全 文 ：药物分析
高效液相色谱法测定鸡骨草胶囊中相思子碱
的含量
李耿 ,周秀 ,赵亚 ,张敏敏 ,沈嘉熙
(广州中医药大学 中药学院 ,广东 广州 510006)
摘要:目的 建立鸡骨草胶囊中相思子碱的含量测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法测定鸡骨草胶
囊中相思子碱的含量。色谱柱为 Phenomenex-ODS(250 mm×4.0mm, 5 μm)柱;流动相为甲醇-0.5%(体
积分数)冰乙酸溶液 ,梯度洗脱;流速为 1.0mL/min;检测波长为 270nm;温度为室温。结果 相思子碱质
进样量在 0.5 ～ 10μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8), 平均加样回收率为 101.89%(n=
6)。结论 该方法操作简便 、快速 ,有良好的精密度和准确性 , 可为鸡骨草胶囊质量控制提供参考。
关键词:鸡骨草胶囊;相思子碱;HPLC法
中图分类号:R917　文献标识码:A　doi:10.3969/j.issn.1006-8783.2011.03.015
文章编号:1006-8783(2011)03-0271-03
DeterminationofabrineinJigucaocapsulebyHPLC
LIGeng, ZHOUXiu, ZHAOYa, ZHANGMin-min, SHENJia-xi
(SchoolofChineseHerbalMedicine, GuangzhouUniversityofChineseMedicine, Guangzhou510006, China)
Abstract:ObjectiveToestablishthedeterminationmethodofabrineinJigucaocapsule.MethodsHPLCwas
performedtodetermineabrineonPhenomenex-ODScolumn(250 mm×4.0 mm, 5 μm), withgradientelution
consistedofmethanol-0.5% glacialaceticacid.Theflowratewas1.0 mL/min.TheUVdetectionwavelength
wasat270 nm, andthecolumntemperaturewasatroomtemperature.ResultsThecontentofabrineshoweda
goodlinearityintherangeof0.5-10 μg(r=0.999 8), andtheaveragerecovery(n=6)was101.89%.
ConclusionThismethodissimple, sensitiveandpreciseforqualitycontroloftheabrineinJigucaocapsule.
Keywords:Jigucaocapsule;abrine;HPLC
收稿日期:2010-12-02
作者简介:李耿(1983-), 男 ,讲师 , 博士 ,主要从事新药开发与研究 , Email:ligeng.boy@qq.com。
网络出版时间:2011-05-17 09:01　网络出版地址:htp://www.cnki.net/kcms/detail/44.1413.R.20110517.0901.008.html
　　鸡骨草胶囊由三七 、人工牛黄 、猪胆汁 、牛至 、鸡
骨草 、白芍 、大枣 、栀子 、茵陈 、枸杞子 10味中药组
成 ,来源于民间验方 ,经多年试制改进而成胶囊剂 。
其内容物为棕褐色粉末 ,味苦 ,具有疏肝利胆 、清热
解毒功效 ,用于急 、慢性肝炎和胆囊炎属肝胆湿热证
者 。广西玉林制药厂生产的鸡骨草胶囊是治疗肝
炎 、胆囊炎的良药 ,发展前景好。徐成志等[ 1]开展
了鸡骨草胶囊质量标准研究 ,采用 TLC法鉴别制剂
中的白芍 、人工牛黄 、猪胆汁 、栀子 、三七 , HPLC法
测定栀子苷 、芍药苷含量;但未见关于君药之一鸡骨
草定性鉴别或含量测定的相关报道。史海明等[ 2-3]
报道鸡骨草药材含有的主要成分为相思子碱 、黄酮
等;钟正贤等 [ 4]研究表明 ,相思子碱具有明显的抗
炎 、增强免疫和降酶退黄抗肝损伤作用 ,推测相思子
碱是鸡骨草抗肝炎的有效成分之一;2010年版 《中
国药典》中收载的鸡骨草定性鉴别的特征成分即为
相思子碱 。故本研究选用广西玉林制药厂生产的鸡
骨草胶囊 ,建立其中相思子碱含量测定方法 ,旨在为
