全 文 ：作者简介:常军民 ,男 ,在职博士 ,讲师 ,从事天然药物的研究与开发。
HPLC测定枝穗大黄中大黄素和大黄酚的含量
常军民1 ,高　宏2 ,张　煊1 ,赵　军1 ,堵年生1
1.新疆医科大学药学院 , 新疆 乌鲁木齐 830054;2.乌鲁木齐市友谊医院 , 新疆 乌鲁木齐 830001
摘要:目的　测定枝穗大黄中大黄素和大黄酚的含量。方法　采用HPLC 测定。结果　枝穗大黄中大黄素和大黄酚的平均含
量分别为0.04%和0.23%;加样回收率大黄素为99.2%,大黄酚为 100.7%。结论　所用方法快速 、灵敏 、准确 ,样品处理简单。
关键词:HPLC;枝穗大黄;大黄素;大黄酚
中图分类号:R284 , R917 文献标志码:A 文章编号:1006-0103(2003)01-0057-02
Determination of the emodin and chrysophanol in Rheum rhizastachyum Schrenk by HPLC
CHANG Jun-min1 ,GAO Hong2 ,ZHANG Xuan1 ,ZHAO Jun1 ,DU Nian-sheng1
1.College of Pharmacy , Xinjiang Medical University , Urumchi 830054 , China;2.Urumchi Friendship Hospital , Urumchi 830054 , China
Abstract:OBJECTIVE　To determine the emodin and chrysophanol in Rheum rhizastschyum Schrenk.METHODS　HPLC was used to de-
termine the emodin and chrysophanol.RESULTS　The content of emodin was 0.04% and the content of chry sophanol was 0.23%;the aver-
age recovery was 99.2% and 100.7% respectively.CONCLUSION　This method is simple , sensitive and accurate.
Key words:HPLC;Rheum rhizastachyum Schrenk;Emodin;Chrysophanol
CLC number:R284 , R917 Document code:A Article ID:1006-0103(2003)01-0057-02
　　枝穗大黄(Rheum rhizastachyum)为蓼科(Poly-
gonum)大黄属(Rheum)多年生草本植物 ,民间以根入
药。生长于海拔两千米以上的山地 、沟坎中 ,主产于
我国的新疆 、甘肃 、青海一带 ,用于清热解毒 、消肿泻
下等[ 1] 。我们课题组对枝穗大黄的化学成分进行了
研究[ 2] ,为了考察枝穗大黄的品质 ,首次采用 HPLC
测定其中大黄素和大黄酚的含量 ,结果表明该法简
便易行 ,快速 、灵敏 、准确 。
1　实验部分
1.1　仪器 、试剂与药品
美国Waters 2690高效液相色谱仪 ,Waters 2487
双波长检测器 ,Waters millennium32色谱工作站 (Wa-
ters corporation)。大黄素 、大黄酚对照品(中国药品
生物制品检定所);甲醇为色谱纯;磷酸为分析纯。
枝穗大黄采自新疆和静县巴轮台 ,由中国医学
科学院药用植物研究所李君山博士鉴定 。
1.2　方法与结果
1.2.1　色谱条件　色谱柱为 SymmetryshieldTM RP18
(5μm ,3.9 mm×150 mm);柱温 30℃;流动相为甲
醇-0.1%磷酸水溶液(90∶10);流速 1 ml·min-1;检
测波长254 nm;进样量 5μl。
1.2.2　线性范围　精密称取 20 mg 大黄素和 20 mg
大黄酚 ,用甲醇定容于 100 ml量瓶中 ,制成标准贮
备液 。分别吸取标准贮备液大黄素 0.1 ml ,大黄酚
0.3 ml用甲醇定容5 ml。得到大黄素和大黄酚的含
量分别为 4 μg·ml-1和 12 μg·ml-1的标准液 ,进样 5
μl ,按上述色谱条件测定 。以峰面积积分值为纵坐
标 ,对照品进样量(μg)为横坐标 ,绘制标准曲线 ,大
黄素 、大黄酚的回归方程分别为:
Y大黄素 =3.108×106 X -4149 , r =0.9999;
Y大黄酚 =3.888×106 X -2281 , r =0.9999。线性范
围分别为0.024 ～ 0.17μg 和 0.008 ～ 0.056μg 。
1.3　样品的含量测定
将枝穗大黄样品研成粉末 ,过 60目筛 ,精密称取
0.1 g ,加入甲醇超声提取 1 h后 ,定容至 10 ml量瓶 ,
用 0.45μm微孔滤膜过滤 ,得供试品溶液 。按上述色
谱条件进行样品测定 ,进样 5μl ,其色谱图见图 1 ,大
黄素的 tR=4.46 min ,大黄酚的 tR=3.83 min。测定 5
次 ,结果枝穗大黄中大黄素的含量为 0.04%, RSD =
2.4%;大黄酚的含量为 0.23%, RSD =1.0%。
1.4　精密度实验
1.4.1　日内精密度　取上述供试品溶液 ,按色谱条
