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复方杠板归胶囊对小鼠的急性毒性实验研究



全 文 :高于束花石斛,四种石斛中总生物碱含量最高的是流苏石斛,其
次是金钗石斛、美花石斛、束花石斛。
近年来,关于石斛多糖和总生物碱含量的研究结果表明,石
斛多糖含量在 4. 45% 以上,总生物碱含量在 0. 02% ~
0. 71%[7 - 9]。不同种质、不同生长年限的石斛成分含量差异很
大,文献报道[10],石斛总生物碱含量随着生长年限的增加而增
加,但石斛总生物碱含量具有明显限量范围,总生物碱含量明显
偏离限量范围的在品质上相对而言比较差,总生物碱含量在此范
围的样品必须结合多糖含量与其他活性化学组分才能真正辨别
石斛药材的品质优劣。
本文将四种石斛的多糖含量、折干率与总生物碱含量进行相
关性分析,结果显示石斛多糖与折干率、总生物碱含量呈负相关,
多糖含量越多折干率就越低(鲜茎含水量越高)、总生物碱含量
就越少,结果与文献[7]一致。不同品种石斛多糖与折干率负相
关,表明石斛鲜茎含水量是影响石斛药材多糖含量的重要因素。
冯娜等[11]研究了不同梯度含水量处理对怀牛膝多糖含量的影
响,发现高梯度含水量处理组怀牛膝多糖含量显著高于低含水量
处理组,文献研究进一步说明充足的水分供给可提高植物多糖含
量。同时,相关性分析结果也反映了不同品种石斛植株之间对水
分的需求量不同,多糖积累具有显著差异。
本实验结果为石斛药材的质量评价及临床应用提供了一定
的实验依据,同时对石斛特色品种选育及规范化、标准化种植也
具有一定指导意义。
参考文献:
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收稿日期:2013-08-26; 修订日期:2013-12-31
基金项目:贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目[黔科合中药字( 2010) 5010 号]
作者简介:胡 颖( 1978-) ,女( 苗族) ,贵州天柱人,贵阳医学院副教授,硕士学位,主要从事中药药理研究工作.
* 通讯作者简介:张 晴 ( 1979-) ,女( 汉族) ,广东开平人,贵阳医学院副教授,硕士学位,主要从事中药药理研究工作.
复方杠板归胶囊对小鼠的急性毒性实验研究
胡 颖1,何 静2,叶 兰1,张 晴1* ,李诚秀1,黄能慧1
(1.贵阳医学院,贵州 贵阳 550004; 2. 贵州金宇药业有限公司,贵州 贵阳 550004)
摘要:目的 观察复方杠板归胶囊对雌性小鼠的急性毒性。方法 小鼠单次灌胃给药进行急性毒性预实验,观察一般状
况和死亡情况,无死亡,则不能求出半数致死量,采用 1 天内最大浓度和最大体积的药量灌胃,连续观察 14 d,测其最大
给药量。结果 小鼠单次灌胃给予复方杠板归胶囊,经预实验提示 LD50无法测出,故进行最大给药量实验,小鼠灌胃给药
的最大给药量为 32. 8g /kg( 相当于生药 262. 72g /kg) ,为临床人推荐用量的 400 倍。结论 复方杠板归胶囊对小鼠急性毒
性甚低。
关键词:复方杠板归胶囊; 小鼠; 急性毒性
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2014. 06. 031
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2014) 06-1361-02
The Study on Acute Toxicity of Compound Polygonum perfoliatum Capsule in Mice
HU Ying1,HE Jing2,YE Lan1,ZHANG Qing1* ,LI Cheng-xiu1,HUANG Neng-hui1
( 1. Guiyang Medical College,Guiyang 550004,Cuizhou,China; 2. Guizhou Jinyu pharmacy Ltd. ,Guiyang
550004,Cuizhou,China)
Abstract: Objective To observe acute toxicity of compound Polygonum perfoliatum capsule in female mice. Methods The mice
were given compound Polygonum perfoliatum capsule with single dose and the death rate and general states of the mice were ob-
served to evaluate the pre - experiment of acute toxicity. If there were no death in mice,the median lethal dose ( LD50 ) can not be
calculated. Thus the mice were given the maximum concentration and the maximum volume drug,and were observed for 14 days.
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2014 VOL. 25 NO. 6 时珍国医国药 2014 年第 25 卷第 6 期
Results The LD50 can not be calculated in the pre - experiment of acute toxicity,so the maximum dosage experiment was carried.
The maximum dosage of mouse lavage administration was 32. 8g /kg ( crude drug 262. 72g /kg) ,corresponding to 400 times of hu-
man clinical equivalent dosage. Conclusion The acute toxicity of compound Polygonum perfoliatum capsule was extremely lower
in mice.