鸡骨草胶囊质量标准的进一步完善提供参考 。
　 广东药学院学报
　 JournalofGuangdongPharmaceuticalUniversity　Jun.2011, 27(3)
1　仪器与试药
戴安 SUMMIT高效液相色谱仪(德国 Dionex公
司 , P580型泵 , ASI-100自动进样器 , PDA-100检测
器), KQ200B型超声清洗仪(昆山市超声仪器有限
公司 ,频率 5 000 Hz、功率 150 W),鸡骨草胶囊(广
西玉林制药有限责任公司 ,批号:250368、 250413、
250403), 相思子碱对照品 (批号:434248, 纯度
99%,美国 Sigma公司),色谱甲醇(德国 Merck公
司),其余试剂均为分析纯 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件及系统适应性试验
色谱柱:Phenomenex-ODS(250 mm×4.0 mm, 5
μm);流动相:甲醇 -0.5%(体积分数 ,下同)冰乙酸
溶液 ,梯度洗脱 , 0 ～ 2 min(体积比 10∶90※10∶90),
2 ～ 12 min(体积比 10∶90※15∶85), 12 ～ 20 min(体
积比 15∶85※20∶80);进样量:20 μL;检测波长:270
nm;流速:1.0 mL/min。精密吸取缺鸡骨草药材的
阴性样品 、相思子碱对照品 、鸡骨草胶囊供试品溶液
各 20μL注入液相色谱仪 ,在上述条件下进行测定 ,
相思子碱峰峰形对称 ,与其他组分分离度好 ,理论塔
板数大于 10 000,分离度大于 1.5,结果见图 1。
1.相思子碱
图 1　对照品(A)、缺鸡骨草药材的阴性样品(B)及供试品
(C)HPLC图
Figure1　HPLCchromatogramsofstandard(A), negative(B)
andSample(C)solutions
2.2　溶液的制备
2.2.1　对照品贮备液的制备　精密称取相思子碱
对照品 25mg,加 70%(体积分数 ,下同)甲醇溶解并
转移至 25mL的容量瓶中 ,定容至刻度 ,摇匀 ,使成
质量浓度为 1.0mg/mL的对照品贮备液。
2.2.2　供试品溶液的制备　取鸡骨草胶囊(批号:
250368)研细 ,取内容物约 1 g,精密称定 ,加 70%甲
醇 30mL,称重 ,超声处理 30 min,放冷 ,用 70%甲醇
补足减失的重量 ,摇匀 ,滤过 ,滤液过 0.45 μm微孔
滤膜 ,取续滤液即得 。
2.2.3　阴性样品溶液的制备　取除鸡骨草外的药
材 ,按处方比例添加辅料 ,按鸡骨草胶囊制备工艺制
得阴性样品 ,再按 “ 2.2.2”项下方法制备 ,即得 。
2.3　线性关系考察
取 1.0 mg/mL的对照品贮备液 ,用 70%甲醇分
别稀释成相思子碱质量浓度为 0.05、 0.10、 0.25、
0.50、0.75、1.0 mg/mL的系列对照品溶液 。分别精
密吸取上述溶液 20 μL,进样 ,以进样量(X)为横坐
标 ,峰面积(Y)为纵坐标绘制标准曲线 ,得回归方程 Y
=22.327X-4.228, r=0.999 8。结果表明 ,相思子
碱在 0.5 ～ 10μg范围内与峰面积呈良好线性关系。
2.4　精密度试验
精密吸取相思子碱对照品溶液(质量浓度 0.25
mg/mL)20 μL,重复进样 6次 ,按 “2.1”项下色谱条
件测定 ,峰面积 RSD值为 0.8%,结果表明仪器精密
度良好。
2.5　稳定性试验
取鸡骨草胶囊 (批号:250368)约 1 g,精密称
定 ,按 “2.2.2”项下方法制备供试品溶液 ,按 “ 2.1”
项下色谱条件分别在 0、8、10、12、14 h进样 ,测定相
思子碱峰面积 ,其 RSD值为 2.0%,结果表明供试品
溶液在 14 h内稳定。
2.6　重复性试验
取同一批号样品(批号:250368)1g,精密称定 ,
平行 6份 ,分别按 “2.2.2”项下方法制备供试品溶
液 ,按 “2.1”项下色谱条件测定 ,计算鸡骨草胶囊中
相思子碱的平均质量分数为 1.483 mg/g, RSD值为
0.45%,结果表明本方法重复性良好 。
2.7　加样回收试验
取已知相思子碱含量的样品(批号:250368)约
0.5 g,精密称定 ,平行 6份 ,分别精密加入质量浓度
为 0.75 mg/mL的对照品溶液 1.0 mL,按 “ 2.2.2”
项下制备供试品溶液 ,按 “2.1”项下色谱条件测定 ,
加样回收率结果见表 1。