件 ,每 2 h 测定 1 次 , 共 5 次。大黄素的 RSD =
0.9%,大黄酚的 RSD =0.6%。
1.4.2　日间精密度　方法同“1.4.1” ,每隔 1天测
华西药学杂志
W C J · P S 　2003 , 18(1):57～ 58　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2003.01.023
定1次 ,共 5 d。大黄素的 RSD =1.1%,大黄酚的
RSD =1.8 %。
图 1　大黄素 、大黄酚对照品(A)和样品(B)的色谱图
Fig 1　HPLC chromatograms of emodin and chrysophanol(A)and
sample(B)
1.5　加样回收率实验
精密称取已测知含量的样品 0.1 g ,加入对照品
适量 ,按“1.3”项的方法操作 ,计算回收率(表 1)。
2　讨论
流动相的 pH 对实验有较大的影响 ,单纯用甲
醇与水 ,尽管也能得到较好的分离效果 ,但大黄素表
现不稳定 , 降低流动相的 pH 可得到改善 , 采用
0.1%磷酸代替水取得了较好的分离效果。
表 1　加样回收实验结果(μg·ml-1 , n=5)
Table 1　Results of recovery experiment(μg·ml-1 , n=5)
Components Origin Added X/% RSD / %
Emodin 0.04 0.01-0.02 99.2 1.5
Chrysophanol 0.23 0.05-0.10 100.7 1.9
　　枝穗大黄为非正品大黄 ,对其品质的考察非常
重要 ,我们首次采用 HPLC 法对其蒽醌类成分进行
含量测定。为大黄属植物品质鉴定提供了可靠的依
据 。该法简便易行 、灵敏 、准确。
参考文献
1　中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[ M] .24卷第三
分册.北京:科学出版社 ,1984.254
2　赵军 ,常军民 ,堵年生.枝穗大黄化学成分研究[ J] .中国中药杂
志 , 2002 , 27(4):281
收稿日期:2002-07
＊新疆医科大学 24期研究生
作者简介:胡君萍(1971-),女 ,硕士 ,从事药物分析工作。Tel:0991-4362471(O)
双波长薄层扫描法测定维吾尔药琐琐葡萄中齐墩果酸的含量
胡君萍 ,杨建华＊ ,堵年生
新疆医科大学药学院 ,新疆 乌鲁木齐 830054
摘要:目的　用薄层扫描法对维吾尔药琐琐葡萄中齐墩果酸进行定量分析。方法　双波长反射锯齿扫描 ,λS=520 nm ,λR=650
nm;狭缝宽 0.4 mm×0.4 mm;线性化器SX=3;展开剂为环己烷-乙酸乙酯(7∶3);显色剂用 10%硫酸乙醇溶液。结果　琐琐
葡萄中齐墩果酸的含量为0.201%, 齐墩果酸标准曲线线性范围为2 ～ 6μg ,平均回收率为 98.2%, RSD =3.1%(n =9)。结论
　方法准确可靠 ,回收率好 , 可为维吾尔药材琐琐葡萄的品质评价提供参考。
关键词:琐琐葡萄;齐墩果酸;双波长薄层扫描法
中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1006-0103(2003)01-0058-02
Determination of oleanolic acid in Vitis amurensis by TLCS
HU Jun-ping ,YANG Jian-hua ,DU Nian-sheng
College of Pharmacy , Xinjiang Medical University ,Urumqi 830054 , China
Abstract:OBJECTUVE　To determine oleanolic acid in Vitis amurensis by TLCS.METHODS　Dual-wavelength reflecting zigzag scanning
was performed ,λS=520 nm(λR=650 nm , slit width 0.4 mm , SX=3).The developing solvent was cyclohexane-ethylacetate(7∶3), and the
spraying solvent was ethanol containing 5% sulfuric acid.RESULTS　The content of oleanolic acid in Vitis amurensis was 0.201%, the linear
range of determination was 2.0-6.0 μg.The average recovery was 98.2%, RSD =3.1%(n =9).CONCLUSION　The method was
practicable with good recovery.
Key words:Vitis amurensis ;Oleanolic acid;TLCS
CLC number:R917 Document code:A Article ID:1006-0103(2003)01-0058-02
华西药学杂志
W C J · P S 　2003 , 18(1):58～ 59