液、
复方供试溶液各 5μL,点于同一硅胶 G 薄层板上,以正己
烷 -乙酸乙酯 -甲酸(27∶ 10∶ 1. 2)为展开剂展开,取出,晾
干,于 254nm紫外光灯下检视。复方供试溶液在与对照药
材同位置有相同颜色斑点,阴性对照溶液无干扰。结果见
图 5。
图 5 复方杠板归胶囊中熟大黄的薄层鉴别图
注:1、2、3,复方杠板归胶囊供试品溶液 (批号:20140120,
20140207,20140211);4. 熟大黄对照药材溶液;5. 缺熟大黄阴性
对照溶液
3 讨论
杠板归胶囊由杠板归、赤芍、丹参、熟大黄等七味中药
组成的复方中药制剂,成分复杂,阴性对照干扰强,参考
《中国药典》及文献上的方法均不能达到有效分离,故我们
所筛选的薄层色谱条件大多需要二次展开,其对照药材均
先以水回流提取后再将水提液干燥后的残渣作进一步的
处理后才作为对照药材溶液使用,经多次重复试验,重复
性好,专属性强,主斑点分离完全,阴性对照无干扰,可作
为复方杠板归胶囊的质量标准依据。
参考文献
[1] 国家药典委员会 . 中国药典(2010)[M]. 北京:中国医药科
技出版社,2010:194,22,70,147,155.
·42· 贵阳中医学院学报 第 36 卷