2.8　样品测定
取 3批样品 ,各 1.5 g,精密称定 ,按 “ 2.2.2”
项下方法制备供试品溶液 ,进样 20 μL,依法测定
峰面积 ,用外标一点法计算相思子碱的含量 ,结果
见表 2。
272 广东药学院学报　 第 27卷　
表 1　相思子碱加样回收率试验结果
Table1　Recoveryresultsofabrine(n=6)
序号 样品量 m/g 样品中的量 m/mg 加入量 m/mg 测得量 m/mg 回收率 /% 平均回收率 /% RSD/%
1 0.51 0.751 0.75 1.534 104.40
2 0.53 0.781 0.75 1.543 101.60
3 0.52 0.771 0.75 1.541 102.67
101.89 2.85
4 0.51 0.762 0.75 1.525 101.73
5 0.48 0.710 0.75 1.493 104.40
6 0.51 0.785 0.75 1.509 96.53
表 2　样品含量测定结果
Table2　Contentresultsofsamples(n=3)
批号 w(相思子碱)/(mg· g-1) RSD/%
250368 1.476 2.45
250413 1.474 1.69
250403 1.472 2.40
3　讨论
3.1　流动相条件优化过程中 ,参考了文献 [ 5] ,选用
甲醇-水 、甲醇- 0.5%冰乙酸进行比较 。结果显示 ,
用甲醇 -0.5%冰乙酸系统效果较好 ,相思子碱峰的
峰形对称 ,且与其他组分分离度高 ,因此选用甲醇 -
0.5%冰乙酸作为鸡骨草胶囊含量测定的流动相 。
3.2　相思子碱为吲哚类生物碱 ,其紫外检测范围在
220 ～ 295 nm之间[ 6] 。本实验采用的 DAD检测器
可进行全波长扫描 ,扫描结果显示 , 270 nm处相思
子碱峰分离度好 、峰形对称 ,故确定检测波长确定为
270nm。
参考文献:
[ 1] 徐志成.鸡骨草胶囊质量标准研究 [ J] .安徽医药 , 2009,
13(12):1496-1497.
[ 2] 史海明 , 温晶 ,屠鹏飞.鸡骨草的化学成分研究 [ J] .中草
药 , 2006, 37(11):1610-1613.
[ 3] 史海明 , 温晶 ,屠鹏飞.毛鸡骨草的化学成分研究 [ J] .中
草药 , 2006, 37(5):658-660.
[ 4] 钟正贤 , 李燕婧 ,陈学芬 , 等.相思子碱的药理作用研究
[ J] .中医药导报 , 2009(1):8-10.
[ 5] 史海明 , 黄志勤 ,温晶 , 等.HPLC法测定鸡骨草药材中相
思子碱的含量 [ J] .药物分析杂志 , 2007, 27(11):1716 -
1718.
[ 6] 肖崇厚.中药化学 [ M] .6版.上海:上海科学技术出版
社 , 1996:118.
(责任编辑:刘晓涵)
褪黑素类似物阿戈美拉汀可有效治疗重度抑郁症
澳大利亚研究人员发现 ,褪黑素类似物 (melatoninanalogue)阿戈美拉汀 (agomelatine)可有效治疗重度抑郁
症。这一研究成果于 2010年 5月 18日发表在英国 《柳叶刀 》(TheLancet)杂志在线版。
褪黑素类似物通常用于调节人体生理节奏和改善睡眠状况 ,但阿戈美拉汀却具有与常用抗抑郁药相似的抗
抑郁效果 ,而且副作用更少 ,安全性更好。
研究人员指出 ,传统的抗抑郁药可以有效缓解病人的抑郁症状 ,但其他严重影响生活质量的症状如睡眠障碍
等无法得到改善。阿戈美拉汀同样作用于 5-HT2c受体 ,但作用方式独特 ,对于治疗重度抑郁症及其他重大情绪
障碍方面可以起到独一无二的作用。
研究人员比较了褪黑素 、雷美尔通(ramelteon)、他司美琼(tasimelteon)、PD-6735和阿戈美拉汀的疗效 ,发现阿
戈美拉汀在治疗重度抑郁症方面最具潜力。从短期疗效来看 ,阿戈美拉汀的抗抑郁效果与文拉法辛
(venlafaxine)、氟西汀(fluoxetine)和舍曲林(sertraline)相似 ,从长远来看 ,服用阿戈美拉汀的患者出现抑郁症复发
比率(23.9%)远比服用安慰剂的患者(比率为 50.0%)要低。
由于阿戈美拉汀不会提升体内血清紧张素(5-羟色胺)水平 ,因此其在胃肠道 、代谢及性方面的副作用比其他
抗抑郁药要少。
阿戈美拉汀在欧洲和澳大利亚有售 ,但在美国却尚未获得 FDA的批准。
(来源:Medscape.com, 2011-05-20夏训明编译)
273　第 3期　 李耿 ,等.高效液相色谱法测定鸡骨草胶囊中相思子碱的含量