Key words: Compound Polygonum perfoliatum Herb Capsule; Mice; Acute toxicity
复方杠板归胶囊处方来源于贵州民间苗族经验方,由多味贵
州地方特色药材经现代制药技术研制而成。具有清热解毒、活血
化淤、渗湿散结、消炎止痛之功效。本课题组实验研究表明该药
对实验性大鼠盆腔炎具有良好的治疗作用[1],因此我们进一步
对其急性毒性进行研究。
1 材料
1. 1 药品 复方杠板归胶囊(Fu Fang Gang Ban Gui Jiao Nang,
GBG),由贵州金宇药业有限公司提供,批号:20090208。
1. 2 动物 昆明种小鼠,体质重 18 ~ 22 g,雌性,预先饲养 3d。
由贵阳医学院实验动物中心提供,合格证号:SCXK(渝)2007 -
0006。
2 方法[2,3]和结果
2. 1 预实验
2. 1. 1 药物的剂量和配制 GBG 0. 48 g(相当于生药 3. 83g)/
粒,内容物为棕褐色颗粒,临用前用蒸馏水配制,最大浓度为
41%混悬液(相当于生药 3. 27g /ml),因此 16. 4 g /kg(相当于生
药 130. 86g /kg)剂量为可配灌胃小鼠的一次给予的最大剂量。
预实验设 3 个剂量组,分别为 16. 4,11. 5,8. 05g /kg(分别相当于
生药 130. 86,91. 76,64. 23g /kg),组间剂量比值为 1∶ 0. 7。等容
积不等浓度灌胃给药,给药容积为 0. 4ml /10g。
2. 1. 2 方法 取雌性小鼠 18 只,按体质量随机分成 3 组,每组 6
只,给药前小鼠禁食 12h,自由饮水。按实验剂量设计分别单次
灌胃给予小鼠 GBG混悬液,给药后立即观察和记录小鼠的一般
情况(体质量变化、饮食、皮毛、行为、分泌物、排泄物等)及中毒、
死亡情况,观察期 14d。
2. 1. 3 结果 用药后动物安静、活动减少,约 1 h 后逐渐恢复正
常,未见其它明显中毒症状,其后观察期内各组小鼠均无死亡,毛
发光泽、行为活动、进食及大小便正常,鼻、眼、口腔无异常分泌
物,余未见其他异常病态表现。结果见表 1。预实验提示 LD50无
法测出。
表 1 GBG小鼠灌胃 LD50的测定预实验
组别 剂量 /g·kg - 1 动物数 死亡动物数 死亡率(%)
1 16. 4 6 0 0
2 11. 5 6 0 0
3 8. 05 6 0 0
2. 2 最大给药量实验[4] LD50值不能测出,故进行最大给药量实
验。
2. 2. 1 方法 取雌性昆明种小鼠 40 只,按体质量随机分为 2 组,
每组 20 只,禁食 10 h(不禁水)后给药组灌胃给于 41%GBG混悬
液 0. 4ml /10g,剂量为 16. 4 g /kg(相当于生药 130. 86g /kg),24 h
内给药 2 次,每次间隔 8h,对照组给等容蒸馏水。给药后 1 h 恢
复供食供水,观察 14d内动物的一般状况及死亡数。实验结束时
处死动物,肉眼观察各主要脏器组织病变情况。
2. 2. 2 结果 给药后见给药组动物安静、活动减少,约 1 h 后逐
渐恢复正常。给药后 1 天内给药组小鼠便中可见未吸收药物。
其后观察期内各组小鼠毛发光泽、行为活动、进食及大小便正常,
未见其他异常病态表现,给药组与对照组比较体质量变化无明显
差异(表 2),肉眼尸检也未见明显病理变化,观察期内无一动物
死亡,此日剂量 32. 8 g /kg(相当于生药 261. 72g /kg)为最大给药
量。
表 2 GBG最大给药量实验小鼠体质量变化 (珋x ± s)
组别
剂量
/g·kg - 1
体质量 /g
给药前 给药后 7 d 给药后 14 d
对照 - 20. 10 ± 1. 37 25. 35 ± 1. 79 28. 50 ± 1. 91
GBG 32. 8 20. 15 ± 1. 42 24. 40 ± 1. 64 28. 05 ± 1. 64
给药组与对照组比较:P >0. 05;n =20
3 讨论
LD50是能够引起一半受试动物死亡的药物剂量,在药物的安
全性评价中,是标志动物急性毒性反应程度的一项重要指标。在
预实验中,我们单次按最大给药容积给予最大浓度的 GBG16. 4
g /kg(相当于生药 130. 86g /kg),小鼠试验期间一般状况良好,体
质量、饮食、皮毛、行为、分泌物、排泄物等均无异常变化,也无一
动物死亡,无法求出 LD50,故进行最大给药量实验,按 32. 8g /kg
(相当于生药 262. 72g /kg),24h内分两次灌胃,连续观察 14 d,小
鼠一般状况良好,未见小鼠死亡。GBG 临床人推荐用药剂量为
5. 76g /d,以成人体重为 70kg 折算,相当于 0. 082g /(kg·d)[生
药 0. 65g /(kg·d) ],得到小鼠最大给药量为临床人推荐用量的
400 倍,表明 GBG对小鼠的急性毒性甚低,也提示该药的安全性
相对较高,值得进一步研究开发。
参考文献:
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时珍国医国药 2014 年第 25 卷第 6 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2014 VOL. 25 NO. 6