全 文 ：　第 29卷 第 2期
2011年 5月 　　　　　　　
贵州师范大学学报(自然科学版)
JournalofGuizhouNormalUniversity(NaturalSciences)　　　　　　　　
Vol.29.No.2
May2011
文章编号:1004— 5570(2011)02-0108-03
杠板归药材薄层色谱检测方法研究＊
龙尚祥 1, 2 ,周　欣 1, 2, 3 ,赵　超 2, 3 ,龚小见 2, 3＊
(1.贵州大学精细化工研究开发中心,贵州 贵阳　550025;2.贵州师范大学天然药物质量控制中心 ,贵州 贵阳　550001;
3.贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室 ,贵州 贵阳　550001)
摘要:目的:建立杠板归药材的聚酰胺薄层色谱鉴别方法。方法:杠板归经不同提取方法提取后 , 以甲醇∶甲酸
(100∶2)为展开剂 ,对杠板归中的槲皮素-3-O-β -D-葡萄糖醛酸进行聚酰胺薄层鉴别。结果:薄层色谱鉴别斑点
清晰 , 能够有效鉴别杠板归中的槲皮素-3-O-β -D-葡萄糖醛酸。结论:本法操作简便 ,稳定 , 专属性强 ,可有效鉴别
杠板归药材 , 为其质量标准提升打下一定基础。
关 键 词:杠板归;聚酰胺薄层色谱鉴别;槲皮素-3-O-β -D-葡萄糖醛酸
中图分类号:O657.7　　文献标识码:A
ExperimentalResearchonTLCIdentificationof
PolygonumperfoliatumL.
LONGShang-xiang1, 2 , ZHOUXin1, 2, 3 , ZHAOChao2, 3 , GONGXiao-jian2, 3＊
(1.TheCenterforResearchandDevelepmentofFineChemicalsofGuizhouUniversityHuaxi, Guiyang, Guizhou550025;China;
2.TheResearchCenterforQualityControlofNatureMedicimeGuizhouNormalUniversity, Guiyang, Guizhou550001;
3.KeyLaboratoryforInformationSystemofMountainousandProtedionofEcological, Guiyang, Guizhou550001, China)
Abstract:Objective:ToestablishamethodofPolyamideThinLayerChromatography(TLC)identifi-
cationforPolygonumperfoliatumL..Methods:PolyamideTLCidentificationandanalysiswasstudied
onthevariousextractionsbydiferentsolvents, TLCsystemswasperformedforidentifyingQuercetin-3-
O-β-D-glucuronideby:methylalcohol-methanoicacid(100∶2).Results:TheTLCspotswerefairly
clearanditcandistinguishQuercetin-3-O-β-D-glucuronideefectively.Conclusion:Themethodis
simple, stable, andspecificityandefectivefortheidentificationofPolygonumperfoliatumL., andcan
beusedtocontrolthequalityofPolygonumperfoliatumL.
Keywords:PolygonumperfoliatumL.;PolyamideThinLayerChromatography;Quercetin-3-O-β -D-
glucuronide
　　杠板归为蓼科蓼属(Polygonaceae)植物杠板归 (PolygonumperfoliatumL.)的干燥全草 ,又名贯叶
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＊ 收稿日期:2010-12-13
基金项目:国家自然科学基金项目(81060340),贵州省中药现代化科研科技产业研究开发专项项目(黔科合社字 [ 2009]
5019号),贵阳市 2010年度科技计划项目(重大专项)([ 2010]筑科 4合同字第 3-重 1号)。
作者简介:龙尚祥(1977-), 男 ,在读硕士研究生 , 研究方向:天然产物化学与仿生农药 。
＊通讯作者:龚小见 , 男 ,硕士 , 讲师 ,研究方向:天然药物化学;Tel:(0851)6700414, Fax:(0851)6700414, E-mail:gongxi-
aojian1@163.com.
DOI :10.16614/j.cnki.issn1004-5570.2011.02.015
蓼 、蛇牙草 、蛇倒退等 ,是我国西南地区常用的传统
草药之一。据 《中药大辞典 》记载 ,杠板归具有利
水消肿 、清热 、活血 、解毒等功效[ 1] 。国内外有关
杠板归的研究报道主要是关于化学成分方面的研
究 [ 2-9] 。 《贵州省中药材 、民族药材质量标准
(2003年版)》中收录了杠板归 ,并且记录了用咖啡
酸作指标性成分的杠板归薄层鉴别方法 。槲皮素-
3-O-β -D-葡萄糖醛酸正丁酯用作指标成分来鉴定
杠板归的方法也有过报道 [ 10] 。本实验室在对杠板
归的化学成分进行分离过程中发现 ,槲皮素 -3-O-
β -D-葡萄糖醛酸在杠板中含量很高 ,而且根据报
道 ,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸具有很强的生物
活性 [ 11-12] ,因此 ,为了进一步控制杠板归的质量 ,
本文阐述了以槲皮素 -3-O-β -D-葡萄糖醛酸为指标
性成分建立杠板归的聚酰胺薄层色谱鉴别方法 ,此
法操作简便 ,稳定 ,专属性强 ,重现性好 ,可有效鉴
别杠板归药材 ,为其质量标准提升打下一定基础。
1　仪器与材料
1.1　仪器　聚酰胺薄膜(浙江省台州市路桥四甲
生化塑料厂);AL-204型电子天平(梅特勒-托利多
仪器(上海)有限公司);DFY-200型摇摆式高速万
能粉碎机(浙江温岭市林大机械有限公司);KQ-
500DE型数控超声清洗器(江苏省昆山市超声仪
器有限公司);DK-98-II型电热恒温水浴锅(天津
泰斯特仪器有限公司);定量毛细管 (迪马公司);
SP-II型条带电动点样器(上海科哲生化科技有限
公司);双巢玻璃展开缸。
1.2　材料　槲皮素 -3-O-β -D-葡萄糖醛酸(自制 ,
经波谱解析技术 (IR、1H-NMR、13 C-NMR、MS)分
析 ,鉴定其结构);10批不同产地药材经杠板归药
材:经贵阳中医学院王祥培副教授鉴定为杠板归
(PolygonumperfoliatumL.);样品来源及编号见表
1;乙醇 、甲醇 、甲酸均为分析纯;水为超纯水。
2　方法与结果
2.1　槲皮素 -3-O-β -D-葡萄糖醛酸的薄层鉴别
2.1.1　溶液的制备
将各个产地的杠板归阴干后粉碎成粗粉(过
40目筛),分别取药材粉末 2g,加入 90%30mL乙
醇溶液回流 1.5h,过滤 ,将滤液转入蒸发皿挥干 ,
用 10mL甲醇溶解 ,滤掉残渣 ,所得溶液作为供试
品溶液 。精密称取槲皮素 -3-O-β -D-葡萄糖醛酸对
照品适量 ,加甲醇制成每 1mL含 0.26mg的溶液 ,
作为对照品溶液 。
表 1　杠板归产地及收集时间
Tab.1　Habitatsandcolectionperiodof
PolygonumperfoliatumL.
No. 产地 收集时间
1 贵阳花溪高坡 2008.8
2 贵州毕节亮岩核桃树 2008.8
3 贵州都匀江州镇 2008.6
4 贵州六枝四角田 2008.10
5 贵州铜仁江口德旺 2008.10
6 贵州贵遵路 63KM 2008.3
7 贵州龙里谷脚 2008.3
8 贵州久长 2008.10
9 贵州药用植物园 2008.3
10 贵州贵遵路出口(息烽) 2008.3
2.1.2　薄层色谱条件的确定
照薄层色谱法(中国药典 2010年版 ,附录 Ⅵ
B)实验 ,吸取上述两种溶液液各 5μL点样于聚酰
胺薄膜上 ,将聚酰胺薄膜薄置于甲醇∶甲酸(100∶
2)的展开缸中预饱和 15min后 , 上行展开 , 展距
8cm,取出 ,晾干 , 然后喷以 1%三氯化铝-乙醇溶
液 ,晾干至斑点显色清晰 ,于紫外灯(365nm)下检
视 ,在相同比移值处见杠板归供试液和槲皮素 -3-
O-β -D-葡萄糖醛酸对照品在相同比移值处呈现相
同颜色的斑点(见图 1)。
图 1　槲皮素-3-O-β -D-葡萄糖醛酸
对照品和杠板归供试液薄层色谱图
Fig.1　TCLofPolygonumperfoliatumL.
andQuercetin-3-O-β-D-glucuronide
2.2　杠板归样品薄层色谱图
展开系统:甲醇∶甲酸 (100∶2)
依次点样为:1:为槲皮素 -3-O-β-D-葡萄糖醛
酸对照品溶液;2-11:分别为杠板归供试液
显色方法:1%三氯化铝 -乙醇溶液 ,凉干 ,紫
外灯(365nm)下检视 。
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　第 2期 龙尚祥 ,周　欣 , 赵　超 ,龚小见:杠板归药材薄层色谱检测方法研究　　　　　　　　　　
3　讨论
3.1　本实验通过大量的薄层条件和样品的前处理
方法摸索试验 ,筛选出了分离效果较好 ,重复性高
的薄层条件 。在样品的前处理方法中考察了不同
提取溶剂 、溶剂用量比及提取时间:1)对杠板归的
甲醇 、乙酸乙酯 、90%乙醇 、80%乙醇 、70%乙醇提
取进行了试验研究 ,结果 90%乙醇提取对其薄层
分离效果较好;2)称取杠板归药材粉末 2.0g4
份 ,分别加入 20mL、 30mL、40mL、50mL的 80%的
乙醇回流提取 ,试验结果表明:30mL90%的乙醇
最佳。 3)取杠板归药材粉末 2.0g4份 ,加入 30mL
90%的乙醇 ,分别回流 0.5h、1.0h、1.5h、2.0h,研
究结果表明:供试品溶液回流提取 1.5 h效果最
佳 。
3.2　试验研究中考查了多种展开系统:1)甲醇 -
醋酸 -水(90∶5∶5);2)甲醇 -水(4∶1);3)乙醇 -
水(1∶1);4)丙酮 -水 (1∶1);5)异丙醇 -水 (3∶
2);6)乙酸乙酯:乙醇 (6∶4);7)氯仿 -甲醇 (7∶
3);8)正丁醇 -乙醇 -水(1∶4∶5);9)氯仿 -甲醇
(96∶4);10)氯仿 -甲醇 -甲酸(60∶38∶2);(10)
甲醇 -甲酸(100∶2)。结果选用甲醇 -甲酸(100∶
2)鉴别槲皮素 3-O-β -D-葡萄糖醛酸薄层分离效果
较好。
3.3　槲皮素 3-O-β -D-葡萄糖醛酸是杠板归中含量
较高的化合物 ,而该化合物在所选用的展开系统中
成点性好 ,干扰小 ,斑点清晰 ,且重显性较好。
3.4　实验对 10批不同产地样品进行了鉴别 ,结果
表明杠板归药材因不同地方和不同采集时间导致
其质量有所不同 。
3.5　本法操作简便 ,稳定 ,专属性强 ,可有效鉴别
杠板归药材并作为其质量控制方法。
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